UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE QUERÉTAROFACULTAD DE CIENCIAS NATURALES

LICENCIATURA EN MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIALABORATORIO DE FISIOLOGÍA ANIMAL

REPORTE DE PRÁCTICA:

INTERACCIÓN DE SISTEMAS

EQUIPO 7

Puga Castro EmmanuelQuintanar Barrios MargaritaRomán Félix LucíaTovar Macías RafaelOlmos Merk J. Daniel

MATERIA: Fisiología Animal IIPERIODO: 2do SemestreFECHA: 07/Noviembre/2014

El objetivo de ésta práctica ha sido explicar a los compañeros la manera correcta de sostener y de sujetar a las ratas y a los ratones, esto se hizo mediante una explicación y una

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RESÚMEN

presentación de power point, donde se le explico a los compañeros la importancia del uso de los animales en los laboratorios, se les explico porque es tan importante que se estresen lo menos posible, y por tanto, la importancia de la correcta sujeción, la forma en la que los animales deben de estar confinados, desde la dieta, el espacio y hasta el fotoperiodo. Posteriormente, se mostró una breve película, donde se explicaba de manera gráfica y verbal la forma de sujetara a los animales.

Seguido de esto, se le proporciono a cada equipo una rata y un ratón, no sin antes, escuchar al Dr. MVZ Martín hablarnos sobre la bioética para con estos animales, los cuales fueron sometidos a distintos procedimientos. A todos se les suministraron “medicamentos” que en realidad era agua estéril, con la finalidad de conocer simplemente la forma de proceder para hacerlo efectivamente.

Cada equipo, con el material que ellos mismos llevaban, y con algún otro que el Doctor Martín había traído para prestarnos, cada equipo a su rata y a su ratón le aplico por vía oral con la sonda gástrica, vía subcutánea con una aguja de insulina, vía intramuscular, agua estéril y vía intraperitoneal se les aplicó un Pentobarbital sódico en cantidad suficiente para sedarles, y posteriormente, con el animal sedado, se extrajo sangre con capilares del ojo, se extrajo sangre de la vena caudal, sangre por vía intracardiaca, y finalmente, se inyecto una dosis más de Pentobarbital sódico en el miocardio para producir la muerte indolora del animal.

Como parte del manejo de los animales del laboratorio, de los cadáveres en este punto de la práctica, y tal como lo establece la NOM-062-ZOO, se dispuso de los cadáveres en las bolsas o contenedores correspondientes. Marcadas con un color particular, así mismo las cajas donde se colocaron los deshechos punzocortantes, como las agujas, que en este caso fue lo único que se utilizó.

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CONTENIDO

PÁGINA

RESÚMENÍNDICE DE FIGURASÍNDICE DE CUADROSÍNDICEINTRODUCCIÓN

- Objetivo56

REVISIÓN DE LA LITERATURA

1. PRINCIPIOS BÁSICOS PARA EL MANEJO DE ANIMALES DE LABORATORIO

1.1. ÉTICA Y ALTERNATIVAS1.1.1. Principios éticos internacionales para investigación biomédica

con animales.1.1.2. Alternativas ( El principio de las tres R’s)2. PRINCIPIOS PARA EL MANEJO DE ANIMALES EN EL

LABORATORIO3. RECOMENDACIONES TÉCNICAS EN LA MANIPULACIÓN DE LOS

ANIMALES DE LABORATORIO4. MÉTODOS DE SUJECIÓN DE LOS ANIMALES EN EL

LABORATORIO5. PROCEDIMIENTOS DE ANESTESIA6. VÍAS DE ADMINISTRACIÓN DE ANESTÉSICOS EN LOS

ANIMALES DE LABORATORIO7. EUTANASIA

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7889

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METODOLOGÍA- Material- Procedimiento

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RESULTADOS 17DISCUSIÓN 18CONCLUSIÓN 19BIBLIOGRAFÍA 20ANEXOS- NOM-062-ZOO Uso de los Animales de Laboratorio

FIGURA PÁGINAFIGURA 1 Métodos apropiados para sujetar a un ratón 11

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ÍNDICE

ÍNDICE DE FIGURAS

FIGURA 2 Métodos apropiados para sujetar a un ratón 12FIGURA 3 Métodos apropiados para sujetar a una rata 13FIGURA 4 Vías de administración de sustancias y toma de muestras 14

