RECUENTO DE GLOBULOS ROJOS Y

GLOBULOS BLANCOS

OBJETIVO

Aprender a realizar y aplicar la metodología para un recuento de Leucocitos por milímetro cúbico de sangre e interpretar el resultado.

RECUENTO DE GLOBULOS BLANCOS

Para el conteo de leucocitos, se usan métodos sistemáticos que son más rápidos y precisos, y los métodos manuales.

Todo método manual de recuento celular incluye 3 fases: Dilución de la sangre Muestreo de la sangre

diluida en un volumen Recuento de células en ese

volumen

MATERIALES:

Cámara de Neubauer

Pipetas de Thoma Diluyente TURK Microscopio Contador para

recuento.

CÁMARA DE NEUBAUER Esta hecha de vidrio óptico. Especial de precisión. Base rectangular y gruesa. En el tercio medio se hallan cuatro ranuras longitudinales. La superficie del puente central es más profunda que los dos

puentes exteriores. En el puente central (fondo de la cámara) están grabadas las

redes de conteo.

Para el recuento de leucocitos se cuentan los 4 cuadrados de las esquinas, que corresponden a los  campos 1, 3,7 y 9.

PIPETA DE THOMA

Pipetas de leucocitos perla blanca

110.5

Para su dilución, se emplea la pipeta de blancos, de modo que la solución que obtenemos es de 1/20. Se utiliza como diluyente el líquido de TURK. El líquido de TURK es hipotónico de modo que se destruyen los hematíes y así no entorpecen en el recuento.

El líquido de TURK consta de ácido acético glaciar 2ml, violeta de genciana 1ml y agua destilada 1000ml. Deberá filtrarse a menudo para evitar levaduras y hongos.

 PROCEDIMIENTO

Toma de muestra: se desinfecta la zona con alcohol al 70%, y se practica punción venosa. La sangre es recogida en un tubo lila con EDTA

Llenar la pipeta de glóbulos blancos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar una dilución de 1/20. Limpiar la punta con gasa o papel absorbente. Si la sangre se pasa de la marca, se puede absorber con gasa el excedente

0.5 11

Introducir la pipeta en el tubo o frasquito que contiene el diluyente (liquido de TURK) y absorber hasta la marca 11, no deben quedar burbujas.

0.5 11

Se tapan ambos extremos de la pipeta con papel parafilm y se coloca en un rotador automático o se hace rotar manualmente de 2-3 minutos

Montar la laminilla de vidrio en la cámara para recuento. Debe estar limpia y seca.

Destapar la pipeta y descartar 3 a 4 gotas, luego colocar una gota pequeña cerca de un extremo de la cámara para que por capilaridad se llene exactamente.

Dejar 3 minutos  que los leucocitos se sedimenten

Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. y contar  en los 4 cuadrados.

En el recuento se incluyen las células que cubren o tocan por dentro o por fuera las líneas limitantes superior e izquierda en el cuadro pequeño de recuento y no se consideran los que estén en los límites inferior y derecho.

CALCULO DEL Nº DE LEUCOCITOS

N° de leucocitos x mm3 = N° de leucocitos contados x 50EJEMPLO: En el análisis hecho,  los resultados de la cuenta de células quedaron así por casilla:

El número de leucocitos fue de 111, que al multiplicarse por 50 daba como resultado    5 550/mm3, lo que indica un índice normal

N° de leucocitos x mm3 = altura x dilución x área N° de leucocitos x mm3 = 1/10 x 1/20 x 4 = 1/10 000N° de leucocitos x mm3 = 4/200 = 1/50N° de leucocitos x mm3 = N° de leucocitos contados x 50

VALORES DE REFERENCIA Hombres y Mujeres:……….5 000-10 000 leucocitos/mm3 Recién Nacidos…………..10 000-12 000 leucocitos/mm3

La cuantificación o recuento de leucocitos es muy importante para el diagnóstico de enfermedades.

Un bajo número de glóbulos blancos se denomina leucopenia y puede deberse a:

• Insuficiencia de la médula ósea (por ejemplo: debido a infección, tumor o cicatrización anormal).

• Enfermedades vasculares del colágeno (como el lupus eritematoso sistémico).• Enfermedad del hígado o el bazo.• Radioterapia o exposición a la radiación.

