Micotoxinas: Diseño y Desarrollo de un Programa Integrado ... · PROYECTOS DE INNOVACION EN...

PROYECTOSDEINNOVACIONENALIMENTOSSALUDABLES2015-2016

Micotoxinas: Diseño y Desarrollo de un Programa Integrado de Monitoreo y Análisis para la Calidad e Inocuidad Alimentaria (PRIMACIA) Aplicado a

Frutos Secos.

Código del Proyecto: PYT-2016-0064


Institución Ejecutora: Asociación Gremial de Productores yExportadores de Nueces de Chile A.G.

Institución Asociada: Facultad de Medicina – Instituto de CienciasBiomédicas – Universidad de Chile

Fecha de inicio y duración del proyecto: 15/03/2016 – 24 meses

Fecha de la presentación actual: 12/08/2016

Nombre participante en presentación: Américo López Rivera – Director alterno


ANTECEDENTESGENERALESDELEQUIPODELAPROPUESTA

Nombrepersona Cargo/Formación Funciónenlapropuesta Competenciasdelprofesional

Elena Puentes Ing.Agrónomo/GerenteChileNut Coordinacióngeneral Experta en frutales de nuez.

Américo López RiveraAcadémicoFacultaddeMedicina- UniversidaddeChile

Coordinaciónactividadesenterreno.

Investigador. Toxicología dealimentos. DirectorLaboratorio Toxicología, FM-Uch.

RemigioLópezSolísAcadémicoFacultaddeMedicina- UniversidaddeChile

Actividadesenterreno.

Investigador. Biomedicina(Biología Celular y Molecular).Director Laboratorio deBiología Supramolecular

JaimeMontealegreAndrade

AcadémicoFacultaddeCienciasAgronómicas-UniversidaddeChile

Actividadesenterreno.

Investigador. Manejo Integradoy Control Biológico deFitopatógenos Fungosos yBacterianos

Jessica Millar Ing.Agropecuario/ChileNut Gestiónyejecucióntransferenciaderesultados

Experiencia en desarrollo ytransferencia a pequeños ymedianos agricultores.

JUSTIFICACIONDELAVIGENCIACIENTIFICA– TECNOLOGICADELPROYECTO

1.- En mercados importadores de productos agricolas:

Fantasma de las crisis en seguridad alimentaria. Frecuentes brotes de hongostoxigénicos en países de gran importancia agrocomercial. Impacto negativo en lasalud humana y en la economía de las industrias de este sector productivo.

• Europa ha reaccionado: red de 1.200 laboratorios de referencia vigila lacalidad alimentaria (80 de éstos cuentan con el sello de Laboratorio deReferencia Comunitaria).

• Tales laboratorios se han focalizado en optimizar el análisis de micotoxinas yde elementos pesticidas trazas (EPT) en alimentos.

• Europa se ha propuesto como meta principal la unificación de sus criteriosanalíticos para estas sustancias en la red completa de sus laboratorios.

• Europa es un mercado emergente para agroproductos chilenos.

CONTEXTO


2. En Chile no existe un sistema de evaluación del riesgo toxicológico queproporcione un alto nivel de garantías sobre la seguridad de los productosagrícolas, que refuerce la salud pública y la producción agrícola nacional.

Chile carece de infraestructura analítica normada para enfrentar las demandasde sus mercados compradores de productos sensibles a hongos toxigénicos,como son frutos secos, frutos deshidratados, uva y vino, entre otros.

CONTEXTO


3. Regulaciones más exigentes por parte de los mercados importadores:Métodos de Análisis y Niveles Regulatorios.

En la CE, las normas relativas a micotoxinas señalan que la vigilancia sanitariadebe incluir sistemas de alarma, detección de micotoxinas y hongoscontaminantes, el apoyo de BPA en programas de monitoreo, incluyendo laevaluación de riesgo.

En otros mercados importantes, emergen vientos de proteccionismo….

CONTEXTO


En este amenazante contexto….

Nuestro eventual incumplimiento de las normas conduciría al bloqueo de productosagropecuarios chilenos, disminución en nuestras exportaciones, pérdida deprestigio como país exportador y disminución de la fuerza laboral asociada

Así, Chile está obligado a cumplir con los estándares de calidad exigidos por UE yUSA. Por tanto, hoy urge implementar acciones de control en toda la cadenaproductiva del sector frutícola nacional.