CUADRO PÁGINA

CUADRO 1 Anestésicos recomendados para animales con fines de experimentación y enseñanza dependiendo del taxón

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CUADRO 2 Productos químicos utilizados en eutanasia por sobredosis 15CUADRO 3 Productos químicos utilizados en eutanasia por sobredosis 15

ÍNDICE DE CUADROS

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US

O DE ANIMALES DE LABORATORIO

La docencia e investigación biológica y biomédica, y el desarrollo, producción y control de medicamentos, alimentos y otros insumos importantes para la salud humana y animal, requieren la utilización de animales de laboratorio (Mrad y Cardozo, 1999).

Siempre que se utilizan animales en investigación se tiene que considerar que un objetivo, tan importante como el de obtener resultados experimentales será el de minimizar cualquier dolor o angustia que estos puedan sufrir. El refinamiento de los procedimientos para conseguir que sean más humanos debe ser parte integrante de toda investigación científica. Esto es importante tanto desde el punto de vista de la preocupación humanitaria como para cumplir con los requisitos de la legislación sobre animales de investigación.

El empleo de animales en la investigación y enseñanza involucra responsabilidad de quienes los utilizan; por tanto, es un deber evitar la crueldad y procurar su bienestar.

El lugar destinado a la cría y control de los animales de laboratorio utilizados como reactivos biológicos en protocolos experimentales es llamado bioterio. El bioterio debe contar con un ambiente estandarizado acorde a las necesidades de las especies allí alojadas, garantizando el bienestar de los animales y la seguridad del personal que desempeña labores dentro de las instalaciones. Todos estos aspectos son fundamentales para asegurar la reproducibilidad y confiabilidad de los resultados obtenidos en los experimentos.

Se deberá contar con la preparación adecuada y conocimientos actualizados para aplicar el principio de las 3R en el manejo de animales en el laboratorio:

• Reemplazar (utilización de alternativas que produzcan los mismos resultados, tales como experimentos in vitro, cultivos celulares, modelos inanimados, modelos por computadora)

• Reducir (utilizar un número mínimo de animales)

• Refinar (utilizar técnicas adecuadas para evitar al máximo el sufrimiento)

La Norma Oficial Mexicana NOM-062-ZOO-1999 marca claramente cuáles son las características de trato en los animales de laboratorio y las especificaciones técnicas para la producción, cuidado y el uso de animales.

El objetivo y campo de aplicación de la NOM-062-ZOO-1999 es fijar las bases para el diagnóstico, prevención, control y erradicación de las enfermedades y plagas que afectan a los animales; procurar el bienestar animal y fomentar la certificación en establecimientos

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INTRODUCCIÓN

dedicados al sacrificio de animales y procesamiento de bienes de origen animal para consumo humano.

Los aspectos que abarca son:

• Alimentación y provisión de agua

• Instalaciones

• Requerimiento mínimo de espacio

• Manejo

• Identificación

Objetivo:

- Conocer el propósito del uso de animales de laboratorio.- Aprender a manejar los animales de laboratorio (ratón y rata) adecuadamente.- Conocer la forma adecuada de la administración y toma de muestras.

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1. PRINCIPIOS BÁSICOS PARA EL MANEJO DE ANIMALES DE LABORATORIO

La investigación en el área biomédica demanda gran cantidad de animales de laboratorio con características biológicas específicas. Para lograr el cumplimiento de esta tarea, el MVZ especialista en animales de laboratorio debe diseñar y operar métodos reproductivos acordes con las necesidades propias de la comunidad investigadora.

El diseño de los experimentos que utilizan animales de laboratorio exige la definición detallada de las características genéticas y ambientales. Solo así, utilizando animales definidos y estandarizados se obtendrán resultados reproducibles.

Todo lo que suceda desde el nacimiento hasta la muerte del animal debe ser preocupación del investigador, pues a todo lo largo de este intervalo pueden introducirse variables que afecten adversamente los resultados experimentales.

En nuestro medio la Ciencia y la Tecnología de animales de laboratorio aún está en estado embrionario. Existe un número muy limitado de profesionales y técnicos especializados en los diferentes aspectos de la cría y el mantenimiento de los animales. Los usuarios, no están, en la mayoría de los casos, preparados para definir la calidad del animal que necesitan y generalmente desconocen la historia previa de los que usan y las diferencias de los bioterios que los originaron.

