PRCTICA N10 PRUEBA DE EMBARAZO SUB UNIDAD BETA (HCG)

1.- INTRODUCCIONLagonadotropina corinica humana(hCG) es una hormonaglicoprotena producida en el embarazo, fabricada por el embrin en desarrollo poco despus de la concepcin y ms tarde por el sinciciotrofoblasto (parte de la placenta). Su funcin es evitar la desintegracin del cuerpo lteo del ovario y, por ende, mantener la produccin de progesterona que es fundamental para el embarazo en los seres humanos. La hCG puede tener funciones adicionales; por ejemplo, se cree que afecta a la tolerancia inmunolgica del embarazo. Las primeras pruebas de embarazo, en general, se basan en la deteccin o medicin de hCG. Debido a que la hCG es producida tambin por algunos tipos de tumores, es un importante marcador tumoral, pero no se sabe si esta produccin es una causa o un efecto de la tumorignesis.La gonadotropina corinica humana es una hormona que es excretada en el suero y orina durante el embarazo y puede detectarse en la prueba de la sub unidad beta generalmente a los 7 das del desarrollo de la concepcin. En la primer retraso del periodo menstrual la concentracin de la hormona va aumentando desde 100mIU/ml hasta el trmino del primer trimestre. La beta acu color es mtodo de sndwich que utiliza la enzima conjugada y sustrato Ay B que con los anticuerpos presentes en la sangre se formara una coloracin azul que indica presencia de la hormona gonadotropina corinica. Niveles altos de Hcg estn asociados a mola hidatiforme, carcinomas, trofoblastocis y neoplasia.

2.- OBJETIVOS Determinar la presencia de la hormona gonadotropina corinica humana para el diagnstico de embarazo

Determinacin de la Hormona Gonadotropina Corinica Humana (HCG) en orina por medio de una reaccin inmunolgica.

Demostrar la concordancia entre las pruebas para diagnstico precoz de embarazo en muestras simultneas de sangre y orina a niveles iguales o superiores a 25 mUI/ml.

3.- MATERIALES Y EQUIPOS:

TUBOS DE ENSAYO SIN ANTICOAGULANTES

DEFINICIONUSO

Son tubos de polipropileno utilizados para extraer, transportar y procesar muestras de sangre equivalente al tubo de vidrio convencional.

Determinacin qumica y serolgica en suero.

CENTRIFUGA

DEFINICIONUSO

Son equipos mdicos utilizados en los laboratorios, clnicas y otros, para la separacin de solutos de sus solventes.

Utilizar la fuerza centrfuga para separar slidos suspendidos en un medio lquido por sedimentacin o para separar lquidos de diversa densidad.

AGUA DESTILADA

DEFINICION

Es aquella sustancia cuya composicin se basa en la unidad demolculasde H2O. Es aquella a la que se le han eliminado las impurezas e iones mediantedestilacin. La destilacin es un mtodo en desuso para la produccin de agua pura a nivel industrial. Esta consiste en separar los componentes lquidos de unamezcla.

RELOJ

DEFINICION

Se llama al instrumento capaz de medir el tiempo natural (das, aos, fases lunares, etc.) en unidades convencionales (horas, minutos o segundos).

pipeta

DEFINICIONUSO

Se emplean puntas desechables, de plstico, que habitualmente son estriles.

Empleado para succionar y trasferir pequeos volmenes de lquidos sin tener que lavar el aparato

PUNTAS DESECHABLES

DEFINICIONUSO

Son de plstico, estriles y lo cual son de un solo uso. Existen varios tipos de puntas: las amarillas (son para volmenes pequeos por ejemplo 10 ul) y las azules(para volmenes grandes por ejemplo 800 ul).Son utilizadas como complemento de los micros pipetas para suministrar cantidades muy exactas de fluidos.

MICROSCOPI0 CON OBJETIVO DE 100X

DEFINICIONUSO

Es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeos para ser vistos a simple vista.

-Se usa para ver pequeos objetos en el porta objeto como clulas bacterias paracitos.

TUBO DE ENSAYO

DEFINICIONUSO

Es un pequeo tubo cilndrico de vidrio con una punta abierta (que puede poseer una tapa) y la otra cerrada y redondeada.Se utiliza para contener pequeas muestras lquidas o slidas, aunque pueden tener otras fases, como realizar reacciones qumicas en pequea escala. Entre ellos est el exponer a temperatura el mismo contenedor.

Pipetas pasteur de plstico

DEFINICIONUSO

Fabricadas en polietileno, hay de varios modelos segn capacidad (1.5 ml, 3 ml) y son estriles y no estriles.Sirve para medir la cantidad de aceite o de cualquier otro lquido.

PLACA PARA PRUEBA DE EMBARAZO

DEFINICION

Es aquella que es utilizada para realizar la prueba de diagnstico de embarazo en orina

MICROPLACA

DEFINICIONUSO

Es una placa con mltiples pocillos que se utilizan como pequeostubos de ensayo. Cada pocillo de una micro placa puede contener normalmente entre unas decenas denano litrosy variosmililitrosde lquido.La micro placa se ha convertido en un utensilio estndar en la investigacin analtica y clnica enmicrobiologa, y en laboratorios de diagnstico. Se usa muy frecuentemente en elensayo de inmunoabsorcin ligado a enzimas (ELISA) y pruebas de embarazo.

