UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE

MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES IZTACALA

BIOLOGÍA CELULAR Y BIOQUÍMICA

ACTIVIDAD EXPERIMENTAL 1

“Estructura celular.”

GRUPO – 1351

PROFESORES

GAVIRIA GONZÁLEZ LLARAÍ CAROLINA

ORTÍZ MELO MARÍA TERESA

INTEGRANTES

CASASOLA SILVA ALEXIS GIOVANNI

HUERTA LÓPEZ MARCELA BONITZÚ

OLMOS GARCÍA RICARDO ERNESTO

PÉREZ HERNÁNDEZ HÉCTOR ANTONIO

RAMÍREZ DOMÍNGUEZ LILIANA BERENICE

VILLARREAL HERNÁNDEZ VIRIDIANA

FECHA DE ENTREGA

2/SEPTIEMBRE/2015

INTRODUCCIÓN.

La invención del microscopio óptico condujo al descubrimiento de las células,

pues en 1665 Robert Hooke empleó este instrumento para examinar un

corcho; se dió cuenta que el corcho estaba constituído por un conjunto de

cámaras diminutas y las denominó “células”, (Alberts et al., 2006).

Con las observaciones continuas de diversos científicos e investigadores a lo

largo del tiempo, en 1839 el botánico Matthias Schleiden y el zoólogo

Theodor Schwann enunciaron la teoría celular, la cual tiene como principio la

idea de que todas las células vivas se forman por la división de células

preexistentes, (Jiménez, 2006).

Existen dos tipos de células en la naturaleza: las procariontes, que están

conformadas de una membrana celular, citoplasma, material genético y

ribosomas; y las eucariontes, son aquellas que tienen, además de las

estructuras anteriores, organelos membranosos y su material genético está

encapsulado en un núcleo. La identificación de las diversos estructuras

celulares ha sido gracias al avance de la microscopía y el desarrollo de la

microscopía electrónica, (Ramírez y Reyes, 2007).

El núcleo generalmente es el orgánulo más destacado de la célula

eucarionte, está rodeado por dos membranas concéntricas que forman la

envoltura nuclear y contiene moléculas de DNA. Al igual que el núcleo, las

mitocondrias tienen una doble membrana que los rodea y contienen DNA,

además éstas se reproducen por división. Por otro lado se encuentran los

cloroplastos, presentes sólo en células vegetales que, además de las dos

membranas que los rodean, presentan membranas internas apiladas que

contienen clorofila, la cual le dará pigmento a la célula.

Además del núcleo, las mitocondrias y los cloroplastos, el citoplasma

contiene muchos otros orgánulos como: el retículo endoplásmico, es un

laberinto irregular de espacios interconectados rodeados por una membrana

plegada, y encargado de la mayoría de los componentes de la membrana

celular; el aparato o complejo de Golgi, constituido por pilas de sacos

aplanados envueltos por membranas, recibe y a menudo modifica

químicamente las moléculas producidas en el retículo endoplásmico para,

posteriormente expulsarlas de la célula o hacia otras localizaciones dentro de

la misma; los lisosomas, que son orgánulos pequeños de forma irregular en

lo que ocurre la digestión celular; y los peroxisomas que son vesículas

pequeñas cubiertas de membrana que proporcionan el ambiente adecuado

para las reacciones que generan y degradan peróxido de hidrógeno, (Alberts

et al., 2006).

Las células vegetales también disponen de una vacuola, la cual realiza

hidrólisis y a medida que absorbe agua aumenta el tamaño de la célula,

permitiendo que ésta se haga más grande con una inversión mínima en

citoplasma nuevo, (Campbell y Reece, 2007).

OBJETIVOS.

● Observar, distinguir y describir diferentes tipos celulares.

● Observar algunas diferencias importantes entre las células vegetales y

animales.

● Observar y distinguir algunos organelos celulares visibles al

microscopio óptico.

● Observar los fenómenos osmóticos de plasmólisis y turgencia en

eritrocitos y en células de espinaca.

MATERIALES.

● 12 portaobjetos y 12 cubreobjetos.

● 2 agujas de disección.

● 2 pipetas Pasteur con bulbo.

● 2 microscopios ópticos.

● 3 cajas de Petri.

● 6 triángulos de vidrio.

● 8 tubos de microcentrífuga.

● Gradilla para tubos de microcentrífuga.

● 1 pinza de disección.

● 1 vaso de precipitados de 50 mL.

● 1 paño para limpiar cristales.

● 1 gotero con aceite de inmersión.

● Tubos capilares.

● Alcohol al 70%

● Hojas frescas de una planta suculenta.

● Algodón.

● Espinaca.

● Piezas frescas de cebolla blanca, morada y cambray

REACTIVOS.

● Medio líquido Sabouraud.

● Azul de tripano al 0.5%

● Rojo neutro al 0.1%

● Cultivo de levadura en medio líquido.