Las investigaciones básicas y aplicadas y los trabajos de manufactura y control de medicamentos y vacunas que utilizan animales deberían ajustarse a las normas internacionales de Buenas Prácticas de Manufactura (GMP) y de Laboratorio (GLP). Además, las revistas científicas internacionales exigen que los investigadores firmen un documento donde se garantice que las experiencias han sido efectuadas respetando las normas internacionales existentes.

1.1. ÉTICA Y ALTERNATIVAS

El tema ético compete a todos los individuos pero, con mayor razón, a los involucrados en la investigación biológica, desde el técnico auxiliar que esté a cargo de los animales, hasta el directivo de la institución productora o usuaria de los mismos. La primera condición del científico que trabaja con

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REVISIÓN DE LA LITERATURA

animales de laboratorio es el respeto por la vida, el dolor o el sufrimiento a que éstos pueden ser sometidos en los trabajos bajo su responsabilidad.

Siempre que se utilizan animales en investigación se tiene que considerar que un objetivo, tan importante como el de obtener resultados experimentales será el de minimizar cualquier dolor o angustia que estos puedan sufrir. El refinamiento de los procedimientos para conseguir que sean más humanos debe ser parte integrante de toda investigación científica. Esto es importante tanto desde el punto de vista de la preocupación humanitaria como para cumplir con los requisitos de la legislación sobre animales de investigación.

1.1.1.Principios éticos internacionales para investigación biomédica con animales.

El avance del conocimiento, la protección de la salud y/o el bienestar de los hombres y los animales requiere de experimentación con animales vivos.

Siempre que sea apropiado, usar métodos alternativos. Realizar experimentación en animales después de estudiar su

importancia para la salud humana y animal y para el avance del conocimiento biológico.

Seleccionar animales de especie y calidad apropiadas y usar el mínimo número requerido para obtener resultados científicamente válidos.

Tratar a los animales como especies sensibles y considerar imperativo ético el cuidado y uso adecuado, evitando o minimizando la incomodidad (disconfort), angustia y dolor.

Presumir siempre que los procedimientos dolorosos para el hombre también causarán dolor en otras especies vertebradas.

Procedimientos que pueden causar dolor o angustia momentánea o mínima deben ser realizados con sedación, analgesia o anestesia. No realizar procedimientos quirúrgicos o dolorosos en animales no anestesiados o paralizados con agentes químicos.

Cuando se requiere apartarse del principio anterior la decisión debe ser tomada por un Comité convenientemente constituido. Estas excepciones no deben ser hechas solo para demostración o enseñanza.

Al final de la experiencia, o en el momento apropiado, los animales que puedan sufrir dolor crónico o cerebro, angustia, invalidez, que no puedan ser aliviados, deben ser sacrificados sin dolor.

Los animales mantenidos con fines biomédicos, deben tener las mejores condiciones posibles, de preferencia con supervisión de veterinarios con experiencia en ciencia de animales de laboratorio.

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El director del establecimiento es responsable por la calificación de los investigadores y demás personal, para realizar los trabajos requeridos, debiendo otorgar adecuadas oportunidades de entrenamiento.

1.1.2.Alternativas ( El principio de las tres R’s)

Se considera como alternativa cualquier técnica que Remplace el uso de animales, que Reduzca su número en un trabajo particular o que Refine un método existente para disminuir el dolor o malestar de los animales (Remplazo, Reducción y Refinamiento).

Entre las alternativas tendientes al Remplazo se pueden mencionar:

- Sustitución de estudios en animales vivos por invertebrados, embriones de vertebrados o microorganismo.

- Trabajos con órganos o humores aislados de animales.- Técnicas in vitro utilizando cultivo de órganos, tejidos o células.- Sistemas fisicoquímicos mimetizantes de funciones biológicas.- Simulación de procesos fisiológicos y modelos matemáticos de relación

estructura-actividad basados en las propiedades fisicoquímicas de principios activos utilizando computadores.

Entre las alternativas tendientes a la Reducción se pueden mencionar:

- Ajuste de la calidad genética, sanitaria y ambiental de los animales para lograr una menor dispersión de los datos y como consecuencia la disminución de los animales necesarios para la significación estadística de los resultados. Simultáneamente la utilización de técnicas de diseño experimental sofisticadas para la misma finalidad (Pérez y col, 2001).

