UNIVERSIDAD NACIONAL “SAN LUIS GONZAGA” DE ICA

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

INSTITUTO DE INVESTIGACIONES

PROYECTO DE INVESTIGACIÓN

I. GENERALIDADES

1. TÍTULO

DETERMINACIÓN DE METABOLITOS SECUNDARIOS Y

ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE

LAS HOJAS DE ALIUM CEPA VAR. CEBOLLA AMARILLA

DULCE

2. PERSONAL INVESTIGADOR

2.1. AUTORES

Q.F. Unfredo Pabel Apumayta Vega (Responsable)

Q.F. Gerardo Francisco Rosas Hernández (Miembro)

3. TIPO DE INVESTIGACION

Básica

4. RÉGIMEN DE INVESTIGACIÓN

Libre

5. LUGAR DONDE SE REALIZA EL ESTUDIO

Distrito de Ica.

1

6. INSTITUCION DONDE SE DESARROLLA EL PROYECTO

Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional

“San Luis Gonzaga” de Ica.

7. DEPARTAMENTO ACADÉMICO Y SECCIÓN A LA QUE

PERTENECE EL PROYECTO

Departamento Académico de Ciencias Químicas de la Facultad

de Farmacia y Bioquímica.

8. DURACION DEL PROYECTO

12 Meses

Fecha de Inicio : Diciembre del 2014.

Fecha de término : Noviembre del 2015.

9. ETAPAS DEL PROYECTO

Etapa Informativa 1 mes

Etapa Preparativa 1 mes

Etapa Ejecutiva 4 mes

Etapa Evaluativa 4 meses

Publicación y sustentación 2 mes

10. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES

ACTIVIDADESMESES

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Revisión bibliográfica X X X X X X X X X X X X

Elaboración y trámite del

Proyecto.

X X

2

coordinación con los

productores de Cebollas

Amarillas Dulces

X X X X X X

Obtención de muestras. X X X

Obtención de extracto. X X X X

Análisis fitoquímico X X X

Determinación de la actividad

antioxidante.

X X X

Tratamiento de los resultados. X X X

Redacción del informe. X X

11. RECURSOS DISPONIBLES

11.1. PERSONAL DE APOYO.

- Personal docente y no docente de la Facultad de

Farmacia y Bioquímica.

11.2. LOCALES Y SEDES EDUCATIVAS

- Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

de la UNICA.

- Biblioteca de la Facultad de Agronomía.

- Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

de la UNMSM Lima.

11.3. MATERIALES Y METODOS

3

11.3.1. Descripción de la Muestra.

Se trabajará con hojas de cebollas blancas

que quedan después que los bulbos de las

cebollas son acopiados y colocados en

costales para su venta. Se trabajará con

cultivos de cebollas procedente de la

Pampa de Villacuri Ica.

12. PRESUPUESTO EN NUEVOS SOLES

12.1. INVERSIÓN EN BIENES

Materiales de oficina 740.00

Material de Limpieza 570.00

Muestras 120.00

Materiales y Reactivos 1,800.00

Sub Total 3,130.00

Material bibliográfico y fototécnico

Fotocopias 100.00

Consultas en Internet 120.00

Sub Total 220.00

12.2. SERVICIOS

4

12.2.1. Movilidad y dietas

Movilidad Ica–Lima-Ica 150.00

Dieta y alojamiento Lima 300.00

Movilidad Local 1,200.00

Sub total 1,650.00

12.2.2. Impresiones y Procesamientos

Tipeos 140.00

Traducciones 120.00

Sub total 260.00

Total ........................................... 5,260.00

13. FINANCIACIÓN

Para el desarrollo del presente Proyecto los gastos serán asumidos por el

fondo de desarrollo universitario.

II. PLAN DE INVESTIGACION

A. PROBLEMA

a. ENUNCIADO DEL PROBLEMA

El problema queda enmarcado en la siguiente pregunta.

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¿Qué tipos de metabolitos secundarios y Cuál es la

actividad antioxidante del extracto etanólico obtenidos

de las hojas post cosecha de las Cebollas Amarillas

Dulces que crecen la Pampa Villacuri – Ica?

b. DEFINICION Y DELIMITACION DEL PROBLEMA

La cebolla es una planta bianual que necesita de dos ciclos para

producir semilla. Desarrolla un bulbo (parte comestible) en su

primera ciclo de crecimiento y los vástagos o tallos florales en la

segunda ciclo.

