Presentacion Articulo Ejercicio

8/18/2019 Presentacion Articulo Ejercicio

1/51

LA PRÁCTICA DE EJERCICIOINCREMENTA LA

BIOGENESIS MITOCONDRIALEN EL CEREBRO


2/51

• TIPO DE ESTUDIO: EXPERIMENTAL• FUENTE: journal applied physiology, volumen 111 de

!11

• INSTITU"I#N: – University of South Carolina, Columbia, South Carolina

• Department of Exercise Science, Arnold School of Public Health,

• Department of Pathology, Microbiology, and Immunology, School of Medicine

• AUTORES: – Jennifer L. Steiner – E. Angela Mur!"# – Ja$ie L. M%Clellan – Martin D. Car$i%!ael – J. Mar& Da'i(

• FE"$%: – A%eta)* ara u+li%a%i,n en -uli* )e /00 – P1BLICADO: Ag*(t* 2 )e /00

http://scholar.google.com/scholar?q=journal+applied+physiology&hl=es&as_sdt=0&as_vis=1&oi=scholart&sa=X&ved=0ahUKEwj4_IWS1IzLAhWBMSYKHQvDBVcQgQMIGzAAhttp://scholar.google.com/scholar?q=journal+applied+physiology&hl=es&as_sdt=0&as_vis=1&oi=scholart&sa=X&ved=0ahUKEwj4_IWS1IzLAhWBMSYKHQvDBVcQgQMIGzAA


3/51


4/51

ANTECEDENTES

'ENEFI"IOS DE P(%"TI"%( E&

E/E("I"IO:• Au$enta la $it*%*n)ria en el$9(%ul* e(uel;ti%*.

• In%re$enta la re(i(ten%ia a la

fatiga• Me-*ra el ren)i$ient* f4(i%*


5/51

ANTECEDENTES

&% FUN"I#N 0ITO"OND(I%& – E( un fa%t*r i$*rtante a(*%ia)* a l*( +ene


6/51

ANTECEDENTES

E/E("I"IO%"TI)ID%D "E(E'(%& 0ITO"OND(I% – P*%*( e(tu)i*(

– Ca$+i*( en la a%ti'i)a) $it*%*n)rial )el!i*%a$* )e rata( )urante el e-er%i%i*

– Ca$+i*( en la a%ti'i)a) $it*%*n)riala(*%ia)*( %*n la e)a):

– A%ti'i)a) )e l*( %*$le-*( )e la %a)ena re(irat*ria I "=I en $it*%*n)ria( ai(la)a(

– E6re(i,n en el %ere+el* )el SIRP50 >(ilent inf*r$ati*nregulat*r T0?


7/51


8/51

0%("O TEO(I"O


9/51

0%("O TEO(I"O


10/51

0%("O TEO(I"OIMPORTANCIA DE LALA PGC503


11/51


12/51

0%("O TEO(I"ODurante el e-er%i%i* (e r*)u%e un

e(tr;( $eta+,li%* en el %ere+r* >enregi*ne( $*t*ra( " n* $*t*ra(?(i$ilar al ue (e genera en el $9(%ul*

a(*%ia)* a la +i*g;ne(i( $it*%*n)rial.


13/51

P(O'&E0%

NO SE AN E=AL1ADO LOS EECTOS

DEL EJERCICIO SOBRE LA PGC503 LASIRT0 LA CS >CITRATO SINTASA? @ EL$tDNA EN EL CEREBRO.


14/51

$IPOTESIS

• EL EJERCICIO ISICO DE RESISTENCIAP1EDE IND1CIR 1N INCREMENTO ENLA BIOGENESIS MITOCONDRIAL ENEL CEREBRO DISMIN1@ENDO ASI LAATIGA MENTAL @ MEJORANDO EL

DESEMPEFO ISICO.


15/51

O'/ETI)O *ENE(%&• DETERMINAR LOS EECTOS DE OCO

SEMANAS DE EJERCICIO DEL TIPOENTRENAMIENTO DE RESISTENCIASOBRE LA BIOGENESIS

MITOCONDRIAL EN REGIONESESPECICAS DEL CEREBRO.


16/51

OBJETI=OS ESPECICOS• E'aluar la e6re(i,n )el $RNA )e PGC503 SIRT5

0 CS >%itrat* (inta(a? " $tDNA en tall* %ere+ral

%ere+el* %*rte7a l,+ul* fr*ntal !i*%a$* el!i*tla$* %ere+r* $e)i* " $9(%ul* (,le*.

• C*$arar l*( ni'ele( )e %uatr* $ar%a)*re( )e

+i*g;ne(i( $it*%*n)rial en el %ere+r* " en el$9(%ul* e(uel;ti%* )e rat*ne( )e(u;( )e *%!*(e$ana( )e entrena$ient* )e re(i(ten%ia.


