Seguridad Transfusional y Calidad en

Servicios de Transfusión:

Rol de los profesionales de la Salud

Jorgelina Blejer

Fundación Hemocentro Buenos Aires

jlblejer@gmail.com

jblejer@hemobaires.org.ar

mailto:jlblejer@gmail.com

TEMARIO

Infecciones transmisibles por transfusión

(ITT).

Generalidades del Banco de Sangre.

Interpretación de resultados en las

pruebas de Tamizaje.

Introducción de Técnicas de detección de

Ácidos nucleicos virales en el Banco de

Sangre (NAT)

ITT

ITTTransmisión

de un agente

infeccioso

Hemo-componente

Huésped susceptible

Endógena (donante)

Exógena (contaminación

en el procesamiento)

ITT

Virus Parásitos

Priones Bacterias

ITT

MuerteEnfermedad

grave Infección

inaparente

CARACTERÍSTICAS ITT

Presencia en Sangre

Estabilidad a 4°C

Período de incubación asintomático

CARACTERÍSTICAS ITT

patogenicidad,

prevalencia en donantes de sangre

RELEVANCIA

Huésped

inmunocomprometido

CARACTERÍSTICAS ITT

FUENTE DE LA

INFORMACION

INTRODUCCIÓN

Bancosde

Sangre

Control muestras de

donantesITT

FALTA DE DETECCIÓN TRANSMISION

AL RECEPTOR

INTERVENCIONES

Medidas

Selección del donante

Donantes voluntarios

Entrevista

Cuestionario

Tamizaje

Pruebas de alta

sensibilidad

Calidad

SEGURIDAD

TRANSFUSIONALMedidas

Donantes voluntarios

Selección del donante

Reactivos de alta sensibilidad

Mantenimiento de registros

NAT

SEGURIDAD

TRANSFUSIONAL

Control

Criterios de transusión

Evitar descarte

Agentesemergentes

TIPOS DE DONANTES

REPOSICIÓN

DE PRIMERA VEZ

VOLUNTARIOS

DE REPETICION

> ITT < ITT

DONACION VOLUNTARIA: OMS

SELECCIONADOS VOLUNTARIOSNO

REMUNERADOS

BAJO RIESGODONACION REGULAR

DONACION VOLUNTARIA: OMS

EDUCACIÓN INFORMACIÓN DONACIÓN

VOLUNTARIA

Descarte

Eficiencia

Seguridad

transfusional mediante

programas

CUPÓN DE AUTOEXCLUSIÓN

Se debe brindar a cada donante la

oportunidad de indicar confidencialmente

que la unidad recolectada puede ser

inadecuada para transfusión, haciendo

saber que la misma será estudiada para los

marcadores de ITT pero no será utilizada

para ser transfundida.

GUÍA PARA LA SELECCIÓN

DE DONANTESGuía Situación para el uso Ejemplos

Sólo cuestionario Agentes con riesgo definido y sin

pruebas sensibles y específicas

Malaria

Priones

Sólo pruebas No hay preguntas que puedan detectar si

los donantes están en riesgo de infección

WNV

Cuestionario y pruebas Agentes para los que existen factores de

riesgo identificados y pruebas efectivas

HIV, HCV,

HBV

Pruebas específicas Infecciones con alta prevalencia, para un

grupo de receptores que puedan

beneficiarse con las pruebas negativas

CMV

Pruebas en

hemocomponentes

Agentes no detectables en muestras de

donantes

Bacterias

REGULACIÓN EN

DIFERENTES PAÍSES

El cuestionario varía de acuerdo con la

epidemiología regional y pruebas

disponibles.

WNV, nvCJD, Chagas, etc.: no se realizan

pruebas en países no endémicos pero se

pregunta a los donantes de viajes.

