La prueba de en el diagnóstico medico legal de las manchas ...

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375 La prueba de BARBERIO en el diagnóstico medico legal de las manchas de esperma POR Antonio Lecha-Marzo Del Laboratorio de Medicina legal de la Universidad de Valladolid La reacción propuesta hace anos por el profesor FLOREN- CE O, no es especifica dei esperma humano, ni aun dei esperma ni de los órganos que lo constituyen. Su valor es muy restringido, pues sólo sirve para diferenciar manchas que no son de esperma y manchas que tal vez lo sean. En bastantes casos no se puede demostrar la existencia dei espermatozóide en una mancha es- permática, aun poniendo en práctica los mejores procedimientos, porque el espermatozóide, como toda célula animal, por la acción de ciertos agentes, fisicos ó químicos ( 2 ) puede sufrir tales altera- ciones que Ie hagan irreconocible. Se necesitaba, por lo tanto, para la identificación dei esperma una prueba que como la de TEICHMANN Ó nuestros métodos para obtener los cristales de sa- les de hematina, en la sangre, nos resolviera el problema de un modo seguro y preciso. A nuestro amigo el doctor MIGUEL BAR- BERIO (de Nápoles) corresponde el honor de haberla propuesto. El 8 de abril de 1905 el doctor BARBERIO ( s ) pre- Reacción de sentó una comunicación á la Real Academia de BARBERIO ciências fisicas y matemáticas de Nápoles, en la que describe una nueva prueba que considera sensible, segura y particular. La reacción ha sido después estu- diada por MÓDICA, CEVIDALLI, DE DOMINICIS, GALBO, MAJONE, LEVINSON, LECHA- MARZO y BOKARIUS!; nuestros reconocimientos son muy numerosos, y nos han permitido una evaluación de di- cha prueba y llevar alguna contribución sobre las aplicaciones prácticas que puede permitir. O Véase nuestra Memoria: La Identificación dei esperma. Médios pro- puestos hasta el dia y una nueva, rápida y segura prueba microquimica. Ma- drid, editor Moya, 1907. Describimos extensamente Ia reacción de FLORENCE y los métodos para preparar los zoospermos de las manchas. ('- ) LECHA- MARZO : Loco citato, págs. 36- 40. _ (") M. BARBERIO : Nuova reazione microchimica dello esperma e sua applicazione nelle ricerche médico- legali. Rend, delia R. Academia delle Scien- ze Fisiche e Matematiche di Napoli, fase. 4.o. abril 1905. Rev. de Chim. Pura e Ap.- 3.o anno- n.o 9- Outubro. 26

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La prue ba de BARBE RIO en e l diagnós tico medico le gal de las manchas de e sperma

P O R

Antonio L e c h a - M a r z o

Del Laboratorio de Medicina legal de la Universidad de Valladolid

La r e acc ión pr opue s ta hace anos po r e l profe s or F LORE N -

CE O , n o es e s pe cifica de i e s pe rma h u m a n o , n i a un de i e s pe r ma

ni de los ór g a no s que lo cons t ituye n. Su va lor es m u y r e s t r ing ido ,

pue s s ólo s irve para dife r e nc ia r ma nc ha s q ue n o s on de e s pe r ma

y ma nc ha s q ue tal ve z lo s ean. En bas tante s casos n o se pue de

de mos tr a r la e x is te ncia de i e s pe r ma tozóide e n un a ma n c h a es-

pe r mát ica , a un p o n ie n d o e n prác t ica los me jor e s pr oc e d imie ntos ,

po r que e l e s pe r ma tozóide , c o m o toda cé lula a n ima l, p o r la a c c ión

de cie r tos age nte s , fis icos ó q u ímic o s (2) pue de s ufr ir tale s alte ra-

c ione s q ue Ie ha g a n ir r e conoc ible . Se ne ce s itaba , po r lo tanto ,

pa ra la ide nt ific a c ión de i e s pe rma una pr ue ba que c o m o la de

T E IC H MAN N Ó nue s tros mé to do s para obte ne r los cr is tale s de sa-

les de he ma t ina , e n la s angre , nos re s olvie ra e l p r o b le ma de u n

m o d o s e gur o y pre c is o. A nue s tro a m ig o el doc to r M I G U E L BAR-

BERIO (de Nápole s ) cor r e s ponde e l h o n o r de habe r la pr opue s to .

