Pneumovirus_aviar_(Esp)
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EL DESAFÍO DEL PNEUMOVIRUS AVIAR
Ing. Miguel ChaleAvda. La Selva 135
Girona – Españ[email protected]
Temario
1. Pneumovirus aviar: La enfermedad
Características, Subtipos, Transmisión,
Patogénesis, Agentes secundarios
2. APV en ponedoras
3. APV en reproductoras
4. APV en broilers
5. Diagnóstico
6. Vacunación
Pneumovirus Aviar (APV)
SHS – Síndrome de cabeza hinchada
TRT – Rinotraqueítis del pavo
ART – Rinotraqueítis aviar
MPV – Metapneumovirus aviar
Síndromes y sinónimos
Clasificación de APV
FAMILIA:PARAMYXOVIRIDAE
SUBFAMILIA:PNEUMOVIRNAE
GENERO: PNEUMOVIRUS
VRS VirusesMouse pneumovirus
GENERO:METAPNEUMOVIRUS
Pneumovirus aviar (APV)Metapneumovirushumano (hMPV)
Fusión & Penetración (F) Membrana Lipídica
Adhesión (G)
Matriz
Complejo RNP
Características del Pneumovirus
Subtipos
• 1 Serotipo
• Cuatro subtipos descritos: (Moabs – Seq proteína G )
- A
- B
- C: USA (pavos) y Francia (patos)
- D: Francia (patos)
• Cepas de origen pavo son, menos patogénicas para
pollos y gallinas, pero cepas de gallinas y pollos son,
usualmente, también patogénicos para pavos
Europa, Asia, África, América (exc. EEUU), Medio Oriente
Se puede confundir con otras enfermedades:
• Escherichia coli• Ornithobacterium rhinotracheale (ORT)• Mycoplasmosis (MG/MS)• Pasteurella multocida
• Bronquitis infecciosa (BI)• Enfermedad de Newcastle (ND)• Influenza aviar (IA)
Pneumovirus Aviar (APV)
Transmisión
1) Horizontal • Contacto directo e indirecto• Rápidamente dentro de la manada• El virus es eliminado por cornetes nasales y tráquea• Transmisión aérea es altamente efectiva• Una valla puede retrasar la difusión del virus (ave a
ave)• Persistencia corta: 5-8 días
2) Vertical?• Virus encontrado en tracto reproductivo (epitelio
oviducto)• Se encontraron pavos de 3 días positivos por PCR
(Subtipo C)• No hay reportes de transmisión al huevo
Patogénesis
Replicación en el tracto respiratorio alto
APV A o B: Entrada (Oculo-nasal)
Lesiones en epitelio (Pérdida de cilios)
Consecuencia: Signos clínicos
Infección de macrófagos/viremia
Desarrollo de respuesta inmune
Inmunidad celular(Persistencia corta)
Inmunidad humoral(Persistencia larga)
Distribución por diferentes órganos
Limpieza del virus y recuperación
Ag. Secundarios (E. Coli, etc)
Patogénesis
Tiempos
24 horas PI en cornetes nasales y tráquea
96 horas: completa deciliación de tráquea
Signos clínicos se presentan luego de que el virus ya
no se encuentra en ave
Aislamiento sólo hasta aprox. 10 días PI
Daño de mucosa en cornetes nasales
Patogénesis
Agentes secundarios
• E. Coli O2, O8, O78
• APV + E. Coli Lesiones
• Pasteurella multocida
• Mycoplasma gallisepticum
• ORT
• APV + ORT Lesiones
Alta interacción con agentes secundarios
250 muestras positivas a APV
Factores que exacerban
APV
Higiene
Ventilación
Multiedad
Bioseguridad
Densidad
Cama
Estacionalidad de APV
Granjas con APV entre los años 1998-2000 en EEUU (Nezworski, 2002)
Primavera Verano Otoño InviernoInvierno
0
5
10
15
20
25
Jan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep Oct Nov Dec
