UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINAFACULTAD DE INGENIERIA AGRICOLAMAESTRIA EN GESTION DE CUENCAS HIDROGRAFICAS

PRACTICA N 5

DETERMINACIN DE TOXICIDAD

DONCENTES:- Dra. LIA RAMOS FERNANDEZ Dr. VICTOR MEZA CONTRERAS M. Quim. MARY FLOR CESARE CORAL

ALUMNO: JOSE MANUEL TAPULLIMA CHUQUIPIONDO

LIMA - PER2014

I. INTRODUCCIN

Se entiende por "toxicidad" a la cantidad de una sustancia que, bajo un conjunto especfico de condiciones, causa efectos detrimentales. La toxicidad indica la potencia de una sustancia venenosa y no la afeccin producida por sta (concepto que corresponde a "intoxicacin" o "envenenamiento"). La toxicidad se expresa como la cantidad de la sustancia en mg/kg de peso vivo que origina efectos biolgicos determinados, en un tiempo dado y en una especie establecida.Existen diversos indicadores de toxicidad, siendo uno de los ms usados la "dosis letal 50" (LD50); este es un indicador estadstico de toxicidad aguda, el cual seala la cantidad del txico que causa la muerte del 50% de los animales intoxicados. Con el nombre de "LC50" ("concentracin letal 50") se proyecta el indicador anterior a la toxicidad de un gas en el aire, aunque tambin se le suele referir al agua.

Es frecuente sealar la concentracin de un txico o la dosis administrada utilizando al "ppm" (partes por milln) como unidad de medida. Al respecto debe recordarse que 1 ppm equivale a 1 g/tonelada, 1 mg/kilogramo y a 1 ug/gramo. Es tambin frecuente referirse a ellos en trminos porcentuales (%) y en numerosas ocasiones se hace necesaria la interconversin de estas unidades. Para convertir ppm a % se correr la coma decimal 4 puestos a la izquierda; lo inverso se realizar para convertir % a ppm. (Sachana, 2007).

OBJETIVOS:Objetivo General Determinar la toxicidad de un contaminante quimicoObjetivos Especficos Determinar la concentracin letal (CL50) de dicromato de potasio en una especie sensible Daphnia magna

II. MARCO TERICO2.1. Toxicidad.

Es la capacidad para producir dao a un organismo vivo, en relacin con la cantidad o dosis de sustancia administrada o absorbida, la va de administracin y su distribucin en el tiempo (dosis nicas o repetidas), tipo y severidad del dao, tiempo necesario para producir este, la naturaleza del organismo afectado y otras condiciones intervinientes.

La toxicidad es una cualidad intrnseca y relativa de todas las sustancias, las cuales dependen de un conjunto de condiciones y circunstancias como son los procesos de biotransformacin, as como los mecanismos de defensa del propio individuo, lo cual est determinado por las caractersticas genticas de cada uno; es posible que tambin tengan influencia otros factores internos y externos como son las circunstancias fisiolgicas del individuo y participacin concomitante de otros compuestos qumicos.

El manejo y consumo de estas supone un riesgo que est dado por:

a. Las caractersticas fsico-qumicas de las sustancias.b. Su potencialidad toxica (pT), o toxicidad intrnseca que est en razn inversa a las cantidades precisas para provocar daos a los seres vivos.c. La probabilidad de que sea adsorbida por el hombre, y la frecuencia con que esto pueda ocurrir. De estos dos factores dependen el riesgo, o probabilidad de que se produzca un efecto toxico.

Cuando un organismo recibe pequeas dosis de una sustancia procura adaptarse a ella, bien sea incrementando su propia capacidad de biotransformacin (metabolismo) y excrecin o incluso elevando, dentro de unos mrgenes, su umbral de sensibilidad para soportar el toxico.

En el caso en que la dosis supere estas capacidades fisiolgicas de adaptacin, aparecern modificaciones en los parmetros biolgicos.

2.2. Factores que modifican la toxicidad de una sustancia.a. Va de administracin y absorcin.b. Propiedades fsico-qumicas.c. Distribucin y acumulacin en el organismo.d. Variedad e integridad de los mecanismos de toxicacin y excrecin que posea el organismo.e. Salud previa del individuo.f. La selectividad sistmica del xenobitico y la importancia de los rganos blanco.g. La susceptibilidad personal del individuo.