HBV: en países hiperendémicos no se

realiza anti-HBc

MARCADORES EN

ARGENTINAM

AR

CA

DO

RE

S

Chagas Par serológico

Sífiis

Brucelosis

HBV HBsAg Anti-HBcore

HCV HCV Ac HCV Ag

HTLV 1/2

HIV HIV Ac HIV Ag

NAT

RESEÑA HISTÓRICA DE

TAMIZAJE EN USA

Sífilis• Implementación década ‘40

• Obligatoria década ‘50

HPT

• ‘60 mas del 30% receptores

• HBsAg 1972

• HBV y HPT no A no B más frecuente en donantes pagos

SIDA

• 1982 Primeros casos

• Pruebas alternativas

• 1985 Primera prueba de tamizaje

PRUEBAS TAMIZAJE

ADICIONALES USA

Año Prueba de tamizaje

1986 ALT y anti-HBcore (subrogantes para HNANB)

1988 Ac para HTLV

1990 Ac para HCV (anti-HCV 1.0)

1991 Anti-HBcore (complementaria para HBV)

1992 Anti-HCV 2.0 – anti – HIV 1/2

1996 Ag p24

PRUEBAS TAMIZAJE

ADICIONALES USA

Año Prueba de tamizaje

1997 Anti HTLV 1-2

1999 NAT para HIV y HCV

2003 NAT para WNV

2004 contaminación bacteriana

2006-

2007

Ac anti-T. cruzi

2007-

2009

NAT para HBV

PRUEBAS DE TAMIZAJE Y

CONFIRMATORIAS USAAgente Marcador Tamizaje Confirmación

HBV HBsAg

Anti HBcore

ELISA-CLIA

ELISA-CLIA

Neutralización

HCV Anti HCV ELISA-CLIA Inmunoblot (RIBA -LIA)

HIV 1/2 Anti HIV

Ag p24

ELISA-CLIA

ELISA-CLIA

Inmunoblot (WB -LIA) IFI

Neutralización

HTLV 1/2 Anti HTLV ELISA-CLIA Inmunoblot (WB -LIA) IFI

Sífilis Treponémico

No trepon.

ELISA-Aglut

Aglut

IFI-Aglutinación

IFI-Aglutinacion

T. cruzi Anti - T. cruzi ELISA-CLIA

Aglutinación

3ª técnica

(RIPA en USA)

¿NAT????

SENSIBILIDAD Y

ESPECIFIDAD

PRUEBAS DE DIAGNÓSTCO

PRUEBA DIAGNÓSTICA

Permite distinguir a la persona que

presenta una patología y a la que no la

presenta.

Tener en cuenta que: Existe una variabilidad inherente a todo

ensayo.

Las personas con la enfermedad presentan variaciones.

Las personas sin la enfermedad presentan variaciones.

ELEMENTOS BÁSICOS

• aquellos en quienes el ensayo resulta negativo y la enfermedad no está presente.

Verdaderos negativos

• aquellos en quienes el ensayo resulta positivo y la enfermedad está presente.

Verdaderos positivos

• aquellos en quienes el ensayo resulta negativo y la enfermedad está presente.

Falsos negativos

• aquellos en quienes el ensayo resulta positivo y la enfermedad no está presente.

Falsos positivos

SENSIBILIDAD

Es la probabilidad de clasificar

correctamente a un individuo enfermo, es

decir, la probabilidad de que para un

sujeto enfermo se obtenga en la prueba

un resultado positivo.

Capacidad del ensayo para detectar la

enfermedad.

SENSIBILIDAD: = VP/VP+FN

ESPECIFICIDAD

Es la probabilidad de clasificar

correctamente a un individuo sano, es

decir, la probabilidad de que para un

sujeto sano se obtenga un resultado

negativo.

Capacidad del ensayo para detectar a los

individuos sanos.

ESPECIFICIDAD =

VN/VN+FP

Sensibilidad

Capacidad de un método para

detectar positivos.

Especificidad

Capacidad para detectar

negativos

PRUEBAS DIAGNOSTICAS

• alta sensibilidad para poder captar a todos los enfermos.

Pruebas de tamizaje

• alta especificidad,para evitar falsos positivos.

Pruebas confirmatorias

CARACTERISTICAS DE LOS

ENSAYOS

Tamizaje

Alta sensibilidad

Adecuada

especificidad

Confirmatorio.

Adecuada sensibilidad

Alta especificidad

VALOR DE CORTE: CUTOFF

Máxima Sensibilidad

Máxima especifidad

Umbral óptimo

RP= RELACIÓN DE

POSITIVIDAD

Cut Off: valor de corte

RP =DO muestra/CutOff

Si la densidad óptica (DO) de lamuestra es menor al valor de corteno reactivaSi la DO excede el valor de corte elresultado es reactivo

ZONA

GRIS?

