Practica Nº5 - ACCION DE LOS MICROORGANISMOS SOBRE DIVERSOS SUSTRATOS 2
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5/28/2018 Practica N5 - ACCION DE LOS MICROORGANISMOS SOBRE DIVERSOS SUSTRATOS 2
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RIVERA ALARCON LUIS DANIEL AGROINDUSTRIAS
Practica N 05
ACCION DE LOS MICROORGANISMOS SOBRE DIFERENTESCOMPUESTOS
I-. INTRODUCCION
Existen muchos ejemplos de la accin de microorganismos sobre diferentescompuestos como los que presentan a continuacin los cuales son de muchaimportancia.
Los microorganismos no se encuentran aislados, sino que su nmero suele sermuy elevado por unidad de volumen o por unidad de superficie. Porconsiguiente, all donde se encuentran son muy abundantes. !dem"s suelenformar agrupaciones de varios microorganismos que interaccionan entre s#unos pueden usar como alimento los productos residuales de otros, o puedenser atacados por los vecinos que compiten por el mismo alimento. Estasinteracciones dan lugar a sucesiones de microorganismos# la microflora de unasuperficie, de un alimento o del interior de una cavidad abierta del cuerpopuede variar con el tiempo.
Las pruebas de hidrlisis y fermentacin de carbohidratos son muy importantespara la identificacin de las bacterias. Los medios, para estudiar la degradacinde estos compuestos, se preparan por lo general a$adiendo %.&' delcarbohidrato ()' si la lactosa* a un medio b"sico sin carbohidratos .Paradetectar si hubo actividad en+im"tica se anali+a la aparicin de productos o ladesaparicin del sustrato. Entre los productos prpura de bromocresol, o a+ulde bromotinol. Los carbohidratos diferenciales m"s comunes usados son deglucosa, maltosa, sacarosa, lactosa, xilosa, arabinosa, almidn, inulina ysalicina.
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II-. OBJETIVOS
emostrar y comprobar si hay accin de microorganismos sobre
diferentes compuestos qumicos y determinacin de la accin y efectode las en+imas que caracteri+an a los diferentes compuestos qumicos.
III-. MARCO TEORICO
Agente !"#$ic%
Existen ciertas sustancias qumicas que influyen negativamente sobre lasbacterias, pudiendo ejercer dos tipos de efectos diferentes#
-acteriost"ticos# cuando impiden el crecimiento bacteriano.
-actericidas# cuando destruyen (matan* las bacterias.
En general, si no slo nos referimos a las bacterias, sino a cualquier tipo demicroorganismos, hablamos respectivamente de agentes $icr%&i%t'tic% y$icr%&ici(a. !hora bien, para una misma sustancia qumica, la lnea dedemarcacin entre un efecto microbiost"tico y otro microbicida dependemuchas veces de la concentracin de dicha sustancia y del tiempo durante elque acta.
/mo podemos saber que un microorganismo est" 0muerto12 El nicocriterio v"lido es la p3rdida irreversible de la capacidad de divisin celular, esdecir, de la )*r(i(a (e +ia&i,i(a(, y se suele comprobar empleando t3cnicascon placas de Petri (es decir, confirmando que no crecen en medios slidosadecuados*.
!ntes de proceder al estudio de las diversas mol3culas que puedenafectar el crecimiento o la viabilidad de los microorganismos, veamos unascuantas definiciones b"sicas.
4odos los das usamos agentes qumicos para controlar el crecimientomicrobiano# detergentes y jabones para el cuerpo y la ropa, cloracin de lasaguas potables, antis3pticos para la piel y el tratamiento de heridas,desinfectantes para tratar superficies en la industria y en los laboratorios,quimioter"picos y antibiticos para tratar enfermedades bacterianas, etc.
Agente eteri,i-ante son aquellos que producen la inactivacin total detodas las formas de vida microbiana (o sea, su 0muerte1 o p3rdida irreversiblede su viabilidad*. (4ambi3n existen agentes fsicos esterili+antes, como yavimos en los dos captulos anteriores*.
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Agente (ein.ectante /% ger$ici(ason agentes (sobre todo qumicos*antimicrobianos capaces de matar los microorganismos patgenos(infecciosos* de un material. Pueden (y en muchos casos suelen* presentarefectos txicos sobre tejidos vivos, por lo que se suelen emplear slo sobremateriales inertes.
Agente anti*)tic%son sustancias qumicas antimicrobianas que se oponena la sepsis o putrefaccin de materiales vivos. 5e trata de desinfectantes conbaja actividad txica hacia los tejidos vivos donde se aplican.
IV-. MATERIALES 1 E2UIPOS
6 !sa de siembra.6 alcohol.6 matra+.
6 7echero de alcohol.6 4ubos de ensayo.6 7icropipeta.6 4ubos con agar 8liger.6 /ultivo de microorganismo de#
o Eschericha coli.
o Proteus vulgaris.
o 5erratia marcecens.
V-. PROCEDIMIENTO
34 /on una aguja de 8olle inocular por picadura central profunda y porestrias en superficie.
4 9ncubar los tubos a :; hrs.64 ?acer lectura se los medios en la forma siguiente#74 El cambio de color del medio del cultivo de rojo a amarillo en la
superficie indica fermentacin de L!/4@5!.
