Servicio de BiologServicio de Biologíía Moleculara MolecularHospital ClHospital Clíínico Quirnico Quirúúrgico rgico ““Hermanos AmeijeirasHermanos Ameijeiras““

Endocrinopatías de origen genético. Experiencia en 20 años de trabajo

MScMSc. . MarlMarléénn Quesada Quesada DortaDortaInvestigador Agregado. Profesora AuxiliarInvestigador Agregado. Profesora Auxiliar

XIX Congreso Latinoamericano de Patología Clínica y VII Congreso de la Sociedad Cubana de Patología Clínica

OBJETIVOSOBJETIVOS

1. Determinar la frecuencia de aberraciones cromosómicas en pacientes portadores de endocrinopatías de origen genético.

2. Establecer la relación entre las diferentes aberraciones cromosómicas encontradas y el diagnóstico clínico presuntivo.

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ANOMALANOMALÍÍAS CROMOSAS CROMOSÓÓMICASMICAS

1/200 1/200 RN vivosRN vivos

55--10% muertes 10% muertes perinatalesperinatales

50% abortos 50% abortos espontespontááneosneos

INTRODUCCIINTRODUCCIÓÓNN

ANOMALANOMALÍÍAS CROMOSAS CROMOSÓÓMICASMICAS

INDICADORES DIAGNINDICADORES DIAGNÓÓSTICOS STICOS Y PRONY PRONÓÓSTICOSSTICOS

ENDOCRINOPATENDOCRINOPATÍÍAS AS DE DE

ORIGEN GENORIGEN GENÉÉTICOTICO

INTRODUCCIINTRODUCCIÓÓNN

GENGENÉÉTICA CLTICA CLÍÍNICANICA

CITOGENCITOGENÉÉTICA CLTICA CLÁÁSICA SICA

CITOGENCITOGENÉÉTICA MOLECULARTICA MOLECULARFISH, PCRFISH, PCR--in situ, Hibridaciin situ, Hibridacióón in situ n in situ

comparada comparada

INTRODUCCIINTRODUCCIÓÓNN

MOTIVOS DE CONSULTAMOTIVOS DE CONSULTA

•• InfertilidadInfertilidad ((♀♀, , ♂♂))•• AmenorreaAmenorrea primariaprimaria o o secundariasecundaria•• Baja Baja tallatalla y y estigmasestigmas turnerianosturnerianos..•• PerfilPerfil endocrinolendocrinolóógicogico..•• Alteraciones en el desarrollo de los Alteraciones en el desarrollo de los

caracteres sexuales secundarioscaracteres sexuales secundarios.

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Se Se estudiaronestudiaron 656656 pacientespacientes de ambos de ambos sexossexos con con diagndiagnóósticosticode Endocrinopatde Endocrinopatíías de as de origenorigen gengenééticotico, , procedentesprocedentes del del ServicioServicio de de EndocrinologEndocrinologííaa del hospital del hospital ““HermanosHermanosAmeijeirasAmeijeiras””. .

MATERIALMATERIAL Y MY MÉÉTODOTODO

1.1. GonosomopatGonosomopatíías numas numééricas.ricas.2.2. GonosomopatGonosomopatíías estructurales yas estructurales y numnumééricasricas (mosaicos). (mosaicos). 3.3. Inversiones de sexo. Inversiones de sexo. 4.4. GonosomopatGonosomopatíías estructuralesas estructurales..

Criterios de inclusiCriterios de inclusióónn

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MATERIAL Y MMATERIAL Y MÉÉTODOTODO

•• AnAnáálisis cromoslisis cromosóómico: Bandas G (GTG)mico: Bandas G (GTG)

•• El ordenamieEl ordenamienntoto de los cariotipos se realizde los cariotipos se realizóómediante el Sistema Internacional de mediante el Sistema Internacional de Nomenclatura CromosNomenclatura Cromosóómica mica (ISCN, 2006).(ISCN, 2006).

•• TTéécnicacnica molecular y molecular y citomolecularcitomolecular (PCR, (PCR, FISH) Gen SRY.FISH) Gen SRY.

