CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO INDUSTRIAL Y DE SERVICIOS No. 128

Práctica 5. Curva de crecimiento bacteriano.

Sub-módulo 3: Ejecuta técnicas de identificación de Microorganismos con base a las

normas.

Integrantes: Chavira Ruiz Teresa Edith, Mercado Galaviz Diana Laura, Mercado Portillo Saira Nayeli,

Morales Cardona Andrea Isabel, Muños Armenta Alejandra, Nieves Flores Sergio Aarón, Olivas

Barrientos Lizbeth Tatiana, Portillo Robles Javier Armando.

Facilitadora: Ing. Acosta Bezada Jessica Alicia

Fecha de Inicio: 29 de octubre 2014 Fecha de Finalización: 5 noviembre 2014

Introducción

La célula bacteriana es esencialmente una maquinaria de síntesis capaz de duplicarse a sí misma. El proceso de síntesis para el crecimiento bacteriano involucra unas 2000 reacciones químicas de una amplia variedad. Una vez sintetizados los polímeros, el crecimiento continúa con el ensamblaje y formación de nuevas estructuras celulares que finalizan con la división en dos células hijas. En una medio apropiada física y nutricionalmente, un cultivo se reproduce continuamente como células vegetativas, los nutrientes absorbidos y metabolizados permiten crecer al microorganismo.

• Crecimiento

o Es definido como un incremento

ordenado de todos los constituyentes y estructura celular. En muchos microorganismos, este incremento continúa hasta que la célula se divide en dos nuevas células: Fisión binaria

El crecimiento microbiano conlleva usualmente a un incremento en el número de células. Es importante distinguir entre el crecimiento individual de células y el crecimiento de poblaciones de células:

o Crecimiento individual

o Es el incremento en el tamaño y peso y

es usualmente un preludio a la división celular o Crecimiento poblacional

o Es el incremento en el número de

células como una consecuencia del crecimiento y división celular

Tasa de crecimiento o Es el cambio del número de células o

masa por unidad de tiempo Generación

o Intervalo para la formación de dos

células provenientes de una. Tiempo de generación

o Tiempo que tarda una población en

duplicarse. Se puede definir también como la cantidad de tiempo requerida para completar un ciclo de división.

Resumen:

En esta práctica se realizó el cultivo de bacterias a partir de comida de la cafetería escolar (carne de puerco y pollo), así como una la curva de crecimiento, para obtener un sondeo de la calidad de los alimentos de la cafetería escolar, se prepararon medios de cultivo y estos se inocularon con dichas muestras , se introdujeron en la incubadora durante 24 hr, y se realizó una morfología colonial en cada uno de los cultivos dando como resultado el crecimiento de algunas bacterias ,luego se

volvieron a introducir los cultivos en la incubadora. Y se realizó una tinción Gram por cada colonia encontrada en nuestros cultivos para saber qué tipos de bacterias contenían la carne de puerco y la de pollo. Tres días después se hizo la curva de crecimiento, pero como la curva de crecimiento es exacta durante las primeras 24hr, solo se hizo una observación de los cultivos para saber cuáles colonias habían muerto y que nuevas bacterias se habían producido. En esta práctica fue esencial la curva de crecimiento para conocer cada una de las fases de las colonias de las bacterias El tiempo de la fase de latencia puede variar debido a las condiciones del cultivo así como también por la edad del inoculó, el tamaño del inoculo y los nutrientes contenidos en el medio de cultivo. 'La edad del inoculó varía debido a la cantidad de materiales tóxicos en él y la falta de nutrientes que posea la célula durante su desarrollo, los inóculos viejos prolongan más la fase de latencia.

Abstrac:

In this practice, a bacterial culture was done from the school cafeteria food (pork meat and poultry), a growth curve was also done, in order to investigate the quality of the school cafeteria food, bacterial culture media was prepared and inoculated with such samples, they were placed in the incubator for 24 hr and a colonial morphology of every bacterial culture indicated growth of some of the bacteria, the samples were placed in the incubator afterwards. A gram stain study was completed for every bacteria colony found in the bacteria cultures to understand the type of bacteria coming from pork meat and poultry.