Núm
ero
de g
ranj
as
1998
1999
2000
media
APV en ponedoras
Signos clínicos en ponedoras comerciales
Afinidad por tracto respiratorio y
reproductivo
Caída de producción 5-40%
Problemas de calidad de huevo
Edema facial
Descarga nasal
Virus se difunde por jaulas
Ponedoras: Cae producción
Resumen de lotes afectados por APV
0102030405060708090
100
1 4 7 10 13 16 19 22 25 28 31 34 37 40 43 46 49 52 55 58 61
7 lotes de ponedoras
685 muestras de sueros de 54 lotes
Edad de seroconversión
EDAD (Semanas)
Núm
ero
de lo
tes
Peritonitis
Calidad de huevo
Color de cáscara
Fragilidad de cáscara
Huevos sin cáscara
Porcentaje variable
APV en reproductoras
Signos clínicos en reproductoras
Se produce entre las 24-52 semanas
Caída de postura e incubabilidad
Signos clínicos: Opistótonos/torticolis
Postración y somnolencia
Edema facial
Oídos con exudado amarillento
Opistótonos
APV en broilers
Signos clínicos en broilers
Se produce sobre 4-6 semanas
Edema facial uni o bilateral (1-2% total)
Ronquera
Estornudos
Ojo acuoso
Descarga nasal
Postración
Los más afectados son los mejores machos de la
manada
APV en pavos
Signos clínicos en Pavos
• Especie más sensible
• Ojo acuoso
• Conjuntivitis
• Edema facial uni o bilateral
• Signos respiratorios: Exudados nasales serosos
• Morbilidad es alta (100%)
• Mortalidad es variable (10-15%)
Diagnóstico de APV
Diagnóstico
Clínico
Inmunoquímico
Aislamiento vírico
Molecular
Serología
Diagnóstico clínico
Signos clínicos similares con otras enfermedades de
tipo respiratorio (coriza, CRD, Pasteurella, ORT)
Correcto diagnóstico diferencial es un deber: Coriza
infeccioso
Diferentes circunstancias clínicas:
Signos clínicos > APV
APV > Signos clínicos
Inmunofluorescenciadirecta
(IF)
Streptavidin biotinInmunoperoxidasa
(IP)
Métodos inmunoquímicas
Aislamiento viral
Difícil de material de campo.
El virus se elimina rápidamente.
Recogida de muestras antes de que
aparezcan los signos clínicos.
Recogida de muestras del tracto respiratorio
superior (cornetes y tráquea)
Cook and Cavanagh, AP, 2002, pp 117-132
Aislamiento viral
0
1
2
3
4
5
6
7
1 2 3 4 5
Días postinfección
1 3 5 7 10
Signos clínicos
Cornetes
Tráquea
Pulmones
RiñonesViru
s/gr
de
tejid
o
Aislamiento viral
Recolección de muestras
4. Dejar secar la tarjeta 40 minutos
1. Realizar el corte sagital 2. Exponer la parte interna del cornete
3. Estampar el cornete nasal
RT-PCR
Primers específicos A & B
Técnicas moleculares
Subtipo BMuestra de campo
Subtipo AControl positivo
Subtipo BControl positivo
Persistencia de Subtipos A y B en tejidos
Estudio propio
Aung, 2006
1 3 6 8 10 14 17 21Escobillon + + + + + - - -Cornetes + + + + - + - -Escobillon + + + + + + + -Cornetes + + - + + - + +
Días post-infecciónTejido
Subtipo A
Subtipo B
APV
APV-A APV-B APV-A APV-B APV-A APV-BCornete nasal + + + + - -Glándula de harder + + + + - -Tráquea - + + + - +Pulmon - - - + - -Bazo - - - + - -Bolsa de Fabricio - - - + - -
Tejido3 días PI 6 días PI 11 días PI
Serología
Seroneutralización (SN)
Inmunofluorescencia indirecta (IIF)
Elisa: Mayoría de los Kits ELISA dan positivo después de 10
días post-infección.