LOGÍSTICA PARA LAS PRUEBAS

Prueba no reactiva

Resultado Negativo

Liberación de unidad

Prueba reactiva

Inicialmente reactiva

Repetición por

duplicado

Repetición Ambos no reactivosUno o ambos

reactivos

NegativaRepetidamente

reactiva

IMPLICANCIA RESULTADOS

REACTIVOS

Resultados reactivos

Descarte unidad

Probable prohibición de donaciones

futuras

Algoritmos de reingreso

Componentes de donaciones

previas

Recuperacionde componentes

antes de la confirmación

Notificación de pacientes.

Hemoderivados

Confirmación?

NOTIFICACIÓN A

RECEPTORES

Si no existe ensayo confirmatorio, puede

resultar difícil determinar si es una

verdadera infección

Si no hay tratamiento, puede no haber

beneficio para el receptor

Si hay beneficio para Salud Pública

evitar diseminación

ARGENTINA NOTIFICACION POR LEY

PARA PENSAR…

A mayor prevalencia poblacional, mayor probabilidad de

resultados falso-negativos

A menor prevalencia poblacional, mayor probabilidad

resultados falso-positivos

PREVALENCIA

Número de casos de una infección/

enfermedad en un determinado punto en el

tiempo, dentro de una población específica

A menor prevalencia poblacional, mayor

probabilidad

Resultados falso-positivos

Donantes de

sangreVPP

VPP Y VPN

• Es la probabilidad de padecer la enfermedad si se obtiene un resultado positivo en el ensayo. VPP

• Es la probabilidad de que un sujeto con un resultado negativo en la prueba esté realmente sano. VPN

INFLUENCIA DE LA PREVALENCIA

Sensibilidad y

Especificidad

son propiedades intrínsecas a la prueba diagnóstica

Valores predictivos

dependen de lo frecuente que sea la enfermedad a diagnosticar en la población

VPP

ENSAYOS PARA BANCOS DE

SANGRESe eligen por poseer un alto grado de sensibilidad a fin de poder identificar todos los individuos que pudieran estar infectados.

Los ensayos detectan

Anticuerpos,

Antígenos,

Anticuerpos + antígenos

Ácidos nucleicos de los agentes infecciosos.

TIPOS DE ENSAYO:

ANTICUERPOS

Ac en individuos recuperados

Ac en individuos vacunados

Falta de detección en infecciones silentes

DIFICULTADES

TIPOS DE ENSAYO: ANTíGENOS

• Agente infeccioso

• Sus componentesDetección

directa

• Baja sensibilidadDesventaja

• HBsAg

• Ag HCVEjemplos exitosos

TIPOS DE ENSAYO:

ANTÍGENO-ANTICUERPO

HIV

4º generación

HCV

ENSAYOS DE TAMIZAJE

BANCO DE SANGRE

Ensayos

Inmuno-ensayos

ELISA

CLIA

Aglutinación (HA- AP)

Ensayos rápidos

NAT

INMUNOENSAYOS

Laboratorios muy grandes con automatización total

Laboratorios medianos con automatización parcial

Pequeños laboratorios con número limitado de muestras que hacen los ensayos manualmente

INMUNOENSAYOS

Detección de complejos inmunes

ELISAGeneración

de color

CLIA Medición de luz

INMUNOENSAYOS (ELISA –

CLIA)

Son fáciles de realizar,

Muchas muestras.

No requieren uso de sustancias radioactivas.

Son sensibles y específicos.

Se pueden operar en sistemas manuales

abiertos o cerrados automatizados.

INMUNOENSAYOS-AGLUTINACIÓN

Se utilizan para

Chagas (HAI) son Glóbulos rojos sensibilizados con Ag de parásito.

Brucelosis: se usan suspensiones de bacterias muertas y si la muestra contiene Ac se produce aglutinación.

Sífilis : Ac anti reagina (RPR: unidos a partículas de carbón).

Aglutinación pasiva con partículas de gelatina.

MÉTODOS RÁPIDOS

Muchos se basan en una forma de inmunocromatografía

La muestra puede ser suero, plasma, sangre entera.

Las reacciones positivas se visualizan como un punto o

una banda y se incluye una banda o punto control que

se utiliza para validar los resultados.

