SEROPREVALENCIA DE ANTICUERPOS ANTI Trypanosoma...

MARIANA QUERO

YUBRIANGEL REYES

MARIANA RODRIGUEZ

ALIRIS SÁNCHEZ

KELLY SANTOS

ORLANDO TORRELLAS

SEROPREVALENCIA DE ANTICUERPOS ANTI Trypanosoma cruzi,

INFESTACIÓN AMBIENTAL, INFECCIÓN DE VECTORES Y FACTORES

EPIDEMIOLÓGICOS PARA LA ENFERMEDAD DE CHAGAS EN EL ÁREA

DE INFLUENCIA DEL AMBULATORIO RURAL TIPO I LA UNIÓN,

PARROQUIA SAN MIGUEL. MUNICIPIO URDANETA. ESTADO LARA.

JUNIO- NOVIEMBRE 2005.

BARQUISIMETO, NOVIEMBRE 2005.

UNIVERSIDAD CENTROCCIDENTAL

“LISANDRO ALVARADO”

DECANATO DE MEDICINA

DEPARTAMENTO DE MEDICINA PREVENTIVA Y SOCIAL







AUTORES: MARIANA QUERO

YUBRIANGEL REYES

MARIANA RODRIGUEZ

ALIRIS SÁNCHEZ

KELLY SANTOS

ORLANDO TORRELLAS

TUTOR: DR. RAFAEL BONFANTE

ASESOR: DRA. ANA JARA







_________________________ __________________________

TUTOR ASESOR

DR. RAFAEL BONFANTE DRA. ANA JARA







AUTORES:

MARIANA QUERO

YUBRIANGEL REYES

MARIANA RODRIGUEZ

ALIRIS SÁNCHEZ

KELLY SANTOS

ORLANDO TORRELLAS

_________________________ __________________________

TUTOR ASESOR

_______________________________

JURADO

BARQUISIMETO, NOVIEMBRE 2005.

DEDICATORIA

A todas aquellas personas que padecen de la Enfermedad de Chagas.

A cada uno de los estudiantes y

profesionales de la salud quienes en su larga lucha por el bienestar social dedican

gran parte de su tiempo para conocer un poco más todo lo relacionado con esta

enfermedad.

AGRADECIMIENTO

A Dios todo poderoso quien nos iluminó el camino para finalizar con éxito este trabajo.

A nuestros padres por su amor y apoyo incondicional en la realización de nuestras

metas.

Al Dr. Rafael Bonfante Cabarcas por su gran colaboración en la tutoría de este proyecto

al aportar sus conocimientos y experiencias y dedicar gran parte de su tiempo para la

culminación de este proyecto de investigación.

A la Dra. Ana Jara por su orientación y valiosa colaboración en la asesoría de este

proyecto.

A la Dra. Claudina Rodríguez, asesora científica del área de medicina tropical, por

guiarnos y apoyarnos en nuestra investigación.

A la Lic. Belkys Oviol, asesor sociológico, por su labor en la coordinación de las

comunidades estudiadas.

Al Dr. Juan Luís Concepción, asesor científico, por su desinteresada y excelente

colaboración en el procesamiento de las muestras.

Al Dr. Douglas García y Dra. Damelis Daza por su apoyo en la validación de los

instrumentos y la asesoría en el análisis de los datos e esta investigación.

Al Alcalde Luís Ladino por el apoyo logístico y colaboración brindada junto con el

equipo de choferes de la alcaldía para el transporte del equipo de investigación.

A la Sra. Carmen María Cuicas y su familia por habernos dado alojamiento y por el

cariño brindado.

A la Sra. Euida, enfermera de medicina simplificada, por prestarnos su ayuda en la toma

de muestras y en la organización de las comunidades.

A los líderes de cada comunidad estudiada por su valiosa labor en la organización y

desarrollo del trabajo.

A la Prof. Yubire González, por su valiosa ayuda en trabajo de campo realizado en las

comunidades.

Al Proyecto Integral de Chagas por aportar los recursos financieros.

Al personal que labora en los laboratorios de Parasitología y Bioquímica y a todas

aquellas personas que de una u otra forma hicieron posible la realización de este

proyecto de investigación.







Mariana Quero; Yubriangel Reyes; Mariana Rodríguez; Aliris Sanchez, Kelly Santos;

Orlando Torrellas.