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RESULTADOSRESULTADOS

Gráfico 1. Correlación entre el diagnóstico clínico y el citogenético

33%

67%

Confirmación No confirmación

n=656n=656

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RESULTADOSRESULTADOS

51

10

27

12

0102030405060

%

1

Gráfico 2. Frecuencia de los reordenamientos cromosómicos

G. numéricas G. estructuralesMosaico Inversiones sexo

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RESULTADOSRESULTADOS

GonosomopatGonosomopatííaa NNúúmeromero %%NumNumééricasricas 110110 5151

Mosaicos (Mosaicos (estrucestruc. y num.). y num.) 5959 2727

Inversiones de sexoInversiones de sexo 2424 1212

EstructuralesEstructurales 2222 1010

TotalTotal 215 215 100100

Tabla 1. Frecuencia de las GonosomopatTabla 1. Frecuencia de las Gonosomopatíías encontradasas encontradas

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RESULTADOSRESULTADOS

DiagnDiagnóósticostico TOTALTOTAL %%SSííndrome de ndrome de KlinefelterKlinefelter 6060

4141

66

22

11

110110

5555

SSííndrome de Turnerndrome de Turner 3737

Variante de Variante de KlinefelterKlinefelter 55

Triple XTriple X 22

SSííndrome YYndrome YY 11

TTotalotal 100100

Tabla 2. Tipos de GonosomopatTabla 2. Tipos de Gonosomopatíías numas numééricasricas

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RESULTADOSRESULTADOS

DiagnDiagnóósticostico Total % Total % DisgenesiaDisgenesia GonadalGonadal MixtaMixta 28 4828 48

MosaicoMosaico de de SSííndromendrome de de KlinefelterKlinefelter 12 2012 20

MosaicoMosaico de de SSííndromendrome de Turnerde Turner 17 2917 29

VarianteVariante de de SSííndromendrome de Turnerde Turner 2 32 3

TOTALTOTAL 59 10059 100

TablaTabla 3. 3. TiposTipos de Gonosomopatde Gonosomopatíías as EstructuralesEstructurales y y numnumééricasricas en en mosaicosmosaicos

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RESULTADOSRESULTADOS

Disgenesia Gonadal Mixta (DGM)

Desorden del sexo cromosDesorden del sexo cromosóómico caracterizado por la mico caracterizado por la existencia de un testexistencia de un testíículo de un lado y un teste culo de un lado y un teste indiferenciado en el otro. indiferenciado en el otro.

Fenotipo:Fenotipo: Masculino Masculino 30%30%Femenino Femenino 60%60%Alteraciones sugestivas de Alteraciones sugestivas de TurnerTurner 10%10%

TESTES TESTES DISGENDISGENÉÉTICOSTICOS

25% 25% GONADOBLASTOMA O GONADOBLASTOMA O

DISGERMINOMADISGERMINOMA

RESULTADOSRESULTADOS

Disgenesia Gonadal Mixta (DGM)

Técnica molecular y Citomolecular (PCR, FISH)Gen SRY ( longitud 35 kb, localización en Yp1-region 1A1)

45,X/46,XY,del(Y)/47,X,YY,del 2Yq45,X/46,XY,del(Y)/47,X,YY,del 2Yq45, X/46, X, 45, X/46, X, isodic(Yisodic(Y))

46,XX/45, X/46,XY/47, XYY46,XX/45, X/46,XY/47, XYY

FFóórmula cromosrmula cromosóómicamicaFenotipo masculino Fenotipo FemeninoFenotipo masculino Fenotipo Femenino

RESULTADOSRESULTADOS

DiagnDiagnóósticostico Total Total %%

SSííndromendrome de Morrisde Morris 18 18 7575

HermafroditismoHermafroditismo verdaderoverdadero 6 6 2525

TTotalotal 24 24 100100

TablaTabla 4. 4. TiposTipos de Gonosomopatde Gonosomopatíías as InversionesInversiones de de SexoSexo

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Tabla 5. Inversiones de Sexo

