PARTE V Métodos de propagación y conservación de germoplasma
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Métodos de Conservación de Fitopatógenos Dra. Ing. Agr. Sandra Alaniz Mayo de 2012 Importancia de conservar los Fitopatógenos ¿Para qué hay que conservar las cepas de los patógenos? - intercambio de cepas - nuevas investigaciones - docencia Métodos de Conservación 1) Repique continuo en medio de cultivo INCONVENIENTES: - contaminaciones - degeneración de cepas - perdida de virulencia - disminución de capacidad de esporulación - alto costo Métodos de Conservación Objetivos: - no afecten sus características (expresión fenotípica, virulencia, esporulación) - bajo riesgo de contaminación - bajo costo - no ocupen mucho espacio Se basan en: disminuir al mínimo la actividad del patógeno mediante - bajada de temperatura - deshidratación Métodos de Conservación A) CORTO PLAZO (< 2 años) - medio de cultivos a baja temperatura Ventajas: bajo costo Desventajas: baja duración B) MEDIANO PLAZO (2 a 8 años) - desecación (sílica gel, perlas de vidrio, otros) - en suelo - en tejido vegetal deshidratado - suspensión en agua estéril Métodos de Conservación C) LARGO PLAZO (> 8 años) - criopreservación (almacenar a < 20 ºC) - liofilización Ventajas: larga conservación Desventajas: alto costo de los aparatos y materiales
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Métodos de Conservación de Fitopatógenos
Dra. Ing. Agr. Sandra AlanizMayo de 2012
Importancia de conservar los Fitopatógenos
¿Para qué hay que conservar las cepas de los patógenos?
- intercambio de cepas- nuevas investigaciones- docencia
Métodos de Conservación
1) Repique continuo en medio de cultivo
INCONVENIENTES:
- contaminaciones- degeneración de cepas- perdida de virulencia- disminución de capacidad de esporulación- alto costo
Métodos de Conservación
Objetivos:- no afecten sus características (expresión fenotípica, virulencia, esporulación)- bajo riesgo de contaminación- bajo costo- no ocupen mucho espacio
Se basan en: disminuir al mínimo la actividad del patógeno mediante
- bajada de temperatura- deshidratación
Métodos de Conservación
A) CORTO PLAZO (< 2 años)- medio de cultivos a baja temperatura
Ventajas: bajo costoDesventajas: baja duración
B) MEDIANO PLAZO (2 a 8 años)- desecación (sílica gel, perlas de vidrio, otros)- en suelo- en tejido vegetal deshidratado- suspensión en agua estéril
Métodos de Conservación
C) LARGO PLAZO (> 8 años)- criopreservación (almacenar a < 20 ºC)- liofilización
Ventajas: larga conservaciónDesventajas: alto costo de los aparatos y
materiales
Métodos de Conservación- Corto plazo
1)Tubos con medio de cultivo a 5ºC- en general medio de cultivo pobre (AA,
otros)- se puede cubrir superficie con aceite- hongos, bacterias
Métodos de Conservación- Corto plazo
2) En planta viva- virus- se mantienen en invernáculo
Métodos de conservación – Mediano plazo
1) Papel de filtro colonizado deshidratado y almacenado a -20ºC
- papel se deseca con sílica gel (hidróxido de sílice)
- hongos (productores de esporas) y bacterias
Métodos de Conservación – Mediano plazo
2) Material vegetal deshidratado
- se deseca el vegetal y almacena con sílica gel- en general se almacena a temperatura
ambiente- hongos, bacterias y virus
Métodos de Conservación – Mediano plazo
3) Embebidos en agua- temperatura almacenamiento depende del
patógeno- problemas de contaminación- hongos
Métodos de Conservación – Mediano plazo
4) En suelo- se puede o no almacenar en frío - para hongos de suelo ( ej: Monosporascus
cannonballus)
Métodos de Conservación- Largo Plazo
1)Solución con glicerol a - 70ºC- solución de glicerol (alcohol):10-15 %- clave: congelamiento y descongelamiento
rápido- hongos y bacterias
Métodos de Conservación- Largo Plazo
2) Nitrógeno líquido a -196ºC- hongos, bacterias y virus
Métodos de Conservación- Largo plazo
3) Liofilizados- se mantienen entre 0 y 5ºC- hongos, bacterias, virus
Muchas gracias!!!
Dra. Ing. Agr. Sandra AlanizMayo de 2012