RESUMEN:

Con el propósito de determinar la seroprevalencia de la Enfermedad de Chagas y los factores de riesgo presentes en cuatro comunidades rurales del Municipio Urdaneta, se llevo a cabo un estudio analítico de corte transversal, a través de un muestreo aleatorio simple por lotería, constituyéndose la muestra en 140 viviendas, para un total de 594 individuos y 122 perros, a los cuales se les investigó la presencia de anticuerpos anti Trypanosoma cruzi, tomando muestra de sangre venosa, la cual fue analizada a través de técnicas de ELISA y MABA; además se aplicaron dos instrumentos, que permitieron recabar información sobre los factores de riesgo. Los resultados obtenidos muestran una seroprevalencia en humanos de 9.3 % y en caninos del 3%. Los factores de riesgo relevantes fueron la edad, donde el mayor número de individuos eran mayores de 50 años, con una p=0.0001 mostrando así una asociación significativa con la enfermedad, llama la atención el grupo etario menor de 10 años, donde la seroprevalencia fue de 0%; y la Hipertensión Arterial, con una p=0.0001. Con lo cual se concluye que los caninos no desempeñan un rol importante como reservorios de la Enfermedad de Chagas dentro del domicilio, que no hay transmisión activa de la enfermedad, que persisten los factores de riesgo y que el principal vector identificado y capturado pertenece a la especie Triatoma maculata. Con los datos suministrados en el presente estudio se logró recabar información actualizada sobre la Enfermedad de Chagas en las comunidades estudiadas.

vii

I. INTRODUCCIÓN

La enfermedad de Chagas fue descubierta en 1909 por el Dr. Carlos Ribeiro

Justiniano Das Chagas, durante su trabajo en la campaña antimalárica en el estado de

Minas Gerais Brasil, además, él descubrió el agente etiológico, vector (reduvideos) los

reservorios domésticos y silvestres, así como los animales de laboratorio susceptible a la

infección1.

La enfermedad de Chagas o Tripanosomiasis Americana es una parasitosis

crónica, generada por un protozoario flagelado denominado Trypanosoma cruzi

(T.cruzi) y transmitida al hombre y otros animales (gato, perros, cerdos, roedores) a

través de las deyecciones de insectos hematófagos denominados triatominos1.

Esta enfermedad es exclusiva del continente americano, endémica en 21 países

con 18 a 20 millones de personas infectadas y 100 millones en riesgo de infección. La

mayor parte de los pacientes se presentan en poblaciones rurales, donde la característica

principal es un nivel socioeconómico bajo. Es un problema de salud pública, no sólo por

los altos niveles de incidencia y prevalencia, sino debido a que la gran mayoría de los

pacientes chagásicos presentan reducción de su capacidad física y fallecen en la etapa

más productiva de su vida alrededor de los 40 años, con disminución de los ingresos y

empobrecimiento del grupo familiar. Un aspecto preocupante es que la Enfermedad de

Chagas ha ido modificando su alcance poblacional, afectando actualmente las zonas

urbanas como consecuencia de las migraciones del campo a la ciudad2.

La forma habitual de transmisión del Trypanosoma cruzi al hombre en áreas

endémicas es a través de un insecto hematófago infectado con el parásito. El vector más

importante es el Rhodnius prolixus, el cual tiene hábito intradomiciliario, siendo el

hábitat más frecuente las grietas de las paredes de barro (“bahareque”), los techos de

palma y los nidos de aves. Los vectores Triatoma maculata y Panstrongylus

geniculatus tienen hábitos peridomiciliarios y selváticos, respectivamente3.

El T. cruzi presenta tres formas evolutivas: tripomastigotes, epimastigotes y

amastigotes, su ciclo vital requiere de dos hospedadores, vertebrados e invertebrados.

Los triatominos vectores al alimentarse de un reservorio infectado ingieren los

tripomastigotes sanguíneos circulantes que evolucionarán en su tubo digestivo,

sufriendo transformación a tripomastigotes metacíclicos (formas infectantes). Los

triatominos parasitados al picar al hombre o animal susceptible para alimentarse de

sangre, depositan los tripomastigotes metacíclicos a través de sus deyecciones y ocurre

la entrada de estos por el orificio de la picada o al ocurrir lesiones en piel por el

rascado4.