17/51

0%TE(I%&ES 3

02TODOS


18/51

DISEFO EXPERIMENTAL• (%TONES I"(:

– Ma%!*( )e *%!* (e$ana( )e na%i)*. – L4nea )e rat*ne( (il'e(tre( %ru7a)*(

en)*g$i%a$ente en la( ue l*( !er$an*((*n gen;ti%a$ente i);nti%*( " %*n(angu4ne*(. – Mane-a)*( en el la+*rat*ri* tre( )4a( ante( )el

e6eri$ent*.

– C*n)i%i*ne( e(tn)ar )e !u$e)a) lu7te$eratura " rui)*. – Ci%l* )e )4a: n*%!e >0:0?


19/51

DISE4O E5PE(I0ENT%&

• %&E%TO(I6%"ION – E.perimenal: 7E58: 19 (%TONES

• ANALISIS DE M1ESTRAS DE TEJIDOS:00• TEST DE RESISTENCIA: H

– "onrol: 7SED8: 1 (%TONES:• ANALISIS DE M1ESTRAS DE TEJIDOS: H• TEST DE RESISTENCIA:


20/51

DISE4O E5PE(I0ENT%&

– %D%PT%"I#N: )urante / $in al )4aK )4a(. – E/E("I"IO DE (ESISTEN"I%: "O((E( SO'(E (UED%

• O%!* (e$ana(• 1na !*ra )iaria

• Sei( )4a( a la (e$ana• $$in• )e in%lina%i,n• 0$in )e )e(%an(* ara !i)rata%i,n• Se e(ti$ula+an $anual$ente a %*rrer )urante la fa(e )e

entrena$ient* %*n un le'e t*ue en la %*la

– *(UPO "ONT(O&: C*n)i%i*ne( (i$ilare( )e $anteni$ient*


21/51

DISE4O E5PE(I0ENT%&

O'TEN"ION DE 0UEST(%S: – E1TANIADOS CON ISOLORANO EN

ALTA CONCENTRACIN

– 2 ORAS DESP1ES DEL 1LTIMOENTRENAMIENTO

– M1ESTRAS:

• tall* %ere+ral %ere+el* %*rte7a l,+ul*fr*ntal !i*%a$* el !i*tla$* %ere+r*$e)i* " $9(%ul* (,le* fuer*n %*ngela)a(a 5/ !a(ta el anli(i(.


22/51

P(O"ES%0IENTO DE 0UEST(%SEXPRESIN DEL $RNA

• Mue(tra( )e $9(%ul* " %ere+r*fuer*n !*$*geni7a)a( en nitr,gen*

l4ui)* en un P*litr*n K0//.


23/51

E5P(ESI#N DE& m(N%

• Se u(* el $;t*)* ti*%ianat* )e guani)ina >%*nrea%ti'* TRIOL? ara e6traer el $RNA: – L*( rin%ii*( a%ti'*( )el TRIOL (*n:

• en*l

• i)r*6iuin*le4na• Ti*%ianat* )e guani)ina• ti*%ianat* )e a$ini* .• Gli%er*l.

– Se anali7* *r e(e%t*f*t*$etria el $RNA *+teni)*:• La rela%i,n Q/:/ (e u(* ara )eter$inar %ali)a) )el

$RNA.• $RNA %*n una rela%i,n )e 0.Q fue in%lui)* en el e(tu)i*.


24/51

EXTRACCIN DEL $RNA CON TRIOL


25/51

O'TEN"I#N DE& -DN% TRANSCRIPCION IN=ERSA DEL $RNA

• Se e6trae .L )e $RNA• Se !i7* la tran%ri%i,n in'er(a )el RNA en %DNA:

– En /ul )e '*lu$en )e rea%%i,n:• 0H.ul RNA >0. g? en agua li+re )e RNA a(a(• ul 0/ RT +uer• 00ul $M MgCl• 0/ul )e $e7%la )e )e*6"5NTP• .ul e6a$er*( aleat*ri*(

• 0ul )e in!i+i)*r )e RNAa(a• 0.ul Tran(%rita(a in'er(a $ulti(%ri+e• La tran(%ri%i,n re'er(a fue %*$leta)a a C *r 0/ $in KC

*r 0/ $in " C *r $in• Enfria$ient* (*+re !iel*.• La( $ue(tra( fuer*n al$a%ena)a( a / !a(ta (u a$li