2.3. Clasificacin Toxicolgicaa. Intoxicaciones agudas. (24-48 horas). Leve. Moderada o severa.b. Intoxicacin subaguda. Perodo de latencia de 2 a 4 semanas.c. Intoxicacin subcrnica. 4 semanas 7 aosd. Intoxicacin crnica. Mayor a 7 aos.2.3.1. Toxicidad Aguda.Una exposicin nica (sola) a una sustancia txica que puede causar el dao biolgico severo o incluso la muerte; exposiciones agudas por lo general no son caracterizadas con una duracin mayor a un da.La toxicidad aguda tiene por objeto determinar los efectos de una dosis nica y muy elevada de una sustancia.

2.3.2. Toxicidad Crnica.Es la capacidad de una sustancia para producir efectos adversos consecuentes a una exposicin prolongada; estos pueden aparecer durante o despus de interrumpida la exposicin, estos efectos o cambios estn relacionados con cambios en el metabolismo, crecimiento o capacidad de supervivencia (muerte y reduccin de la capacidad reproductora).

2.3.3. Toxicidad Subcrnica.Son los efectos adversos ocasionados por administracin o exposicin repetida de una sustancia durante un corto periodo de tiempo, usualmente el 10% de la vida (al menos 90 das en animales).

2.4. Ensayos de toxicidad

Los ensayos biolgicos son constituidos como herramientas de diagnstico adecuadas para determinar el efecto de agentes fsicos o qumicos sobre unos organismos de prueba bajo condiciones experimentales especficas y que son controladas por el los experimentadores. Estos efectos pueden ser tanto de inhibicin como de magnificacin y son evaluados gracias a la reaccin de los organismos, tales como muerte, crecimiento, proliferacin, multiplicacin, cambios morfolgicos, fisiolgicos o histolgicos.

Los efectos pueden manifestarse en diferentes niveles, desde estructuras subcelulares o sistemas de enzimas, hasta organismos completos, poblaciones o comunidades.

Considerando que el efecto toxico sobre los sistemas biolgicos es ejercido por la accin combinada de todas las sustancias nocivas presentes en el medio, incluso aquellas que no son toxicas en s, pero que afectan las propiedades qumicas o fsicas del sistema y consecuentemente las condiciones de vida de los organismos.

En los sistemas acuticos es caracterstico el caso de sustancias que agotan el oxgeno o que son coloreadas, o que simplemente impiden la propagacin de la luz, por lo que los ensayos biolgicos tambin incluyen el efecto de los organismos sobre las sustancias, como la degradacin microbiana o biodegradabilidad.

Los ensayos de toxicidad se emplean para diferentes fines (establecimiento de concentraciones aceptables de diferentes parmetros, determinacin del cumplimiento de la legislacin, etc.) y proporcionan resultados tiles para la proteccin de la salud pblica y de la vida acutica frente al impacto causado por la introduccin de contaminantes en las aguas. A continuacin la tabla 1, muestra una lista de sustancias no deseables y txicas que puede contener el agua:

De forma general, los ensayos, tambin llamados pruebas de toxicidad, pueden ser definidos de acuerdo con:

Su duracin; corto, mediano o largo plazo. El mtodo implementado para incorporar la muestra al sistema de ensayo; estadstico, con renovaron, de flujo continuo. El propsito para el cual son utilizados; control de calidad de vertimientos, evaluacin de compuestos especficos, toxicidad relativa, sensibilidad relativa, etc.

Tabla 1. Sustancias no Deseables y Toxicas Incluidas en Estndares de Agua

SUSTANCIAS NO DESEABLES Y TOXICAS INCLUIDAS EN ESTANDARES DE AGUA

SUSTANCIAS INDESEABLESSUSTANCIAS TOXICAS

NitratosOrganocloradosArsnicoAntimonio

NitritosHierroBerilioSelenio

AmonioManganesoCadmioPesticidas

Sulfuro de HidrogenoCobreCianuroHAP

HidrocarburosZincCromo

FenolesFosforoMercurio

BoroFlorNquel

SurfactantesBarioPlomo

Fuente: www.miliarium.com.

