METODOS DE RECONOCIMIENTO, IDENTIFICACIN E INDIVIDUALIZACIN DE MANCHAS DE SEMEN

METODOS DE RECONOCIMIENTO, IDENTIFICACIN E INDIVIDUALIZACIN DE MANCHAS DE SEMEN1INTRODUCCIN: El estudio de las manchas de semen tiene gran importancia en Criminalstica, pues constituye una prueba muy precisa. Su estudio se encuentra asociado a delitos que afectan las buenas costumbres y el buen orden de las familias (casos de violacin, actos lascivos, acto carnal con menores y el ultraje al pudor, entre otros). El informe pericial que emite el experto adquiere fundamental importancia para la investigacin, esclarecimiento del hecho y calificacin legal.

2DEFINICIN:El semen o esperma es un lquido viscoso, ligeramente alcalino, blanquecino a amarillento, de olor sui generis, que es expulsado a travs del pene en la eyaculacin. Est constituido por una suspensin de espermatozoides en el plasma seminal, y se forma por el aporte de los testculos, el epiddimo, la vescula seminal, la prstata, las glndulas de Cowper, las glndulas de Litre y los vasos deferentes.

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4 Los espermatozoides son clulas haploides que constituyen el gameto masculino de los animales, su funcin es la formacin de un cigoto al fusionarse su ncleo con el del gameto femenino (vulo). La funcin del plasma seminal es aportar un medio nutritivo con osmolalidad y volumen apropiado para el transporte y sobrevivencia de los espermatozoides en el aparato genital femenino.

51) La Fraccin Previa o prosttica (13% al 33% del volumen total): Proviene de la prstata, es fluida, no presenta espermatozoides. Tiene una elevada concentracin de fosfatasa cida y cido ctrico.2) La Fraccin Principal (5% al 10% del volumen total): Procede del epiddimo y de los conductos deferentes, presenta elementos lquidos y gelatinosos. Es la fraccin que contiene la mayor cantidad de espermatozoides.

6El semen tambin puede contener algunas clulas desprendidas del epitelio de los conductos excretores y de la uretra. En caso de infecciones, puede llegar a contener altas concentraciones de virus o grmenes, por ejemplo, el Virus de Inmunodeficiencia Humana

7Manchas de semenAl estado fresco: lquido filante, blanco lechoso, ligeramente amarillento. Al secarse se torna amarillo franco y de aspecto acartonado.Soportes: prendas de vestir de la vctima, del acusado o de ambos, de los sospechosos de haber cometido ultraje, hisopos o lquidos del lavado vaginal, exudados vaginal y rectal, rastros en muebles, alfombras, pisos, toallas, pauelos, papel higinico, preservativos.Buscar pelos arrancados, restos biolgicos en las uas, pelos de pubis sobre los orificios naturales de la vctima.8Sobre la piel: forman dbiles pelculas brillantes, de aspecto barnizado.Sobre telas absorbentes: aspecto conocido de mapa geogrfico, irregulares, de color grisceo, bordes limpios almidonados al tejido.Sobre telas no absorbentes: forman escamas o pelculas brillantes.Las primeras pruebas utilizadas en el anlisis de manchas de semen fueron organolpticas y algunas reacciones qumicas. En 1826, Olliver dAngers y Barruel informaron sobre un caso de agresin sexual donde se sospechaba que ciertas manchas en la ropa de la vctima fueron hechas intencionalmente con grasa de origen animal.

Aspecto de las manchas segn el soporte9Naturaleza espermtica de la mancha.Especie animal a la que pertenece el esperma.Cantidad de esperma contenido en la mancha.Identidad gentica del semen por ADN.

El elemento fundamental en la identificacin de esta secrecin est en el hallazgo del espermatozoide.Problemas que plantean las manchas de esperma en criminalstica10Tienen mayor utilidad cuando se trata de localizar el vestigio entre las ropas de la vctima en superficies grandes (sbanas, mantas).El papel de una prueba de orientacin recae ms en su habilidad para descartar la presencia de semen en una mancha cuestionada que en la de indicar la presencia de semen.Las tcnicas que se utilizan son: luz ultravioleta y fosfatasa cida.Anlisis de manchas seminales: Pruebas de orientacin 11Luz ultravioleta: detecta semen en los lugares del crimen. Las manchas de semen presentan una fluorescencia directa blanco amarillenta, brilla en la oscuridad al contraste con la luz ultravioleta. La razn de esta propiedad radica en la composicin del semen. Donde se encuentran diversas sustancias minerales que posibilitan que el conglomerado final, absorba una cantidad importante de ondas de luz UV, que luego puede desprender en forma de luz visible.

121. Examen directo con luz UV (365 nm) a temperatura ambiente: en general se observan las manchas de semen por la fluorescencia caracterstica, excepto cuando el tejido presenta tratamiento de blanqueado ptico. 2. Examen directo con luz UV (365 nm) previa refrigeracin, o el material puede ser colocado sobre hielo seco, cuya temperatura de volatilizacin es de -78,5 C: La fosforescencia de las manchas persiste 20 segundos despus de retirada la fuente de luz UV. Otros fluidos del cuerpo producen fosforescencia a baja temperatura, por lo que la tcnica de Calloway es de orientacin y no de certeza. Buscar manchas visibles e invisibles. Se aprecian por el color blanco semi-transparente y de aspecto grumoso; cuando son frescas el color es ligeramente amarillo y de textura endurecida.

