Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos

(Antibiograma por difusión con discos - CIM/CBM –

Curvas de muerte - PIS/PBS- VBS – Dosaje de Antimicrobianos)

Mirta G. Quinteros

Orientan tratamiento empírico inicial.

Influencian decisiones sobre el

tratamiento específico individual.

Desarrollo del vademecum hospitalario.

Aplicación de políticas de control de

infecciones.

Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos

Pruebas para evaluar “in vitro” la

sensibilidad a los antimicrobianos

Método de Difusión con discos

Método Difusión cuantitativa (Etest)

Método Dilución (automatizados y no automatizados)

Pruebas de screening (detección fenotípica)

Detección enzimática directa

Detección genotípica de resistencia

Curvas de cinética de muerte bacteriana

Pruebas para evaluar bactericidia

Prueba de sensibilidad a los

antimicrobianos: Método de Dilución

Fundamento

Se basa en los estudios colaborativos de Ericsson y Sherris

Se preparan diferentes concentraciones del antimicrobiano, en el medio de cultivo (caldo o agar), y se enfrentan con el microorganismo en estudio

Se obtienen resultados cuantitativos de concentración de antimicrobiano capaz de inhibir, o no, el crecimiento visible de un determinado microorganismo

Prueba de sensibilidad a los

antimicrobianos: Método de Dilución

El resultado que se obtiene al realizar las pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos utilizando esta metodología se denomina con la sigla CIM

C: Concentración

I: Inhibitoria

M: Mínima

La CIM es la Mínima Concentración del antimicrobiano ensayado capaz de Inhibir el crecimiento visible del microorganismo en estudio.(MIC: Minimal Inhibitory Concentration)

Esquema de la metodología utilizada para realizar el

método de dilución en medio líquido (macrodilución)

ANTIBIOGRAMAS

1. Farmacológico.

2. Epidemiológico.

3. Clínico.

Criterios de Interpretación

Pruebas de Sensibilidad a los

Antimicrobianos

F. Nicola:Módulo 4- ATM2007

HISTOGRAMAS: Distribución de microorganismos Vs CIM

Pruebas de Sensibilidad a los

Antimicrobianos

INTERPRETACIÓN E INFORME64 –

32 –

16 –

8 –

4 –

2 –

1.0 –

0.5 –

I6

I10

I15

I20

I25

I30

I35

(mm)

MIC

(µ

g/m

l)

Resistante Intermedio Susceptible

Pruebas de Sensibilidad a los

Antimicrobianos

1.Antibiograma por difusión con discos o tabletas

Pruebas de Sensibilidad

a los Antimicrobianos

Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos

ANTIBIOGRAMAS POR DIFUSIÓN

TABLETAS

DISCOS de

PAPEL

Tiras E-test

ESCATEGRAMA: CIM [µg/ml] Vs Ө [mm]

F. Nicola:Módulo 4- ATM2007

Pruebas de Sensibilidad a los

Antimicrobianos

RESISTENCIA INTRINSECA Y NATURAL

NATURAL: GRAM (+) : R a polimixina

INTRINSECA:

Bacilos GRAM (-): R a glucopéptidos,eritromicina

Proteae: R a nitrofuranos-polimixina.

Serratia spp: R a polimixina

Enterobacter spp: R a cefalotina

Klebsiella spp: R a ampicilina

Enterococcus spp: R a Cef.1ºG- R de bajo nivel AG.

R a imipenem: S. malthopilia, E.faecium, E.raffinosus

R a vancomicina: E.gallinarum, E.casseliflavus

D-Test

Positivo

Fenotipo iMLSB

Negativo

Fenotipo M (Eflujo)

Pruebas de Sensibilidad

a los Antimicrobianos

Consenso grampositivoa- RAM2003

Ampicilina 20%

Cloranfenicol: 5%

Cefaclor: 5%

Cefuroxima. 3%

todas las cepas R a Amp fueron R a

CMP

AMS / AMC: 0%

Rifampicina: 0%

Resistencia a los antimicrobianos (Argentina n:350)

•Whonet 2004

PRODUCCIÓN DE B-

LACTAMASAS GRAM (+)

Haemophilus influenzae

Mecanismo de R:

R a ampicilina βlasa

Vigilancia de R.

R a ampi cromosómica /CEC)

R a quinolonas ( Ac. Nal)

ß-LACTAMASAS

PLASMIDICAS

•ß-lactamasas de espectro

extendido (BLEE):

TEMderiv

SHVderiv

PER1-2

CTXMderiv

Citrobacter freundii (AmpC + BLEE)

Utilización de los discos CTX-AMC-CAZ

Discos de C3G con y sin ácido clavulánico (CAZ, CTX, CPO)

Halo de inhibición de C3G /Clav 5 mm C3G sola

Enterobacterias productoras de Amp C inducible

Cefepima-AMC

FEPFEC

Métodos para confirmar fenotípicamente

la presencia de BLEE

CTX

CTC

Pruebas de Sensibilidad a los

Antimicrobianos

Detección de la presencia de carbapenemasas

BGN

Curso a Distancia sobre Bacteriología Clínica 2010 – Col. Bioq. Pcia. Bs. As. y Univ. Kennedy –

Mirta Quinteros y Marcelo Marín

carbapenemasas de clase A

Pruebas de Sensibilidad

a los Antimicrobianos

Ácido clavulánico

Perfiles de resistencia

Stapylococcus aureus Penicilinasa

(+)

Meticilino resistente (SMR)

Penicilina

Amoxicilina

Ampicilina

Ampicilina-sulbactam

(AMS)

Amoxilina-clavulanico

CEF 1G (cefalotina)

Oxacilina

Vancomicina

R

R

R

S

S

S

S

S

R

R

R

R

R

R

R

S

Perfiles de resistencia

Bacteroides fragilis

(anaerobios)

Gentamicina, amicacina (AG)

Nitrofuranos

Metronidazol

Amoxicilina-clavulánico

clindamicina

R

R

S

S

S

Perfiles de resistencia

Escherichia coli BLEA BLEE AmpC

Ampicilina

Cefalotina (CEF1ºG

Amoxicilina/clavulanico (AMC)

Ampicilina /sulbactam (AMS)

Ceftriaxona, cefatacidima, cefotaxima (CEF·ºG)

Cefepime (CEF4ºG)

Cefoxitina (cefamicina)

Ertapenem, Meropenem, imipenem

(carbapenemes)

R

R

S

S

S

S

S

S

R

R

S

S

R

R

S

S

R

R

R

R

-

S

R

S

Ciprofloxacina, levofloxacina (FQ) S ó R S ó R S ó R

Colistina (polipeptidos) S S S

Gentamicina, amicacina (aminiglocòsidos) S ó R S ó R S ó R

Resistencia a los antibióticos Amenaza vigente para la

Salud pública