El tallo es muy rudimentario y pequeño, ya que alcanza solo unos

cuantos milímetros de longitud. Se le llama "falso tallo" y presenta

un conjunto de hojas que forman el punto apical. Entre los

principales activos que contiene la cebolla destaca un 0.015% de

aceite esencial incoloro, muy rico en compuestos sulfurados como

la cicloaliína y la propiláliína. El jugo fresco de cebolla contiene

ácido sulfociánico y sulfocianato e isosulfocianato de alilo. Además

tiene ácido tiosulfínico, cuya fermentación produce una sustancia

con efectos bacteriostáticos. Entre los componentes volátiles

destaca el ácido tiopropiónico y el 2-propanotial-sóxido, sustancias

responsables del lagrimeo que produce la cebolla al cortarla.

Además se han encontrado otras sustancias sulfuradas, entre las

que destacan algunos derivados polifenólicos, glucósidos,

flavónicos (sobre todo quercitina) y fitohormonas con efecto

6

gonadotrópico(1,2). Con respecto al uso de sus hojas no hay

reportes. En la región Ica para el periodo de cosecha 2012 – 2013

la producción fue de 1216,084.73 TM(1).Esperándose un incremento

de la producción para el periodo de cosecha 2031-2014. Este

volumen de material cosechado genera aproximadamente el 45-55

% de su peso como material que se desperdicia. Principalmente

hojas que son dejadas al ambiente para poco a poco se sequen y

termine reciclándose en el suelo o termine siendo quemado.

Mientras esto ocurre el entorno ambiental es modificado por los

malos olores y crecimiento desmesurado de insectos que podrían

estar siendo vectores de vectores y propiciando contaminación por

hongos y o bacterias Fito patógenas y otros malestares(3,4,5).

Creemos necesario iniciar estudios de las hojas pos cosecha de las

cebollas amarillas que crecen en la Pampa Villacuri de Ica a fin de

investigar posibles propuestas para el uso de este residuo agrario;

motivo por lo cual presentamos como plan de investigación el tema

“DETERMINACIÓN DE METABOLITOS SECUNDARIOS Y

ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DEL EXTRACTO ETANÓLICO

DE LAS HOJAS DE ALIUM CEPA VAR. CEBOLLA

AMARILLA DULCE” trabajo que se desarrollará en el

Laboratorio de Química Analítica de la Facultad de

Farmacia y Bioquímica de la UNICA.

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c. OBJETIVO DE LA INVESTIGACIÓN

i. Objetivo General

Determinar qué tipos de metabolitos secundarios y que

actividad antioxidante tiene el extracto etanólico

obtenido a partir de las hojas post cosecha de Allium

cepa Var. Cebolla Amarilla Dulce que crece en La

Pampa Villacuri de Ica.

B. HIPOTESIS Y VARIABLES.

a. HIPÓTESIS

- El extracto etanólico de las hojas post cosecha de

Allium cepa Var. Cebolla Amarilla Dulce que crecen en

La Pampa Villacuri de Ica tiene los metabolitos

secundartios siguientes; Fenoles, taninos, triterpenos

esteroidales, cumarinas, flavonides y saponinas; Con

una actividad antioxidante, expresada como CI 50 frente

a una solución patrón de DPPH que oscila entre 60-80

L.

b. VARIABLES.

Variable Independiente:

- Hojas post cosecha de Cebolla Amarilla Dulce

8

Variables Dependientes:

- Metabolitos secundarios

- Actividad antioxidante

c. OPERACIONALIZACION DE LA VARIABLE.

Posición de la Variable

Nominación de la Variable Indicador Índice

Variable Independiente

Hojas post cosecha de Cebollas Amarilla Dulce

Características morfológicas

Taxonomía

g

Clasif icación botánica

Variable Dependiente

Estudio fitoquímico

Actividad Antioxidante

Reaciones de coloración y/o precipitación de metabolitos secundarios

Cuantif icación

espectrofotométrica

Positivonegativo

Absorbancia

C. MATERIAL, METODO Y TECNICAS.

3. NATURALEZA DEL ESTUDIO (6 ,7 ,8 ,9 ,10)

Tipo de estudio: transversal exploratorio y Explicativo

Nivel de Investigación. Será una investigación básica.

9

Diseño de Investigación: Experimental

4. MUESTRA A ENSAYAR

Las muestras a ensayar serán hojas pos cosecha de la

Cebollas Amarilla Dulce que crecen en la Pampa Villacuri

de Ica

5. OBTENCIÓN DE MUESTRA A ESTUDIAR

El proceso para obtener la muestra a estudiar. Se presentan

en el flujograma siguiente:

FLUXOGRAMA N° 1

OBTENCIÓN DE MUESTRA A ESTUDIAR

10

HOJAS DE CEBOLLAS

BULBOS DE CEBOLLAS

COSECHA DE CEBOLLAS

CULTIVO DE CEBOLLAS

FLUXOGRAMA N° 2

OBTENCIÓN DE EXTRACTO ETAN0LICO

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Det. de la Act. Antioxidante y

estudio fitoquim.

