Laboratorio de Fisiología I...

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“DIFUSIÓN” Laboratorio de Fisiología I M.C Rosa Elena Arroyo Carmona Integrantes: Bravo Negreros Verónica Cerón Arcos Gabriela Lucas Molina Jeirimy L. Palomino García Angelina Benemérita Universidad Autónoma de Puebla Facultad de Ciencias Químicas Lic. Químico Farmacobiólogo

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“DIFUSIÓN”Laboratorio de Fisiología I

M.C Rosa Elena Arroyo Carmona

Integrantes:

Bravo Negreros Verónica

Cerón Arcos Gabriela

Lucas Molina Jeirimy L.

Palomino García Angelina

Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

Facultad de Ciencias Químicas

Lic. Químico Farmacobiólogo

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La célula: Unidad anatómica

funcional básica y estructural del

cuerpo humano

● Elementos básicos que conforman

el organismo.

● Aportan la estructura de los tejidos

y los órganos del cuerpo.

● Ingieren los nutrientes y los

convierten en energía.

● Realizan funciones especializadas.

● Contienen el código hereditario del

organismo que controla las

sustancias sintetizadas por las

células y les permite realizar copias

de sí mismas.

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El protoplasma está

compuesto por diferentes

sustancias que componen la

célula, principalmente cinco

sustancias: agua,

electrólitos, proteínas,

lípidos e hidratos de

carbono.

Estructura de la célula

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Membrana plasmática

● La membrana celular o plasmática cubre la célula.

● Estructura elástica, fina y flexible que tiene un grosor de tan

solo 7,5 a 10 nm.

● Está formada casi totalmente por proteínas y lípidos

55% de

proteínas

25% de

fosfolípidos

13% de

colesterol

4% de

otros

lípidos

3% de

hidratos de

carbono

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Estructura

Polar, cargada negativamente

No polar, sin carga

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Modelo de mosaico fluido (Singer y Nicholson, 1972)

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Funciones de la membrana

● Mantiene la diferencia en la composición del líquido dentro y fuera de la

célula.

● Actúa como barrera mecánica.

● Permite el paso selectivo de sustancias específicas entre ella y su medio

ambiente, controlando la entrada de moléculas de nutrientes y la salida de

los productos de secreción y de desecho.

Para que una célula pueda sobrevivir

debe mantener una composición

específica de su contenido, única para

cada tipo de célula.

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● Mantiene diferencias en las concentraciones de iones dentro y fuera de

la célula, importante para la actividad eléctrica de la membrana.

● Unión ente células para formar tejidos y órganos.

● Desempeña un papel clave para que la célula responda a cambios o

señales en su entorno (comunicación celular).

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Gradiente de concentración

Diferencia de concentración de solutos o sustanciasdisueltas en ambos lados de la membrana.

El término gradiente de concentración se

usa en relación con cualquier diferencia

en la concentración entre una localización

y otra, no solo diferencias entre un lado y

otro de la membrana, también se define

como la velocidad a la cual la

concentración cambia con la distancia.

Como el gradiente de concentración

es sinónimo de diferencia de [ ], se le

asigna el símbolo: ∆C

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Cuando las moléculas se mueven de

mayor a menor concentración; el

movimiento será espontáneo (o

pasivo) y no requiere un gasto de

energía:

A favor de su gradiente

de concentración.

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Por el contrario, de menor a mayor

concentración será un movimiento

activo, no ocurre de forma espontánea

y requiere energía:

En contra de su gradiente de

concentración.

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Transporte a través de la membrana

Pasivo Activo

No requieren

gasto

energético

Requieren

gasto

energético.

Difusión

simple

Difusión

facilitada Osmosis

Mediado por

proteínas

transportadoras o

bombas

Mediado por

vesículas o

transporte en masa

Endocitosis

Pinocitosis Fagocitosis

Exocitosis

Mediada por receptor

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Transporte a través de la membrana

● Si una sustancia puede atravesar la membrana se dice que la membrana es permeable a esa sustancia.

● Si una sustancia no puede atravesar la membrana se dice que la membrana es impermeable a ella.

● La membrana es selectivamente permeable.