HCG ENZIMA CONJUGADA

DEFINICIONUSO

1 frasco con 2,5 ml de solucin de anti Beta HCG Monoclonal conjugado con Peroxidasa.Sirve para la determinacin de HCG en sangre u orina.Mtodo Elisa visual Directo.

HCG ENZIMA CONJUGADA

DEFINICIONUSO

Solucin con H2O2 y tetrametilbencidina (TMB), envasada en un frasco mbar.La globulina anti-humana reacciona con el complejo antgeno-anticuerpo, y la que no se une es eliminada por los lavados; la unida reacciona con el sustrato (TMB), para dar una reaccin coloreada azul, dando positivo el diagnostico de embarazo.

REACTIVO LATEX

DEFINICIONUSO

Reactivo para la determinacin de HCG en muestras biolgicas. Mtodo directo por aglutinacin de ltex.La gonadotrofina corinica humana (hCG) eventualmente presente en la muestra, reacciona con los anticuerpos monoclonales unidos a partculas de ltex produciendo una aglutinacin de las mismas visible rnacroscpicamente.

REACTIVO ANTICUERPO

DEFINICION

Prueba rpida por aglutinacin no diluida para la deteccin cualitativa y semicuantitativa de diagnostico de embarazo.

4. PROCEDIMIENTO:a) PRUEBA VISUAL RAPIDA PARA HCG:

Puede salir positivo por: Embarazo Neoplasia Mola

Primero obtenemos una muestra de sangre venosa en el tubo de tapa roja.

Llevamos a centrifugar a 3 500 rpm en un tiempo de 5 minutos. Para obtener el suero.

Luego de obtener el suero, con la micro pipeta extraemos 1 gota = 50ul de suero.

Colocamos la gota en la microplaca o pocillo y adicionamos una gota de enzima conjugada. Y lo dejamos incubar a temperatura ambiente por 5 minutos.

Luego de incubar por 5 minutos lo echamos al lavadero y lavamos 5 veces con agua destilada. Para finalmente pasarlo a secar con papel higinico

Luego adicionamos 1 gota del segundo reactivo llamado TMB y volvemos a incubar por 5 minutos a temperatura ambiente.Finalizamos con los resultados de la prueba y vemos que no se puso color azul; por lo tanto es NEGATIVO.

b) TEST DE EMBARAZO EN ORINA (PREGNOSTICON):

Llevamos a centrifugas por 5 minutos a 3 500 rpmLa muestra para esta segunda parte del laboratorio fue de orina, colocamos 10ml en un tubo de ensayo.

Colocamos 1gota = 50 ul de orina en la placa para realizar la prueba.

Echamos encima de la muestra 1gota del primer reactivo anticuerpo y lo mezclamos por 30 seg.

Luego echamos el segundo reactivo Latex.

Luego mezclamos los dos reactivos y hacemos movimientos rotatorios por 2 minutos.

Finalmente observamos los resultados y vemos que SI AGLUTINO quiere decir que es NEGATIVO.