El 8 de a br il de 1 9 0 5 e l doc to r BARBE RIO (s) pre-

Reacción de s e ntó un a c o munic a c ión á la Re a l Ac a d e mia de

BARBE RIO c iênc ias fis icas y ma te mát ica s de Nápo le s , e n la

q ue de s c r ibe una nue va pr ue ba que cons ide r a

s e ns ible , s e gur a y pa r t icula r . La r e acc ión ha s ido de s pués estu-

d ia da po r M Ó D I C A , CE VIDALLI, D E DOMIN IC IS , GAL B O, MAJ ON E ,

LE VIN S ON , L E C H A- MARZO y BOKARIUS!; nue s tros r e c onoc imie ntos

s on m u y nume r os os , y nos ha n pe r mit id o una e va lua c ión de di-

cha pr ue ba y lle va r a lg un a c o nt r ibuc ión s obr e las a plic a c ione s

prác ticas q u e p ue d e pe r mit ir .

O Véase nue s tra Me m o r ia : La Ide ntif icación de i e s pe rma. Médios pro-

pue s tos has ta e l dia y una nue v a, rápida y s e gura prue ba m icroquimica. Ma-d r id , e ditor Mo y a , 1907. De s c r ib imos e x te ns ame nte Ia r e acc ión de FLORENCE y los mé todos pa ra pr e pa r a r los zoos pe r mos de las ma nc ha s .

('- ) LECHA- MARZO : Loco citato, págs . 36- 40. _ (") M. BARBERIO : N u o v a r e azione mic r o c h imic a de llo e s pe rma e s ua

a pplic a zione ne lle r ice rche médico- le ga li. Re nd, de lia R. A cade mia de lle S cie n-

ze Fis iche e Mate matiche di Napoli, fase . 4.o. a b r il 1905.

Rev. de Chim. Pura e Ap.- 3.o anno- n.o 9- Outubro. 26

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376 Ch im ic a organica

T ra tando BARBE RIO una gota de e s pe rma fresco, de s pués de

poços minutos de e yaculado, ó de e s pe rma putre facto, ó de una

infus ion de ma nc ha de e s pe rma ant igua , ob tuvo unos microcris -

tales amar illos , muy re fr inge nte s y caracte rís ticos . He aqui la

técnica propue s ta por el a uto r : se lle va una g o t a ' d e e s pe rma ó

de infus ion de ma nc ha s obre un porta- obje tos y se agre ga una

pe que na cantidad de s o luc ión acuos a s aturada de ác ido picr ico,

cantidad que no de be rá s obre pas ar la mitad de l vo lume n de i

liq u id o que se ha de e xaminar . De s pués de poços s e gundos el

liq u id o se e nturbia por la fo r ma c ión de un pre c ipitado, el cual,

limit a do en un pr inc ip io el pun to de contacto de los dos líqui-

dos , poco á poco, al mezclarsé estos, se d ifunde por toda la

gota , que adquie r e color amar illo y aspecto tur bio . De s pués de

poços minutos (dos á cinco) la re acción pue de cons ide rars e c o mo

t e r mina da ; se aplica el cubre - obje tos y pasa á la obs e rvac ión

micros cópica .