A pesar del limitado alcance de la informacin que proviene de los ensayos de toxicidad para su extrapolacin a escala ambiental, los estudios con organismos en laboratorio, en condiciones controladas y estandarizadas para la evaluacin de respuestas, se han convertido en fuentes de informacin importantes para la evaluacin ecolgica de los efectos de los contaminantes txicos.

Debido a que no es viable econmicamente determinar la toxicidad especfica de cada una de las sustancias txicas que pueden aparecer en el agua, se efecta el ensayo de toxicidad del efluente global mediante la utilizacin de organismos acuticos y la observacin de respuestas.

Tras la exposicin del organismo o grupos de organismos a distintas concentraciones de la muestra problema, se miden y registran los efectos biolgicos observados en cada uno de los grupos tratados y en los grupos control y, posteriormente, se efecta un anlisis estadstico de los datos obtenidos. La cantidad de txico suministrado se puede expresar de dos formas:

a. Concentracin: Masa de txico por unidad de volumen de agua.b. Dosis: Cantidad de txico que penetra en el organismo por unidad de masa de tejido o de ser vivo sobre el que acta.

Tambin se puede determinar la concentracin a la cual no se observa efecto (Non Observable Effect Concentration, NOEC) y la concentracin ms baja a la cual se observa efecto (Low Observable Effect Concentration, LOEC).

La toxicidad que experimentan los organismos tras los ensayos puede ser de dos tipos:

a. Toxicidad Agudab. Toxicidad Crnica.

2.5. Bioensayos.

El medio acutico es quien frecuentemente recibe las consecuencias de las actividades antrpica, entre ellas la actividad industrial. En los efluentes se encuentran una serie de sustancias contaminantes, tanto orgnicas como inorgnicas, que ponen en riesgo la salud del ecosistema. Los bioensayos de laboratorio posibilitan tener un primer acercamiento al posible impacto que produce un toxico aislado o una mezcla de ellos.

Los bioensayos de toxicidad con agentes contaminantes en organismos vivos bajo condiciones de laboratorio, se han incrementado en estos ltimos tiempos debido a la brevedad con que se obtiene la informacin sobre las dosis letales y subletales (CL50), que afectan negativamente organismos vivos en los ambientes marinos, estuarinos y dulceacucolas.

El uso de bioensayos para la evaluacin de toxicidad de sustancias liberadas al medio a travs de efluentes, ha llevado a la utilizacin de biomonitores propios de los ambientes evaluados, lo cual favorece indirectamente la preservacin de la biodiversidad local. Sin embargo, la variabilidad en la aplicacin de las tcnicas experimentales para el mantenimiento de organismos silvestres afecta la interpretacin y comparacin de los resultados entre laboratorios, por lo que se hace necesario desarrollar metodologas estandarizadas para establecer condiciones controladas.Utilizar organismos provenientes directamente del hbitat natural puede distorsionar los resultados obtenidos por fuentes de variabilidad no previstas, como nutricin, dinmica de la poblacin, estrs por depredacin, etc. Estas variables pueden ser controladas o eliminadas con las poblaciones de laboratorio; adems, el entrecruzamiento consanguneo que ocurre a lo largo del tiempo en esas poblaciones, resulta en una considerable reduccin de la variabilidad gentica.

Por otra parte, la causa de la complejidad del medio ambiente acutico y de las comunidades biolgicas que lo integran hace difcil establecer el grado de deterioro que afecta a las especies o comunidades acuticas. Por esta razn es conveniente realizar bioensayos utilizando organismos vivos en condiciones controladas de laboratorio. Sin embargo, el objetivo primordial de un bioensayo es reflejar la realidad de cmo afectara a los organismos vivos en su medio natural y para ello es recomendable paralelamente investigar continuamente las comunidades en su propio hbitat (Villamar, 1996).

2.6. Dosis Letal 50 (LD50).Para referirse a la toxicidad de las sustancias, se establecen las dosis precisas para producir la muerte tras una sola absorcin, es decir que para originar una intoxicacin aguda letal.

