09.10.2014

Monitoreo de Aire Consideraciones Generales

Enrique Alvarez| Mayo 2017

Agenda

2

Introdución y Regulaciones

Beneficios de las filtros de Membrana

1

3 Control de Calidad

4 (Aseptica) Transferencia de Matriales

¿Qué es el monitoreo del aire y para qué sirve?

Desde una perspectiva reguladora:

Un sistema para planificar, organizar e implementar todas las

actividades para lograr y mantener los niveles requeridos de

limpieza del aire y de la superficie en las áreas de fabricación

(Guía sobre la fabricación de productos farmacéuticos estériles por

procesamiento aséptico)

¿Qué es el monitoreo del aire y para qué sirve?

Muestreo de ambientes controlados (cuartos limpios A, BC, D y áreas

especificadas) para partículas no viables y viables en el aire

¿Qué es el monitoreo del aire y para qué sirve?

Permite:

Identificación de tendencias

Detección de posibles problemas

¿Qué es el monitoreo del aire y para qué sirve?

... Con la intención de:

"Fabricación de productos farmacéuticos asépticos en el nivel de

alta calidad"

(Guía sobre la fabricación de productos farmacéuticos estériles por

procesamiento aséptico)

Partículas en el aire viables : Microorganismos

Virus

0,1

µ

T4 Phage

MKS Virus

BacteriasEscherichia Coli

1µ

Levaduras Hongos

(Orientación sobre la fabricación de productos farmacéuticos estériles por procesamiento aséptico)

¿Por qué buscar microorganismos aéreos?

Representan un peligro directo para la salud

Son un peligro para la salud cuando están contenidos en un producto.

Perjudicial para la vida útil, la apariencia o el sabor del producto.

Causa de un falso positivo (por ejemplo, prueba de esterilidad).

Microbiología industrial

Alimentos y bebidas

:

• Seguridad alimentaria “agroindustria”• Monitoreo mediante puntos críticos de control • Relevancia detección de patógenos

indicadores de calidadcausantes de deterioro cuenta microbiana identificación de microorganismosmonitoreo ambiental

• Microorganismos importancia industrial “atributos”

Control Microbiológico Industrial

Objetivo

Cerciorar la seguridad alimentaria durante el proceso

Buenas prácticas de rutina preservan

calidad en produtcos

minimizan no conformidades

cumplimientos requisitos regulatorios

(http://www.openculture.com/2011/06/man_as_industrial_palace.html)

[Man as Industrial Palace]

Monitoreo de rutina:Caldo de soya trípticasa (TSB): 30 - 35 ° C (48 h) y 20-25 ° C (72 h)

Monitoreo periódico:Agar Sabouraud: 20 - 25 ° C durante 5 días

Por lo general, no es necesario un monitoreo anaeróbico, a menos que exista una justificación:

Ingredientes del productoContaminación relacionada con el medio ambiente o los seres humanos

Impacto de la calidad del aire en el producto final Dónde se realiza el monitoreo ambiental?

Fuentes de Contaminación

Las más importantes fuentes de contaminación en cualquier fabricación son:

GenteMaterias PrimasAgua

Aire El otro factor importante que siempre está presente!

Los seres humanos son la mayor fuente de

contaminación microbiana en las zonas de

procesamiento aséptico

(Guía sobre la fabricación de productos farmacéuticos

estériles por procesamiento aséptico)

Regulaciones sobre el Monitoreo de Aire

DIN EN ISO 14644

USP <1116> Evaluación microbiológica de habitaciones limpias y otros ambientes controlados

EU GMP Anexo 1 - Fabricación de Medicamentos Estériles

Guía de procesamiento aséptico de Japón y JP

Línea Directa de Procesamiento Aséptico de la FDA

Directrices / Recomendaciones sobre el monitoreo de aire

USP <1116> Evaluación Microbiologíca de cuartos limpios y otros controlesambientales.

EudraLex – La norma que rige los Productos medicos en la Unión Europea.

HHS – Medicamentos Estériles ProducidosPor procesamiento aséptico - cGMP

Directrices / Recomendaciones sobre el Monitoreo de aire

PIC / S: Inspección Farmacéutica Convención y Esquema de Cooperación de Inspección Farmacéutica - Recomendación de Procesos Asépticos.

