INSTITUTO SUPERIOR DE CIENCIAS MEDICAS DE CAMAGUEY "CARLOS J. FINLAY"

ACTIVIDAD ANTIFUNGICA IN VITRO DE UNA CREMADE Plantago major L.

Dra. Ayní Rodríguez Pargas,1 Dra. María del Carmen León Padilla,2 Dr. Alberto HernándezRodríguez3 y Dr. Jesús Junco Barranco4

RESUMEN

INTRODUCCION

En los momentos actuales, a pesar del grandesarrollo alcanzado por la síntesis química, lasplantas medicinales continúan siendo un valioso"arsenal" de sustancias biológicamente activas oprecursores de ésta, ya sea en forma de medi-camento vegetal o materia prima para la industriafarmacéutica.1

Dentro de las plantas de la flora cubana encon-tramos al Plantago major L, que pertenece a lafamilia botánica Plantaginacea y es conocidacomúnmente como llantén mayor (figura).

Según datos, a la planta en su conjunto se leconfiere propiedades medicinales, como es suefecto laxante ya comprobado,2 además se reportanposibles actividades diurética, antihemorrágica, an-tiinflamatoria y cicatrizante; también es útil en eltratamiento de llagas y aftas bucales.2-4Además, se

le atribuye un efecto antimicótico de sus hojas, quehasta ahora no ha sido demostrado, pero es muyreconocido por criterios populares.

Teniendo en cuenta la gran incidencia de micosisque existe en nuestra población, y que la mayoríade las drogas y preparaciones antimicóticas ennuestro país son importadas, se investiga el posibleefecto antimicótico de una crema de llantén mayoren un estudio preclínico in vitro, mediante el métodode difusión con discos en agar Saboraud en cepasde Candida albicans, Trichophytum rubrun y el Mi-crosporum canis, y se compara su efecto con otrosantimicóticos como el ketoconazol, la nistatina y eltolnaftato.

Uno de los métodos usados comúnmente en ladeterminación del efecto antifúngico es la pruebacon discos de difusión en agar, en la cual se utilizandiscos de nitrocelulosa impregnados con el com-puesto que se debe ensayar.5-7

1 Doctora en Medicina. Especialista de I Grado en Farmacología. Profesora Instructora.2 Doctora en Medicina. Máster en Medicina Tradicional y Natural. Especialista de I Grado en Farm acología. Profesora Asistente.3 Doctor en Medicina. Especialista de I Grado en Farmacología. Profesor Auxiliar.4 Doctor en Medicina. Especialista de I Grado en Bioquímica.

Se demostró mediante un estudio in vitro, según el método de difusión condiscos en agar Sabouraud, el efecto antifúngico de una crema elaborada conlas hojas de Plantago major en una concentración de 20,7 g de sólidos porcada gramo de ungüento hidrófilo; ésta resultó muy efectiva frente a laCandida albicans, en menor grado, frente al Trichophytum rubrum y no seobservó actividad antimicótica in vitro frente al Microsporum canis . El empleode esta crema significa un ahorro importante, pues su costo es inferior al delos antimicóticos comerciales empleados en nuestro estudio (ketoconazol,nistatina y tolnaftato).

Palabras clave: PLANTAS MEDICINALES; ANTIMICOTICOS; Plantago major;AGENTES ANTIFUNGICOS; POMADAS.

REV CUBANA PLANT MED 1(3):9-12, SEPTIEMBRE-DICIEMBRE,1996

Cuando este ensayo se va a realizar con cepasfúngicas, se plantean muchos inconvenientesrelacionados con la temperatura en la cual crecenlas cepas y la estabilidad de los compuestos usa-dos en tales condiciones durante un tiempo prolon-gado;5,8,9 no obstante, se sigue usando como herra-mienta de incalculable valor para tales fines.5,6 Elmétodo de difusión en agar mediante discos denitrocelulosa es uno de los más usados en elmundo,7,8 por la gran ventaja que posee sobre losdemás, y sus parámetros han sido bien reguladospor el National Committe for Clinicals LaboratoryStandards (NCCLS). Por tanto, este método es elque se emplea en nuestra investigación.

MATERIALES Y METODOS

La planta, objeto de estudio, se recolectó el 5 deabril de 1995 por la mañana, en el municipio Guái-maro de la Provincia de Camagüey, su identificaciónbotánica correspondió a la Academia de Ciencias,con número de herbario 3009.