Esta dosis letal (DL) se calcula por experimentacin con suficiente numero de animales para obtener valores de significacin estadstica; as se calculan la DL mnima que mata a un solo individuo, la DL50, o media letal para el 50% de los ejemplares, la DL-100 que intoxica mortalmente a todos los individuos, y dosis intermedias como la DL-25, DL-75, etc.

Sin embargo, se ha observado que este parmetro es insuficiente para calificar la toxicidad de las sustancias, porque productos de escasa toxicidad aguda, con altas DL- 50, resultan muy peligrosos cuando se adsorben de forma crnica.

2.7. Concentracin efectiva 50 (EC50.)Concentracin del efluente que produce efectos negativos apreciables en un porcentaje "x" de la poblacin de ensayo. Se usa el CE50 o EC50, que sera la concentracin efectiva que afecta al 50 % de la poblacin.

2.8. Concentracin Letal 50 (LC50.)

Es la concentracin inhalada de un producto que es capaz de provocar la muerte del 50% de los individuos de una muestra, en un perodo de tiempo. Se expresa en partes por milln (PPM) para gases y vapores, en miligramos por metro cbico (mg/mt3) para polvos. 11

Al encontrar la relacin dosis respuesta, se puede establecer una curva de toxicidad, que permita un anlisis estadstico de los resultados para as obtener la concentracin letal media (CL50) de los organismos prueba, expresada en partes por milln (ppm).

Unos efectos nocivos evaluados por medio de ensayos biolgicos normalizados pueden indicar niveles de peligrosidad trasladable y asimilable a organismos que forman parte de los sistemas naturales y la biocenosis, por lo tanto la forma correcta de realizar los bioensayos es mediante el empleo de la respuesta cuantitativa, es decir, considerando solo dos resultados experimentales muerto o vivo, a partir de esto se puede determinar la relacin entre la concentracin y el efecto, en porcentaje. Como se dijo anteriormente los datos cuantitativos permiten la determinacin estadstica de la posicin e inclinacin de la curva de concentracin mortalidad para un periodo de exposicin. Con esto se puede evaluar el peligro y riesgo generado por sustancias de inters sanitario que se encuentran en el medio donde vive el organismo prueba. A continuacin en la grfica 1 se muestra la relacin dosis respuesta que puede sufrir cualquier organismo a ciertas concentraciones de contaminantes presentes en su medio, los cuales producen alteraciones en su hbitat.

Cuando se implementan pruebas de toxicidad, se debe realizar la estandarizacin de las mismas, en la cual se establece la sensibilidad de las especies y su secuencia de efecto frente a un txico de referencia, segn las repeticiones del experimento. Con esto se certifica que la respuesta de la poblacin en estudio se debe al efecto del txico de referencia y no a variaciones de sensibilidad de los organismos o a fallas operacionales en la aplicacin del mtodo, elaborando as cartas de vigilancia, teniendo en cuenta la precisin y exactitud que se deben y pueden obtenerse en los resultados generados por un determinado bioensayo.

2.9. Tipos de organismos empleados en los bioensayos.La seleccin de organismos para bioensayos debe basarse en:

Los objetivos del programa toxicolgico. La informacin disponible sobre los posibles organismos. Las caractersticas de las especies. Las instalaciones y equipo del laboratorio. El nivel de capacitacin de los tcnicos.

Los bioensayos acuticos pueden aplicarse a un amplio rango de programas, sin embargo, es importante entender claramente todas las facetas del proceso de seleccin a fin de disear programas que se acercarn efectivamente a los objetivos.

2.10. Ventajas de los organismos cultivados en el laboratorio de bioensayos.

Disponibilidad en forma inmediata de organismos aclimatados, saludables, que han sido criados bajo las mismas condiciones. La respuesta de los organismos para bioensayos a la sustancia txica est influenciada por factores tales como su edad (los animales jvenes son usualmente ms sensibles), dieta (los animales bien alimentados brindan respuestas ms consistentes), presin (los organismos alterados o presionados son ms sensibles) y condiciones fsicas como temperatura, luz y el nivel de oxgeno disuelto en el agua.