Directrices / Recomendaciones sobre el Monitoreo de aire

Grado Examples of operations for terminally sterilised products

A Llenado de Productos, Cuando usualmente estan en riesgo

C Preparation of solutions, when unusually at risk. Filling of products

D Preparation of solutions and components for subsequent filling

Grado Examples of operations for aseptic preparations

A Aseptic preparation and filling

C Preparation of solutions to be filtered

D Handling of components after washing

EudraLex – The Rule Governing The Medicinal Products In The Europeaen Union

Directrices / Recomendaciones sobre el Monitoreo de aire

Maximum permitted number of particles per m3 equal to or greater than the tabulated size

At rest In operation

Grade 0.5 µm 5 µm 0.5 µm 5 µm

A (ISO 5) 3520 20 3520 20

B (ISO 7) 3520 29 352000 2900

C (ISO 8) 352000 2900 3520000 29000

D 3520000 29000 Not defined Not defined

EudraLex – The Rule Governing The Medicinal Products In The EuropeaenUnion

Clean room class (zone)

ISO- Standard 14644-1

U.S.Customary/ Clean room class according to

Active air sampling CFU per m3

Settle plates (90 mm) CFU/4h

EC/EU/PIC/WHO

Classification

U.S. Fed. Std. 209 E

EC

EU

USP

FDA

EU

A (LAF in work areas)

4.8 (≥ 5µm) 100 (M 3.5) < 1 < 1 < 3 < 1

1 < 1

B 5 (at rest) (0.5 and 5 µm)

100 (M 3.5) 5 10 < 3 10

7 5

C 7 (at rest) 8 (in op.)

10 000 (M 5.5) 100 100 < 20 100

10 50

D 8 (at rest) 100 000 (M 6.5) 500 200 < 100 200

100 100

Comparación de directrices

Con la publicación de ISO 14644-1, Fed-Std-209E se retira (finales de 2001)

Cambios anteriores del anexo I de la Directiva sobre BPF de la CE (Directiva GMP de 1992).

Versión revisada del anexo I de la Directiva sobre BPF de la UE (a partir de septiembre de 2003). La versión anterior de 2003 Se vuelve a revisar y está en funcionamiento para las partículas desde marzo de 2009 (taponamiento de excepción de los frascos liofilizados (1 de marzo, 2010) Valores para el muestreo de aire activo y pasivo. (Valores a alcanzar en funcionamiento).

Nueva Guía de la FDA: Orientación para la Industria, Productos Farmacéuticos Esteriles, Producido por Aseptic Processing- Curent Good Manufacturing Practice, septiembre de 2004

USP capítulo 1116

Regulations on Air Monitoring

"Un programa de control ambiental debe (.....) permitir acciones

correctivas significativas y efectivas.

Es responsabilidad del fabricante, desarrollar, iniciar, implementar y

documentar un programa de monitoreo ambiental microbiano.

(USP <1116>)

Caudal de aire constante

Volumen de muestra de 1m3 por lo menos

Volúmenes de muestra variables

Sin turbulencias | Sin riesgo de contaminación

Alta tasa de retención | Tasa de recuperación de microorganismos

Protección de microorganismos

Requrimientos sobre un Sistema de muestreo de aireActivo.

Métodos de recolección de microbios aerotransportados

Monitoreo pasivo del aire

Placas de colocación

Monitoreo Activo del Aire

Filtración (Filtro de Membrana de

Gelatina

Impactación

....more

Métodos para Recolectar Microorganismos Aerotransportados

Pasivo | Cualitativo Activo | Cuantitativo

• Sedimentación InstrucciónImpactación

- ¿De ranura a agar? - ¿Impactador de tamices? - Muestreador centrífugoMétodo del filtro de membrana

Métodos para la Recolección de Microorganismos Aerotransportados Monitoreo Pasivo: Método Cualitativo - Sedimentación

Passive | Qualitative

• Sedimentación • Settle platos:Placas de Petri estándar que contienen medios de cultivo apropiados

•

Las placas se pusieron abiertas y expuestas durante un tiempo dado y luego se incubaron

• Desventajas:Sólo el monitoreo de partículas biológicas viables que sedimentan fuera del aire

•

No detectarán partículas o gotas más pequeñas suspendidas en el aire

•

No se pueden tomar muestras de volúmenes específicos de aire. Los medios de agar en las placas pueden secarse