Los formatos son simples y generalmente no requieren

reactivos adicionales.

Se leen visualmente dando un resultado en minutos.

La lectura es subjetiva y no quedan registros

permanentes.

No se adaptan tamizaje de grandes números de

muestras.

METODO RÁPIDO:

INMUNOCROMATOGRAFÍA

ENSAYOS DE AMPLIFICACIÓN DE

ÁCIDOS NUCLEICOS (NAT)

En esta tecnología, un segmento específico de RNA/DNA es amplificado in vitro.

Permite la detección de niveles bajos de virus en la muestra original

Los ensayos de NAT se pueden realizar en minipooles (MP) o individual (ID).

Se han desarrollado además ensayos multiplex que pueden detectar ADN o ARN de varios virus simultáneamente.

ENSAYOS CONFIRMATORIOS

Resultado confirmado: mejor

asesoramiento Argentina: no es obligatorio confirmar

Notificación

Obligatoria

ENSAYOS CONFIRMATORIOS

• Tratamiento

• TransmisiónAsesorar al

donante

• Probable reingresoIdentificar las reacciones no

específicas

FACTORES INHERENTES AL

ENSAYO Sensibilidad y especificidad Monitoreo de agregado de muestra y reactivos

Reproducibilidad del ensayo y precisión

Presentación del ensayo

Claridad de las instrucciones

Facilidad de uso

Volumen de muestra

Numero de determinaciones por ensayo

Tiempo total del ensayo

FACTORES INHERENTES AL

LABORATORIO

Número de muestras a analizar.

Nivel y competencia del personal.

Equipamiento disponible.

Nivel del sistema de calidad del

laboratorio.

FACTORES LOGÍSTICOS

Selección y validación de proveedores.

Precio.

Disponibilidad y confiabilidad del suministro de reactivos.

Tiempo de vencimiento de reactivos.

Soporte técnico.

Mantenimiento de equipamiento, servicio preventivo y reparación.

EVALUACIÓN DE LOS ENSAYOS:

PANELES

Panele

s

Positivas

Negativas

En seroconversión

Positividad baja

Diversos genotipos

Reacciones cruzadas

BIOLOGIA MOLECULAR

DOGMA BIOLOGIA MOLECULAR

Transcripción inversa (retrovirus)

Ribozimas (ARN con actividad catalítica)

Priones (proteína infecciosa)

BIOLOGÍA MOLECULAR EN

MEDICINA TRANSFUSIONAL

A pesar de la realización del tamizaje de

marcadores serológicos .......T

ran

sm

isió

n

Período de ventana

Donantes asintomáticos

Infecciones silentes

Mutantes o cepas raras

Errores humanos

APARICIÓN DE INDICADORES DE

INFECCIÓN

Lapso durante el cual el donante está infectado pero los resultados de la pesquisa de marcadores son negativos.

TiempoInfección

Reacción inmune

Positivo Serológico

PERÍODO DE VENTANA

Período de ventana

RIESGO ATRIBUIBLE AL PERÍODO

DE VENTANA

HIV > 90%

HBV > 90%

HCV: 73-88%

25% infecciones

silentes

Tiempoeclipse

Positividad Serológica

Virus

NAT y Ag positivo

Reacción inmune

NAT Y DETECCIÓN DE ANTÍGENO

FASE ECLIPSE

dentro del período ventana, durante la cual

no existen evidencias de infección en

sangre por métodos de laboratorio;

incluyendo NAT.

DEBIDO A LA EXISTENCIA DE LA FASE ECLIPSE, NO VIRÉMICA, NUNCA CERRAREMOS EL PERÍODO VENTANA, INDEPENDIENTEMENTE DE LA SENSIBILIDAD DEL MÉTODO DE NAT UTILIZADO.

PERIODO DE VENTANA Y NAT

NAT: DETECCIÓN EN PERIODO DE

VENTANA

Ventana HIV HCV HBV

Duración

(días)

22 70 56

Reducción

por NAT

10-15 41-60 5-6

Duplicación viral

(días)

1 0,3 4

Carga viral 102-7 105-7 102-4

DESVENTAJAS TÉCNICAS Y

ECONÓMICAS INICIALES

Personal entrenado.

Necesidad de gran espacio físico y circulación unidireccional de los materiales.