Si el liqu ido está muy d ilu ído , la pre c ipitac ión cr is talina es

más le nta ; lo mis mo s uce de si se agre ga ác ido pic r ico en exceso

ó en s o luc ión d ilu id a : la re acción es me nos ne ta y el pr e c ipitado

a dquir e una for ma pre ponde rante me nte granulos a , pe r die ndo en

parte ó tota lme nte su valor de mos tra tivo. Nos otros t a mpoc o he-

mos o b t e n ido bue nos re s ultados e mple a ndo e s pe rma concentra-

d o ; las cr is talizacione s más e s ple ndidas se obtie ne n con una di-

luc ión me dia , que se lle ga á conoce r bie n de s pués de habe r

he cho vár ios pre parados . BARBE RIO acons e ja, en los pr ime ros en-

sayos , c ome nza r con una cantidad min ima de ác ido picr ico, por

e je mplo, la que pue de ser tr ans por tada con un asa de h ilo de

pla t ino, y de s pués , á los poços minutos , agre gar , si es necessário,

otra pe que na cantidad para obte ne r un e ntur biamie nto difus o y

sens ible .

Se giin re sulta de nues tros r e conoc imie ntos , un tr a tamie nto

pr évio de las manchas con c lor ofor mo favorece notable me nte la

re acción de BARBE RIO : la cr is talización es más copios a y los cris-

tales de mayor tamafío.

C E VIDALLI (de i Ins tituto de Me dic ina le gal de Florência) (*)

(L) A. CEVIDALLI : Ue be r e ine ne ue mikr oc he mis c he Re a kt ion des Sper-ma . V ie rte ljahrs s chrift f iir ge richtl. Me d. a. õffe ntl. S atiitdts w e s e n, 3 .a s érie , vo l. x x x i, fase . l.o

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La p r ue b a de Ba r b e r io e u las m a n c h a s de e s pe r ma 377

ha modific a do el re activo de B ARB E RIO e mple a ndo una s o luc ión

glice ro- a lcohólica , que obt ie ne dis o lvie ndo al calor en la glice ri-

na tanto ác ido pic r ico has ta que con el e nfr iamie nto no se separe

n ing ún cris tal, y de s pués a gr e ga ndo todo el a lcohol abs oluto ne-

cesario para re dis olve r el libre exceso de ac ido. Esta s o luc ión

glice ro- alcohólica , e scribe C E V IDAL L I, pre senta las s iguie nte s ven-

tajas , que nos otros he mos p o d id o ta mbié n apr e c ia r : l . a E v it a y

mantie ne entre limite s r e duc idos la fo r ma c ión de cris tales de

ác ido picr ico, los cttales , e s pe cialme nte e mple ados éste en solu-

c ión a lcohólica , se pr oduce n á veces tan r ápida y copios ame nte

que dificultan la obs e rvac ión. 2 * Pe rmite , s in otras maniobr as ,

una pr o longa da cons e rvación de los pre parados , mie ntras para

obte ne r este inte nto con las s oluc ione s acuosas ó a lcohólicas es

necesario hace r us o de pre parados en gota pe ndie nte , ó bie n

de jar los desecar para monta dos de s pués en báls amo, pr évio un

r ápido lavado en agua . 3.a Resalta e ficazme nte el c a mpo micros -

cópico.

Las s oluc ione s pic rogomos as pre sentan las mis mas ve nta jas :

nos han da do re s ultados muy satis factorios con e s pe rma fresco y

putre facto. C E V IDAL L I, con el re activo de B ARB E RIO y su modifi-

cación ha e ncontr ado cons tante la re acción en el e s pe rma de 10

indivíduos y en manchas e spe rmaticas datante s de tres afios y

me dio.