Propiedades de las partículas para atravesar la membrana plasmática sin ayuda:

1. Solubilidad relativa de la partícula en lípidos (liposolubilidad)

2. Tamaño de la partícula

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Transporte a través de la membrana

Las bicapas lipídicas son altamente impermeables a la mayoría de

moléculas polares. Para transportar pequeñas moléculas solubles en

agua hacia el interior o hacia el exterior de las células o de los

compartimientos intracelulares delimitados por las membranas, las

membranas celulares contienen varias proteínas de transporte, cada

una de las cuales es responsable de transferir un determinado soluto

o una clase de solutos a través de la membrana.

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Difusión

Es el movimiento de las moléculas de una a otra localización

simplemente como resultado de su movimiento térmico, hasta que se

logra el equilibrio y se distribuyen de manera equivalente.

Velocidad de transporte: la velocidad a la

cual una sustancia se mueve a través de la

membrana se mide como un flujo.

El flujo de moléculas en una u otra dirección

es el flujo unidireccional; la diferencia entre

los flujos unidireccionales es el flujo neto.

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Difusión simple

Intercambio de sustancias disueltas de muy bajo peso molecular,

cuanto menor tamaño molecular y mayor carácter hidrófobo, mejor

difunde una sustancia a través de la membrana.

Es el movimiento desde las regiones de alta concentración hasta las de menor concentración por ejemplo: agua, gases disueltos (oxigeno, dióxido de carbono), moléculas liposolubles (alcohol etílico y la vitamina A)

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Factores que influyen en la difusión simple:

La solubilidad lipídica

de la sustancia que

difunde.

El tamaño y la forma

de moléculas.

Temperatura.

Grosor de membrana

Permeabilidad de la membrana: para

cualquier mecanismo de transporte

pasivo, una alta permeabilidad implica

una mayor velocidad de transporte, en

igualdad de condiciones.

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El flujo de

moléculas en

una u otra

dirección es el

flujo

unidireccional;

la diferencia

entre los flujos

unidireccionale

s es el flujo

neto.

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Ley de Difusión de Fick

Contempla los factores que influyen sobre la tasa de difusión neta.

1.- La magnitud del gradiente de concentración. Si la membrana es permeable a una sustancia, la tasa de difusión simple de esa sustancia será directamente proporcional a su gradiente de concentración; es decir, a mayor diferencia de concentración, mayor será la tasa neta de difusión.

2.- el área de la superficie membranal a través de la cual las sustancias se difunde. Cuanto mayor sea la superficie disponible, mayor será la tasa de difusión.

ΔC

A

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3.- La liposolubilidad de la sustancia. Cuanto mayor sea la liposolubilidad de una sustancia, ésta se difundirá con mayor rapidez a favor de su gradiente de concentración a través de la bicapa lipídica.

4.- el peso molecular de la sustancia. Las moléculas más ligeras rebotan más lejos al chocar que moléculas más pesadas. En consecuencia, se difunden con facilidad permitiendo intercambios rápidos de estos gases a través de las membranas pulmonares. Mientras mayor sea el peso molecular, menor será la tasa de difusión.

5.- La distancia a través de la cual las moléculas deben difundirse. Cuanto mayor sea la distancia, más lenta será la difusión.

β

MW

ΔX

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Factores que influyen sobre la tasa neta de difusión de una sustancia a través de una membrana.

(Ley de Fick)

Tasa neta de difusión (Q) = ∆𝐶.𝐴.𝛽

𝑀𝑊.∆𝑋

Coeficiente de difusión (D) α1

𝑀𝑊

Permeabilidad (P) 𝐷𝛽

∆𝑋

Q α ∆C . A. P

Factor Efecto sobre la tasa neta de difusión

↑ Gradiente de concentración de una sustancia (∆C). ↑

↑ Área de la superficie membranal (A) ↑

↑ Liposolubilidad (β) ↑

↑ Peso molecular de la sustancia (MW) ↓

↑ Distancia (grosor) (∆X) ↓

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Coeficiente de difusión

Es un valor que indica con qué facilidad

una molécula puede moverse en un

disolvente determinado.

Es proporcional a la velocidad que la

molécula que difunde puede alcanzar el

medio que lo rodea.