La crema de Plantago major L. se obtuvo de15 mL de un extracto alcohólico producido con lashojas secas de la planta; el que se adicionó a 100 gde ungüento hidrófilo, de forma tal, que la concen-tración final de la crema fue de 20,7 g de sólidos porcada gramo de ungüento hidrófilo.

Las cepas fúngicas empleadas fueron la Can-dida albicans, el Microsporum canis y el Tricho-phytum rubrum provenientes de pases deaislamiento realizados en casos clínicos positivos,en el Laboratorio de Microbiología del Hospital Pro-vincial Docente "Manuel Ascunce Domenech" de laciudad de Camagüey.

Para realizar el procedimiento se utilizaron 18 pla-cas Petri con medio agar Sabouraud, las cualesfueron divididas en tres grupos de acuerdo con lacepa fúngica que contenían; es decir, se inocularonseis placas Petri con una misma cepa de hongo, tresde ellas portaban la cepa fúngica fundida en elmedio y las tres restantes contenían la mismacepa, pero en este caso estriadas en el mediosólido.

Se emplearon discos de nitrocelulosa de 5 mmde diámetro y se les recubrió la totalidad de susuperficie con cada uno de los productos em-pleados.

Los discos de nitrocelulosa embebidos con cadauno de los productos fueron distribuidos por placaspara cada una de las cepas de hongo, inde-pendientemente de la variante empleada (estriada

o fundida) de la forma siguiente:

-- En la primera placa fueron ubicados dos discoscon ungüento hidrófilo, utilizados como controlesnegativos durante el experimento.

-- En la segunda placa se colocaron discos quecontenían cada uno de los antifúngicos comer-ciales por separados, más dos discos con lacrema de llantén mayor. Además, se colocarondos discos con ungüento hidrófilo como controlnegativo.

-- En la tercera placa se colocaron discos quecontenían cada uno de los antifúngicos comer-ciales por separados, más un disco con la cremade llantén mayor.

Finalmente las placas fueron incubadas durante48 horas a 32 0C hasta observar el crecimiento detodas las cepas empleadas; en ese momento seconsideró oportuna la lectura de las placas.5-7

Los halos de inhibición producidos por los an-t i fúngicos fueron medidos con una reglamilimetrada, que se colocó siempre en la zona demayor diámetro del halo.

Los resultados se expresaron en milímetros yfueron procesados en una microcomputadora IBMcompatible, con el empleo del microsoft Excel ver-sión 4.

RESULTADOS

En la tabla 1 se expresan los resultados obteni-dos al enfrentar las cepas a los productos comer-ciales usados como controles y frente a nuestroproducto de interés (crema de llantén en una con-centración de 20,7 g de sólidos por cada gramo deungüento hidrófilo).

Figura. PLantago major L.

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DISCUSION

Por la similitud en los resultados del experi-mento, con las variables fundida y estriada, fácil-mente apreciables en la tabla 1, decidimosreferirnos para discutir los resultados a una sola deellas (fundida).

Al analizar la tabla 1, podemos ver que la cremade llantén en la concentración empleada tiene unelevado efecto inhibitorio sobre la Candida albicans,que resulta ligeramente superior a la nistatina y alketoconazol al 2 %; esta diferencia no es estadísti-camente significativa, lo que permite confirmar quela crema de llantén, el ketoconazol al 2 % y lanistatina, tienen actividad antifúngica in vitro similar,sobre a la Candida albicans.

Usando la crema de llantén en la misma concen-tración frente al Trichophytum rubrum, se observómenos actividad que con la Candida albicans, peroa su vez la actividad de la crema de llantén sobre elTrichophytum es ligeramente mayor que con lanistatina y es inferior a la mostrada por el ketocona-zol y el tolnaftato; estas diferencias no son estadísti-camente significativa, lo cual evidencia la utilidad denuestra crema frente al Trichophitum rubrum.