• Ventajas:Fácil de usar, no expansivo, no requiere equipo especial

•

Útil para el análisis cualitativo de microbios aerotransportadosLos datos producidos pueden dar una tendencia sobre la calidad del aire

Métodos para la Recolección de Microorganismos Aerotransportados Monitoreo Activo: Método Cuantitativo -ImpactoActive | Quantitative

• Impingement

Desventajas:• Hecho de vidrio -> indeseable en la

industria farmacéutica y sitios de producción de alimentos

• El impacto en los líquidos puede dañar algunas células microbianas, afectar la viabilidad

Ventajas:La muestra se puede analizar utilizando una variedad de métodos: técnicas moleculares como PCR -> resultados rápidos

• Utilizar un medio líquido para la recolección de partículas• El aire muestreado es aspirado dentro de un pequeño frasco que

contiene el medio de recogidaCualquier partıculas suspendidas fueron impactadas en el lıquido de recogida

Methods for Collecting Airborne MicroorganismsActive monitoring: Quantitative Method – Impaction 1/3

Active | Quantitative

• Impaction- Slit-to-Agar- Sieve Impactor- Centrifugal Sampler

• use solid or adhesive medium (Agar) for particle collection• functionality: the air is drawn into a sampling head by a pump and

accelerated...a.) through a perforated plate (sieve sampler)b.) through a narrow slit (slit sampler)

-> this produces laminar air flow onto the collection surface (Agar)

Métodos para la Recolección de Microorganismos Aerotransportados Monitoreo Activo: Método Cuantitativo - Impacto 2/3

Activo | Cuantitativo• Impactación

- De ranura a agar • Impactador de tamices• Muestreador centrífugo

Ventajas:Se pueden utilizar beneficios en términos de comodidad y placas de contacto previamente irradiadas, irradiadas con gamma y placas petriestándar de proveedores especializados

Minimizar el riesgo de contaminación y variaciónPuede manejar caudales más altos y volúmenes mayores -> necesarios para monitorear la calidad del aire en salas limpias (el número de microbios es muy bajo)

Métodos para la Recolección de Microorganismos Aerotransportados Monitoreo Activo: Método Cuantitativo - Impacto 3/3

Active | Quantitative• Impactación

- De ranura a agar - Impactador de tamices- Muestreador centrífugo

Desventajas:Los medios pueden secarse y deteriorarseLas células microbianas también pueden ser dañadas por el estrés mecánico durante el proceso de muestreo y la viabilidad suelta

Impact MethodThe Principle acc. to Andersen

Agar media

Perforated plate (sieve)

Air Stream

Microorganisms

Trapped Microorganisms

Non trapped Microorganism

Métodos para la Recolección de Microorganismos Aerotransportados Monitoreo Activo: Método Cuantitativo - Método de Filtración de MembranaActive | Quantitative

• Membrane Filtration Method

Los microbios se conservan en la superficie de un filtro de membrana

Agenda

1 Introduction & Regulations

Benefits of Membrane Filters2

3 Quality Control

4 (Aseptic) Transfer of Materials

Filtros de Membrana de Gelatina / Desechables

- Water soluble

Tamaño de Poro

(nominal) 3µm

Tasa de retención (máx.)

99,9995% para esporas de Bacillussubtilis niger (a 0,25 m / s)

99,94% para los fagos T3 coli? (Al 80% de humedad relativa)

Condiciones de Uso

Max. 30ºC. Max. 85% Humedad Relativa

Procesamiento de la membrana

Método Directo

El filtro puede colocarse directamente sobre un medio de cultivo después del muestreo.

Método IndirectoMuestreo para evaluaciones especiales:Cuando los inhibidores del crecimiento necesitan ser eliminadosCuando se esperan muy altos recuentos de colonias

Page 4

Gelatine Membrane Filter (GMF)

Petras (1966) y Rotter y Koller

(1973) describieron

originalmente la aplicación de

filtros de gelatina para la

recogida de bacterias en el

aire.

USP <1116> on MD8 and Gelatin Filter

Para las zonas de grado A, el monitoreo de partículas debe realizarse durante toda la duración del proceso crítico, incluyendo el montaje del equipo(Directrices UE Anexo 1 Fabricación de medicamentos estériles)

¿Es (básicamente) posible hacer con el monitoreo de aire viable?