B A RB E RIO r e comie nda ta mbié n el e mple o de s oluc ione s al-

cohólicas de ác ido picr ico, e s pe cialme nte c ua ndo se ope ra con

e spe rma liq u id o putre facto; se de be tratar con el re activo una

cantidad min ima de e s pe rma (el vo lume n de una cabeza de al-

file r), para que al mezclarse las dos gotitas no haya dis pe rs ion

excesiva y cons e cutiva y r ápida e vaporac ión de la me zcla hidro-

a lcohólica . Co n las s oluc ione s a lcohólicas nos parece que el pre-

c ipitado es me no copios o; ade más , el ác ido pic r ico cris taliza muy

fác ilme nte , lo qua l se pue de evitar con la me zcla glice ro- alcohó-

lica de C E V IDAL L I Ó con nues tras s olucione s pic rogomos as . P or

otra parte , la pr ue ba mic r o quimic a de B ARB E RIO res is te fuerte-

me nte á la putre facc ión, c omo lue go te ndre mos ocas ión de

obse rvar.

El e xame n mic r os cópico re quie re aume ntos de 400 á 600

diâme tros . Los cris tales s on me nudos , tres ó cuatro veces más

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3 7 8 C h i m i c a organica

la rgos que anchos , amar illos , fue r te me nte re fr inge nte s , ais lados ó

agr upados , los unos en cruz, otros en es tre lla. Son s utilis imos y

se pre sentan c o mo agujas de contor no r ómbic o , fre cue nte me nte

atravesadas long itudina lme nte por una line a r e fr inge nte ; a lgunos

s e me jan dos conos pe gados por las bases . He mos obs e rvado

ta mbié n agujas octaédr icas y cris tales a la rgados en for ma de bas-

toncitos , con los cabos r e donde ados . «Los ângulos obtus os es tán

casi s ie mpre t r uncados y r e donde ados , y en los ind iv íduos me nos

perfectos t a mbié n los ângulos a gudos han s ufr ido la mis ma suer-

te . En este últ imo caso el cris tal presenta el as pe cto de un cor-

pús c ulo ovoida l, más ó me nos a la rgado, que en los casos extre-

mos se pre senta c o mo un dis co r e donde ado. De esta for ma á

aque lla r ómbic a perfecta hay toda una ga ma de formas inte rme dias

que re pre s e ntan e s tádios dive rs os de de s ar rollo y s on las más

nume ros as y caracteris ticas .» ( B A R B E R I O ) .

nos han s or pr e ndido agrupac ione s especia- les y caracte ris ticas ,

que uno [de nue s tros cole gas compar aba , m u y graficame nte con

pe pitas de oro.

La luz pola r izada (600 diâme tros ) de mue s tra que los cris tales

s on bir re fr inge nte s ; pe rmite obs e rvar ta mbié n vivos y vagos co-

En la figur a he-

mos re pre s e ntado cris-

tales en los pr ime r os

e s tádios de de s ar rollo

y formas perfectas , fa-

ciles de obte ne r ; he mos

d ibu ja do ta mbié n las

dis tinctas agrupac ione s

que pue de n presentar

los cris tales . T ra tando

varias gotas de esper-

ma , en un pe que no tu-

b o de ensayo, con la

s o luc ión de ác ido pi-

cr ico, y t r ans por tando

Cris ta le s de BARBERIO a r r iba y á la de recha he mos d ibu ja do de BARBERIO a r r iba y á la de recha he mos d ibu ja do C O n U t l c u e n t a ~ g ° t ' l s

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La pr ue ba de Ba r be r io e u las ma nc ha s de e s pe rma 379

lores de inte rfe rencia. No Ie ha s ido pos ible al doctor BARBE RIO

hacer la me ns ur a t ion exacta de los ângulos ; sus valores oscilan entre los 8 y 10 grados . Más fácil Ie ha s ido la de te r mina t ion de las dire ccione s de e xtinción, ut ilizando c omo e s tauroscopio bie n la lâmina de cuarzo de KLE IN , Ó el algez de IORDIN E , Ó el ocular de B E RT RAN D: parecen parale las á Ias diagonale s de i r ombo, y si no pe rfectamente parale las inc linadas en un âng ulo no s upe r ior á 9 grados , y por lo tanto casi pe rpe ndiculare s entre s i; la gran sutileza de los cris tales hace que no se advie r tan var iacióne s sen-s ibles de colores por câmbios de la tablilla infe riores á 9 grados .