26/51

ANALISIS C1ANTITATI=ODEL %DNA

• (T+P"(: PCR EN TIEMPO REAL – REACCION DE LA POLIMERASA EN

CADENA


27/51

EN TIEMPO REAL


28/51

P(EP%(%"I#N P%(% (T+P"(

• Ta;0an *ene E.pression %ssays: – 0. ul Ta$an 1ni'er(al PCR Ma(ter Mi6

>A$liTa G*l) DNA P*l"$era(e Pa((i'e

Referen%e 0 +uer )NTP(U A$Ea(e 1NG? – 0uL )e %DNA – HuL )e agua li+re )e RNAa(a – 0.ul 0S ri$er >=IC? >REERENCIA ENDGENA? – 0.ul ri$er >AM? >MARCACIN DEL GEN? – =*lu$en


29/51

"ONDI"IONES DE &% (T+P"(

• ABI Seuen%e Dete%ti*n S"(te$.• $in at /C• 0/ $in at HC• A$li


30/51

"U%NTIFI"%"I#N DE &% E5P(ESI#NDE& m(N% de P*"+1< , SI(T1, and "S

SE "%&"U&O US%NDO E& 0ETODO =="T:

– VC T WC T >AM? C T >=IC? : SE CALC1LO PARA CADA M1ESTRA

– EL PROMEDIO DE TODOS LOS RATONES CONTROL 1E EL =ALORDE LA M1ESTRA PARA CALIBRACIN.

– VC T WVC T >%ali+rat*r? VC T >(a$le?

• "T: 7NUE(O DE "I"OS %& "U%& FUE(ONDETE"T%DOS8 –=IC CT Y 0 – AM CT Y KK


31/51

EXTRACCIN DE $tDNA

• E6tra%%i,n )e DNA )el $9(%ul* (*le* " )e *tra(arte( )el %ere+r* >BS CB CX L C @ " MB>n HZ00gr*u?.

• Te-i)*( fuer*n li(a)*( %*n r*teina(a 8 en

re(en%ia )e +uer )e li(i(. QC*r K !.• Se reali7, una (egun)a li(i(• Se a)i%i*n* +uer " (e in%u+* a /C f*r 0/ $in.• Se a)i%i*n, Et!an*l a la $ue(tra

• Se la'a el DNA " (e )ilu"e en +uer >0/ $M Tri(an) /.$M EDTA H./?

• Cuantil*ngitu) )e *n)a Q/5n$?

(T P"( P%(% mDN%


32/51

(T+P"( P%(% mDN%%0P&IFI"%"I#N 3

"U%NTIFI"%"I#N%0P&IFI"%"I#N DE& DN%• RT5PCR >0// ngrea%ti*n?

– C*$ari(*n *f &ineti%( *f a$li=IC?MGBPr*+e?

– C"t*%!r*$e +:• OR\ARD: TATTCCTTCATGTCGGACGA• RE=ERSE: AAATGCTGTGGCTATGACTG• PROBE: ACCTGAAACAT


33/51

PR1EBA DE ES1ERO 5RT

• L*( rat*ne( a(igna)*( al gru* RT > EXP SED?%*$letar*n (u rue+a =einti%uatr* !*ra( )e(u;( )e la9lti$a (e(i,n )e e-er%i%i*.

• La rue+a %*n(i(ti, )e: – er4*)* )e %alenta$ient* )e 0/ $in > $in a 0 $ $in " $ina / $ $in?

– Rutina en %inta )e %*rrer a una 'el*%i)a) )e $ $in !a(taue (e al%an7, la fatiga.

– El unt* )e fatiga (e )een $inut*(? en elue el rat,n "a n* *)4a (eguir el rit$* )e la %inta )e %*rrer ae(ar )e 0 $in )e e(ti$ula%i,n $anual en la %*la.

– L*( Rat*ne( )e e(te gru* n* (e in%lu"er*n en el anli(i( )ete-i)*( ara tener un %*ntr*l %*n el gru* SED.


34/51


35/51

%N%&ISIS EST%D>STI"O

• LOS DATOS 1ERON ANALIADOS1TILIANDO ANO=A DE 1NA =IA.

• TODOS LOS DATOS 1ERON ANALIADOS1TILIANDO 1N SOT\ARE COMERCIAL>Sig$aStat SPSS C!i%ag* IL?.

• LA SIGNIICANCIA ESTADSTICA 1E

OBTENIDA CON 1NA P < /./.• LOS DATOS SE PRESENTARON COMO

MEDIAS ] SE


36/51

(ESU&T%DOS

• O%!* (e$ana( )e e-er%i%i* )eentrena$ient* re(ultar*n en unin%re$ent* (igniP Y/./? en el $9(%ul* (,le* " en la$a"*r4a )e la( regi*ne( )el %ere+r*.