● Colorante Wright al 0.2% en metanol.

● Cloruro de sodio al 3%

● Rojo neutro al 1%

● Azul de metileno

● NaCl al 0.6%, 0.9% y 1.2%

METODOLOGÍA.

RESULTADOS.

Las siguientes imágenes muestran algunos de los organelos ubicados a partir

de tinciones y empleando el microscopio óptico , observando células

vegetales, animales y procariotas.

Figura 1. Levadura de pan (Saccharomyces cerevisiae) teñida

con rojo neutro al 1% (100X).

c) b)

Figura 2. Células epidérmicas de cebolla teñidas con azul de tripano 0.5%. a) 10X, b) 40X.

a) b) c)

Figura 3. Muestra de raspado bucal (cara interna de la mejilla) fijada con colorante de

Wright. a) 10X, b) 40X, c) 100X.

a) b)

Fig 4. Estomas de hojas de planta suculenta. a) 40X, b) 10X.

a) b b)

Figura 5. tejido de jitomate. a) 10X, b) 40X.

a) b)

Figura 6. Células epidérmicas de cebolla morada. a) 10X, b) 40X.

a) b)

Figura 7. Células epidérmicas de la zona verde de cebolla cambray. a) 10X, b) 40X.

Figura 8. Eritrocitos en solución de NaCl al 0.6% (100X).

a) b) c)

Figura 9. Hojas de espinaca en soluciones de NaCl. a) 0.6%, 10X, b) 0.9%, 40X, c) 1.2%,

10X.

a) b)

Figura 10. Muestra de yogurt fijada teñida con tinta china. a) 40X, b) 100X.

DISCUSIÓN.

En el  núcleo están contenidos la mayoría de los genes de la célula eucariota, posee un diámetro aproximado de 5 microm. Este organelo está limitado por una doble membrana que forma la envoltura nuclear, la parte externa continúa con el retículo endoplásmico rugoso y la interna está formada por una red de filamentos, (Campbell, et. al., 2007). Al ser observado en microscopio, se presenta como un sitio circular  oscuro, debido a que es un área más densa por su alto contenido en proteínas y el súper empaquetamiento del DNA; conforme a esto, en las figura 2 se aprecia una región en el interior de la célula que concuerda con la descripción antes planteada  por lo que se infiere que se trata del núcleo. Además el azul tripano (azul diamina, azul niágara, azul vital) es un colorante derivado de la toluidina que posee la capacidad de teñir a tejidos y células muertas (Ehrlich, 1904), al aplicarlo en la epidermis de la cebolla las células se tornan azules, como se puede ver en la Fig 2 a) (10x) y b) (40x, donde también se puede

observar ligeramente el núcleo,  por lo que inferimos que estas células se encontraban muertas.

Durante la tinción de células de la mucosa bucal, se pudo constatar que, a diferencia de las células vegetales, las células animales no tienen pared celular; si bien se pueden distinguir los límites de las células, no hay una línea de separación como en el caso de tejidos vegetales, tal como se ilustra en la figura 3 donde claramente se observa el citoplasma, más teñido que su alrededor lo que nos indica una limitación y el núcleo también claramente visible de un color más pronunciado.El colorante Wright, usado durante la muestra en la figura 3 está compuesto por colorantes ácidos (eosina) y colorantes básicos (azul y violeta de metileno) (Dox et. al. 1983) por lo que el núcleo de la célula que posee un carácter ácido, es teñido de un color violeta debido a  la interacción de los colorantes básicos, en especial el violeta de metilo, que posee la capacidad de unirse directamente con el ADN.

Como se puede observar en la figura 4 a) y b) las células estomáticas tienen forma arriñonada, un núcleo grande bien definido y cloroplastos pequeños, estas células tienen paredes ventrales gruesas adyacentes al poro y paredes dorsales delgadas lo cual favorece la apertura del estoma  durante intercambio gaseoso (IICA, 1998).

La imagen 5 que hace referencia a la muestra de jitomate,  la cual no se pudo observar detalladamente debido a que la muestra era de un grosor no idóneo por lo que sólo se puede observar algunos puntos rojos fluctuando sobre el medio acuoso, estos, se infiere son los cromóforos. Los cromóforos son los responsables de la coloración de gran número de alimentos vegetales, la principal función de estos es captar la energía que luego es transferida a las clorofilas para ser utilizada en la fotosíntesis (Meléndez-Martínez et. al., 2004)

Con respecto a la figura 6 a) y b) sólo se pueden discernir las paredes celulares debido a que es lo único que no está teñido por las antocianinas (pigmentos hidrosolubles que se hallan en las vacuolas de las células vegetales y que otorgan el color rojo, púrpura o azul a las hojas, flores y frutos) (Taiz y Zeiger,2006).