Se requiere mucho tiempo.

El costo.

Los ensayos comerciales estaban automatizados parcialmente.

ANTECEDENTES DEL CONTROL DE

DONANTES POR NAT

1996: David Kessler, de la FDA, e investigadores de “Retroviral Epidemiology Donors Study” (REDS): implementación NAT.

1997: Paul Ehrlich Institute: introducción NAT (datos reportados por la Cruz Roja de Westfalia en 1996).

1997: Agence Francaise du Sang manifiesta necesidad de implementar NAT.

NAT: ANTECEDENTES

Cruz Roja en Alemania NAT para HIV HBV y HCV en donantes de sangre en 1997.

En USA 1999.

1996 Retroviral Epidemiology Donors Study (REDS)

Desventajas técnicas

y económicas

NAT: ANTECEDENTES

Evento importante “Committee for

Proprietary Medicinal Products” (CPMP)

derivados de plasma hayan sido estudiados

para ARN de HCV (07-1999).

infecciones que se habían producido en

receptores de inmunoglobulinas por vía

endovenosa.

USA

exportación productos sanguíneos a Europa

NAT: ANTECEDENTES

Febrero ‘99, la FDA - AABB donantes de

sangre con NAT para HIV y HCV.

GRUPO DE TRABAJO

AABB

NIH CAP ARC

CONSIDERACIONES PARA

REALIZACIÓN DE “POOLES”.

Disminución de la sensibilidad.

Bloqueo de mayor número de componentes.

Sustancias interferentes: control interno.

Método de “pooleo”.

Remoción de muestras serológicamente reactivas.

Algoritmos para resolver “pooles” positivos.

Algoritmos de confirmación de NAT.

Métodos de concentración de AN.

POOLES

IDMP 6MP 24-16MP 96

500

TAMAÑO POOLES

INDUSTRIA 500

ALEMANIA 96 MINIPOOLES

USA 16-24 6-16 INDIVIDUAL (ID)

NAT: POOL

Pool

reactivo Pooles más pequeños

Liberación de negativas

Descarte de reactivas

negativoLiberación

de unidades

NAT: POOLES ACTUALIDAD

Se han desarrollado sistemas automatizados.

Dos plataformas aprobadas por al FDA, utilizan ensayos múltiples que detectan los Ac. Nucleicos de HIV, HCV y HBV

Están aprobados para pooles de 6 a 16 muestras dependiendo de la plataforma.

HBV- WNV?

REDUCCIÓN DE LA VENTANA CON

DISTINTOS TAMAÑOS DE “POOLES”

MUESTRAS HIV HCV

512 30-50% 50-98%

128 85% 95%

16 >90% >99%

TAMIZAJE POR ENSAYOS

SEROLÓGICOS Y POR NAT.

Se han descripto casos negativos por

técnicas de biología molecular que se

detectaron con los métodos serológicos

convencionales

Uso balanceado de

métodos moleculares y

serológicos

Laperche, S. Transfusion 2008; 48: 576-579

VARIANTES DE HIV NO

DETECTADAS POR NAT

Foglierini et al Transfusion 2011:51; 719

Muller et al Tranfusion 2013:53; 2423

Serologia

positiva

ITT

VENTANA SEROLÓGICA PARA

INFECCIÓN DE HIV, HBV Y HCV

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

3,5

0 10 20 30 40 50 60 70 80 90

arbitr.units

days after infection

Anti-HIV

HBsAg

Anti-HCV

Schreiber GB et al. N Engl J Med, 1996;334: 1685

586.507 personas

2.318.356 donac.

HIV

MARCADORES DE HIV

Comportamiento intermedio entre HCV y HBV

•Período de ventana de antígenos cercana al NAT

•Moderada viremia durante el período de ventana

Busch MP y Col. Transfusion 2000; 40 (2): 1143-159

TAMIZAJE DONANTES DE SANGRE

1° gen Lisados virales HIV 1

2° genAg recomby péptidos específicos

HIV 1/2

3° genDetectan

IgM además de IgG

Grupo O

TAMIZAJE DONANTES DE SANGRE

p24

combos Ag y Ac

NAT Ácidos nucleicos

Ag p24

1996 Ag p24. (Reducción del

período de ventana a 16 días).