Los organismos para bioensayos que se cultivan en el laboratorio representan una fuente predecible de organismos de prueba de una edad conocida. El uso de condiciones estndares de laboratorio y de alimentacin asegurar que todos los organismos de prueba respondern a las sustancias txicas en una forma similar con el paso del tiempo. Esta es una caracterstica importante cuando se comparan los resultados de diferentes laboratorios.

2.10. Desventajas de los organismos cultivados en el laboratorio de bioensayos

Muchos organismos con ciclos complejos de vida o informacin insuficiente sobre su cultivo no pueden ser cultivados en el laboratorio. Por lo tanto, la variedad de organismos est ms limitada cuando se usan los que han sido criados en el laboratorio.

Los requerimientos de cultivo para organismos acuticos varan sustancialmente, an entre especies estrechamente relacionadas. Es necesario conocer el alimento ptimo, la temperatura, el ciclo de luz y el agua a fin de mantener cultivos continuos en el laboratorio. Esta informacin requiere de aos de investigacin. Aunque muchas algas, invertebrados y especies de peces se han usado como organismos para bioensayos, slo existe informacin disponible sobre algunas especies, que permite un cultivo satisfactorio de laboratorio. Falta de representatividad a las condiciones y organismos en la comunidad a ser probada.

El aspecto negativo de los organismos estndares criados en el laboratorio es que ellos no son necesariamente representativos de la comunidad acutica o de las condiciones de salud de los organismos de cada lugar. Por lo tanto, si el objetivo es estudiar un efluente especfico o la descarga a un ro o lago, entonces deben considerarse los organismos recolectados en el campo como una alternativa.

2.11. Ventajas de los Organismos Recolectados en el Campo para Bioensayos.

Hay circunstancias en las que los organismos recolectados en el campo son apropiados. Puede recolectarse el organismo directamente del campo, adems esto ocurre en poblaciones grandes, monoespecficas. Estn los organismos disponibles durante todo el ao o slo durante ciertas estaciones. Se pueden desarrollar exmenes con varias especies en la misma cmara de prueba, adems, los organismos que son compatibles, tales como caracoles, almejas, peces y plantas acuticas pueden incluirse en la misma cmara de prueba, permitiendo un estudio simultneo de efectos mltiples.

2.12. Desventajas de los Organismos Recolectados en el Campo para Bioensayos.. La alta presin y mortalidad frecuentemente estn asociadas con los procedimientos de recoleccin y transferencia. Muchos organismos pueden morir antes o durante la prueba y otros pueden ser inusualmente sensibles a sustancias txicas como resultado de la presin asociada con los procedimientos de recoleccin y transferencia. Las muertes en los controles pueden invalidar la prueba. La disponibilidad de los organismos puede estar limitada. Muchas especies no abundan durante todo el ao o tienen varios cambios en su ciclo de vida. La edad, salud y condiciones de cultivo de los organismos son desconocidas. No existe manera de obtener organismos "estandarizados" del campo y frecuentemente hasta la edad es desconocida.

En general, es preferible utilizar organismos criados en el laboratorio en vez de los recolectados en el campo porque los exmenes estandarizados requieren de un abastecimiento siempre disponible de organismos en buena salud provenientes de cultivos de condiciones conocidas y constantes. Los bioensayos hechos en el laboratorio usando organismos recolectados en el campo han sido menos satisfactorios, con muy pocas excepciones. Los organismos recolectados en el campo son ms satisfactorios cuando el laboratorio est cerca al lugar de recoleccin y el abastecimiento de agua desde all est siempre disponible.

El uso de ms de una especie, permitir que el bioensayo, sea de toxicidad aguda o crnica, una determinacin ms cuidadosa de toxicidad porque los organismos acuticos varan en sus respuestas a las sustancias txicas. Por ejemplo, los peces pueden ser mucho ms sensibles que los invertebrados a una sustancia qumica, mientras que puede suceder lo contrario con otra sustancia qumica. La tabla 3 presenta los principales grupos de organismos para bioensayos e indica su adaptabilidad al cultivo de laboratorio versus la recoleccin de campo y la cantidad de informacin disponible en los mtodos de cultivo y prueba.