El volume n de los cris tales varia entre 5 — 6 [J. Ó 20 Ó más [j.; Ia mayor ia de los cris tales , los que se produce n en las condicio-nes ordinar ias son de unas 8 á 14 JL. En a lgunos de nues tros pre parados he mos e ncontrado a lgunos cris tales muy largos , di-vididos por tres lineas transversales en cuatro s egmentos . M Ó D I -

CA (') ha e ncontrado también a lgunos cris tales como fragmen-tados .

No he obs e rvado dife rencias notable s entre los cris tales de BARBE RIO obte nidos con espe rma de indivíduos robus tos y los obte nidos con espe rma después de marchas fatigosas , enfermeda-des ó e nve ne namie ntos . T a mpoc o he mos obs e rvado dife rencias ni en la forma, ni el núme r o en indivíduos de diversas edades .

El doctor V. MAJONE, ayudante en el Ia-Reacción del esper- bora tor io de l Prof. C O R R A D O (Unive rs idad

ma con el trini- de Nápole s ) ha e s tudiado el compor tamie nto trocresol y algu- de i e spe rma en presencia de l tr initrocre -nos nitrofenoles. sol (- '); en efecto sabia, y s in s alirnos de i

campo de la me dic ina legal podr iamos ci-tar a lgunos e je mplos , que a lgunas propr ie dade s son cotnune s á series enteras de cotnpues tos . El tr initrocre sol como el ác ido pi-crico da lugar á la fo r ma t ion de cris tales amar illos , re fringentes , romboidale s ó ovoidale s , etc., etc.; s in e nbargo la s e ns ibilidad es a lgo me nor que la de l tr initrofe nol, lo cual seria de bido á la poca

(') O . MÓDICA: Su lla nuo va r e azione mic r o c h imic a de llo s pe r ma . A r-

ck iv io di Farmacologia s pe ríme ntale e Scie nze affine , a n o iv , vo l. iv , fase . 12. (2) V. MAJONE : Sulla r e azione mic h r o c h imic a de l T r init r oc r e s olo e d i

a luc uni nit r o fe noli con lo s pe r ma . La Me dicina Italiana, a no v , n ú m . 8, 1907.

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s olubilidad de i tr initrocre sol en el agua . MAJ ON E ha e ns ayado también la reacción con los mononitrofe nole s (orto, me ta y para-nitro) y con un dinitro. Los cristales obte nidos con los pr ime ros se parecen, la mayor parte , á los que s uminis tra el ác ido pic r ico; con el dinit ro en vár ios pre parados no pa do obte ne r cris tales .

El doctor C. Q A L B O (*) en una interesan-Auío-movimiento y te Me mor ia sobre la reacción que nos occu-

multiplicación de pa ha da do á conoce r los e s túdios de su los cristales de maes tro O T T O VON S C H RÒN , profesor de BARBE RIO. anatomia "patológica en la Unjve r s idad de

Nápole s , sobre el auto- mov imie nto de los

cris tale s jov e ne s de BARBE RIO.

El automovimie nto de los cris tales jóve ne s , fe nóme no curio-so, notabilis imo, fué obs e rvado ya por S C H RÒN hace 33 a íios ; es uno de los 8 fe nóme nos que cons tituye n la base de su teoria La Biologia Mine ral. En la autoge ne s is de l r o mbo de l bac ilo de la tube rculos is y en el cuarto pr oduc to de secreción de l bacte -

rium coli obse rvo que los cris tales hijos se separaban de los cris-tales gene radore s con movimie ntos propr ios . Este cur ios is imo fe nóme no, cuyo alcance fué entrevis to en s e guida por VON SCHRÕN, presentaba s in e mbargo a lgunas dificultade s para obser-va do , pues hay que esperar durante muc ho t ie mpo el mome nto preciso de la s e parac ión; cosa que no sucede , y nosotros no te-ne mos inconve nie nte a lguno en afirmar lo, pues lo he mos obser-vado con los cris tales de BARBE RIO.