1997 ensayos para HIV de cuarta

generación (detección simultánea del

antígeno y anticuerpos HIV).

REDUCCIÓN PERÍODO DE

VENTANA PARA HIV

REDUCCION NAT

ANTICUERPOS

11-15 DÍAS

AG P24

5 -9 DÍAS

Feibig EW, et al AIDS 17: 1871, 2003

RIESGO TRANSMISIÓN HIV

1:2.135.000

Dodd, R. et al. Transfusion 2002; 42: 975

1:3.100.000

Stramer S. et al. N. Engl. J. Med 2004; 351: 760.

RIESGO TRANSMISIÓN HIV

37.174.054 unidades

12 HIV RNA +

2 Ag p24 +

Ninguna unidad fue Ag p24 positiva y HIV RNA negativa

DONANTES DE PRIMERA VEZ 4.1 VECES

MAYOR QUE EN DONANTES DE REPETICIÓN

HTLV

p19 matrix

p24 capsid

p62/ p32 RT

gp 21 transmembrane

Gp 46 surface

p15 Nucleocapsid HTLV

• HTLV-1 (Gallo et al, 1979)

•Paciente con leucemia T del adulto (ATL)

• HTLV-2 (Kalyanaraman et al, 1982)

•Paciente con leucemia de células vellosas

(Hairy cell leukemia)

PRIMEROS RETROVIRUS

HUMANOS

Homología 65%

HTLV-1 endémico HTLV-2 endémico• HTLV-1 aislados • HTLV-2 aislados

DISTRIBUCIÓN MUNDIAL

TRANSMISIÓN

Vías

De madre a hijo

Sexual

Parenteral

TRANSMISIÓN POR TRANSFUSIÓN

Transfusión

Intracelular

sólo con sangre entera o

componentes celulares

probabilidad de transmisión disminuye

cuanto > es el almacenamiento

TÉCNICAS DE TAMIZAJE Y

CONFIRMACIÓN Tamizaje

Aglutinación pasiva (AP).

Enzimoinmunoensayo recombinantes (ELISA).

Muestras repetidamente reactivas

Confirmación

Western blot (WB).

Inmunofluorescencia indirecta (IFI).

ENFERMEDADES ASOCIADAS

HTLV-1

Leucemia T del adulto (ATL).

Paraparesia espástica tropical (TSP).

Dermatitis infectiva, uveitis, etc.

HTLV-2

No ha sido asociado con ninguna enfermedad.

ENFERMEDADES HTLV 1

ATL período de incubación 30-40 años

riesgo 2-4%

TSP período de incubación 3 a 5 años riesgo menos del 1%.

HEPATITIS VIRALES

HEPATITIS VIRALES

HEPATITIS POST TRANSFUSIONAL

•30%‘60

•Niveles muy bajos

Actualmente

HEPATITIS POST TRANSFUSIONAL

Perkins H y Bush M, Transfusion 2010; 50:2082

HEPATITIS NANB

DROGADICCIÓN I.V.

TRATAMIENTO CON DERIVADOS DE

PLASMA

TRANSUSION DE HEMOCOMPONENTES

HCV

NANB

Choo et al

1989

HEPATITIS NANB

Pruebas subrogantes

ALT

Anti-HBcore

PRUEBAS SUBROGANTES

(ALT)Pacientes

receptores de transfusiones

donantes con niveles altos

de ALT

29%

donantes con niveles bajos

de ALT

9%

Alter 1981 JAMA 246, 630

ALT como

subrogante fue

adoptado en

pocos países

PRUEBAS SUBROGANTES (A-

HBC)Pacientes

receptores de transfusiones

Donantes anti HBcore

positivos

Riesgo 2 a 3 veces mayor de desarrollar HPT-NANB

Koziol, 1986 Ann Intern Med 104, 188

Stevens 1984. Ann Intern Med 101, 733.

PRUEBAS SUBROGANTES

’86 anti-HBcore y ALT en USA

eliminaría el 30-50% de las HPT-NANB.

disminuyó de un 0.52% a 0.36%

población de donantes había sido

modificada para reducir el riesgo de

transmisión del HIV .

NIH ‘95: SUBROGANTES

ALT

discontinuada

A-HBc

Marcador subrogante

de HIV

Prevención de HBV

Anti- HCV

específicos

TRANSMISION HBV

Vías de transmisión

Sangre

Drogadicción, Transfusiones, etc.

