ASIGNATURA: BIOQUIMICA

UNIVERSIDAD DEL QUINDIO

PROGRAMA DE LICENCIATURA EN BIOLOGA

LABORATORIO DE BIOQUIMICA

2015JOHANNY AGUILLON OSMA MSc.

DESNATURALIZACION PROTEICA

OBJETIVO

Comprobar el efecto de algunos factores fsicos y qumicos sobre la estructura de las protenas.

INTRODUCCIN

Una protena es cualquiera de los numerosos compuestos orgnicos constituidos por aminocidos unidos por enlaces peptdicos que intervienen en diversas funciones vitales esenciales, como el metabolismo, la contraccin muscular o la respuesta inmunolgica. Las molculas proteicas van desde las largas fibras insolubles que forman el tejido conectivo y el pelo, hasta los glbulos compactos solubles, capaces de atravesar la membrana celular y desencadenar reacciones metablicas. Tienen un peso molecular elevado y son especficas de cada especie y de cada uno de sus rganos.

Se estima que el ser humano tiene unas 30,000 protenas distintas, de las que slo un 5% se ha descrito con detalle. Las protenas sirven sobre todo para construir y mantener las clulas, aunque su descomposicin qumica proporciona energa, con un rendimiento de 4 kilocaloras por gramo, similar al de los hidratos de carbono.

Adems de intervenir en el crecimiento y el mantenimiento celulares, son responsables de la contraccin muscular. Las enzimas son protenas, al igual que la insulina y casi todas las dems hormonas, los anticuerpos del sistema inmunolgico y la hemoglobina, que transporta oxgeno en la sangre, los cromosomas que transmiten los caracteres hereditarios en forma de genes, estn compuestos por cidos nucleicos y protenas (histonas).La Desnaturalizacin Proteica:

En cualquier proceso por el cual el ordenamiento espacial de una protena cambia de la estructura ordenada de la molcula original hacia una conformacin tridimensional ms desordenada. Durante la desnaturalizacin se rompen los enlaces de hidrogeno y los hidrofbicos y hay un incremento de la entropa con prdida de la actividad biolgica. Las protenas desnaturalizadas se vuelven menos solubles y est puede estar dada por factores fsicos, qumicos o biolgicos.PREPARACIN DE LA MUESTRA

Mezclar 70ml de agua destilada con una clara de huevo (cuidando de que no se te vayan residuos de la yema), agitar la mezcla y dejarla reposar. Tambin se trabajar con albumina srica al 5% y leche.A. DENATURALIZACIN DE LAS PROTEINAS

1. En un tubo de ensayo, poner 2 ml de las muestras de protenas.

2. Aadir 5 gotas de cido actico concentrado y calentar el tubo de ensayo directamente a la llama del mechero (tomar el tubo con unas pinzas para tubo de ensayo), cuidar que la mezcla no hierva y se derrame el contenido.

3. Observa la reaccin y toma los apuntes correspondientes

B. REACCIN XANTOPROTEICA

1. En un tubo de ensayo, poner 2 ml de las muestras de protenas.

2. Aadir 0.7 ml de cido ntrico concentrado

3. Calentar al bao mara a punto de ebullicin (100 C), hasta observar la reaccin colorida (positiva si es amarillo)4. Sacar el tubo del bao mara y poner a enfriar en un vaso de precipitado de 200 ml que contenga agua fra

5. Aadir al tubo de ensayo puesto a enfriar 10 gotas de solucin de hidrxido de sodio preparado al 40% en agua destilada.

C. REACCIN DE BIURET

1. En un tubo de ensayo adicionar 2 ml de las muestras proteicas.2. Aadir 1.5 ml de una solucin de hidrxido de sodio al 20%

3. Aadir 5 gotas de una solucin de sulfato cprico preparada al 1% (dejar reposar la reaccin un momento)

4. La reaccin positiva desarrolla una coloracin violeta roscea caracterstica.D. REACCIN DE LOS AMINOCIDOS AZUFRADOS (CISTENA Y METIONINA)1. En un tubo de ensayo adicionar 2 ml de las muestras proteicas.2. Aadir 1.5 ml de una solucin de hidrxido de sodio al 20%

3. Adicionar 10 gotas de una solucin de acetato de plomo al 5%

4. Calentar a la flama de un mechero, (cuida que la solucin no hierva y no se derrame).

5. Si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que se ha formado sulfuro de plomo, utilizndose

el azufre de los aminocidos, lo que nos sirve para identificar protenas que tienen en su composicin aminocidos con azufre (metionina y cisteina).CUESTIONARIO

1. Cul es la parte de la clula en donde se sintetizan los aminocidos que forman las protenas?

2. Menciona las principales funciones de las protenas para la clula y los organismos vivos?

3. Por qu se utiliza la albmina como modelo para las determinaciones en esta prctica?BIBLIOGRAFIA: Lorient. Bioqumica agroindustrial. ACRIBIA.1994Lehninger. Principios de Bioqumica OMEGA. 2005. 5

PAGE 2

_1071640951.unknown