Lotes vacunados con vacuna viva proveen bajos títulos
ELISA, debido a que la inmunidad celular juega un rol
importante en la protección (Cook, 1989; Williams,
1991; Jones, 1996)
Pneumovirus en reproductoras 28 semanasPlan vacunal utilizado: 1 vacuna viva -12 semanas / 1 inactivada -18 semanas
Pneumovirus en reproductoras 38 semanasPlan vacunal utilizado: 1 vacuna viva -12 semanas / 1 inactivada -18 semanas
Pneumovirus en reproductoras 48 semanasPlan vacunal utilizado: 1 vacuna viva -12 semanas / 1 inactivada -18 semanas
Pneumovirus en reproductoras 63 semanasPlan vacunal utilizado: 1 vacuna viva -12 semanas / 1 inactivada -18 semanas
Cinética del pneumovirus en reproductoras
1 vacuna viva (12 semanas) 1 inactivada (18 semanas)
0
2000
4000
6000
8000
10000
12000
14000
16000
18000
28 38 48 63
Pneumovirus en broilers
Broilers vacunados 1 día de edad
Pneumovirus en broilers
Broilers infección de campo
Pneumovirus en ponedoras
Títulos vacunales obtenidos en gallinas ponedoras SPF
0
5.000
10.000
15.000
20.000
25.000
30.000
Inactivada Subtipo A (33 dpv) Inactivada Subtipo B (51 dpv) Viva subtipo A (21 dpv) Viva subtipo B (21 dpv)
Biochek Civtest-Hipra Idexx
Vacuna dpv Biochek Civtest-Hipra IdexxInactivada Subtipo A (33 dpv) 33 15.923 5.693 10.134Inactivada Subtipo B (51 dpv) 51 18.764 16.434 26.026Viva subtipo A (21 dpv) 21 1.540 635 2.906Viva subtipo B (21 dpv) 21 8.805 8.194 12.016
Incidencia de APV
Estudio basado en muestras recibidas en el serviciodiagnóstico de HIPRA (DIAGNOS)
POSITIVAS 54%
NEGATIVAS 46%
600 muestras
Control de APV
Claves de manejo
Calidad de aire
Correcta ventilación
Temperatura
Vacunación temprana
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
2000
2200
2400
2600
2800
3000
3200
3400
3600
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52 54 560
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
110
120
130
140
150
160
170
180
Gramos de alimento/ave/día
Peso corporal(Gramos)
Mortalidad acumulada(%)
Mantener observadas:
• Arranque
• Manejo de camas
• APV Vacunación
APV - Vacunación
Vacunas: Hechos
Anticuerpos maternales no protegen contra
infecciones de campo
Muestra baja respuesta serológica, pero una buena
eficacia
Inmunidad es principalmente celular, aunque también
tiene inmunidad humoral
Importancia de vacunas homólogas origen pollo para
pollos y gallinas
Vacunas: Hechos
Vacunas con cepas Subtipo B y Subtipo A dan
protección cruzada entre ellas.
Vacunas subtipo C no protegen contra subtipos B o A
Vacunas vivas protegen signos clínicos
Vacunas inactivadas protegen caídas de postura
Vivas + inactivadas: previenen signos clínicos y caída
de postura.
