Metodos de Trasnfeccion
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Métodos de transfección
Cultivo de tejidosCultivo de tejidos
Presupone el cultivo de plantas o partes Presupone el cultivo de plantas o partes de plantas (explantos) en un medio de de plantas (explantos) en un medio de cultivo apropiadocultivo apropiado
El cultivo se desarrolla en condiciones de El cultivo se desarrolla en condiciones de temperatura, humedad, fotoperíodo e temperatura, humedad, fotoperíodo e irradiancia controlados.irradiancia controlados.
La manipulación se realiza en cabinas de La manipulación se realiza en cabinas de flujo laminarflujo laminar
Esta técnica es importante en la Esta técnica es importante en la propagación de especies de interés propagación de especies de interés agroforestal: micropropagaciónagroforestal: micropropagación
Cultivo in vitro
Callos• Tejidos no diferenciados ( a veces diferenciados),
en división activa.• Frecuentemente se desarrollan a partir de heridas.
Medio de cultivo
• Mezcla de sustancias en los que las células, tejidos y órganos pueden.
• Sustancias inorgánicas: N, P, K, Ca, Mg, Cl, Na• Cu, Zn, Mn, Fe, Bo, Mo, Co, I• Suplementos orgánicos complejos: leche de
coco, extracto de levadura.• Reguladores de crecimiento : hormonas.• Fuente de carbono: sacarosa• Con o sin agar: medio semi -sólido o líquido.
Reguladores de crecimiento
Hormonas/ Fitohormonas:• Auxinas: grupo de hormonas vegetales
(naturales o sintéticas) que inducen la elongación, o en algunos casos la división celular. – Frecuentemente inducen
raíces adventicias e inhiben la formación de tallos adventicios.
• Cytokininas: grupo de hormonas vegetales (naturales o sintéticas) que inducen división celular y frecuentemente tallos adventicios y en muchos casos inhiben la formación de raíces adventicias.
• Reglas generales para la acción hormonal:
• • Auxina : Cytokinina = ~1 Callo• • Auxina : Cytokinina < 1 Tallo• • Auxina : Cytokinina > 1
Raíces
Transformación mediante cocultivo de A tumefaciens y discos de hojas de tabaco
CULTIVO in vitro
GEN MARCADOR GPVF
R. ALEGRIA CONACYT 2002
Ingeniería Genética
CLONACIONTérmino genérico para la replicación en un laboratorio de genes, células u organismos de una entidad original, con copias genéticas exactas del gen, célula u organismo original. Esta técnica ha producido avances sensacionales en medicinas y vacunas. También hay investigación en clonación de células humanas, órganos y otros tejidos. Esto puede producir el reemplazo de piel, cartilagos y hueso para victimas de quemaduras y accidentes, o de órganos.
Clonación