Manual de Bioquimica 2016

7/25/2019 Manual de Bioquimica 2016

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Bioqumica

Nombre _______________________________________ Grupo ____________ Fecha __________

PRACTICA No. 1PROPIEDADES QUMICAS DE AS PROTENAS

INTRODUCCI!N"

Las protenas son compuestos indispensables de las clulas tanto animales como vegetales.Qumicamente estn conformadas por C, H, O !, adems pueden contener ", # otros elementos."on de peso molecular alto por $idr%lisis dan aminocidos.

Las protenas dan reacciones coloridas con algunos reactivos& estos colores no sonespecficos de las protenas sino de algunos aminocidos que las constituen. 'orman precipitadoscon las sales de los metales pesados, con algunos cidos inorgnicos, detergentes colorantes& loque se debe es en parte a la formaci%n de comple(os en parte a las propiedades de las protenas.Las protenas son sustancias anf%teras por combinarse tanto con cidos como con bases. )lgunasson coagulables por el calor, presencia de cidos o etanol.

O#$ETI%O"Observar detalladamente la formaci%n de precipitados el cambio de color en diferentessoluciones proteicas con la presencia de diferentes reactivos.

MATERIA REACTI%OS*+ ubos de ensao +- ml de H!Oconcentrado* /radilla 0-ml de soluciones proteicas1peptona polipeptona2* 3aso de precipitado de +0- ml +- ml de sol. !aOH al +04 *-4* 5ec$ero Bunsen *- ml de sol. Cu"O6al *-4* pin7as para tubo 0- gr de 1!H62+"O6

* 8mbudo 0- ml de alco$ol etlico* )gitador *- ml de reactivo de 5illon #apel filtro #apel indicador

PROCEDIMIENTO"1. REACCI!N &ANTOPROTEICA

8n un tubo para cada muestra colocar + ml de soluci%n proteica, a9adir -.0 ml de H!O concentrado lentamente& despus agregar gota agota soluci%n de !aOH al +04 $asta que estalcalino. :e(ar reposar la me7cla observar los cambios ocurridos. 8s positiva para aminocidosaromticos como 'enilalanina, tirosina, tript%fano, etc.

'. REACCI!N DE #IURET8n un tubo para cada muestra coloca + ml de soluci%n proteica, a9ada 0 gotas de Cu"O6al *-4 agite, en seguida a9ada *.0 ml de !aOH al *-4, o bien *.0 ml de reactivo de Biuret. :e(arreposar observar los cambios. 8sta prueba es positiva para los enlaces peptdico.

(. REACCION DE MION8n un tubo para cada muestra colocar ml de cada soluci%n proteica a9adir * ml de reactivo de5illon calentar a ebullici%n. )nota los cambios. 8sta prueba es positiva para el aminocidotirosina.

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Bioqumica

). REACCION DE COAGUACI!N *POR CAOR+8n un tubo para cada muestra coloca ml de soluci%n proteica calintala, agrega 0 a ; ml dealco$ol. )nota los cambios ocurridos. Con esta prueba se determina la estabilidad de lasprotenas.

,. SAIFICACI!N"atura *-ml de soluci%n proteica con 1!H62+"O6en la forma siguiente< )grega poco a poco el

sulfato $asta que agites no se disuelva. 'iltra la soluci%n final.

a2 )l precipitado, aplicar la reacci%n de 5illon.b2 )l filtrado, aplicar la reacci%n de Biuret.

O#SER%ACIONES"=====================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================

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RESUTADOS. >eali7a la comparaci%n entre las distintas soluciones======================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================

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CUESTIONARIO"*. 8n la prueba * ?Quin obtiene mas precipitado porque@

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+. Comparativamente ?Cul de las soluciones tiene maor precipitado en la prueba de Biuret@=================================================================================

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. ?Que efecto tiene el 1!H62+"O6en las protenas@=================================================================================

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CONCUSIONES"======================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================



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PRACTICA No. 'DESNATURAI-ACI!N DE PROTEINAS DE UE%O

INTRODUCCION"

La desnaturali7aci%n de una protena es una modificaci%n de la estructura interna da lugar acambios en las propiedades qumicas, fsicas biol%gicas. 8sto puede ocurrir por acci%n del calor,fuer7as mecnicas, congelaci%n entre otras.

8sta desnaturali7aci%n se debe a que las molculas plegadas en $lice se rompen los enlacespuente de $idrogeno disulfuro, por lo que dice que se desdoblan. 8n la forma desdoblada puedetener lugar la coagulaci%n 1agregaci%n2 de las molculas formar entonces un gel, por calentamientoprolongado, etc. La protena puede separarse completamente del lquido donde se encuentradisuelta.