Orientado a generar conocimientos e innovaciones científicas y tecnológicas quecontribuyan a garantizar la calidad e inocuidad de frutos secos (nueces) producidosen Chile, así como a perfeccionar la calidad y oportunidad de la detección einformación sobre micotoxinas, hongos toxigénicos, EPT y parámetros ambientales,todos los cuales constituyen componentes elementales en la evaluación del riesgoaplicado a la inocuidad alimentaria.

El análisis del riesgo propuesto en el proyecto, es un proceso preventivo (estudio decausas y efectos que producen) para garantizar la inocuidad toxicológica. Seidentificará, evaluará y preverá el riesgo de contaminación de las nueces.

NUESTRO PROYECTO


Diseñar y desarrollar un Programa Integrado de Monitoreo y Análisis deCalidad e Inocuidad Alimentaria (PRIMACIA) que permita detectar ymonitorear micotoxinas (Aflatoxinas y Ocratoxina A) a lo largo de todala cadena productiva en el cluster de Frutos secos (nueces), con lamisma sensibilidad utilizada actualmente en la Unión Europea (UE).

OBJETIVOGENERALDELPROYECTO

El Programa permitirá identificar puntos críticos de contaminación en la línea deproducción, determinar tendencias en la proliferación de hongos tóxicosasociados y construir una base de datos de utilidad en la toma decisionesregulatorias.


1: Generar cultivos de hongos puros asociados a micotoxinas y caracterizarlosmorfológicamente (microscopía) y por su capacidad para producir toxinas. Secontribuirá con cepas para la Colección Chilena de Recursos GenéticosMicrobianos.

2: Desarrollar e implementar métodos analíticos HPLC/FL para identificar ycuantificar Aflatoxinas y Ocratoxina A en muestras de nueces (validación bajonormativas internacionales que permitan acreditación INN según NCh ISO17025/2005).

3: Desarrollar e implementar un Programa Integrado de Monitoreo y Análisis parala Calidad e Inocuidad Alimentaria (PRIMACIA) aplicado a nueces. Este estaráorientado al cumplimiento de normas del mercado internacional para laexportación de nueces enteras, sin cáscara, frescas y secas.

4: Transferir y difundir tecnología referida a identificación de hongos toxigénicos,análisis e identificación de micotoxinas y estructura del Programa de Sanidad deFrutos secos (desde el Laboratorio de Toxicología de la Universidad de Chile a lasEmpresas asociadas)

OBJETIVOS ESPECÍFICOS


Nº RE Resultado Esperado (RE)

Indicador de Resultados (IR)

Nombre del indicador Situación actual Meta del indicador(situación final)

Fecha alcance meta

1 Caracterización morfológica de hongos

Cultivo y aislaciónde cepas de hongos 0 Identificación de hongos

micotoxigénico 30-10-2016

2 Determinación toxicidad del hongo Capacidad de producción detoxinas

No existe información Presencia de toxina 30-03-2017

3 Método HPLC validado para la determinación de AFLAs y OTA

Curvas de Calibración y Análisis de Recuperabilidad

r = 0,99R = 94 %

Valores r= 0.89 - 0,99R = 90 y 110 % 30-10-2016

4Determinación de puntos de riesgo de contaminación en la línea de producción

Puntos de riegos de contaminación 0Presencia de

contaminación por muestra

30-10-2017

5

Desarrollo Programa Integrado de Monitoreo y Análisis para la Calidad e Inocuidad Alimentaria (PRIMACIA)

Manual del PRIMACIA 0 1 30-01-2018

6 Implementación de PRIMACIA Participación de empresas en el Programa 0 10 30-01-2018

7 Tecnología transferida Agricultores capacitados 0 Sobre 10 30-03-2017

8 Difusión

Publicación de artículos en revista agronómica de circulación nacio-nal. Publicación de Manual de PRIMACIA en nueces. Folletos de difusión

0

500 manuales de manejo integral + Un

manual en versión digital 1000 folletos de difusión

30-09-201730-01-2018

[

RESULTADOS ESPERADOS


ANÁLISIS DE HONGOS GENERADORES DE TOXINAS:Muestras de frutos de diferentes árboles y en distintas etapas de maduración (Centros deProducción asociados a ChileNut). Técnicas tradicionales de cultivo de hongos enmedios selectivos, aislamiento y subcultivo de colonias e identificación microscópica(Laboratorio de Fitopatología de la Facultad de Ciencias Agronómicas de la U. deChile). Identificación de cepas por técnicas de análisis molecular (PCR) en Chile oInglaterra (International Centre for Agricultural Bioscience-CABI). Cepa toxigénicasserán almacenadas en INIA Quilamapu (Chillán). En estas cepas se estudiarácondiciones de estimulación de producción de toxinas. Se correlacionará estasobservaciones con el contenido de toxinas en los frutos correspondientes.