Perinatal

Muy importante en áreas de altaprevalencia

Sexual

Hetero yhomosexual

Pertenece a la familia Hepadnaviridae,

con doble cadena de DNA

y envoltura lipídica.

pr

Diapo celso bianco

Geographic Distribution of Chronic HBV InfectionGeographic Distribution of Chronic HBV Infection

HBsAg Prevalence

8% - High

2-7% - Intermediate

2% - Low

MARCADORES DE INFECCIÓN POR HBV

ALGORITMOS TAMIZAJE BANCOS DE

SANGRE

Serología

Serología

Serología + NAT

NAT ID

• HBsAg

• HBsAg

• Anti-HBcore

• MP NAT

MARCADORES DE TAMIZAJE

Busch MP y Col. Transfusion 2000; 40 (2): 1143-159

COMPARACIÓN DE MÉTODOS

Reducción

período de

ventana (dias)

Rendimiento

10.000.000

donaciones

HBsAg nuevas 11-15 15-21

MP NAT 9-11 13-15

ID NAT 25-36 35-50

Biswas et al. FDA/REDS HBV Study

HCV- EPIDEMIOLOGÍA

•130-170 millones de infectados crónicos

•3-4 millones de nuevas infecciones por año

•Más de 350.000 muertes por año

VÍAS DE TRANSMISIÓN

Vías

Sangre SexualDe madre

a hijo

Mayor importancia

TRANSMISIÓN POR TRANSFUSIÓN

’60 -’70

25% Receptores

PREVALENCIA EN DONANTES DE

PRIMERA VEZ

INCIDENCIA EN DONANTES DE

REPETICIÓN

Riesgo

actual

0,0001%

DIAGNOSTICO Y TAMIZAJE

Anticuerpos

Antígeno

RNA viral

•Período de ventana de anticuerpos muy grande: 66-70 días

•Alta viremia durante el período de ventana (100.000 Cp/ml)

•Alta velocidad de duplicación exponencial (10-17 hs

MARCADORES DE INFECCIÓN POR

HCV

Busch MP y Col. Transfusion 2000; 40 (2): 1143-159

ENSAYOS SEROLÓGICOS

1° Genc-100-

3 150 d

2° GenNS-3 NS-4

82 d

3° Gen NS- 5 70 d

HCV Ag

• CLIA (Quimiolumniscencia)Ag

• Reactivos combinados Ag-Ac

4° gen

(“combo”)

REDUCCIÓN PERÍODO DE

VENTANA PARA HCVREDUCCION

NAT

ANTICUERPOS

50-60 DÍAS

HCV AG

2-4 DÍAS

Dodd, R. et al. Transfusion 2002; 42: 975 - Coroucé et al, Transfusion. 2000;40:1198

Tobler et al. Vox Sang. 2005;89:201 - Laperche et al Transfusion. 2005;45:1965.

RIESGO TRANSMISIÓN HCV

1:1.935.000

Dodd, R. et al. Transfusion 2002; 42: 975

1:270.000

Stramer S. et al. N. Engl. J. Med 2004; 351: 760.

RIESGO TRANSMISIÓN HCV

39.721.404 unidades

139 HCV RNA+

(33% otros marcadores)

DONANTES DE PRIMERA VEZ 3.3 VECES

MAYOR QUE EN DONANTES DE REPETICIÓN

NAT EN EL MUNDO

33

PA

ÍSE

S

30

.00

0.0

00

do

na

cio

ne

s

Europa: 18

Asia: 9

América: 3

Oceanía :2

Africa :1

Roth WK, Busch MP, Schuller A. Vox Sang 102, 82–90, 2012

NAT EN EL MUNDONAT + n TOTAL +/MILLON

HIV 244 272.520.696 O,9

HCV 680 303.196.074 2,24

HBV 1884 114.286.214 16,48

NAT EN LATINOAMÉRICA.