37/51

(ESU&T%DOSEXPRESIN DEL $RNA DE SIRT1INA 0 >SIRT50? EN PARTES

DEL CEREBRO @ M1SC1LO SOLEO DE RATONES ICR

DESP1ES DE OCO SEMANAS DE ENTRENAMIENTO


38/51

(ESU&T%DOSEXPRESIN DEL $RNA DE PGC503 EN PARTES DEL CEREBRO @

M1SC1LO SOLEO DE RATONES ICR DESP1ES DE OCOSEMANAS DE ENTRENAMIENTO


39/51

RES1LTADOSEXPRESIN DEL $RNA DE CS >%itrat* (inta(a? EN PARTES DELCEREBRO @ M1SC1LO SOLEO DE RATONES ICR DESP1ES DE

OCO SEMANAS DE ENTRENAMIENTO


40/51

RES1LTADOSCONTENIDO DE $tDNA EN PARTES DEL CEREBRO @ M1SC1LO SOLEO DE

RATONES ICR DESP1ES DE OCO SEMANAS DE ENTRENAMIENTO


41/51

DISC1SIN

• El e-er%i%i* in%re$enta la +i*g;ne(i( " la fun%i,n$it*%*n)rial en el $9(%ul* e(uel;ti%*. E(te !alla7g* e(%*n(i(tente %*n re*rte( re'i*(.

• a(ta la fe%!a /00 e(te e( el ri$er e(tu)i* ueanali7a l*( %a$+i*( en +i*g;ne(i( $it*%*n)rial enregi*ne( e(e%4


42/51

DISC1SIN

• El !alla7g* $( (igni


43/51

DISC1SIN

• P%PE& DE &% P*"+1al?a y de la SI(T+1 – S*n i$*rtante( en la +i*g;ne(i( $it*%*n)rial )e

$u(%ul* e(uel;ti%* *(teri*r a %a$+i*(


44/51

DISC1SIN

• Nue(tr*( re(ulta)*( (ugieren ue elentrena$ient* f4(i%* au$enta la('4a( $*le%ulare( tant* en el %ere+r*

%*$* en el $9(%ul*.

• P*r l* ue e( r*+a+le ue e(t*(

fa%t*re( ta$+i;n e(tn in'*lu%ra)*(en la +i*g;ne(i( $it*%*n)rial en el%ere+r*.


45/51

DISC1SIN

• E( *(i+le ue e(t*( %a$+i*( (e )e+an aun efe%t* )e fa(e agu)a *(teri*r alentrena$ient*.

• Se i)enti


46/51

DISC1SIN

• En rela%i,n a la re)u%%i,n )e lafatiga e( ra7*na+le en(ar ue elau$ent* )e la( $it*%*n)ria(

%ere+rale( ue)en )e(e$e^ar unael i$*rtante en la re)u%%i,n )ela fatiga a tra';( )e (u in_uen%ia

(*+re el e(ta)* )e la energ4a%ere+ral.


47/51

DISC1SIN

• Na'arr* et al. %*n%lu"er*n ue el e-er%i%i* $*)era)*en rat*ne( 'ie-*( au$enta+a el ren)i$ient* enrue+a( neur*$u(%ulare( " )e euili+ri*. L* ue (e%*rrela%i*na+a %*n un au$ent* )e la( en7i$a( %la'e(

en la fun%i,n $it*%*n)rial ue n*r$al$ente)i($inu"en %*n la e)a).

• 1n in%re$ent* )e la +i*g;ne(i( $it*%*n)rial in)u%i)a*r el e-er%i%i* ta$+i;n ue)e tener i$li%a%i*ne(

i$*rtante( en )i'er(a( enfer$e)a)e( neur*l,gi%a(in%lu"en)* tra(t*rn*( (iuitri%*( tra(t*rn*(gen;ti%*( " enfer$e)a)e( neur*)egenerati'a(.


48/51

CONCL1SION

• L*( aut*re( lantean ue e6i(te la *(i+ili)a))e ue el e-er%i%i* ue)e $e-*rar la (alu)neur*l,gi%a " el fun%i*na$ient* f4(i%* a tra';()el in%re$ent* )e la +i*g;ne(i( $it*%*n)rial.

• El e-er%i%i* *)r4a %*n(i)erar(e %*$* una*%i,n tera;uti%a ara atenuar l*( efe%t*(

negati'*( )el en'e-e%i$ient* " el trata$ient*" * re'en%i,n )e la( enfer$e)a)e(neur*l,gi%a(.


49/51


50/51


51/51

MARCADORES• PGC053:

• Per*6i(*$e r*liferati*n a%ti'ate) re%et*r Zga$$a %*a%ti'at*r 505alfa

• SIRT 0:• SILENT INORMATION REG1LATOR T0

• CS:• CITRATO SINTASA

• DNA MITOCONDRIAL : $tDNA

Presentacion Articulo Ejercicio

Documents

Transcript of Presentacion Articulo Ejercicio