- Planificación de las experiencias para compartir los mismos animales.- Establecimiento de banco de datos, facilitación del acceso a la literatura

especializada y estímulo a la publicación de los resultados negativos con la finalidad de evitar la repetición de experimentos.

Entre las alternativas tendientes al Refinamiento se pueden mencionar:

- Perfeccionamiento de métodos para detectar dolor.- Utilización de técnicas no invasivas, antropométricas o telemétricas.- Empleo de análisis radiológicos para detectar tumores o deterioro

orgánico incipiente sin esperar sintomatología aparente. Esto permitirá anticipar la eutanasia evitando así el padecimiento prolongado del animal.

- Uso de analgésicos, tranquilizantes o anestésicos cuando las circunstancias lo permitan.

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2. PRINCIPIOS PARA EL MANEJO DE ANIMALES EN EL LABORATORIO

En el diseño de una investigación o actividad de enseñanza que involucra el trabajo con cualquier especie animal, uno de los principales aspectos a considerar es su manejo con apego a normas éticas.

Los alumnos deberán contar con el conocimiento suficiente que les permita aprovechar al máximo la experiencia, y deberán recibir instrucción previa sobre el adecuado manejo y las técnicas a desarrollar (anestesia, administración de fármacos, toma de muestras, cirugía, etc.)

El animal en estudio deberá satisfacer ampliamente los objetivos y requerimientos de práctica.

Los animales utilizados para experimentación deberán proceder preferentemente de unidades especiales de reproducción de animales de laboratorio.

Los animales de origen desconocido no deben ser utilizados, excepción hecha de las especies silvestres que sean colectadas bajo su correspondiente autorización de la SEMARNAT o demás dependencias que lo regulen.

La experimentación con especies amenazadas de extinción solo es justificable si contribuye a la preservación de las mismas. Además deberán estar bajo la autorización de un protocolo revisado y calificado previamente por las autoridades correspondientes.

Los animales producidos, alojados o en experimentación deberán recibir el cuidado, manejo y condiciones ambientales adecuadas (alimento y agua suficiente y espacio ventilado), así como atención médica veterinaria en todo momento.

Los procedimientos deben ser compatibles con los propósitos del estudio, a prueba de fallas, causar un impacto ambiental mínimo y realizarse en un área apartada de los cuartos de animales.

De acuerdo al principio de las 3R, antes que utilizar animales, cuando la práctica así lo permita, el profesor deberá considerar la posibilidad de utilizar otras opciones.

De acuerdo al mismo principio, el número de animales utilizados para una práctica debe ser el estrictamente necesario para dar una respuesta clara a las interrogantes planteadas; especialmente cuando el procedimiento pueda causar sufrimiento o dolor.

Los procedimientos quirúrgicos, o los que ocasionen lesiones o dolor, deberán ser conducidos con la supervisión directa de personal calificado.

Cuando un animal se encuentre en un estado de tensión severa o sujeto a dolor que no puede ser evitado, aliviado o eliminado con medicamentos u otros métodos aceptables, se

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deben tomar medidas para limitar la intensidad y duración del procedimiento, y si es necesario, practicar inmediatamente la eutanasia con el método más apropiado y realizada por una persona debidamente capacitada.

Como regla general, el mismo animal no debe ser motivo de prácticas sucesivas a menos que la naturaleza de la investigación así lo requiera.

Cuando un animal no sea utilizado, se deberá considerar otra alternativa distinta a la eutanasia. Cuando se trate de animales de laboratorio, deberán reintegrarse a los bioterios o ser donados a otras personas que puedan cuidar de ellos. Cuando se trate de animales silvestres, deberán ser evaluados para determinar si son viables para el retorno a su medio ambiente natural.

Ningún animal deberá desecharse hasta existir seguridad de que ha muerto. Una vez terminada la actividad, todo el material, equipo e instrumental utilizado que haya estado en contacto con los animales deberá someterse a un procedimiento de esterilización.