O#$ETI%O"

8l alumno comprobar las temperaturas de desnaturali7aci%n de las protenas de $uevo,aplicando varias condiciones.

MATERIA" REACTI%OS"A ubos de ensae )gua destilada* /radilla )7car * apa de ca(a de petri cido ctrico* 5ec$ero de Bunsen Bicarbonato de sodio* #in7as para tubo + Huevos* ripi* ela de alambre

+ 3asos de precipitado de *-- ml* erm%metro* 3aso de +0- ml 1ba9o mara2* )gitador

PROCEDIMIENTO"

1. ESTRUCTURA DE UE%O >omper el $uevo cuidando de todo quede sobre la tapa 1sin romper la ema2, quitar losfragmentos de cascar%n. Comparar la estructura con el dibu(o que se eDpone aba(o reconocer cada

una de las partes que integran el $uevo.5embrana de la ema

albmina espesa 5embrana vitelina

albmina fluida

ema

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Bioqumica

'. TEMPERATURAS DE COAGUACI!N DE AS PROTENAS DE UE%O "epara de un $uevo la clara la ema en un vaso de precipitado, colocar una peque9acantidad de clara en un tubo calentar suavemente a ba9o mara en un vaso de precipitado& su(eta elterm%metro dentro del tubo de ensae&anotar la temperatura en la cual la albmina se coagula 1sepone opaca2. >epita lo anterior con la ema. :iferencia la temperatura de ambas.

(. EFECTO DE A PRESENCIA DE DI%ERSOS FACTORES SO#RE A TEMPERATURA DECOAGUACION.

A+ DIUCION:ilua a la mitad 1*epite la prueba +. #ara esta prueba $acer unamuestra testigo, esto es colocando la misma cantidad de clara reempla7ar la soluci%n dea7car por agua destilada. )nota las temperaturas de coagulaci%n de ambos tubos.

C+ ADICION DE ACIDOS / #ASES *I02ue0c3a 4e2 p+)notar la temperatura de coagulaci%n de acuerdo al pH indicado por el maestro, el cual

se logra con la adici%n de soluci%n a sea cido ctrico o bicarbonato de sodio segn serequiera para obtener el pH deseado.

O#SER%ACIONES====================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================

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RESUTADOS"/rafica los datos de la parte c2 de todo el grupo eDplica el comportamiento

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CUESTIONARIO"

1. :efine las temperaturas de coagulaci%n de acuerdo a las condiciones.=================================================================================================================================================================='. 8Dplica por que, por que se tiene ese comportamiento.

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=================================================================================(. 8Dplica otros dos factores que alteran las protenas adems de la temperatura==================================================================================================================================================================

CONCUSIONES"====================================================================================================================================================================================================================================================================================================================================

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Bioqumica

PRACTICA No (PROPIEDADES QUMICAS DE OS CAR#OIDRATOS

INTRODUCCI!N"

Los carbo$idratos eDisten en abundancia en los reinos animal vegetal como a7cares,

almidones celulosa. ) estas sustancias se les conoce con el nombre de Hidratos de Carbono oCarbo$idratos. :e acuerdo con su composici%n, tienen la f%rmula general de CnH+nOn."e clasifican comoE:O"< "on los carbo$idratos con maor peso molecular como el almid%n, celulosa

glic%geno.

O#$ETI%OComparar las diversas propiedades qumicas de distintos carbo$idratos por medio de pruebas

sencillas.

MATERIA REACTI%OS+- ubos de ensao A ml de !aOH al *-4* /radilla 6 ml de H+"O6conc* 5ec$ero Bunsen ml de )g!Oal 04* 3aso de precipitado de +0- ml + ml de !H6OH conc* ripie 0 ml de 'e$ling ) 0 ml de B* #in7as para tubo 0 ml de Benedict* ela de alambre Carbo$idratos< Lactosa, deDtrosa, maltosa* )gitador F )lmid%n, F)7car.

PROCEDIMIENTO"

!O)< >eali7a una agitaci%n antes de cada calentamiento.

*. 8n un tubo de ensae para cada carbo$idrato, $aga una me7cla de ml de !aOH al *-4 -.0 gr1aproDimado2 del carbo$idrato, llevar a ebullici%n observando que ocurre desde el principio.

+. 8n un tubo para cada muestra introdu7ca * gr del carbo$idrato agrega unos 6 ml de H+"O6concentrado, espera unos minutos. ) veces es necesario calentar un poco, sin llegar a ebullici%n.

)nota los cambios gases ocurridos en cada tubo.. 8n un tubo de ensae para cada muestra colocar ml de )g!O + gotas de !aOH, observa. )

continuaci%n agrega, gota a gota, !H6OH $asta disoluci%n del precipitado. )9adir -.0 gr decarbo$idrato agita coloca en ba9o mara de ;-GC por 0 min aproD.. 8l resultado es positivocuando aparece un espe(o en las paredes del tubo.

