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ESCUELA SUPERIOR POLITCNICA DEL CHIMBORAZOFACULTAD DE CIENCIAS

ESCUELA DE BIOQUMICA Y FARMACIAASIGNATURA: ANLISIS CLNICOS 1

DOCENTE: Dra. Morella Guilln Ferraro. PhD.

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APELLIDOS Y NOMBRES: ___________________________________________________________________

CDIGO: ____________

PRACTICA No. 3 FECHA: ______________________

TEMA: RECUENTO ERITROCITARIO, DETERMINACION DE HEMATOCRITO,

HEMOGLOBINA Y ERITROSEDIMENTACIN

OBJETIVOS DE LA PRCTICA:

Aplicar sus conocimientos previos para la determinacin de la hemoglobina, el hematocrito, la velocidad de

sedimentacin globular y el contaje de eritrocitos as como el clculo de los ndices corpusculares: VCM, HCM,CHCM. Aplicar las medidas de tica y bioseguridad.

MATERIAL NECESARIO PARA LA PRCTICA. FAVOR TRAER LO SUBRAYADO

1. Jeringas (5 10 mL) con aguja.

2.

Torniquete.

3.

Torundas de algodn o gasas.

4.

Alcohol isoproplico al 70 %.

5.

Tubos desechables con EDTA (Tapa lila).

6.

Gradilla.

7.

Banda adhesiva o curita

8. Lancetas

9.

Jabn, gel desinfectante y toallas desechables.

10.

Guantes desechables, mascarilla, gorro,

uniforme y madil.

11.

Tubos capilares

12.

Boquilla para la pipeta de Thoma.

En que consiste el recuento de eritrocitos? En qu unidades se expresa?

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MATERIAL BIOLOGICO NECESARIO PARA EL RECUENTO DE ERITROCITOS:

Sangre total anticoagulada

REACTIVOS:

Liquido de Hayem o solucin de Dacie

E.D.T.A. al 10 %

MATERIAL NECESARIO:

Pipeta de Thoma

Hemacitmetro (cmara de Neubauer)

Boquilla

Microscopio

Contador celular


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DESCRIBA EL PROCEDIMIENTO PARA EL CONTAJE DE LOS ERITROCITOS

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PARTES DE LA PIPETA DE THOMA:


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ILUSTRACION PARA EL LLENADO DE LA CAMARA DE NEUBAUER

CONTEO DE GLOBULOS ROJOS

En cul parte de la cmara de Neubauer se realiza el recuento de hemates?

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En cuales cuadrados?

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Cul es la superficie de todo el cuadrado?

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Los cinco cuadrado que volumen tienen?

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Cmo se realiza el clculo?

Mencione las causas de error en el recuento en cmara de Neubauer

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Resultados del contaje de glbulos rojos:

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HEMATOCRITO

Con el valor del hematocrito se confirma el diagnstico de diferentes enfermedades y patologas, como es el

caso de las anemias y la policitemia.

DEFINICION

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MATERIAL BIOLOGICO NECESARIO PARA EL HEMATOCRITO:

Sangre total anticoaguladaMATERIAL NECESARIO:

Tubos capilares heparinizados si es muestra capilar

Tubos capilares

Micro centrfuga

Plastilina selladora

PROCEDIMIENTO:

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CAUSAS DE ERROR EN DETERMINACION DE HEMATOCRITO:

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TUBO DE MICROHEMATOCRITO Y METODOS DELECTURA DEL VOLUMEN DE CELULAS EMPACADAS.


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HEMOGLOBINA

La hemoglobina es el componente principal de los glbulos rojos constituye el 95% del peso eritrocitario, es

una protena conjugada que sirve de vehculo para el transporte de O2 y CO2. Tanto la concentracin de

hemoglobina como el hematocrito representan en forma directa el nmero de eritrocitos. Las enfermedades

relacionadas con los eritrocitos (especialmente los sndromes anmicos) estn definidas por la concentracin

de la hemoglobina.

Mencione las condiciones donde pueden aparecer niveles de hemoglobina por debajo de los normales

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Mencione las condiciones donde pueden aparecer niveles de hemoglobina por encima de los normales

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FUNDAMENTO

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FUNDAMENTO DE ESPECTROFOTOMETRIA:

La base de la colorimetra y la espectrofotometra es que muchas sustancias tienen color propio, o pueden

dar lugar a productos finales coloreados en ciertas reacciones qumicas. Hay una relacin entre la intensidad

de este color y la concentracin del producto final, o sea la concentracin de uno o varios de los reactivos; de

esta manera, la intensidad del color puede utilizarse para medir la concentracin. Para este fin se emplean

los espectrofotmetros, que son instrumentos para la medicin del color.