Three days after, a growth curve was done and because the growth curve is exact during the first twenty four hours, observation just was done to know which bacteria colonies were dead and what new bacteria has been produced.

In the practice, the growth curve was essential to understand every phase of the bacteria colonies. The latency phase period can vary due to the conditions of the bacteria culture as well

as the inoculation age, the inoculate size and the nutrients contained in the culture. The inoculate age varies due to the quantity of the toxic material in the culture and the lack of nutrients present in the cell during its development. The old inoculates delay the latency phase.

Materiales y Métodos:

Los materiales, reactivos que se utilizaron en la

práctica se mencionarán a continuación:

Materiales:

Cajas Petri

Tubos de ensaye

Mortero y Pistilo

Asa

Matraz

Mechero

Reactivos:

M.C. McKonkey

M.C. EMB

M.C. Nutritivo

Muestra de carne de puerco

Muestra de carne de pollo

Procedimientos:

Procedimientos No. 1: Preparación de

los medios de cultivo.

1. Se preparan 3 tipos de medio de

cultivo en el laboratorio de modo que

cada mesa cuente con 3 cajas Petri

de cada medio.

2. Se calienta con la ayuda del mechero

hasta que hierva, posteriormente se

prepara para esterilizar y realizar el

vaciado correspondiente.

Procedimientos No. 2: Preparación de

muestra y realización del estriado.

3. En dos morteros diferentes diluir una

muestra de carne y una de pollo con

agua.

4. Con una asa estéril tomar una

alícuota de un mortero y realizar el

estriado correspondiente en cada

medio de cultivo;

Nutritivo: Estría masiva

Mc Konkey:

EMB:

Procedimientos No. 3: Morfología.

5. Etiquetar cultivos del 1 al 3 y con cual

muestra se trabajo

6. Se introducen a la incubadora por 24

horas para observar crecimiento y

posteriormente realizar morfología

colonial. Nota: Contar cuantas

colonias hay y distinguir que colonias

tiene la caja. Tabla 1.

Procedimiento No.4 : Tinción de Gram

7. Para hacer la morfología de las

bacterias se realiza la tinción.

8. Se coloca una gota de agua en un

portaobjetos, previamente etiquetado

con la colonia que se trabajara sobre

él.

9. Tomar muestra de una colonia y se

dispersa en la gota de agua con la

ayuda del asa.

10. Dejar secar, para proceder a fijar la

muestra (se pasa 3 veces el

portaobjetos por la llama del

mechero).

11. Se agrega una gota de cristal violeta

por 1 min. y se enjuaga en forma de

Z.

12. Se agrega una gota de iodo-lugol por

1 min. y posteriormente se enjuaga.

13. Se agrega una gota de alcohol-

cetona por 30 segundos y se enjuaga.

14. Después agregar una gota de

safranina por 30 segundos y enjuagar.

15. Finalmente se agrega aceite de

inmersión y se coloca un cubreobjetos

para después observarse en el

microscopio a 100X.

16. En seguida se hace la morfología de

cada bacteria. Tabla 2.

Procedimiento No.5 Curva de

crecimiento

17. Introducirlas nuevamente a la

incubadora por 3 días más.

18. Observar nuevamente cuantas

colonias hay en cada caja para

después realizar la curva de

crecimiento correspondiente. Tabla 3.

Resultados

Tabla No.1

M.C Color Forma Superficie

Bordes

Nutritivo 1 pollo

Blanco irregular

plana

cobulada

Nutritivo 2

Beige Irregular

Plana

cobulada

Nutritivo 3

gris Irregul Convex

Filamentosa

puerco ar a

McKonkey 1 pollo

rosa irregular

plana

cobulada

McKonkey 2 puerco

rojo irregular

acuminada

Redondeada

McKonhey 3 puerco

rojo puntiforme

acuminada

Redondeada

EMB 1 pollo

Morado oscuro

puntiforme

acuminada

redondeada

EMB 2 puerco

Rosa, centro morado

puntiforme

Acuminada

redondeado

EMB 3 morada puntiforme

acuminada

Redondeada

Tabla No. 2

Agar Colonia

Gram Tipo

Mackonkey 4(Pollo)