Tabla 2. Adaptabilidad de los Organismos como Especies para Bioensayos.-Adaptabilidad del organismoComnmente usado como un organismo para bioensayo

Cultivo de laboratorioRecoleccin de campo

1. AlgasExcelenteMuy difcil de recolectar, cultivo puroS

2. ProtozoosExcelenteMuy difcil de recolectarMuy limitado

3. Invertebrados

a. Plantnicos

1. RotferosBuenoMuy difcil de recolectar, cultivo puroLimitado

2. CladcerosExcelenteAlta tasa de mortandad despus de la recoleccin de campoS

3. CoppodosMedianoAlta tasa de mortandad despus de la recoleccin de campoLimitado

4. CamaronesBuenoBuenoS

b. Bnticos

1. AnlidosMedianoMedianoLimitado

2. InsectosBajoMedianoS

3. MoluscosBuenoMedianoS

4. CrustceosBajoMediano

4. PecesExcelenteAlta tasa de mortandad despus de la recoleccin de campoS

Fuente: Manual de evaluacin y manejo de sustancias toxicas en aguas Superficiales,

III. MATERIALES Muestra orgnica - especies de Daphnia Magna. Solucin de Dicromato de Potasio (K2Cr2O7) de 200 ppm Tubos de ensayos de 10 mL. Goteros Pipetas Agua destilada

IV. METODOLOGA

1. Seleccionar individuos de Daphnia magna adultas, y colocarlos en 11 tubos (10x tubo) de ensayos diferentes; 10 pruebas y un 1 blanco.

2. Aadir solucin de Dicromato de Potasio a 200ppm de concentracin y agua destilada en los 10 tubos de ensayo hasta obtener soluciones de 1 -20 ml de concentracin respectivamente, segn lo indicado en la Cuadro N 01.

Cuadro N3: Concentracin de soluciones para el ensayoN TestVolumen de K2Cr2O7 (mL)Volumen de agua (mL)

Blanco020

1218

2416

3614

4812

51010

6128

7146

8164

9182

10200

3. Tomar nota de la hora de inicio, a partir del cual se observar los efectos de la toxicidad (inmovilizacin o muerte) de los individuos y determinar CL50.

PREPARACION DE DILUCIONES

V. RESULTADOS

Preparacin de la batera de tubos de ensayo, conteniendo concentraciones de dicromato de potasio (K2Cr2O7)

Seleccin de las muestras de daphnia

El control del ensayo se realiz a los siguientes intervalos de tiempos:1era lectura 1 hora2da lectura 3 horas 3era lectura 24 horas El cuadro siguiente muestra los resultados:CONC(K2Cr2O7) ml1 hora3 horas24 horasENSAYO

000010

200010

400310

622210

800010

1000010

1200010

1433310

1611110

1800010

2022410

La DL50 se obtuvo de la lectura realizada a 24 horas de exposicin

USANDO EL PROGRAMA SPEARMAN SE OBTUVO LOS SIGUIENTE RESULTADOS

Clculos del parmetro

Error IC normal de 95,0%Parmetro Estimado estndar Inferior SuperiorMedia 20,1979 2,04448 16,1908 24,2050Desv.Est. 0,481828 4,94212 0,0000000 259225818

Tabla de percentiles(Para los clculos se supone que la respuesta natural es fija)

Perc con respuesta Error IC normal de 95,0%Porcentaje natural Percentil estndar Inferior Superior 1 9,91 19,0770 9,46774 0,520539 37,6334 2 10,82 19,2083 8,12097 3,29151 35,1251 3 11,73 19,2917 7,26657 5,04943 33,5339 4 12,64 19,3543 6,62390 6,37173 32,3370 5 13,55 19,4053 6,10120 7,44721 31,3635 6 14,46 19,4487 5,65634 8,36252 30,5350 7 15,37 19,4868 5,26633 9,16498 29,8086 8 16,28 19,5209 4,91717 9,88339 29,1583 9 17,19 19,5519 4,59967 10,5367 28,5670 10 18,1 19,5804 4,30745 11,1379 28,0228 20 27,2 19,7924 2,13927 15,5995 23,9852 30 36,3 19,9452 0,603287 18,7628 21,1276 40 45,4 20,0758 0,811856 18,4846 21,6670 50 54,5 20,1979 2,04448 16,1908 24,2050 60 63,6 20,3199 3,29182 13,8681 26,7718 70 72,7 20,4505 4,62916 11,3775 29,5235 80 81,8 20,6034 6,19552 8,46039 32,7464 90 90,9 20,8154 8,36864 4,41312 37,2176 91 91,81 20,8439 8,66113 3,86838 37,8194 92 92,72 20,8749 8,97888 3,27658 38,4732 93 93,63 20,9089 9,32828 2,62585 39,1920 94 94,54 20,9470 9,71851 1,89906 39,9949 95 95,45 20,9904 10,1636 1,07014 40,9107 96 96,36 21,0414 10,6865 0,0962433 41,9866 97 97,27 21,1041 11,3294 -1,10107 43,3093 98 98,18 21,1874 12,1840 -2,69274 45,0676 99 99,09 21,3188 13,5310 -5,20148 47,8390