Los cadáveres de animales sacrificados deberán disponerse de acuerdo a las medidas de seguridad para agentes biológicos (NOM-087-ECOL-1995). Los materiales de desecho, cadáveres o partes de los animales deberán manejarse de acuerdo al procedimiento de Manejo de residuos peligrosos biológico-infecciosos conforme la norma NOM-087-ECOL-SSA1-2002. Aun cuando la conciencia actual tiende a evitar el sufrimiento animal en todos los ámbitos de la vida, a veces es necesario utilizar especímenes para estudios. Sin embargo, incluso en estos casos, la conciencia ética en el trato a los seres vivos tiene que prevalecer.

La Norma Oficial Mexicana NOM-062-ZOO-1999 marca claramente cuáles son estas características de trato en los animales de laboratorio:

Sólo se usarán animales vivos en caso de que no haya otros recursos (simuladores digitales, maniquíes, animales muertos naturalmente, p. ej.) para realizar el estudio que interesa.

Se tratará de utilizar el menor número de animales posible. Deben utilizarse técnicas adecuadas para que en el manejo de los animales de

prueba se evite al máximo el sufrimiento de los mismos, lo cual incluye la debida preparación de quienes van a utilizarlos.

En general, aunque no lo diga la norma, es relevante que sólo se utilizarán animales vivos en las condiciones anteriores y siempre y sólo si los estudios de que se trate tienen una expectativa realista de mejorar las condiciones de vida de los humanos o los mismos animales.

3. RECOMENDACIONES TÉCNICAS EN LA MANIPULACIÓN DE LOS ANIMALES DE LABORATORIO

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El manejo de los animales debe hacerse utilizando las técnicas de sujeción recomendadas para cada animal en particular, con gentileza, firmeza y respeto por el animal, para no causarles fracturas y evitar el sufrimiento.

4. MÉTODOS DE SUJECIÓN DE LOS ANIMALES EN EL LABORATORIO

El manejo debe hacerse con gentileza, firmeza y respeto por el animal. Para transferir por ejemplo un ratón de una jaula a otra debe tomarse de la base de la cola, usando guantes. (Figura 1)

FIGURA 1. Métodos apropiados para sujetar a un ratón

RATÓN

Para su manejo hay que considerar que es un animal muy sensitivo, nervioso y rápido. Para sacarlo de su jaula hay que introducir la mano y tomarlo de la cola o colocar los dedos por debajo de su cuerpo para que suba a la palma de la mano. Posteriormente para sujetarlo, se pone al animal en una superficie rugosa para permitir que se estire con sus patas superiores, se levanta de la cola y se toma la mayor cantidad de piel de la nuca con los dedos índice y pulgar, sosteniendo la cola con el dedo meñique, apoyado en la palma de la mano, sujeto de esta manera se le puede aplicar cualquier tipo de administración. (Figura 2)

FIGURA 2. Métodos apropiados para sujetar a un ratón

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RATA

Es un animal dócil y menos nervioso el macho que la hembra, para extraerlo de la jaula, se debe abrir previamente la rejilla, dejar que los animales tomen confianza y posteriormente se realiza una sujeción de todo el cuerpo, con los 5 dedos, en forma gentil. (Figura 3)

FIGURA 3. Métodos apropiados para sujetar a una rata

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5. PROCEDIMIENTOS DE ANESTESIA

Los anestésicos utilizados en los animales sirven para provocarles un estado de inconsciencia con ello se evita su sufrimiento y se puede realizar su manejo adecuado. Éstos fármacos varían de acuerdo los distintos grupos taxonómicos, se han probado algunos anestésicos específicos, de los cuales se recomiendan (American Veterinary Medical Associaton, 2001). CUADRO 1. Anestésicos recomendados para animales con fines de experimentación y enseñanza dependiendo del taxón (Olivares, 1996)

6. VÍAS DE ADMINISTRACIÓN DE ANESTÉSICOS EN LOS ANIMALES DE LABORATORIO

En las técnicas experimentales el refinamiento es importante, por lo que se debe considerar la analgesia y anestesia, la administración de fluidos y sustancias; y en su caso, la eutanasia, utilizando procedimientos y métodos confiables, que no produzcan pánico en el animal y seguro para el personal involucrado.

El analgésico y el anestésico deberán seleccionarse para satisfacer los requerimientos clínicos y éticos, sin comprometer aspectos científicos del protocolo.