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
3,5
4
3 4 5 6 7 8 9 10
MDA -MDA +
Punt
uaci
ón d
e si
gnos
clín
icos
Días postinfección
Anticuerpos maternales no protegen
Vacunas: Hechos
Puntuación de signos clínicos: 3 semanas PI
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
1 2 3 4 5 6
Días postinfección
Vacunas: Hechos
Vacunadas
Control
Punt
uaci
ón d
e si
gnos
clín
icos
0102030405060708090
100
25 26 27 28 29 30 31 32
VivaViva+InctInactivadaControl
Edad (semanas)
Producción de huevos - IV inoculación de gallinas
Vacunas: Hechos
infección
0102030405060708090
100
25 26 27 28 29 30 31 32
Control
Viva
Viva+Inct
Inactivada
% huevos sin cáscara
Edad (semanas)
Infección
Vacunas: Hechos
Calidad de cáscara antes y después de desafío con APV
Administrado vía spray para protección inmunidad
local
Separada de otras vacunas respiratorias para
evitar la interferencia como es el caso de vacunas
de ND (Ganapathy, 2005) y BI (Jones, 1998;
Cook, 2001)
Protección cruzada entre Subtipos B y Subtipo A
Vacuna viva
Administración – Intramuscular
Protección contra caída de producción, calidad
del huevo e incubabilidad
Protección cruzada entre Subtipos B y Subtipo A
Vacuna inactivada
Programa vacunal
Primovacunación Viva
RevacunaciónViva
Baja incidencia 7 días ---
Alta incidencia 7-10 días 18-22 días
Broilers
Resultados de campo en broilers
Zona alto desafío
38-39 DMES Llegada Salida Mort % Peso IC EF Llegada Salida Mort % Peso IC EF
may-09 595.100 552.840 7,10 2,08 1,9 267,8 897.250 852.126 5,03 2,16 1,8 292,2jun-09 460.600 421.724 10,39 1,92 2,0 226,2 161.050 151.250 6,09 2,27 1,8 302,0jul-09 392.200 370.576 5,51 2,11 1,8 284,0 1.054.373 997.571 5,39 2,18 1,7 307,5ago-09 664.200 591.940 10,88 2,01 2,0 229,7 903.370 855.898 5,25 2,35 1,8 315,4sep-09 594.600 556.810 6,36 2,13 1,9 270,6 605.850 565.166 6,72 2,32 1,9 295,2Media 2.706.700 2.493.890 8,0 2,1 1,9 255,7 3.621.893 3.422.011 5,7 2,3 1,8 302,5
No vacunados Vacunados vacuna viva
Programa vacunal sugerido
Reproductoras pesadas y ponedoras comerciales
PrimovacunaciónViva
RevacunaciónInactivada
10 – 12 semanas 18 – 20 semanas
Reproductoras: eficacia de diferentes programas
0,0
10,0
20,0
30,0
40,0
50,0
60,0
70,0
80,0
90,0
100,0
23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62
Weeks of age
SHS-SHS % Laying
SHS-TRT % Laying
SHS-SHS % Fertility
SHS-TRT % Fertility
SHS-SHS % Hatchability
SHS-TRT % Hatchability
Reproductoras: Prueba de campo en área endémica
Número de manadas
(Media 10.000)
Prog. De Vacunación Sin TRT Con TRT
105Inactivada 18 sem.
82.8 % 17.2 %
20 Viva 12 sem. e Inac. 18 sem. 95 % 5 %
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52 54 56 58 60 62 64 66 68 70 72
% se
man
al d
e pu
esta
Semanas de edad
% de puesta
SHS TRT
SHS SHS
Ponedoras: eficacia de diferentes programas
0
50
100
150
200
250
300
350
20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52 54 56 58 60 62 64 66 68 70 72
Núm
ero
de H
uevo
s/A
ve
Semanas de edad
Producción Acumulada
SHS TRT
SHS SHS
Ponedoras: eficacia de diferentes programas
0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
500
20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52 54 56 58 60 62 64 66 68 70 72
Núm
ero
de A
ves
Semanas de edad
Mortalidad Acumulada
SHS TRT
SHS SHS
Ponedoras: eficacia de diferentes programas
Resumen de factores importantes
Diagnóstico adecuado es un deber
Estudio de interacción con otros patógenos
respiratorios
Bioseguridad y buenas prácticas de manejo
(ventilación)
Evaluación de costo/beneficio de vacunación
Selección de vacuna y programa de vacunación
Administración adecuada de vacuna es crítica
EL DESAFÍO DEL PNEUMOVIRUS AVIAR
Ing. Miguel ChaleAvda. La Selva 135
Girona – Españ[email protected]