7/24/2019 Prueba Bioquimica Voger Poskawer

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PRUEBA BIOQUIMICA VOGER PROSKAUER

1.1 PRINCIPIO

Determinar la capacidad de al!n"# micr""rani#m"# para pr"d!cir !npr"d!ct" $inal ne!tr"% acetilmetilcar&in"l 'AMC% acet"ina(% a partir de la$ermentaci)n de la l!c"#a. V"e# * Pr"#+a!er 'VP( e# !n ep)nim" d"&le,V"e# - Pr"#+a!er $!er"n l"# primer"# &acteri)l""# en "erar !nac"l"raci)n r"/a en l"# medi"# de c!lti" de#p!0# del tratamient" c"n idr)2id"de p"ta#i".

1.3 4UNDAMEN5O BIOQU6MICO

7a pr!e&a de V"e# * Pr"#+a!er 'VP( #e &a#a en la detecci)n de acet"ina% !npr"d!ct" $inal ne!tr" deriad" del meta&"li#m" de la l!c"#a. 7a l!c"#a e#meta&"li8ada a acid" pir9ic"% el principal intermediari" en la l!c"li#i#. A partirdel :cid" pir9ic"% la# &acteria# p!eden #e!ir m!c"# camin"# meta&)lic"#; lapr"d!cci)n de acet"ina e# !na de la# ?&!tan"di"l '" 3%>? &!tilen"lic"l(% c"m" el E. coli 'VP ? ( -

&( 7"# =!e pr"d!cen 3.>?&!tan"di"l c"m" #!# principale# pr"d!ct"#$inale#% c"m" l"# r!p"# Klebsiella Enterobacter.

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El principal pr"d!ct" $inal de la !tili8aci)n del pir!at" de l"# r!p"# Klebsiella Enterobacter% e#pecie# de Serratia% e#pecie# de Bacilllus - m!c"# "tr"#micr""rani#m"# e# el 3%> * &!tan"di"l. Sin em&ar"% la pr!e&a de V"e# *Pr"#+a!er #e &a#a en la detecci)n de acet"ina% !n prec!r#"r en la pr"d!cci)ndel 3%>? &!tan"di"l. Una m"l0c!la de acet"ina #e $"rma p"r la de#car&"2ilaci"n

de d"# m"l0c!la# de :cid" pir9ic".

@arden - alp"le% e#t&lecier"n =!e la acet"ina e# !n e#tadi" intermedi" en lac"ner#i)n a 3%>? &!tan"di"l. 5ant" la acet"ina c"m" la 3%> * &!tan"di"l #"npr"d!ct"# ne!tr"# de la $ermentaci)n de la l!c"#a.

3 Pir!at"Acet"ina 3CO3

@arden - alp"le allar"n =!e c!and" #e $ermenta la l!c"#a% #"lamente #e$"rma !na pe=!ea cantidad del prec!r#"r% acet"ina, !na parte ma-"r delcar&"n" de la l!c"#a e# !#ad" para la $"rmaci)n del 3%> * &!tanedi"l.

Paret#+- - er+man allar"n =!e la $"rmaci)n de acet"ina #e ac!m!la c!and"!n "rani#m" e# c!ltiad" en c"ndici"ne# aer)&ica#. A#< mi#m"% alp"le"er" =!e en el Enterobacter aerogenesp!ede pr"d!cir#e acet"ina a partirdel 3%> * &!tanedi"l c"n !na ma-"r ac!m!laci)n de acet"ina #i el c!lti" e#t:e2p!e#t" al "2ien" atm"#$0ric".

7a acet"ina p!ede #er meta&"li8ada p"r !n" de e#"# d"# medi"#;

1( Red!cci)n a 3%> * &!tanedi"l % =!e #e ac!m!la a men"# =!e #epr"d!8ca la re"2idaci)n% "

3( 7" =!e e# ma# rar"% p"r "2idaci)n en diacetil"% =!e a #! e8 p!ede #er

cata&"li8ad"#

Stal- - er+man enc"ntrar"n =!e la $"rmaci)n de acet"ina - 3%> * &!tanedi"le# !na #i#tema reer#i&le de red!cci)n " de "2idaci)n% en el =!e la acet"ina #ec"nierte p"r red!cci)n en 3%> * &!tanedi"l% " e#te e# "2idad" en acet"ina. C"nla e2p"#ici)n al "2ien" atm"#$0ric" - a !n medi" alcalin" el 3%> * &!tanedi"le# lentamente reer#i&le.