6.-CUESTIONARIOA) EN QUE OTROS CASOS LOS NIVELES ELEVADOS DE LA HCG ESTN ASOCIADOS A ENFERMEDADESAlgunos tumores producen gonadotropina corinica humana como en la enfermedad trofoblstica gestacional que abarca las siguientes patologas: Mola hidatiforme (parcial o completa). Mola invasiva Coriocarcinoma. Tumor trofoblstico del lecho placentario. Sndrome de Down Cncer ovricoEl coriocarcinoma o cncer del tero, puede producir el producto qumico, como el cncer en los testculos de un hombre. Otros tipos de cncer que pueden elevar los niveles de hCG incluyen ciertos cnceres de estmago, hgado, pulmn, pncreas e intestino grueso.B) CONOCE OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOSTICO DE EMBARAZO ANLISIS DE HCG EN ORINALa hormona el embarazo puede medirse en orina mediante eltest de embarazo caseroque se puede comprar en la farmacia y usarse a partir del primer da de atraso menstrual. Si es positivo (+) no hay dudas del embarazo porque este test no tiene resultados falsos positivos. Si es negativo (-) y contina el atraso menstrual, debe repetirse unos 5 das ms tarde, porque la cantidad de hormona producida puede ser inferior al nivel necesario para que se active el reactivo. Si al cabo de este tiempo sigue siendo negativo (-) puede ser que no ests embarazada y tu atraso se deba a otras razones.Tambin la hCG puede medirse en orina pero por laboratorio. El mismo puede realizarse a partir de los 7 10 das de la probable concepcin y es realizado por un profesional. Se recomienda llamar con un da de anticipacin al laboratorio para preguntar si existe alguna indicacin especial para realizar el anlisis. LA PRUEBA CASERA DE EMBARAZOExisten muchos tipos de pruebas caseras de embarazo, o HPTs, que pueden comprarse en farmacias u otros comercios. Algunas funcionan colocando su orina en un vaso e introduciendo un palillo dentro de la orina, o colocando parte de la orina con un gotero en un recipiente especial. Otras se llevan a cabo colocando un palillo en el flujo de orina. El perodo de tiempo que tiene que esperar para que el palillo o el recipiente cambien de color o muestre un smbolo (como de ms o de menos) vara de una prueba a otra. Todas las pruebas contienen instrucciones escritas. La mayor parte de las pruebas tambin tienen un nmero gratuito al que usted puede llamar si tiene alguna duda acerca de cmo hacer la prueba o cmo interpretar los resultados. ANLISIS DE HCG EN SANGREUna fraccin de hCG ms especfica puede determinarse en sangre materna a partir de los 7 das de la probable concepcin. Generalmente se cuantifica, para establecer la cantidad exacta de hormona que se est produciendo y si no hay dudas sobre la fecha de tu ltima menstruacin, deber coincidir con los valores estndares segn las semanas reales del embarazo en curso. El anlisis cuantitativo de sangre (oanlisis de beta hCG)mide la cantidad exacta de hCG en la sangre. Esto significa que puede detectar cantidades muy pequeas de hCG, lo que lo hace un anlisis muy exacto. El anlisis cualitativo de la sangreda una respuesta simple, ya sea positiva o negativa, en cuanto a si usted est embarazada. La exactitud de este anlisis es similar a la de las pruebas de orina. No obstante, los anlisis de sangre pueden detectar hCG ms cerca del comienzo del embarazo que las pruebas de orina.Los anlisis de sangre pueden decirle si est embaraza entre 6 y 8 das despus de ovular (o de que el huevo sale de un ovario). Las pruebas de orina pueden determinar el embarazo alrededor de 2 semanas despus de la ovulacin.Algunas pruebas de orina ms sensibles le pueden decir si est embarazada hasta 6 das luego de concebir, o un da despus de no haber tenido el perodo menstrual. EcografaPuede diagnosticar un embarazo a partir de las 5 semanas de gestacin a partir de la FUM (Fecha de ltima Menstruacin). Muchas veces, cuando el embarazo es tan pequeo, no se puede visualizar el embrin con su latido cardaco hasta la semana 6 7. Adems laecografasirve para muchas otras cosas.

C) DESPUES DE UN ABORTO ACCIDENTAL O LEGRADO EL EXAMEN HCG ES POSITIVO O NEGATIVOLa gonadotropina corinica, tambin llamada HCG, prueba la cantidad de hormona producida por la placenta al comienzo del embarazo. En un embarazo sano, los niveles de HCG aumentan en un patrn relativamente predecible, doblndose cada 48 a 72 horas, aunque los niveles iniciales de hCG en la primera prueba de embarazo, alrededor del tiempo de la primera falta, pueden variar considerablemente. En un embarazo destinado a terminar en aborto espontneo, los niveles de hCG normalmente no se elevan apropiadamente. Despus de un aborto involuntario, el tiempo que tardan los niveles de hCG para volver a los niveles de antes del embarazo pueden variar.Los niveles de HCG en el momento del aborto varan dependiendo de cmo de avanzado estaba el embarazo. Por ejemplo, los niveles HCG a las seis semanas, dos semanas despus de la primera falta del perodo, rondan la media entre 1.080 mlU/mL y 56.500 mlU/mL, de acuerdo a la Asociacin americana de embarazos. Cuanto ms elevados estn los niveles de HCG, ms tiempo tardarn en volver a la normalidad despus del aborto.Despus de un aborto, el tejido de la placenta se separa o se elimina a travs de una dilatacin y legrado quirrgico. Ya que la placenta no est extinguiendo el HCG, los niveles eventualmente se reducirn a menos de 5mIU/mL, considerado como un HCG negativo. Los niveles de HCG normalmente vuelven a niveles negativos de cuatro a seis semanas despus de un aborto involuntario, segn explica la asociacin americana de embarazos.D) QUE RECOMENDACIONES DARIA A LOS PACIENTES QUE TIENEN EMBARAZOS NO DESEADOS Aconsejarle a la paciente a que procese sus propias emociones para poder ayudarle, ya que es probable que se sienta con ira, ansiedad, tristeza, culpa. Proporcionarle a la usuaria un servicio de atencin integral por personal calificado, que garantice la privacidad y confidencialidad.

Fomentar a la paciente ya sea adulta o adolescente que tenga cuidado mdico y psicolgico durante el embarazo y as cuidar de sus necesidades fsicas, emocionales y fisiolgicas durante el embarazo.

Promover el concepto de que todo nio que viene al mundo tiene el derecho a nacer y ser protegido.

Hacerle conocer al adulto o adolescente los factores de riesgoque traera realizarse un aborto. Estimular la preparacin para la maternidad y la importancia del apego entre la madre y el nio como tambin los beneficios de la lactancia materna.

Brindar orientacin a los familiares y aconsejarle que le brinde todo su apoyo.

BIBLIOGRAFIA

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http://www.gtlab.com.ar/UserFiles/File/HCG%20newsletter.pdf