13La fluorescencia y fosforescencia del semen est relacionada con la presencia de los aminocidos tirosina y triptfano, una base nitrogenada llamada flavina y, algunas veces, por la presencia de la bacteria Pseudomona fluorenscens. El semen tambin contiene pequeas cantidades de una molcula fluorescente llamada colina. Se requieren tcnicas que nos permitan evaluar el poder fecundante de un eyaculado o una dosis seminal, es decir, tcnicas que nos permitan conocer si los espermatozoides sern capaces de disolver las cubiertas oocitarias y de reconocer al oocito.

14Lmpara de Bretton o luz azul o luz forense: tiene un principio y uso similar a la lmpara de Wood, pero toma en cuenta la fluorescencia de fondo, por lo que el observador debe usar gafas con un filtro especial para eliminar la luz de fondo y dejar pasar la luz fluorescente proveniente slo de la mancha de semen . La capacidad de bloqueo de los filtros es directamente proporcional a la sensibilidad del sistema para detectar cantidades muy pequeas de semen.

15Deteccin de Fosfatasa Acida: En 1935, Kutscher y Wohlbergs informaron que la eyaculacin masculina contiene una enzima que hidroliza diferentes steres de fosfato a un pH cido. Se origina en la glndula prosttica y se llam "fosfatasa de la prstata. En 1945, Lundquist, sugiere que las grandes cantidades de fosfatasa cida prosttica en el semen humano se utilicen como base para la identificacin de semen en situaciones mdico legales.

16Fosfatasa cidaEnzima fosfomonoesterasa no especfica.Se encuentra en niveles altos en el semen. El nivel de la actividad de la fosfatasa cida es 500 a 1000 veces ms alta en el semen humano que en otros fludos o secreciones corporales.Es considerada como un rpido y confiable indicador de la presencia de semen.17

18Pruebas de certeza:Pruebas microscpicasEs el mtodo ms utilizado actualmente.Se detectan espermatozoides mviles en lquido de lavado vaginal hasta 24 hs. despus de la violacin e inmviles 100 das despus de ocurrido el hecho en manchas secas.

Otros mtodos: Electroforticos: mtodo bidimensional sobre papel, combinacin de electroforesis y cromatografa, lo que permite separar la espermina de los aminocidos del semen.Mtodos enzimticos: la fosfatasa cida prosttica produce la hidrlisis de la fosforilcolina en cido fosfrico y colina.19Ensayos de Florence y Barberio: En 1895 y 1896, el Dr. Florence en Lyon public una serie de documentos refiriendo sus estudios en fluidos seminales y su aplicacin mdico-legal. Para esta poca, el ahora familiar test de Florence fue introducido y considerado como presuntivo, el cual puede ser practicado antes de iniciar una bsqueda cuidadosa de clulas espermticas u otro elemento en manchas sospechosas de semen.

20Los cristales caractersticos de Florence no se forman a partir de moco nasal o vaginal, orina, sudor, saliva, lgrimas, leche materna, ni algunas muestras de semen de animales. En esta reaccin el Iodo se une a la colina formndose un cristal en forma de aguja de reloj, color mbar, denominado yoduro de colina El moco vaginal, moco nasal y saliva no dan positivo para la reaccin. Barberio pens que la sustancia en el semen responsable para la reaccin era orgnica y diferente de la sustancia reactiva en el test de Florence, esta sustancia se hallaba presente en plasma seminal e incluso en muestras de azoosprmicos.

21Pollack en 1948 estableci: Aspermia se caracteriza por una ausencia total de espermatozoides en la eyaculacin. El trmino "azoosprmico" se refiere a cualquier muestra seminal en el que los espermatozoides maduros no estn presentes.

El fundamento de la prueba se basa en la afinidad de los colorantes bsicos por los elementos celulares cidos y de los colorantes cidos por elementos celulares bsicos. La tincin ms conocida en los laboratorios de criminalstica a nivel mundial es la denominada rbol de Navidad. 22Arbol de navidad: los ncleos de los espermatozoides se colorean de rojo carmn brillante y las colas de color verde-azulado. Esto es importante en muestras contaminadas o mezcladas.La tincin histolgica tradicional de hematoxilina y eosina (H & E) tambin es ampliamente utilizada en los laboratorios de criminalstica, as como la tincin Giemsa, Diff Quick y Ziehl Neelsen Loefler.

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24El antgeno prosttico (PSA P30) es una proteasa producida por la prstata, y se puede hallar en el fluido seminal, fluido prosttico, sangre masculina y orina masculina, es utilizada como indicador de la presencia de semen en muestras de casos penales.

Deteccin del Antgeno Prosttico (PSA o P30) y la Semenogenina (SG):

25Prueba RSID-Semen: utiliza anticuerpos monoclonales anti-humanos de SG. La sensibilidad es equivalente a la de otro Kit de deteccin de SG recientemente comercializado. Los resultados de los test de tiras se completan en 10 minutos.

26Transporte y cuidado de las manchas como evidenciaLa presencia de un espermatozoide completo observado al microscopio es la nica prueba irrefutable de la presencia de semen.Es importante proteger las prendas que contengan espermatozoides.No deber enrollarse ni doblarse la parte manchada y no deber someterse a friccin.27