Los pre parados se hacen en gota pe ndie nte , para que las for-mas cris talinas sean más perfectas ; el examen á la luz polar izada.

«Es una danza ve locis ima — escribe G A L B O —lo que se obser-va en todo el pre parado, por lo cual los pe que nos cris tales sugie-ren en la me nte las luces tre mulante s de i firmame nto en una no-che serena de es tio. Con una obs e rvación paciente y que dura a lgunas horas , es pos ible notar como el movimie nto de los cris-tales jove ne s no es de s orde nado y capr ichos o, s ino que obedece también, como todos los fe nóme nos de la naturaleza, á leyes esta-

(' ) C. GALBO: Sulla nuova r e azione mic r o c h imic a de llo s pe rma de i BAR-B E R I O . Riforma Medica, a fio x n , n ú m . 44, 1906.

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La p r ue b a de Ba r b e r io e u las m a n c h a s de e s pe r ma 381

bles é immutable s . Se obs e rvan seis especies dis tintas de auto-

movimie nto y que V ON S C H R Õ N ha po d id o clas ificar a s i:

«l. ° Os c ila tor io (s eme jante al mo vimie n to br ownia no).

2.° P r opuls ivo (por este movimie nto s uce de que a lguna vez

dos cris tales que da n durante cie r to t ie mpo unidos y de s pués se

s e paran; podr ia esto ser un acto fe cundador ).

3.° Re tropuls ivo.

4.° Rota tor io a lre de dor de l e je long itud ina l.

5.° Rota tor io a lr e de dor de un e je ide al transve rsal.

õ.° De lfino ide (movimie nto s e me jante al de los de lfine s ,

por el cual el e xtre mo ante r ior de i cris tal de s cie nde y se e leva

en el liqu ido de la gota , mie ntras el e xtre mo pos te r ior de s cr ibe

un movimie nto rota tivo he licoida l».

Los movimie ntos se apre c iaban todavia , s e gún SCHRÕN, en

pre parados de más de 13 meses .

Cr e o que no pue de n re ducirs e los movimie ntos de scritos al

b r ow nia no (que pre sentan todas las par tículas de me nos de una

micra, que nadan en un liquido) ni á los movimie ntos de trasla-

c ión pr oduc idos por corriente s liquidas . En muc hos campos de i

micros copio, pas ado a lgún t ie mpo de obte nido el pr e parado, ve-

mos casi todos los cris tales ya paralizados , pe ro s in e mba r go

que da a lg uno provis to aun de movimie ntos pr opios , y se abre

c amino entre los de mas cris tales y cruza el c a mpo en varias di-

recciones . Se pue de pue s admit ir para ne gar le el auto- movi-

mie nto á este cris tal la exis tencia de una corr ie nte liquida que

Ie mue v e á e l s ólo y cambio cons tante me nte de dire ction? Yo creo

que no.

En los cris tales de B ARB E RIO, cuyo auto- movimie nto va á

te rminar , seríala V ON S C H R Õ N dos subs tancias , una que re acciona

en amar illo á Ia luz polar izada y otra en rosa naranja , mie ntras

el cris tal se hace fus iforme . Esta últ ima , poco á poço cambia

su re acción en ve rde e s me ralda (fas e de la cris talo célula): la

subs tancia ve rde representa el núc le o y la amar illa el lito- plas ma

(VON S C H R ÕN ) . P OC O á poco se d ivide en 4 , en 8 , en 1 6 , en 3 2 ;

estalla y apare ce n las pe que nas cris talo- células con un núc le o

central, ve rde á la luz polar izada .