Cuanto mas grande la molécula y más

viscoso el medio, menor el coeficiente de

difusión.

𝑫 = 𝑫𝟎 𝐞𝐱𝐩(−𝑸

𝑹𝑻)

D= Coeficiente de difusión (m2/seg)

D0= Constante independiente del tiempo y función

del sistema (m2/seg)

Q= Emergía de activación.

R= Cte. Molar de los gases = 8.314 J/mol-K

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Difusión facilitada: transporte pasivo a través de proteínas de

membranaSustancias transportadas de forma pasiva que no atraviesan la membrana por

difusión simple, sino que cruzan a través de proteinas portadoras, también se le

conoce como transporte mediado.

Portador: proteína transmembranosa

que se une a moléculas a un lado de

la membrana y las transporta al otro

lado por medio de un cambio

conformacional o un cambio en la

estructura.

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Ósmosis; transporte pasivo de agua a través de las

membranas

El transporte de agua es sencillo, porque el agua fluye a través de las membranas

siempre de manera pasiva, no se ve afectado por los potenciales de membrana y

siempre es impulsado por su propio gradiente de concentración.

El flujo de agua a través de

las membrana a favor de su

gradiente de concentración

se llama: ósmosis

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La concentración total de una partícula de soluto de una disolución se conoce como

osmoralidad.

La presión osmótica consiste en la presión ejercida por las células debido a la

diferencia de concentraciones de soluto en los compartimientos celulares.

La presión osmótica busca una reducción del potencial de agua. El potencial de

agua consiste en la tendencia de moverse de un ambiente a otro buscando siempre

el equilibrio de concentraciones.

Presión osmótica

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Dependiendo de las concentraciones de

soluto pueden existir tres tipos de soluciones:

● Solución hipotónica: La concentración de

solutos es mayor dentro de las células que

en el medio exterior.

● Solución hipertónica: La concentración

de solutos es menor dentro de las células

que en el medio exterior.

● Solución isotónica: Presenta un equilibrio

de concentraciones dentro y fuera de las

células.

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Fig. Comportamiento cinético del transporte

mediado por difusión simple y por difusión

facilitada.

Mientras que en la difusión simple el flujo

aumenta linealmente conforme se incrementa la

concentración de soluto, la difusión facilitada

puede compararse a una reacción enzimática en

la cual el flujo llega a un máximo ( V. máx.)

cuando todos los transportadores se encuentran

ocupados.

El transportador tiene una constante de unión

específica para el soluto (KM) que se define

como la cantidad de soluto transportada cuando

la velocidad de transporte es la mitad de la

velocidad máxima (V. máx..)

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Transporte activo

Existen dos formas básicas de transporte activo,

ya que difieren en la fuente de energía utilizada:

El transporte de una sustancia en contra del gradiente de concentración requiere un aporte de energía,

porque las moléculas se están moviendo en contra de la fuerza electroquímica que las empuja.

Transporte activo

primario:

Utiliza ATP o alguna otra

fuente de energía química

directamente para

transportar sustancias.

Transporte activo

secundario:

Utiliza el gradiente

electroquímico de una

sustancia como fuente de

energía para llevar a cabo el

transporte activo de otra

sustancia.

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Objetivo:

Que el alumno conozca los mecanismos de paso de una sustancia a

través de una membrana como es el fenómeno de difusión.

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Sustancias:

● HCl 0.1N

● HCl 0.001N

● Fenolftaleína

● NaOH 0.001N

● Agua destilada

Procedimiento:

Con una jeringa hacer un orificio

pequeño en la zona apical del

huevo. (diámetro aprox. de

un popote).

Con una jeringa extraer el

contenido del huevo (yema y clara)

con mucho cuidado para no

romper la membrana que se

encuentra en el interior.

Agregue agua destilada para

eliminar los restos de yema y

clara que puedan haber

quedado.

Hacer un orificio pequeño ahora en

la zona donde se encuentra la

cámara de aire con el propósito de

dejar descubierta la zona donde se

encuentra la membrana.

Material:

● 3 huevos.