REACTIVOS:

Reactivo de Drabkin

MATERIAL:

Tubos de ensayo de 13 X 100 mm


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Pipeta de Sal o micropipetas

Espectrofotmetro y celdas analticas

Pipetas de 5 mL

MATERIAL BIOLOGICO:

Sangre total venosa con EDTA

PROCEDIMIENTO

Se determinar la concentracin de Hemoglobina de una muestra problema siguiendo los pasos detallados a

continuacin:

1. Obtener una muestra de sangre total

2. Encender el fotocolormetro o el espectrofotmetro y esperar a que alcance la temperatura adecuada para

su funcionamiento.

3. Dispensar exactamente 5ml de reactivo de Drabkin en 2 tubos de ensayo, rotulados uno como BLANCO (B)

y el otro como PROBLEMA (P).

4. Homogeneizar la muestra sangunea.

5. Medir exactamente 20 L (0.02 ml) de la sangre en la micro pipeta.

6. Eliminar el exceso de sangre que queda en las paredes externas de la pipeta antes de introducirla en lasolucin de Drabkin.

7. Llevar la pipeta hasta el fondo del tubo y depositar la sangre, procurando lavar las paredes internas de la

pipeta; esto se logra mediante aspiraciones y expulsiones consecutivas de reactivo dentro del tubo. Evitar la

formacin de burbujas.

8. Tapar el tubo y mezclar varias veces por inversin.

9. Dejar reposar por 10 minutos para que se produzca la hemlisis total de las clulas rojas y se complete la

reaccin.

10. Transferir la solucin a las cubetas del fotocolormetro, para su lectura la cual se realizara de la siguientemanera:

a. Colocar el haz de luz a la longitud de onda adecuada (en este caso es de 540 nm)

b. Colocar en una cubeta de lectura el reactivo del tubo Blanco (no contiene muestra) y ajustar el aparato

a 0 (cero) de absorbancia.


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c. En otra cubeta colocar el reactivo con la muestra problema y leer la absorbancia que nos indique el

espectrofotmetro. Anotar la lectura.

CALCULOS:

Se divide la absorbancia del problema entre la absorbancia del estndar, el resultado se multiplica por la

concentracin del estndar.

Cules son los valores de referencia de la hemoglobina?

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Mencione las causas de errores en la determinacin de hemoglobina

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VELOCIDAD DE SEDIMENTACIN GLOBULAR (VSG):

DEFINICION

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MATERIAL:

Tubos de Wintrobe, jeringa, cnula, gradilla de Wintrobe, reloj cronometro, papel secante, guantes


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DESCRIBA EL PROCEDIMIENTO PARA LA DETERMINACIN DE LA VSG POR EL MTODO DE WINTROBE

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VALORES DE REFERENCIA DE LA VSG:

Hombres: _______________________________________Mujeres: _______________________________________

Nios: _________________________________________

Embarazadas: ___________________________________

Recin nacidos: _________________________________

CAUSAS DE ERROR EN LA DETERMINACIN DE LA VSG:

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DETERMINACIONES DE LOS INDICES ABSOLUTOS

La anemia es una deficiencia en la cantidad o calidad de los glbulos rojos y frecuentemente es secundaria a

alguna enfermedad subyacente.

Para diagnosticar a un paciente con anemia debemos clasificar que tipo de anemia est cursando, es necesario

realizar algunos clculos para la determinacin del tamao, contenido y concentracin de hemoglobina en

los glbulos rojos. Estos ndices han resultado tiles para la caracterizacin morfolgica de las anemias y

pueden calcularse a partir del recuento de glbulos rojos, de la concentracin de hemoglobina y del

hematocrito.

El Volumen Corpuscular Medio (VCM o VGM):da idea DEL TAMAO promedio DE CADA ERITROCITO, se

calcula con la siguiente frmula:


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Hemoglobina Corpuscular Media (HCM):es la CANTIDAD HEMOGLOBINA PRESENTE en los eritrocitos, se

calcula:

Concentracin Corpuscular Media de Hemoglobina (CMHC): es la CONCENTRACIN media de Hb en un

volumen determinado de eritrocitos, y se calcula:

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