Por esto en muchas de las pre paracióne s que nos otros con-

se rvamos de los cris tales de B ARB E RIO, se ven formas perfectas

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cuya es tructura int ima parece gr anulos a : se trata de cris tales , en el últ imo e s tádio de de sarrollo, pres tos á or iginar por fragmenta- • c ión otros muchos .

Nada pues más suges tiva que la s e gme ntación ó divis ion di-recta descrita de mane ra tan magis tral por el Profesor de la Unive r s idad de Nápole s .

De spue s de hecha la me zcla de i reactivo C o n s e r v a c i ó n de y el mate r ial e spe rmático, obte nida la reac-

Ios cristales. c ión y si se quie re antes de aplicar el cubre-obje tos se proce de á la desecación de i pre-

parado, para lo qua l se e xpondrá á la te mpe ratura de i ambie nte , pues si se s ome te á temperaturas mayores (la de una lámpar a de a lcohol, por e je mplo), se corre el r ie sgo de fragme ntar ó pe rde r los cris tales ; ade más , aparecen los cris tales de ác ido picr ico y picratos ba jo la forma de largas table tas romboida le s y agujas s utilis imas con el diâme tro longitudina l muchas veces mayor que el trans ve rs al; a lgunas cruzan de un lado á otro el campo micros-cópico. Es tos cris tales no son nada caracterís ticos y si ve rdade ros e lementos pe r turbadore s .

Una vez desecada la pre paración á la te mpe ratura de i am-bie nte se lava r ápidame nte con agua des tilada, que dis ue lve to-dos los picra tos alcalinos y alcalinos te rrosos , que da ndo s ólo los e spécificos , me nos s oluble s ; se seca con pape l abs orve nte y pro-cede al monta je con báls amo. Se pue de , después- de i r ápido lá-vado en agua , de s hidratar con a lcohol abs oluto, aclarar con x ilol y agre gar el báls amo.

La re acción, dice BARBERIO, es extremada-Sensibilidad de Ia me nte sens ible y bas ta para obte ne r la una

reacción. pe que nis ima cantidad de e spe rma, con tal

que se te nga la pre caución de no diluir lo de mas iado y de agregar de la s oluc ión ác ida una cantidad no excesiva. Nues tras inves tigaciones , dir igidas á de te rminar la sen-s ibilidad de la re acción de una mane ra más aprox imada , demues-tran también que la re acción es s e ns ibilis irna; he mos obte nido re acción pos itiva con diluc ióne s de e spe rma al 1 por 25, al 1 por 100, al 1 por 500 y al 1 por 1.000. Se ria s upér fluo indica r que con las diluc ióne s extremadas la obs e rvación ha de ser mas pacie nte y recaer pr inc ipa lme nte en lá ve c indad de las células y

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de más e lementos figurados de i e spe rma. La cr is talización al 1 por 1.000 ha s ido todavia re lativame nte abundante .

La s e ns ibilidad de la re acción ha s ido e s tudiada de i mo do s iguie nte : colocamos en el porta- obje tos la gota de la diluc ión de e spe rma y aplicamos el cubre- obje tos . Pas amos á la observa-tion y cuando e ncontramos a lgunos e lementos agrupados , fijamos con las pinzas la pr e para t ion. Con una asa de pla t ino hae e mos pa-sar por capilar idad una pe que na cantidad de s oluc ión de ác ido picr ico y la cr is talización sobreviene . No ins is tiremos sobre la im-por tância que en la practica pue de n tener estos re conocimie ntos .

MAJ ON E (*) ha obte nido los cris tales con diluc ione s al 1 por 500, hac ie ndo evaporar una gota en el porta- obje tos , lo que equi-vale á una conce ntración.

Co n el e spe rma recientemente e yaculado Influencia del t iem- he mos obte nido una re acción ne ta; Ios cris-

po. tales son bas tante largos .