● Una jeringa

● Plastilina

● Frasco grande

● Probeta

● Pipeta

● Perilla

● Popote

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Coloque el popote en el

orificio donde se

encuentra la zona apical;

fíjelo con plastilina.

En el frasco grande

coloque la base donde

descansará el huevo.

Agregue agua

destilada (180 ml).

Agregue la solución respectiva a

cada uno de los huevos con una

jeringa. (Nota: Medir exactamente

el volumen de la solución utilizada

en cada uno de los casos).

Una vez colocada la

sustancia, extraiga una

alícuota de 2 ml del exterior

del huevo a los 5, 10, 15, 20,

25 y 30 minutos.

A la alícuota tomada agregue

una gota de fenolftaleína y titule

con el NaOH.

Al término mida el volumen del

interior del huevo, así como del

exterior del huevo utilizando

una probeta.

Nota: Llenar las tablas de la misma

práctica.

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Obtención de un indicador de pH a partir de la col

morada

• El colorante de la col morada (brasica oleracea) se puede extraer calentando durante 5-10minutos,

una o dos hojas de la col en una taza con agua purificada.

• El colorante en cuestión se llama cianidina y tiene propiedades químicas muy interesantes pues el color

azul-violeta que presenta en medio neutro (pH = 7) cambia a colores que tienden hacia el rojo en

medioácido (pH = 1-6), y a colores que en medio básico tienden hacia el verde (pH = 8-12) y al amarillo

(pH = 13-14).

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Extracción del colorante:

a). Materiales: b). Reactivos:

- 1 matraz de bola de 100 mL. - HCl al 5 %.

- 1 refrigerante. - NaOH al 5 %.

- 1 canasta de calentamiento. - Agua destilada.

- 10 tubos de ensaye. - Sustancias comunes en casa:

- 1 probeta de 5 mL. •Bicarbonato de sodio,

- 1 Varilla de vidrio. •Sarricida,

- 2 mangueras. •Aspirina,

- 1 bomba de recirculación. •Refresco (preferentemente

incoloro),

- 1 espátula. •Limpiador de estufas, etc.

- 1 vaso de precipitados de 50 mL.

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Procedimiento

1. Corte finamente media hoja de col morada y coloque los trocitos en el matraz de bola.

2. Agregue agua destilada cuidando que el volumen total de agua más la col, no superen las 2/3

partes del matraz.

3. Coloque el resto del equipo para realizar un reflujo. Caliente a reflujo durante 10 minutos o hasta

obtener una solución azul-violeta.

4. Deje que la solución se enfríe por si sola o con un baño de hielo o agua, hasta temperatura ambiente.

5. Decante la solución y coloque un mL de ella en cada uno de los tubos de ensaye. Numere los tubos

del 1 al diez.

6. En el tubo uno agregue gota a gota HCl al 5 % hasta 1 mL o hasta que ya no se observe ningún

cambio de color. Al tubo dos agregue gota a gota NaOH al 5 % hasta 1 mL o hasta que se ya no se

observe ningún cambio de color. Al tubo tres agregue 1 mL de agua destilada. En los tubos 4-10

agregue respectivamente, pequeñas porciones de las sustancias a probar, por ejemplo, un cuarto de

aspirina, hasta un mL de sarricida, un trocito de tomate o jitomate, algunas gotas de limón, refresco,

cal, etc.Para determinar si la sustancia en cuestión es ácida, básica o neutra, compare la coloración

resultante con la de los tubos 1-3 (testigos). Adicionalmente, si cuenta con una presentación a

colores de la escala de colores, proporcione el valor aproximado de pH obtenido.

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Bibliografía:

● A.C.y Hall J. E. 2011.Tratado de Fisiología Médica. 12ª edición. Elsevier.

España

● Sherwood L. 2011. Fisiología humana. De las células a los sistemas. 7ª

edición. Cengage Learning. México

● Becker M. M., Kleinsmith L. J. y Hardin J. 2009. El mundo de la célula. 6ª

edición. Pearson. México

● Fanjul M.L. 2012 Biología funcional de los animales. Siglo Veintiuno. Mexico

● Levy M.N., Koepen B. 2009. Fisiologia. 6° edicion. ELSEVIER. EEUU