Monitoreo continuo de aire

microbiológico para líneas de

llenado aséptico

...(con

Filtro de Membrana de Gelatina

GMF)

Próximamente:

Filtros de gelatina libres de ADN bacteriano y de hongos disponibles como muestras, para:

Analíticos (PCR)

Tiempo corto de muestreo; 1 qm de aire se puede

muestrear en 8 minutos

Muestreo isocinético en áreas de flujo laminar (sin

generación de turbulencia)

El flujo de aire puede calibrarse con la unidad de

calibración

Ajuste automático del flujo de aire

Salida de aire saliente

Detección de microbios en el aire con MD8 airscan& Gelatine Membrane Filter

Placas de medios de cultivo BACTair ™ para Impaction

Individualmente embalado,

Placas de medios de cultivo irradiadas con gamma

No hay necesidad de limpieza,Cabeza de muestreo completamente desechable

Airsampler portable con batería

4 h de tiempo total de muestreo

Ajuste automático del flujo de aire

Se puede operar con

Placas de medios de cultivo BACTair ™ (Impaction)

Filtro de Membrana de Gelatina (Filtración)

Detección de microbios en el aire con AirPort MD8

Adecuado para uso enSalas de clase A / B limpias (líneas de llenado), máquinas BFS y aisladores

La bomba se puede colocar fuera del área de trabajo crítica.

Detección de microbios en el aire con MD8 airscan& Gelatine Membrane Filter

Qualification documents (IQ/OQ) and Service available

Extend Instrument Service

EXPAND® Training courses

Service for MD8 airscan and AirPort MD8

Instalación en Isolators

Gamma irradiated Filters

Gas tight packaging

Un solo paquete y tres paquetes de filtros disponibles para su introducción en salas blancas

Filling Line

Cabeza de muestreo (S) para la fijación del

filtro de membrana de gelatina (GMF) situado

en la clase A

MD8 airscan (A),

interfaces de control remoto (B)

Y válvulas (C) para multisampling

A

B

C

S

Protafolio de Productos

Sampler MD8 Airscan

Membrane Filtration

Sampler MD8 AirPort

Membrane Filtration& Impaction

Gelatine Filters

Membrane Filtration

BACTair TM Agar plates

Impaction

Gelatine Filters

Membrane Filtration

Agenda

1 Introduction & Regulations

Benefits of Membrane Filters

3

2

Quality Control

4 (Aseptic) Transfer of Materials

49

Sartorius contributes to health

Quality Control

Control de Calidad del Filtro de Membrana de Gelatina (GMF)

Prueba de crecimiento con Escherichia coli o Staphylococcusaureus en comparación con placas de agar inoculadas

Comprobación de la morfología y número de colonias

Prueba de inhibición

Solubilidad en Agar

Control de Calidad del Filtro de Membrana de Gelatina

Flujo de aire

Pesaje del círculo de filtro

Solubilidad en solución salina fisiológica

Inspección visual

Esterilidad

Agenda

1 Introduction & Regulations

Benefits of Membrane Filters

4

2

Quality Control3

(Aseptic) Transfer of Materials

Transferencia de materiales en aisladores y entornos críticos

„La transferencia de materiales dentro y fuera de la unidad (aislador) es una de las mayores fuentes potenciales de contaminación.

En general, el área dentro del aislador es la zona local para manipulaciones de alto riesgo “

(Directrices de la UE sobre las BPF - Anexo 1 Fabricación de medicamentos estériles)

ransferencia de materiales en aisladores y salas limpias

A B C

Cámara de transferencia de aisladores (A)Puerta delantera de aisladores (B)Sistemas de transferencia aséptica Biosafe®Ports y bolsas (C)

Transferencia aséptica de materiales en aisladores y salas limpias con Biosafe®Ports y bolsas

Transferencia aséptica de materiales en aisladores y salas limpias con Biosafe®Ports y bolsas

Se puede aplicar a:

Medios nutritivos (líquidos y placas de agar)

Consumibles Sterisart®NF para pruebas de esterilidad de productos farmacéuticos

Gelaine Membrane Filter (GMF)

Introducción de tapones y materiales

Exportación de materiales de desecho

p.ej.

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