PERIODOS DE VENTANA HCV HIV HBV

Argentina 1 5 5

Brasil 11 11 12

Méjico 25 4 4

Colombia 0 0 1

Total 37 20 22

Riesgo estimado 1:68.965

(1:50.251-

1:98.039)

1:124.844

(1:80.645-

1:204.499)

1:49.751

(1:32.895-

1:79.365)

The ISBT Working Party for Transfusion-Transmitted Infectious Disease (WP-TTID) Survey for NAT testing in Latin America. Wendel et al. Vox Sang. 103 Suppl 1, 2012

ARGENTINA: PERIODOS DE

VENTANA

donantes HIV HCV HBV Metodología

Htal. Clinicas 20500 3 - - NOVARTIS

Htal Garrahan 58881 1 - - ROCHE

Hemocentro BA 218905 3 1 4 NOVARTIS

Hospital Italiano 43500 - 1 - ROCHE

Córdoba 148500 1 1 NOVARTIS

ROCHE

CIBIC 78398 - - - ROCHE

TOTAL 564684 8 2 5

Chiera A, Rey J, Oknaian S, Blejer J, Remesar M, Livellara B, Magariños J. “Las pruebas

de biología molecular (NAT) y la seguridad transfusional.” Rev Arg Transf 2013; 39:

19-22.

SIFILIS

SIFILIS Y TRANSFUSIÓN

tamizaje en donantes

inactivación del T p en la

sangre refrigerada

diferimiento de donantes con

riesgo

antibióticos en los receptores

diagnostico sífilis trans-mitida por

transfusión

El último caso

informado de

transfusión de

sífilis por vía

transfusional

ARC por

tamizaje

serológico en

donantes

324 casos de

sífilis durante

2007-2008.

1° caso de

transmisión:

1915

1966

Sífilis

Se trata de una infección crónica

generalizada causada por Treponema

pallidum.

Se transmite vía sexual y que se caracteriza

por fases de actividad separadas por

períodos de latencia.

Familia

Spirochaetales

Género Treponema

TRANSMISIÓN

Se transmite generalmente por vía sexual

y se caracteriza por fases de actividad

separadas por períodos de latencia.

También puede transmitirse de madre a

hijo

Raramente por transfusión de sangre o

componentes.

DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO

No treponémico

IgG e IgM contra un complejo antigénico de cardiolipina-

lecitina-colesterol

VDRL

RPR

Treponémico

Detectan Ag treponémicos

específicos

TPHA - TPPA

ELISA

FTA ABS

BRUCELOSIS

Zoonosis distribuida mundialmente. Agentes

causales cocobacilos del género Brucella.

En Argentina, la prevalencia general en

donantes de sangre fue estimada en 0.94%

Un resultado reactivo puede implicar infección

antigua recuperada, o activa, o una reacción

cruzada.

Enfermedad de

Chagas - Mazza

Carlos Chagas

Salvador Mazza

1909: describe

la enfermedad.

1911: primer

caso congénito

y afección

digestiva

1926: primeros

estudios

diagnósticos

1936: transmisión

por transfusión

ante las

requerimiento a

las autoridades

de

eliminación del

vector y su

asociación con la

precariedad en

las condiciones

de vida

Crea y dirige la Misión

de Estudios de

Patología

Regional Argentina

(MEPRA) que funciona

en un hospital y

laboratorio móvil.

Demuestra la naturaleza del

protozoo, su morfología a en

sangre y el ciclo en sistema

digestivo del triatómineo

CICLOS

ÁREAS ENDÉMICAS

18 millones de infectados - 100 millones de personas en riesgo -

40 mil nuevos casos/año por transmisión vectorial - 12 mil

muertes/año

Emigración

a zonas

urbanas

60% en

ciudades

PREVALENCIA60% en regiones de Bolivia

0,01% en USA

MIGRACION

DE AREAS

RURALES A

CIUDADES

MIGRACIONES

OTRAS FORMAS DE TRANSMISIÓN

Transfusiones de sangre.

Transmisión congénita.

Infección por accidentes de

laboratorio.

Transplantes de órganos.

Por alimentos contaminados.

Drogadicción iv.

TAMIZAJE EN BANCOS DE SANGRE

Serología convencional:

Enzimoinmunoensayo (ELISA)-

Quimioluminiscencia

Hemoaglutinación indirecta (HAI).

Aglutinación de Partículas (AP).

Lisado

Recombinante

ARBOVIRUS

WNV

Dengue

Fiebre amarilla

Chikunguya …….

MUCHAS GRACIAS!!!!!