El resultado indica que se requiere una concentracin de 20.1979 ml de dicromato de potasio (K2Cr2O7) para la DL50

VI. CONCLUSIONES

La DL50 y CL50, estn sujetas a las concentraciones, tiempo y masa de los individuos expuesto al toxico.

En el caso del ensayo, las daphnias muestran tolerancias a bajas concentraciones del toxico utilizado.

VII. CUESTIONARIO

1. Qu significa CL50, EC50 y DL50?

CL50: Concentracin Letal (CL): Es la concentracin de txico estimada que produce la muerte de una proporcin especfica de los organismos de prueba. Se define como la concentracin letal media (CL50), que corresponde a la concertacin que mata al 50% de los organismos expuestos en un determinado periodo de tiempo. la CL50 se expresa en mg / litro DL50: LaDosisletal50%(DL50)esaquellaconcentracinde txico,quealseradministrada por cualquier va de ingreso en un periodo de tiempo definido mata el 50% de lapoblacin de insectos evaluada. Usualmente se expresa con una cantidad de qumico administrado (miligramos) por 100 gramos (o kilogramos) del peso corporal del animal EC50: La EC50 se define como la concentracin de una sustancia en un medio que se espera produzca un cierto efecto en el 50% de los organismos testeados de una poblacin bajo ciertas condiciones.

2. Qu significa partenognesis?

Lapartenognesises una forma dereproduccinbasada en el desarrollo de clulas sexuales femeninas nofecundadas, que se da con cierta frecuencia enplatelmintos,rotferos,tardgrados,crustceos,insectos,anfibiosyreptiles, ms raramente en algunospecesy, excepcionalmente, enaves. La partenognesis fue descubierta porCharles Bonnet.Jan Dzierzonfue el primero en descubrir la partenognesis de losznganosde lasabejas

3. Qu otros organismos pueden utilizarse para la determinacin de la toxicidad Aguda?

En los ensayos ectoxicolgicos pueden emplearse diferentes organismos, pueden ser estos considerados como indicadores de calidad u otros, como muestra la siguiente tabla:

Organismos para bioensayosAdaptabilidad del organismo

Cultivo de laboratorioRecoleccin de campo

1. AlgasExcelenteMuy difcil de recolectar, cultivo puro

2. ProtozoosExcelenteMuy difcil de recolectar

3. Invertebrados

5. RotferosBuenoMuy difcil de recolectar, cultivo puro

6. CladcerosExcelenteAlta tasa de mortandad despus de la recoleccin de campo

7. CoppodosMedianoAlta tasa de mortandad despus de la recoleccin de campo

8. CamaronesBuenoBueno

9. AnlidosMedianoMediano

10. InsectosBajoMediano

11. MoluscosBuenoMediano

12. CrustceosBajoMediano

13. PecesExcelenteAlta tasa de mortandad despus de la recoleccin de campo

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS Davila C.; Rincon N. Diseo de un sistema a nivel piloto para la remocin del hierro y el manganeso por debajo de la concentracin letal media (cl 50- 48) para daphnia magna. Tesis de Grado para Optar al Ttulo de Ingenieros Ambientales y Sanitarios. Bogota, 2009. Sachana M, Hargreaves AJ. Toxicological testing:in vitroandin vivomodels. En:Veterinary Toxicology: Basic and Clinical Principles(Gupta RC, ed.) Academic Press, New York, 2007.