4 Morado

Cocos

Nutritivo4(Pollo)

1 Morado

Diplococos

EMB 1 (Pollo) 1 Rosa Cocos en cadenas

Nutritivo1(Pollo)

2 Rosa Espiroqueta

Tabla No.3 Formula:

M.C Colo Form Supe Borde Nu

r a rficie s mero de bacterias

Mckonkey 1

Naranja

Puntiforme

Convexa

Ondulada

93

McKonkey 3Puerco

Café Café

Circular Puntiforme

Convexa Acuminada

Redonda Ondulada

1045

Nutritivo 1

BlancaCristalinas“““

Lobulado Circular Irregular CircularIrregular

PlanaAcuminadaPlanaPlana Plana

Irregular RedondeadoRedondeado Ondulado Ondulado

781101

Nutritivo 3

Beige Cristalinas“

Irregular Irregular Irregular

PlanaPlanaPlana

OnduladoRedondo Filamentosa

327

EMB 1 Pollo

NegraMorado claroRosa

Irregular IrregularIrregular

AcuminadoConvexaPlana

Redondeado LobuladoOndulado

6111

EMB 2

Negro

Irregular

Papilada

Rizoide

139

Debido a la falta de tiempo, solo pudieron hacerse observaciones comparativas con la tabla 1 ya que la curva de crecimiento solo es factible solo durante las primeras 24 hr.

Conclusión:

Chavira Ruiz Teresa Edith

En esta práctica descubrimos las bacterias que hay en la carne de puerco y en la de pollo, también aprendimos a identificar cuales colonias ya habían muerto, utilizamos la curva de crecimiento bacteriano aquí se tuvo que usar una fórmula para sacar la curva, en la curva de crecimiento identificamos la Fase de latencia o retardo que dura pocas horas, ya que la célula se adapta al medio en el que se encuentra. Puede haber muerte de algunos microorganismos.

Fase de aceleración positiva, en la que las células tienen gran actividad fisiológica, apareciendo el crecimiento protoplasmático. Fase logarítmica.- se lleva a cabo una multiplicación exponencial de los microorganismos. Fase de aceleración negativa, dada por la competencia del alimento. Fase estacionaria, consiste en el equilibrio entre la multiplicación y muerte de los microorganismos. Fase de Destrucción acelerada, debido a la muerte exponencial de los microorganismos, por falta de nutrientes y el aumento de sustancias de desecho. Fase de declive, causada por la muerte total de los microorganismos por la acumulación de sustancias de desecho.

Mercado Galaviz Diana Laura

En esta práctica pudimos observar de manera continua el crecimiento bacteriano en base a la curva del crecimiento.

Dando a conocer así como desde sus faces así desde su tiempo en crecer, la velocidad en la que pueden crecer, su punto donde ya no hay crecimiento hasta llegar a su final es decir como fase final la muerte de esta.

Estas son requeridas normalmente para el control de su crecimiento por lo cual su aprendizaje es necesario.

Mercado Portillo Saira Nayeli

Como conclusión yo creo que se obtuvieron los conocimientos necesarios para la realización de la práctica, la cual era con el objetivo de tener la curva de crecimiento anotada y hecha para ver

que bacterias crecieron y cuales murieron. Al realizar la primera morfología se tomaron notas y después de 3 días se volvió a hacer una nueva para observarse que había sucedido; el registro fue exitoso y se pudieron obtener la curva y ambas morfologías.

Para realizarse la curva de crecimiento se tuvo que ser muy observador e inteligente para observar que cambios se obtuvieron. Al final concluimos con los mismo pasos, el registro de la práctica, trabajo en equipo, esterilización de las cajas y tubos y material utilizado con la olla de presión (cosa que aprendimos a realizar con la práctica numero 1). Posteriormente después de esterilizar se guardan los materiales para que estén listos para la siguiente práctica.