El e spe rma putre facto, te nido en frascos, después de ocho meses, ha da do á BARBE RIO re sultados pos itivos , como el e spe rma desecado en manchas de tres anos de antigüe -dad. M Ó D I C A obtie ne la re acción con esperma desecado en man-chas de catorce meses, y CE VIDALLI con manchas datantes de tres anos y me dio. Una mancha de e spe rma de 10 anos de antigüe -dad, s uminis tró á MAJONE, conve nie nte me nte tratada los crista-les de B ARB E RIO; con otra de 1 6 anos los re sultados fue ron ne-gativos .

Manchas espermaticas de seis anos de ant igue dad, conser-vadas en nues tro laborator io, han da do también la prue ba micro-quimica de BARBE RIO; en a lgun c a mpo micros cópico he mos po-dido reconoce r ade más a lguna que otra cabeza de espermato-zóide con tracto de cola. La res is tencia comparada de la prue ba his tológica y de la mic r oquimica es dife rente , s e gun los casos : en manchas desecadas , muy antiguas , la prue ba mic r oquimic a era supe rior por todos conce ptos á la his tológica ; en infus ione s y Ii-quidos espe rmaticos en es tado de putre facción avanzadis ima, esta

(') V. MAJONE: Su lla n u o v a r e azione mic r oc he mic a de llo s pe r ma . Oior-

nale de ll'A s s oe . Napol. de i Me dici e Naturalis ti, a no x v , 1906.

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últ ima nos ha da do re sultados pos itivos , y por el contrar io, con la mic r oquimic a eran a lgo dudos os y viceversa.

Respecto á la putre íacción, s e gún BARBE-Influencia de Ia pu-, RIO SU prue ba mic r oquimica es bas tante más

trefacción. resis tente que la re acción de F LORE N C E , tanto

que ha obte nido re sultados s e gurame nte po-s itivos en casos en los cuales esta últ ima fallaba al inte nto.

MÓDICA, con espe rma en putre íacción y con moho, ce rrado vár ios dias en una probe ta de tapón e s me rilado, ha obte nido cris tales más sutíles , más transparentes y me nos colore ados en amar illo. Que la putre íacción pue de or iginar estas variaciones no lo ne gamos , pe ro esta acción la e jerce en un pe r iodo avanza-dis imo, después de muchos meses. Lo que si nos parece más s e guro es que la putre íacción re tarda a lgo la formac ión de los cris tales . Es pe rma cons e rvado liquido en un írasco durante los meses de mayo, junio , ju lio y agos to, que no d ió en los pr ime ros dias de s e ptie mbre la reacción de FLORENCE, e ns ayando en él á me diados de l mis mo mes la reacción de BARBERIO d ió re sultados pos itivos ; los cris tales eran amar illos y re fringentes . Examinamos los pre parados dos veces, recien obte nidos y á las ve inticuatro horas , habie ndo pe rmane cido mientras tanto en la câmara hume -da de campana . Cre e mos que por la influe ncia de la putre íacción no se pue de n sacar de ducione s para de te rminar de una mane ra muy apr ox imada la ant igüe dad de las manchas .

Cua ndo el esperma está putre facto, e specialmente en la época de los grande s calores (julio y agos to) re come ndamos efi-cazmente el e mple o de las s olucione s glice ro- alcohólicas de ác ido picr ico s ome tidas á una mezcla fr igor ifica, pues asi, oponie ndo-nos á la acción pe r turbadora de la putre íacción, he mos obte nido con cantidade s pe que nis imas de e spe rma cris tales bas tante volu-minos os y en núme r o e xtraordinár io. Es éste, á nues tro entender, el me jor me dio de opone rs e á la putre íacc ión, que si en ocasio-nes no imp ide la cr is talizacion, por lo rnenos pie rde ésta en ni-tidez.

Es pe rma muy putre facto, pre viame nte conge lado, nos ha da do una cris talizacion tipica. La re acción de FLORENCE en estas condic ione s era ne gativa.

Es pe rma expues to en un tubo abie r to á la luz solar, no d ió