2,3butanediol oxidacion

2,3butanedioldehidrogenasaacetoina

Acetoina reduccion

diacetilo (acetoina) reductasa2,3butanediol

E#t!diand" d"# "rani#m"#% el Enterobacter aerogenes - Staphylococcusauresus% Strec+er - @arar-% ai#lar"n d"# en8ima# re#p"n#a&le# de la "2idaci)nred!cci)n de la acet"ina - el 3%> * &!tanedi"l.

7a $"rmaci)n de 3%>? &!tanedi"l a partir de la $ermentaci)n de la l!c"#a e# p"rl" eneral del tip" del di"l idr"en"; Gl!c"#a 3%> * &!tanedi"l 3 CO3 @3

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E#ta pr"d!cci)n de 3%>? &!tanedi"l pr""ca !n a!ment" de la pr"d!cci)n dean * &!tanedi"l #"n "2idad"# en diacetil"% =!e e# elreactante para el c"l"r pr"d!cid" en la reacci)n de V"e# * Pr"#+a!r. P"r l"tant"% el diacetil" e# !n pr"d!ct" de la "2idaci)n de la acet"ina.

F!ni - @e-m pr"p!#ier"n !n cicl" para la de#c"mp"#ici)n del 3%> * &!tanedi"l%la acet"ina - el diacetil" p"r l"# "rani#m"# capace# de !tili8ar la acet"ina - el3%> * &!tanedi"l c"m" 9nica $!ente de car&"n". C"men8and" c"n 3 m"l0c!la#de 3%> * &!tanedi"l% 1 m"l0c!la del mi#m" e# reenerada - #e $"rma 3m"l0c!la# de :cid" ac0tic"% l" =!e /!#ti$ica el a!ment" de la acide8.

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E# m!- imp"rtante el p@ del medi" de V"e# * Pr"#Ka!r% #e eitara !n p@acid". P"r encima de !n p@ de %> a- ac!m!laci)n de :cid" ac0tic" - $)rmic"%c"n #!pre#i)n de la pr"d!cci)n de CO3 @3 acet"ina - 3%> * &!tanedi"l. P"rde&a/" de !n p@ de %>% el :cid" ac0tic" e# c"nertid" en acet"ina - 3%> *&!tanedi"l% - #e #!prime la pr"d!cci)n de @3 mientra# =!e a!menta la de CO3.

7"# r!p"# Klebsella Enterobacterpr"d!cen m:# alc""l etilic" =!e el E.coli,men"# :cid"# - el d"&le# de CO3 =!e @3 'relaci)n a#e"#a de 3;1(. 7a E.colie# incapa8 de $"rmar acet"ina a partir del pir!at" en el peri"d" de inc!&aci)nn"rmal - tiene !na relaci)n CO3;@3 de 1;1.

7a reacci)n eneral del meta&"li#m" de la l!c"#a p"r l"# r!p"# Kleiella *enter"&acter e# el #i!iente; Gl!c"#a3%> * &!tanedi"l 3C"3 @3

1.> COMPOSICION DE7 MEDIO

Frmula (en gramos por litro) Instrucciones

Pl!ripept"na H. S!#pender 1H del p"l" p"r litr" dea!a de#tilada. Calentar #!aementeaitand" a#ta di#"ler. Di#tri&!ir -e#terili8ar en a!t"clae a 11J?131C

d!rante 1L min!t"#.

Gl!c"#a L.

4"#$at" dip"t:#ic" L.

p@ $inal; . .3CUADRO 1

4UEN5E; 7ABORA5ORIO BRI5ANIA

1. PARA QUE ORGANISMOS SE U5I7IA

E# partic!larmente 9til para la cla#i$icaci)n de Enter"&acteria#.

7a pr!e&a de V"e# * Pr"#+a!er para la acet"ina #e !tili8a #"&re t"d" para#eparar Escherichia coli de l"# r!p"# de Klebsiella Enterobacter.

1.L EFEMP7O DE A7GUNAS BAC5ERIAS

Microorganismo Crecimiento VP

E. c"li A5CC 3L33 B!en" ?

K. pne!m"niae A5CC H> B!en"

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P. mira&ili# A5CC >H1 B!en" ?

S. t-pim!ri!m A5CC 13J B!en" ?

Citr"&acter $re!ndii B!en" ?

Enter"&acter aer"ene# B!en"

RESU75ADOS