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Las vías más comunes para la administración de substancias son: oral, subcutánea, intravenosa, intraperitoneal e intramuscular como se muestra en las imágenes.

FIGURA 4. Vías de administración de sustancias y toma de muestras

Intramuscular: Se realiza en los miembros posteriores, previa sujeción del ratón o rata, introduciendo la aguja en forma paralela al fémur. Las agujas de elección son la de calibre 25 o 27

Intraperitoneal: Consiste en aplicar por vía abdominal el medicamento o inóculo, para lo cual la cavidad abdominal se divide imaginariamente en cuatro secciones, aplicándose la inyección en cualquiera de las dos regiones posteriores, inclinando al animal hacia el cráneo e introduciendo la aguja en un ángulo de 35º aproximadamente para no tocar las vísceras y causar una peritonitis mortal

Subcutánea: Se jala la piel del dorso o abdomen del animal y se introduce la aguja para realizar la administración

Intravenosa: Se dilatan las venas de la cola (son tres) con xilol o un poco de agua caliente. Se localiza una de estas venas y se introduce la aguja. Para esta vía se puede uno auxiliar de contenedores mecánicos, los cuales permiten una buena sujeción y permiten trabajar ampliamente con la cola del animal.

Oral/ Esofágica: Se mantiene al animal en forma vertical, sujetando todo el cuerpo, se pone la sonda en el hocico y con movimientos suaves y firmes se introduce la sonda, viendo el movimiento de deglución por parte del animal (Se puede comprobar el paso de la sonda al sentirlo con el dedo índice de la mano que está sujetando al animal). Se le puede

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administrar el volumen requerido para cada especie, posteriormente, se extrae la sonda con un movimiento firme y suave

7. EUTANASIA

La eutanasia es el acto de matar animales con métodos que induzcan una inconsciencia rápida y muerte con mínimo dolor y estrés. Debe seleccionarse el método de eutanasia más adecuado a la especie en estudio, generalmente se prefieren agentes químicos que físicos; un método que provoque la rápida pérdida de la consciencia, por definición, una muerte sin dolor. (American Veterinary Medical Associaton, 2001).

CUADRO 2. Productos químicos utilizados en eutanasia por sobredosis (Olivares, 1996)

CUADRO 3. Productos químicos utilizados en eutanasia por sobredosis (American Veterinary Medical Association, 2001).

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METODOLOGÍA

Procedimiento:

1.

Cada equipo utilizará una rata y un ratón sujetándolos de forma adecuada.2. A cada uno se le aplicará agua estéril vía: oral (aguja de alimentación),

intramuscular y subcutánea.3. Se anestesiarán vía intraperitoneal con Pentobarbital sódico (Ratón 1 ui y Rata (2

ui) con la jeringa de insulina.4. Una vez anestesiados extraer muestras de sangre vía ocular (utilizar tubo capilar) y

vía intravenosa en las venas de la cola. También pueden hacerlo vía intracardiaca. 5. Una vez terminado con el manejo, sujeción, aplicación de inyecciones y extracción

de sangre se procede a la eutanasia de los ejemplares, aplicando una sobredosis de Pentobarbital sódico vía intraperitoneal.

6. Colocar desechos punzocortantes en bote rojo7. Colocar jeringas, guantes, algodón, etc. en bolsa roja.

8. Colocar cuerpos de ratas y ratones en bolsa amarilla.

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MATERIAL SUSTANCIAS1. 10 Ratas2. 10 Ratones3. Jeringa 5 ml4. Jeringa 3 ml5. Jeringa de insulina6. Franela7. Tubos capilares8. Aguja de alimentación para roedor9. Sanitas10. Alcohol 11. Platina12. Algodón13. Bolsa amarilla14. Bolsa roja15. Bote rojo para punzocortantes

1. Agua estéril 2. Pentobarbital sódico 3. Agua

RESULTADOS

El constante manejo y sujeción de las ratas y ratones provocó estrés en los animales por lo tanto se les dificultó a los alumnos lograr agarrarlos adecuadamente, sin embargo, se contó con el apoyo de profesionales, quienes ayudaron a agilizar su manejo.

Una vez logrado el manejo y sujeción de éstos se prosiguió a la aplicación de inyecciones de agua destilada vía intramuscular, subcutánea y oral obteniendo buenos resultados, la mayoría de los alumnos tuvieron dificultades con la administración oral.