METODOS


ANÁLISIS DE MICOTOXINAS

Cromatografía Líquida de Alto Rendimiento (HPLC). Técnica que permite medir unamplio de rango de analitos a partir de una misma muestra.

De acuerdo con la reglamentación internacional actual y las metodologías descritas enCompendium of Internacional Methods of Analysis-OIV, la determinación de Aflatoxinasen frutos secos y otros alimentos demanda el uso de columna de inmunoafinidadacoplada a HPLC/FL (FL= detector de fluorescencia). Esta técnica se empleará en elpresente proyecto.

VALIDACIÓN DE MÉTODO HPLC/FL: Se tomará como referencia la guía técnica“Aspectos generales sobre la validación de métodos” del Instituto de Salud Pública,AOAC y Normativas internacionales. Se confeccionará un protocolo de validación. Apartir de la linealidad, se determinará la sensibilidad, límites de detección ycuantificación, veracidad, precisión, selectividad e incertidumbre del método.(Laboratorio de Toxicología, Facultad de Medicina, Universidad de Chile)


VALIDACIÓN DEL MÉTODO A PARTIR DE SOLUCIONES ESTÁNDAR DEAFLAs/OTA

Curvas de calibración con soluciones de estándar de AFLAs/OTA

Límites de detección y cuantificación de soluciones estándar deAFLAs/OTA: Calculados a partir de la desviación estándar de los residualesdel calibrado (punto de menor concentración de la recta de calibración).

VALIDACIÓN DEL MÉTODO ANALÍTICO A PARTIR DE MATERIALFORTIFICADOSe realizaran tres curvas de calibración con material de referencia fortificado.

Recuperación: Parámetro calculado a partir del material fortificado. Se basaráen la concentración de las muestras medidas en duplicado y la concentraciónteórica del material fortificado.


METODOLOGÍA EN CAMPO: ELECCIÓN DE CENTROS DE PRODUCCIÓN

Considerando que las nueces se cosechan principalmente desde la IV a la VIII Región, bajodiversos microclimas, se elegirán 15 Centros de Producción de nueces de diferentes zonasy regiones del país. Los centros de producción elegidos serán identificados bajoconfidencialidad primariamente por nombres en clave y su georeferencia.


Segmentos PartesdelanuezCantidadde

análisisDescripción

ÁRBOL(150aprox)

Pelón 15(10%)De150árbolesmuestreados,aleatoriamentesetomarán15paraanalizarpelón(250gpelón/árbol)

Cáscara 15(10%)De150árbolesmuestreados,aleatoriamentesetomarán15paraanalizarcáscara250gcáscara/árbol.

Semilla 75(50%)De150árbolesmuestreadosenelcampodecultivo,setomarán75paraanalizarsemilla.

COSECHA

Semilla 4

Delossacoscosechados,setomarán4a6muestrasrepresentativasde2,5kgcadaunaaprox.paraanálisisdesemilla.

Cáscara 4Delossacoscosechados,setomarán4a6muestrasrepresentativasde2,5kgcadaunaaprox.paraanálisisdecáscaras.

ALMACÉNDELFUNDO

SemillayCáscara 8Delalmacén,setomarán4a6muestrasrecolectadasaleatoriamente.de2,5kgcadaunaaprox.Serealizaráanálisisdesemillasycáscaras.

MATERIAL DE ANALISIS


El Proyecto está orientado a generar conocimientos e innovacionescientíficas y tecnológicas que contribuyan a garantizar la calidad einocuidad de frutos secos (nueces) producidos en Chile.

Específicamente se espera desarrollar un Programa Integrado deMonitoreo y Análisis para la Calidad e Inocuidad Alimentaria(PRIMACIA) de la nuez.

Este constituiría la base de la alerta temprana in situ de focos tóxicosy contaminantes que, junto con asegurar la calidad e inocuidadalimentaria, respalde la gestión productiva de las empresasasociadas al rubro de las nueces

CONCLUSION PRELIMINAR

Micotoxinas: Diseño y Desarrollo de un Programa Integrado ... · PROYECTOS DE INNOVACION EN...

Documents

Transcript of Micotoxinas: Diseño y Desarrollo de un Programa Integrado ... · PROYECTOS DE INNOVACION EN...