6. Coloca en varios tubos de ensae * ml de soluci%n de Benedict. )9ade -.+ gr de cadacarbo$idrato. )gita coloca los tubos al mismo tiempo en agua $irviendo durante min. 8nfra lasoluci%n $a7 comparaciones.Observa el precipitado formado, cambio de color no indica reacci%n.

0. Coloca en tubos de ensae -.0 gr de carbo$idratos. )9ade * ml de 'e$ling aI *ml de 'e$lingbI. 5e7cla bien ponlo a ba9o mara durante un tiempo. "i cambia a marr%n o ro(o, la prueba espositiva. 8sta prueba es una reacci%n de oDido reducci%n donde los alco$oles se oDidan aalde$dos cidos.

O#SER%ACIONES

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RESUTADOS

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CUESTIONARIO

*. ?Qu es un a7car reductor@===================================================================================================================================================================================================================================================+. ?Cul de las + primeras pruebas afecta la estabilidad de los carbo$idratos@___________________________________________________________________________________

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. ?Qu carbo$idrato da positivo para la prueba del )g!O por que@___________________________________________________________________________________

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CONCUSIONES___________________________________________________________________________________

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Bioqumica

PRACTICA No. )IDR!ISIS EN-IMATICA DE PIDOS

INTRODUCCI!N"

Las lipasas las esterasas catali7an la $idr%lisis de los enlaces ster que se encuentran en grannmero de lpidos saponificables.8stas en7imas estn ampliamente distribuidas en la naturale7a son especialmente importante

en el tracto digestivo donde ellas funcionan en la digesti%n absorci%n de grasas. :ebido a que lasgrasas no son solubles en agua las en7imas deben actuar en la interfase del lquido agua.

MATERIA REACTI%OS6 5atraces F Lec$e $omogenei7ada* Bureta #ancreatina al *4* pin7as para bureta !aOH al -.* !

* "oporte universal 'enolftalena* ripie )lco$ol al K;4* Cuba $idroneumtica* 5ec$ero Bunsen* erm%metro* 8mbudo* #ipeta

PROCEDIMIENTO*. Coloca 0 ml de lec$e en cada un de los matraces. )diciona a cada matra7 *.0 ml de

pancreatina al *4 col%calos a ba9o mara de JGC.+. :espus de *0 min retira el primer matra7 del ba9o mara adici%nale *+.0 ml de alco$ol.itula enseguida con !aOH al -.* ! gotas de fenolftalena.

. )gita vogorosamente durante la titulaci%n, a que la protena precipitada puede enmascararlos cidos grasos al titular.

6. :ebido a que la digesti%n por la lipasa continua en los otros dos matraces, durante latitulaci%n, una ve7 que se $a titulado el primer matra7, $a7 lo mismo con los otros siguiendolos tiempos de - 60 min.

0. #repara un testigo de la siguiente manera< Coloca en un matra7 0 ml de lec$e ms *.0 ml depancreatina $ervida previamente durante min. )grega enseguida *+.0 ml de alco$ol gotas de fenolftalena titula.

!O)eali7a una grfica, usando el tiempo de $idr%lisis en las abscisas contra el gasto corregido de!aOH en las ordenadas. Enterpreta el comportamiento de la grfica.

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CUESTIONARIO

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*. ?Qu efecto tuvo la pancreatina sobre los lpidos@===================================================================================================================================================================================================================================================+. ?#or qu los lpidos se pueden titular@

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=================================================================================. ?#or qu es necesario que la temperatura se regule@===================================================================================================================================================================================================================================================

CONCUSIONES

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PRACTICA No. ,ACIDE- EN PIDOS

INTRODUCCI!N""e define como el nmero de miligramos de $idr%Dido de potasio necesario para neutrali7ar

los cidos libres de un gramo de grasa. 3iene dado por la f%rmula


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Bioqumica

CUESTIONARIO*. ?Que grupos funcionales estn presentes en los lpidos@

==================================================================================================================================================================+. ?) que se debe la consistencia de los lpidos@

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. ?Qu es el proceso de oDidaci%n de los lpidos@.==================================================================================================================================================================6. ?#or qu $a ms cidos grasos en una muestra que en otra@ ?) que se debe@

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CONCUSIONES

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Bioqumica

#I#IOGRAFA"

BOHE"MEBioqumica 'undamental8d. #rentice Hall

L8H!E!/8>Bioqumica

8d. Omega

HO>O!Bioqumica

8d #rentice Hall

#8N), )>>OO, /O58P, )#E) Bioqumica

8d. Limusa

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