MS1

M1

MARCO 2do

L. FILTRADO

DESECHAR

FILTRACIÓN

SEGUNDA MACERACIÓN

1er L. FILTRADOMARCO

FILTRACIÓN

MACERACIÓN

MOLIDO

SECADO

HOJAS DE CEBOLLAS

6. ANÁLISIS DEL EXTRACTO ETANÓLICO

- Análisis Organoléptico: Utilizando los órganos de los sentidos

se determinará: color, olor, sabor y aspecto.

- Análisis Físico-Químicos: Se determinará:

* Sólidos solubles totales

* Cenizas

7. ESTUDIO FITOQUÍMICO

Se ejecutarán las reacciones siguientes:

Tricloruro férrico .- para determinar la presencia de compuestos

de naturaleza fenólica.

Gelatina-Sal .- Para determinar la presencia de taninos.

Shinoda .- Para determinar la presencia de flavonoides.

Lierberman-Burchard .- Para determinar la presencia de

triterpenos esteroidales.

Dragendorff, Mayer, Wagner y ácido pícrico .- Para determinar la

presencia de alcaloides.

Prueba de la espuma .- Para determinar la presencia de

saponinas.

Ensayo de Rosemhein .- Para determinar la presencia de

catequinas y/o leucoantocianidinas

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8. DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE

MÉTODO DPPH

La actividad antioxidante se determinará por el método de análisis

químico cuantitativo espectrofotométrico visible en el que se mide

la disminución de la concentración (absorbancia) que tiene una

solución patrón del reactivo (radical libre) 2,2 difenil-1-picrilhidrazil

(DPPH) cuando es consumido por antioxidantes.

FUNDAMENTO

El radical libre DPPH (solución color violeta) reacciona con

compuestos secuestradores de electrones desapareados,

disminuyendo su concentración (pérdida de la intensidad de color)

que es monitoreada a una longitud de onda de 517 nanómetros.

La reacción química que representa la reacción es la siguiente:

PREPARACIÓN DE REACTIVOS

Solución de DPPH

- 22 mg del reactivo se disuelven en 100 mL de metanol.

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Solución Amortiguadora de Acetato pH 6

Para preparar esta solución se utilizó el ácido acético 0.1 M 500

mL y su sal acetato sódico tri hidrato 136.08 g

DETERMINACION DE LA CI50

La CI50 es la concentración del extracto expresada en micro litros

que es capaz de hacer disminuir en 50 % la concentración de una

solución patrón del radical libre 1,1, difenil-2-picrilhidrazil (DPPH)

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BIBLIOGRAFIA

1. Allium cepa Var. Amarilla Dulce. Dirección de Información

Agraria. Se puede conseguir en:

WWW.agroica.gob.pe/?q=node/246. Visitado 20-11-14

2.Producción de cebollas (Perú).WWW.monografias.com>economía.

Visitado 12-11-14.

3. Las cebollas en el

mundo.WWW.agrolibertad.gob.pe/…/inteligencia_dee_mercado_de-

la_cebolla.Visitado 14-1q1-14.

4. Principales Aspectos Agroeconómicos de la Cadena Productiva

de Cebolla. Dirección Regional de Competitividad Agraria.

WWW.minag.gob.pe

5. Martí-Boscà J.V. El medio ambiente y su impacto en la salud.

Gac. Sanit, 2004, 18 (Supl 1) 221. (EEMS), Maastricht, Holanda,

2004: 122.

6. Brand-Williams, W., Cuvelier, M. E., & Berset, C. (1995). Use of a

free radical method to evaluate antioxidant activity. LWT – Food

Science & Technology, 28, 25–30.

7. Galdon, B. R., Rodriguez, E. M., & Romero, C. D. (2008).

Flavonoids in onion cultivars (Allium cepa L.). Journal of Food

Science, 73, C599–C605.

8. Gorinstein, S., Leontowicz, H., Leontowicz, M. (2008).

Comparison of the main bioactive compounds and antioxidant

activities in garlic and white and red onions after treatment

15

protocols. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 56, 4418–

4426.

9. Kaur, C., Joshi, S., & Kapoor, H. C. (2009). Antioxidants in onion

(Allium cepa L.) cultivars grown in India. Journal of Food

Biochemistry, 33, 184–200.

10 Prakash, D., Singh, B. N., & Upadhyay, G. (2007). Antioxidant and

free radicalscavenging activities of phenols from onion (Allium cepa).

Food Chemistry, 102,1389–1393

Ica, Diciembre del 2014

_______________________ _________________________

Q.F. UNFREDO PABEL APUMAYTA VEGA Q.F. GERARDO F. ROSAS HERNÁNDEZ

INVESTIGADOR RESPONSABLE COLABORADOR

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ANEXO 1

CEBOLLA AMARILLA DULCE

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