La pared celular en los tejidos de células vegetales que se analizaron durante la práctica son fácilmente visibles en todos los casos, debido a que su ancho es mayor que el de la membrana plasmática (va de 0.1 micrómetros hasta varios micrómetros). Esto nos permite determinar y diferenciar los límites de las células así como observar su acomodo (Campbell, et. al., 2007).Los cloroplastos son organelos membranosos encargados de la fotosíntesis, dicho proceso se lleva a cabo debido a la intervención de diversos pigmentos como la clorofila presentes en este organelo, por lo que se puede apreciar diversas coloraciones en estos pigmentos sin que se requiera una tinción, tal

como se muestra en las Figuras 7 a)  en el segmento de células verdes de rabo de cebolla cambray (De Erice, et. al., 2012).Durante las pruebas osmóticas realizadas tanto en eritrocitos como en células de espinaca, figuras 8 y 9. Se pudo distinguir ligeros cambios morfológicos en ambos tipos de células al alterar la cantidad de soluto (NaCl) esto se debe a la permeabilidad selectiva de la membrana desde una zona de alta concentración de solvente hacia una zona de baja concentración (Tortora, et. al., 2007).  De esta forma las células al estar expuestas a la solución de NaCl al .06% es decir una solución hipotónica; el agua se desplazó hacia el interior de la célula provocando ligero aumento en el volumen de la célula, sin embargo ya que la pared celular es una estructura relativamente rígida en las  células vegetales estas no sufrieron lisis (figura 8), no obstante, la entrada de agua está limitada por la presión ejercida por la pared celular (Campbell,2008).  De manera opuesta, las células al ser expuestas a la solución hipotónica de NaCl 1.2% el agua se desplazó del citoplasma hacia el exterior resultando en un proceso denominado plasmólisis., finalmente en la solución isotónica de NaCl al 9% la proporción de soluto tanto en el interior como en el exterior se encontraban en equilibrio por lo que las células no presentaron cambios morfológicos (Tortora, et. al., 2007).

En la muestra de la figura  10  se   utilizó   tinción negativa, en la cual la célula se deja sin teñir pero se colorea el medio que las rodea, por lo que se ve es el perfil de las células. La sustancia que se usa para la tinción negativa es un material opaco que no tiene afinidad por los constituyentes celulares y que simplemente rodea a la célula, como es el caso de la tinta china que permite ver células levaduriformes capsuladas debido a que los polisacáridos capsulares rechazan la tinta china y la cápsula aparece como un halo claro alrededor de los microorganismos; aunque no es precisamente el caso debido a que lo que observamos es la célula totalmente coloreada y el medio sin ninguna tinción( Valdéz, 2012).

CONCLUSIONES.

Se distinguió, observó y describió a los diferentes tipos celulares.

Se identificaron algunas diferencias importantes entre la célula vegetal

y animal.

Se ubicaron algunos organelos celulares visibles al microscopio.

Se observaron los fenómenos osmóticos de plasmólisis y turgencia en

eritrocitos y en células de espinaca.

REFERENCIAS.

● Alberts, B., Dennis, B., Hopkin, K., Jonhson, A., Lewis, J., Raff, M.,

Roberts, K. y Walter, P. 2006. Introducción a la Biología Celular. 2° ed.

Editorial Medica Panamericana. México. 6-24 pp.

● Campbell, N. A. y Reece, B. J. 2007. Biología. 7° ed. Editorial Medica

Panamericana. España. 107-108 pp.

● Campbell, N. A. y Reece, B. J.2008.Biology, 8th Edition. California, The

Benjamin / Cummings Publishing Company, Inc.

● De Erice, E. y González, A. 2012. Biología: La ciencia de la vida.

McGrawHill. México. 98-107 pp.

● IICA. 1998.Curso regional sobre nutrición mineral del café. San José,

Costa Rica.

● Jiménez, L. F. 2006. Conocimientos fundamentales de Biología.

Universidad Nacional Autónoma de México. México. 32-37 pp.

● Meléndez-Martínez A., Vicario I. y Heredia F., 2004. Importancia

nutricional de los pigmentos caroteniodes. Archivos latinoamericanos

de nutrición. Vol. 54 (2). 149-154 pp

● Melloni, B., Dox, Eisner,. 1983. Diccionario Medico Ilustrado de

Melloni. Editorial REVERTE. España. 116-117 pp.

● Ramírez, L. J. E. y Reyes L. A. 2007.Manual de prácticas de biología.

Editorial Pretice Hall. Chile. 23 pp.

● Taiz, L.y Zeinger, E. 2006. Fisiología vegetal. Universidad de Jasume.

Pp. 501-505.

● Tortora, G., Funke, B., Case, C., 2007. Introducción a la microbiología,

9na. Médica panamericana. Buenos Aires Argentina. 94-95p.p.

● Valdéz, Daniel. 2012 recuperado de

www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioTinciones.htm el 1

septiembre de 2015,