Se prosiguió anestesiando a los animales vía intraperitoneal, 2 equipos de 10 aplicaron sobredosis en sus ratas o ratones provocando su muerte antes de lo planeado, aún así lograron sacar sus muestras de sangre.

Ya anestesiado el animal se extrajeron muestras de sangre vía intravenosa, ocular e intracardiaca. Uno de los ratones murió al extraerle sangre vía intracardiaca, varios quedaron ciegos al extraer vía ocular y la mayoría no logró sacar sangre vía intravenosa.

Para terminar la práctica se realizó la eutanasia aplicando sobredosis de Pentobarbital

sódico.

El manejo de los ratones no fue adecuado ya que se les estresó demasiado, sin embargo, las ratas recibieron un mejor manejo.

La administración vía oral fue muy estresante para las ratas y ratones, los alumnos tuvieron dificultad al realizar ésta práctica.

La aplicación del Pentobarbital para anestesiar en su mayoría fue correcta, pero otros alumnos no midieron bien sus dosis provocando la muerte de los ratones o ratas antes de la toma de muestras.

Para la extracción de sangre vía intravenosa también presentaron dificultad; y vía ocular todos los equipos lo lograron pero no lo hicieron de forma correcta ya que muchos ratones

quedaron ciegos, una de las razones fue que no estaban bien anestesiados.

El uso de animales en laboratorio siempre debe estar justificado con un fin de enseñanza científico, aunque en muchos países es un método de enseñanza obsoleto. En

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DISCUSIÓN

CONCLUSIÓN

nuestro país lo seguimos utilizando y es importante conocer las normas que rigen su uso, el cuidado que debemos tener con los animales, los métodos manipulación, sacrificio, etc.

Es obligación de quien trabaja con animales con fines educativos darles un trato digno, desde el inicio de su vida y mantenerlos en condiciones de cautiverio adecuadas, hasta el momento del sacrificio. Todo aquel que trate con animales de laboratorio para fines educativos debe conocer la norma oficial que rige su uso NOM-062-ZOO-1999. Los animales más comunes en el bioterio son ratas y ratones, así que es importante que el alumno sepa el cuidado para este tipo de animales, debe saber cómo se alimentan, las maneras adecuadas para manipularlos y como se deben sacrificar de la manera más ética posible causando el menor dolor y estrés al animal. El estudiante deberá tener identificado el objeto de estudio para el cual es necesario utilizar al animal, con el fin de disminuir el tiempo de cautiverio posterior a la práctica. Cualquier persona que haya de experimentar con animales deberá tener un conocimiento previo del animal con el que trabajará.

LIBROS

- Baker, H., Rusell, J. and Weisbroth, S. 1979. The laboratory rat. Biology and diseases. American college of laboratory animal medicine series. Vol 1. pp. 154-166.

- Mrad de Osorio, A. y Cardozo de Martínez, C. 1999. Programa global para la infraestructura de la investigación biológica y biomédica en manejo de animales de laboratorio. Cartilla: Principios básicos para el manejo de animales de laboratorio.

- Olivares, 1999 Manual para el manejo de animales de laboratorio.- Pérez, A., Rodríguez, N., Gil, J y Ramírez, G. 2001. Tamaño de muestra. Versión 1.1.

Programa sistematizado para el cálculo del tamaño de la muestra y el poder en diseños de

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BIBLIOGRAFÍA

investigación. Pontificia Universidad Javeriana. Facultad de Medicina. Unidad de Epidemiología Clínica y Bioestadística.

LINKS

- American Veterinary Medical Associaton, 2001- Manual para el manejo de animales con fines de experimentación y enseñanza. Enero,

2010http://www.archivos.ujat.mx/dacbiol/docencia/lineamientos/manejo_animales.pdf- NORMA Oficial Mexicana NOM-062-ZOO-1999, Especificaciones técnicas para la

producción, cuidado y uso de los animales de laboratorio. http://www.fmvz.unam.mx/fmvz/principal/archivos/062ZOO.PDF

- REDVET. Revista electrónica de Veterinaria 1695-7504 2010 Volumen 12 Número 5B. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n050511B/051116.pdf¿Qué es un bioterio? http://www.bioterios.com/2013/post.php?s=2013-06-30-qu-es-un-bioterio

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