Un alto número de glóbulos blancos se denomina leucocitosis y puede deberse a:

• Anemia.• Tumores de la médula ósea.• Enfermedades infecciosas.• Enfermedad inflamatoria (como artritis reumatoide o alergia).• Leucemia.• Estrés emocional o físico intensos.• Daño tisular (por ejemplo, quemaduras).

RECUENTO DE GLOBULOS ROJOS

Para el conteo de eritrocitos, se usan métodos sistemáticos que son más rápidos y precisos, y los métodos manuales.Todo método manual de recuento celular incluye 3 fases: Dilución de la sangre Muestreo de la sangre diluida en un volumen Recuento de células en ese volumen

OBJETIVO

Aprender a realizar un recuento de Eritrocitos por milímetro cúbico de sangre, interpretar el resultado, así como adiestrarse en el manejo de la cámara de Neubauer y la pipeta de Thoma

MATERIALES:

Cámara de Neubauer Pipeta de Thoma

para glóbulos rojos (perla roja)

Diluyente HAYEM  Microscopio Contador para

recuento.

 PROCEDIMIENTO

Toma de muestra: se desinfecta la zona con alcohol al 70%, y se practica punción venosa. La sangre es recogida en un tubo lila con EDTA

Llenar la pipeta de glóbulos rojos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar una dilución de 1/200, y si se carga hasta 1, la dilución será 1/100. Limpiar la punta con gasa o papel absorbente. Si la sangre se pasa de la marca, se puede absorber con gasa el excedente

Introducir la pipeta en el tubo o frasquito que contiene el diluyente (HAYEM) y llenar de líquido de dilución hasta la marca de 101

Liquido de Hayem, el cual está formado de 5g de NaCl, 2.5g de Na2SO4, 2.5g de MgCl2 y agua destilada para un litro. Este último es el más usado.Es muy importante observar que en la cámara de Neubauer las áreas de recuento de eritrocitos y linfocitos son diferentes.

PIPETAS THOMA

Pipetas de rojos perla roja

1010.5

Se tapa la punta con papel parafin y se coloca en un rotador automático o se hace rotar manualmente de 2-3 minutos

Destapar la pipeta y descartar 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una gota pequeña cerca de un extremo de la cámara para que por capilaridad se llene exactamente. Dejar 2 minutos  que los eritrocitos se sedimenten

Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. luego con el objetivo de 40x contar sobre el cuadro grande central de la cámara solo en 5 cuadrados pequeños: uno central y cuatro angulares (80 cuadritos del total)

En el recuento se incluyen las células que cubren o tocan por dentro o por fuera las líneas limitantes superior e izquierda en el cuadro pequeño de recuento y no se consideran los que estén en los límites inferior y derecho.

CALCULO DEL Nº DE ERITROCITOS

N° de hematíes x mm3 = hematíes contados x 10 000

EJEMPLO:

En el análisis hecho, el número de eritrocitos fue de 491, que al multiplicarse por 10 000 daba

como resultado 4 910 000/mm3, lo que indica un índice normal.

N° de hematíes x mm3 = altura x dilución x área  N° de hematíes x mm3 = 1/10 x 1/200 x 1/5 = 1/10 000N° de hematíes x mm3 = hematíes contados x 10 000

VALORES DE REFERENCIA(Millones de células/mm3)

Hombres:………………………………..…..4 500 000 - 5 500 000Mujeres:…………………………...……..….4 000 000 - 5 000 000Niños (4 años):……….........................4 200 000 - 5 200 000Lactantes (1-6 meses):....…….……….3 800 000 - 5 200 000Recién nacidos:…………………….……..5 000 000 - 6 000 000

Es importante conocer el numero de eritrocitos se halla

• concentraciones bajas : en pacientes con anemia causada por perdida de eritrocitos o hemolisis .

• concentraciones elevadas: en pacientes con deshidratación o con policitemia,etc

OBSERVACIONES

Diafragma del condensador cerrado en su mayoría

Diferencia < 10 células entre cuadrantes Realizar dobles determinaciones Tener en cuenta que la cámara no esté

reseca Cámara limpia Cubrecámara colocada correctamente No tener burbujas de aire en el relleno de la

cámara/pipeta Cámara sobrellenada Tiempo de sedimentación corto