54 El cambio de color en profundidad indica fermentacin de ALB/@5!.84 5i hay produccin de gas aparecer" ruptura del medio.94 !note sus resultados e interprete.
MEDIO AGAR CITRATO DE SIMMOS /AISLAMIENTO DEL CITRATO
OBJETIVO:Estudiar las caractersticas de alguna bacteria de utili+ar el trato como nica
fuente de carbono.
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MATERIALES:
6 4ubos con agar citrato de 5immons.6 /ultivos de medio solido de#
Eschericha coli. Enterobacter aerogenes.
PROCEDIMIENTO:
34 5embrar el agar citrato de 5immons con aguja de 8olle, a partir de unmedio solido Cnunca a partir de un medio liquido*.
4 4ra+ar una sola lnea en la superficie del medio, no sembrar en formaabundante.
64 9nocubar a :; o >D hrs (hasta ; ds *.74 /onsiderar la prueba positiva cuando el color verde del medio cambia a
a+ul.
CALDO MR;VP /PRUEBA DE ROJO DE METILO
OBJETIVOS:
emostrar que algunos microorganismos al fermentar la glucosa producen ymantienen alta acide+, mientras que otros bajan inicialmente la acide+ ydespu3s viran a la neutralidad.
MATERIALES:
6 4ubos con caldo 76FP.6 /ultivos de microorganismos#
Escherichia coli.
5taphylococcus aureus.
PROCEDIMIENTO:
34 /on el an+a de 8olle sembrar el medio respectivo.4 9ncubar el medio a :;'.
RESULTADO:
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/onsiderar la prueba positiva cuando el medio mantiene un color rojo(microorganismo que producen y mantiene alta acide+*, un color anaranjado seconsidera reaccin intermedia y un color amarillo es una reaccin negativa.
REACCION DE VOGUES PROS
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6 /ultivo de microorganismos de # -acillus subtilis. 5taphylococcus aureus. Escherichia coli.
PROCEDIMIENTO:
34 ividir la placa de agar almidn en tres sectores.4 7arque e inocule (con aguja de 8olle, una estra radial* la superficie del
agar.64 9nocubar a :;D horas.64 espu3s del tiempo de incubar a$adir & gotas de reactivo de Govacs yhacer la lectura respectiva
CALDO ?REA
OBJETIVO:emostrar que algunos microorganismos elaboran la en+ima ureasa, y queesta hidroli+a la urea hasta convertirla en amoniaco.
MATERIAL:
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6 4ubos con caldo rea6 /ultivo de microorganismos#
Proteus vulgarisEscherichia coli
PROCEDIMIENTO:
). 9nocular los medios de cultivo=. 9ncubar a :;D horas:. ?acer la lectura del medio en la forma siguiente#
El viraje del medio (p? H.D* a rojo grosella indica hidrlisis de la rea (p?D.) o mas*
AGAR NUTRITIVO
OBJETIVO:emostrar que algunas bacterias son capaces de descomponer el perxido dehidrgeno, por accin de la en+ima catalasa.
MATERIALES:6 Perxido de hidrgeno al :' preparado extemponeamente6 Placas con agar nutritivo6 7icroorganismos.
5taphylococcus sp-acillus subtilisEscherichia coli
PROCEDIMIENTO:
). ividir la placa de agar en : secciones
=. 7arcar las placas o inocular por estrias en las cepas, en estudio:. 9ncubar las placas a :; hrs>. !gregar = I : gotas de perxido de hidrogeno sobre la +ona de
desarrollo&. @bservar si son liberadas algunas burbujas de gas y anotar en 3ste caso
la prueba como positiva.
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VI-. RESULTADOS
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VII-. CONLUSIONES
La descomposicin de protenas y compuestos a+ufrados da lugar con
frecuencia a la produccin a la produccin de "cido sulfhdrico. Elvolumen suele ser tan peque$o que solamente se descubre mediante el
uso de indicadores qumicos pero en la descomposicin de huevos, y lareduccin de sulfatos en lados marinos, suele producirse en cantidadsuficiente para causar mal olor.
7uchas de las bacterias a+ufradas poseen la capacidad de oxidar al
acido sulfhdrico o el a+ufre libre, para producir acido sulfhdrico.
=?=5 J @== ?=@ J =5
=5 J =?=% J :@==?=5@>
Puede producirse este fenmeno qumico a favor de reacciones qumicoo fotosint3tico.
Bna en+ima puede reaccionar con un solo sustrato o en algunos casos
con un grupo particular de sustratos relacionados qumicamente. Enconcreto esto significa que las c3lulas producen generalmente diferentesen+imas para cada compuesto que metaboli+an. !dem"s cada en+imainterviene en un paso o cambio de sustrato.
Las pruebas de hidrlisis y fermentacin de carbohidratos son muy
importantes para la identificacin de las bacterias. En este laboratorio lascaractersticas respectivas del microorganismo a identificar esEscherichia /oli comparando nuestros resultados con la tabla deidentificacin de microorganismos.
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VIII-. BIBLIOGRAFIA
KKK.unex.esCedafoCmicroorganismosbacterias
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