Morales Cardona Andrea Isabel

Puedo concluir que con esta práctica pudimos observar la calidad de los productos que se venden en la cafetería escolar (en este caso los alimentos que contienen carne de puerco y pollo), con ayuda de los medios de cultivo (EMB, Nutritivo, McKonkey) pudimos hacer crecer nuestras bacterias y gracias a los cultivos que se realizaron pudimos realizar la curva del crecimiento bacteriano que resulta de la representación gráfica de la determinación periódica del número de células viables por mililitro que existen en un líquido inoculado con células microbianas provenientes de un cultivo que ha crecido previamente hasta la saturación.

Dicha curva se divide en seis fases, que se simbolizan con letras de la A a la F. Este es un componente esencial de la función microbiana, ya que una célula individual tiene un periodo de vida determinado.

Muños Armenta Alejandra

Concluyo que el término de crecimiento bacteriano se refiere a cambios en la cosecha de células (aumento en la masa total de células) más que a cambios en un organismo individual. El crecimiento denota el incremento del número o de la masa por encima del inóculo original.

El tiempo de generación es el intervalo de tiempo requerido para que la célula bacteriana se divida o para que la población se duplique. Este tiempo es específico para la bacteria y depende de la idoneidad de nutrientes que hay en el medio y de las condiciones físico – químicas.

Nieves Flores Sergio Aarón

El crecimiento es un incremento en el número de células o aumento de la masa microbiana. Este es un componente esencial de la función microbiana, ya que una célula individual tiene un periodo de vida determinado y la especie se mantiene solamente como resultado del crecimiento continuo de la población. En muchas situaciones es necesario el control de la población celular, el conocimiento de cómo se expande es útil para el diseño de métodos de control para el crecimiento microbiano.

La curva del crecimiento bacteriano resulta de la representación gráfica de la determinación periódica del número de células viables por mililitro que existen en un líquido inoculado con células microbianas provenientes de un cultivo que ha crecido previamente hasta la saturación.

Olivas Barrientos Lizbeth Tatiana

Conclusión esta práctica nos ayudó y nos sirvió para desarrollar la cuna bacteriana, en ella podíamos observar y analizar un poco mejor las bacterias

Portillo Robles Javier Armando

Mi conclusión es que en esta práctica supimos las bacterias que contiene la comida de la cafetería gracias a que pusimos a estriar lo que estaba adentro de los burritos lo que estriamos fue carne de cerdo y pollo y también la curva de crecimiento ,se incubaron por un día completo e hicimos morfología bacteriana de estos creció mucha y alguna incontables también se realizó un a tinción gran y con eso vimos que era lo que estábamos comiendo todos los días esto también nos ayudó demasiado con la curva de

crecimiento ya que conocimos cada una de las colonias bacterianas

Discusión

Esta práctica fue realizada con gran éxito, anteriormente se realizaron los cultivos que

fueron inoculados con carne de puerco y pollo. El cual fue conseguido en la cafetería escolar; esto con el fin de realizar pruebas de salubridad y ver la calidad de la comida de esta, se realizó en distintos medio de cultivo tales como Nutritivo, EMB y McKonkey.

En el crecieron distintas bacterias tanto positivas como negativas; entre ellas se encontró cocos y cocos en cadena.

También se realizó una curva de crecimiento, pero debido a la falta de tiempo las primeras 24hr solo se realizó una morfología colonial, se contaron colonias y los cultivos fueron devueltos a la incubadora; tres días después se hizo una observación de los cultivos se hicieron anotaciones de las colonias que murieron y la aparición de nuevas colonias de bacterias.

La práctica puede llenar de alivio a los estudiantes consumidores de productos alimenticios (carne de puerco y pollo) tenía bacterias que debían ser encontrados en él. Nada fuera de su lugar, es decir sin microrganismos patógenos, que debieran preocupar a alguien, demostrando la calidad del producto.

Bibliografía

http://curvadecrecimientov6.blogspot.com/

http://procesamientodeproductos.blogspot.com/2012/10/curvas-de-crecimiento-microbiano.html

Anexos