Pacientes Diagnóstico Sexo FC

1818 SSííndromendrome de de MorrisMorris femeninofemenino 46, XY46, XY

66 HermafroditismoHermafroditismoverdaderoverdadero masculinomasculino 46, XX46, XX

RESULTADOSRESULTADOS

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RESULTADOSRESULTADOS

DiagnDiagnóósticostico Total %Total %

VarianteVariante de Turner (de Turner (mosaicomosaico) ) 45,X/46,X, I (45,X/46,X, I (XqXq))

15 6815 68

OtrasOtras 7 327 32

TTotalotal 22 10022 100

TablaTabla 6. Gonosomopat6. Gonosomopatíías as estructuralesestructurales en en mosaicomosaico

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FiguraFigura 3. 3. PacientePaciente portadorportador del del SindromeSindrome de de KlinefelterKlinefeltercon formula con formula cromoscromosóómicamica 47,XXY47,XXY

RREESSUULLTTAADDOOSS

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FiguraFigura 4 4 PacientePaciente portadorportador del del SindromeSindrome de Turner de Turner con con ffóórmularmula cromoscromosóómicamica 45,X45,X

RREESSUULLTTAADDOOSS

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FiguraFigura 5. 5. PacientePaciente portadorportador de de variantevariante del del SSííndromendrome de de KlinefelterKlinefelter con con ffóórmularmula cromoscromosóómicamica 48, XXYY48, XXYY

RREESSUULLTTAADDOOSS

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RREESSUULLTTAADDOOSS

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Figura 6. Paciente con fenotipo de Figura 6. Paciente con fenotipo de TurnerTurner

RREESSUULLTTAADDOOSS

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Figura 7. FFigura 7. Fóórmula cromosrmula cromosóómica 45,X/46,mica 45,X/46,X(marX(mar) de la ) de la paciente con fenotipo paciente con fenotipo TurnerTurner

FiguraFigura 6. 6. PacientePaciente portadorportador de de unauna variantevariante del del SSííndromendrome de Turner con de Turner con FFóórmularmulaCromosCromosóómicamica 46,Xi(Xq)46,Xi(Xq)RR

EESSUULLTTAADDOOSS

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CITOGENCITOGENÉÉTICA MOLECULAR (FISH)TICA MOLECULAR (FISH)

•• MMáás sensibless sensibles•• Alta especificidadAlta especificidad•• Aplicables a nAplicables a núúcleos cleos interfinterfáásicossicos, ,

metafases, etc.metafases, etc.•• Detecta reordenamientos cromosDetecta reordenamientos cromosóómicos micos

complejos, no detectados por las tcomplejos, no detectados por las téécnicas cnicas convencionales.convencionales.

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VENTAJASVENTAJAS

CITOGENCITOGENÉÉTICA MOLECULAR (FISH)TICA MOLECULAR (FISH)

•• DiagnDiagnóóstico Prenatalstico Prenatal•• OncogenOncogenééticatica•• GenGenéética toxicoltica toxicolóógica.gica.

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CAMPOS DE APLICACICAMPOS DE APLICACIÓÓNN

CONCLUSIONESCONCLUSIONES

1.1. El anEl anáálisis citogenlisis citogenéético corrobora el diagntico corrobora el diagnóóstico stico clclíínico del paciente.nico del paciente.

2.2. Los SLos Sííndrome de ndrome de TurnerTurner y de y de KlinefelterKlinefelter fueron fueron las gonosomopatlas gonosomopatíías numas numééricas mricas máás frecuentes .s frecuentes .

3.3. El estudio cromosEl estudio cromosóómico posee valor diagnmico posee valor diagnóóstico, stico, debiendo considerarse para la conducta debiendo considerarse para la conducta terapterapééutica a seguir en cada caso.utica a seguir en cada caso.

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RECOMENDACIONESRECOMENDACIONES

Aplicar la CitogenAplicar la Citogenéética Molecular en el diagntica Molecular en el diagnóóstico stico clclíínico de aquellos casos con reordenamientos nico de aquellos casos con reordenamientos cromoscromosóómicos complejos no detectables con la micos complejos no detectables con la CitogenCitogenéética Convencional.tica Convencional.

MuchasMuchas GraciasGracias