El tolnaftato al 1 % fue el antifúngico que mostrómayor poder inhibitorio sobre esta cepa, lo queconcuerda con los reportes.10-11

En el estudio se pudo comprobar que la cremade llantén carece de actividad antifúngica frente alMicrosporum canis, mientras que el tolnaftato y lanistatina poseen actividad antifúngica sobre estacepa, aunque no muy marcada, es significativa alcompararse con la crema de llantén. El ketoconazolresultó el antifúngico más potente de los empleadosfrente a esta cepa, lo que corrobora su amplioespectro recogido en toda la literatura revisada.10-12

El ungüento hidrófilo empleado en nuestro ex-perimento como control negativo no mostró ningún

tipo de actividad antifúngica . Esto nos fue de vitalimportancia para comprobar que la actividadbiológica de la crema se debe a los principios activospresentes en el extracto de las hojas.

Al comparar los valores monetarios de la cremade Plantago major L. con el de los antimicóticosempleados en el estudio, vemos que la crema re-sultó menos costosa (tabla 2), de aquí que su apli-cación en pacientes con afecciones causadas porhongos sensibles a este producto, significa unahorro importante.

CONCLUSIONES

1. La crema de llantén mayor en una concentraciónde 20,7 g de sólidos por gramo de ungüentohidrófilo posee actividad antifúngica in vitro sobrela Candida albicans y, en menor grado, sobre elTrichophytum rubrum, no se muestra tal capaci-dad frente a la cepa de Microsporum canis.

2. La crema de llantén mayor desarrolló un halo deinhibición mayor que el resto de las cremas em-pleadas en el ensayo, cuando se puso en con-tacto con la Candida albicans.

3. La actividad antimicótica de la crema de llanténfrente al Trichophytum rubrum fue mayor que en

Tabla 1. Diámetro en milímetros de los halos de inhibición producidos por las diferentes cremas en me dio agarSabouraud

Cepa fúngica Varian-te

Cremallantén major

Pro-medio

Nistatina Pro-medio

Tolnaftato Pro-medio

Ketoconasol Pro-medio

Ungüentohidrófilo

Candidaalbicans

F 25 2425

25 2021

R R-

22 2323

R RE 26 27 20 20 R R 16 19 R R

Trichophytumrubrum

F 10 1414

8 88

27 1723

13 1816

R RE 15 17 7 9 24 24 17 15 R R

Microsporumcanis

F R R-

13 1013

24 2615

22 2923

R RE R R 13 16 10 10 20 19 R R

Leyenda: R: Resistente. F: Fundido. E: Estriado.Fuente: Formulario de investigación. ISCM-C "Carlos J. Finlay", 1995.

Tabla 2. Valor en pesos de las diferentes cremas an -timicóticas y de la crema de Plantago major L. empleadas

CremaCantidad

(g)Valor en moneda

(pesos)

Ketoconazol 2% 15 3,25Tolnaftato 1% 15 0,60Nistatina 15 1,75Llantén major 30 0,60

Fuente: Farmacia Central del Hospital "Manuel Ascunce Dome -nech". Camagüey, 1995.

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la nistatina, pero inferior a la mostrada por elketoconazol al 2 % y el tolnaftato al 1 %.

4. Económicamente la crema de llantén mayor re-sultó ser menos costosa que los demás produc-tos antimicóticos empleados en nuestro estudio.

SUMMARY

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

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Dra. Ayní Rodríguez Pargas . Instituto Superior de Cien-cias Médicas de Camagüey "Carlos J. Finlay".

Antifungal effect of a cream processed from leaves ofPlantago major, in a concentration of 20,7 µg of solidsper each gram of hydrophilous ointment, was provedthrough a in vitro study by method of diffusion withSabouraud disc agar; this cream was very effective forprotection against Candida albicans, in a lesser extent,against Trichophytum rubrum , and a in vitro antimitoticactivity against Microsporum canis wasn’t seen. Use ofthis cream is a significant saving, because of its costis lower to that of commercial antibiotics used in ourstudy (ketoconazol, nistatin, and tolnaftate).

Key words: MEDICINAL PLANTS; ANTIFUNGALS;Plantago major; ANTIFUNGAL AGENTS; OINTMENTS.

16o CONGRESO INTERNACIONAL DE NUTRICIONDel 27 de julio al 1o de agosto de 1997

Montreal, Canadá

Bajo los auspicios de la Sociedad Internacional de Ciencias de la Nutrición

Para obtener mayor información:

Secretariado16o Congreso Internacional de Nutrición

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