El T. cruzi también puede ingresar al hombre por otras vías tales como:

transplacentaria (congénita), transfusional, digestiva, contaminación accidental en el

laboratorio, lactancia materna y trasplante de órganos de donadores chagásicos5.

La evolución natural de esta enfermedad se divide en tres etapas clínicas: aguda,

intermedia y crónica que ocurren luego de un periodo de incubación de 4 a 10 días. Un

gran número de humanos infectados se mantienen asintomáticos y otros presentan

manifestaciones clínicas. La fase aguda con una intensa parasitemia que no siempre

tiene expresión clínica (en un 95%), al presentarse se observa en niños y puede iniciarse

como un conjunto de manifestaciones variables en frecuencia e intensidad que

comprende desde la puerta de entrada de la infección (Signo de Romaña y Chagoma de

inoculación) síntomas generales, y/o alteraciones sistémicas4.

La fase indeterminada o de latencia dura meses o años, en la cual el paciente no

presenta sintomatología y puede evolucionar a una fase cardiaca, digestiva o nerviosa,

siendo la primera la única que se manifiesta en nuestro país4.

Entre el 10 y el 33%5 de estos pacientes desarrollarán en un periodo medio de

10 años la Miocardiopatía Chagásica Crónica, cuyos principales hallazgos son bloqueo

de conducción, extrasístoles repetidas, arritmias de diferentes bases anatómicas y/o

aneurisma apical que puede manifestarse como Insuficiencia Cardiaca con grados

variables de cardiomegalia4,6.

Los perros por ser una fuente importante de alimentación para los triatominos

domésticos han sido considerados un reservorio importante del T. cruzi en la mayoría de

los países de Latinoamérica. Asimismo son un factor de riesgo en la transmisión

doméstica del parásito y un centinela natural de la transmisión de T. cruzi. Clínicamente

la enfermedad de Chagas en el perro es a veces sintomática, similar a la del hombre y

puede observarse una fase aguda y una fase crónica. La fase aguda que se instala

después de 5 a 42 días de incubación se manifiesta por fiebre moderada con o sin edema

palpebral, desmejoramiento progresivo, hepatomegalia pronunciada, diversas

adenopatías, perturbaciones cardiacas y alteraciones nerviosas, la forma aguda dura de

10 a 30 días o más, para luego pasar a la forma intermedia (o asintomática) que puede

prolongarse durante años, sin manifestaciones clínicas. La forma crónica se manifiesta

como en el hombre por cardiopatía, megalovisceras y alteración en el sistema nervioso

central, normalmente mortal7.

El diagnóstico de la Enfermedad de Chagas se realiza basándose en la tríada

constituida por la epidemiología, clínica y laboratorio8.

Entre los factores de riesgo epidemiológicos figuran el desconocimiento de la

población general, un nivel socioeconómico bajo que condiciona la existencia de

viviendas inadecuadas (casas rurales construidas con paredes de bahareque y techos de

palma), desordenes dentro y fuera de las viviendas, el almacenamiento de cosechas

intradomiciliarias, la ubicación de corrales plantaciones , gallineros y anexos de

bahareque anexos a la vivienda, la existencia de animales domésticos (perros, gatos,

aves) y animales silvestres (murciélago, roedores, cachicamos y rabipelado), todos estos

factores sirven de hábitat y fuente de infección para la enfermedad9.

La serología es una herramienta importante en el diagnóstico y epidemiología de

T. cruzi, ya que, el parásito no puede ser demostrado en la fase crónica y su diagnóstico

en dicha etapa se basa en la detección de anticuerpos específicos a los antígenos del

parásito. Un gran número de pruebas serológicas sensibles a anticuerpos anti T. cruzi

han sido utilizadas en Latinoamérica, entre estas se encuentran la aglutinación directa,

ELISA e inmunofluorescencia indirecta las cuales tienen una alta sensibilidad y

especificidad. Actualmente se usa al menos dos métodos validados en cada laboratorio

interesado en el diagnóstico5. Actualmente también se utiliza la técnica MABA (The

multiple antigen blot assay) la cual permite la investigación simultánea de 28 antígenos

diversos basados en la metodología de ELISA10.

Siguiendo el orden de ideas de esta investigación, se define el Indice de

Infestación de los hogares y lugares a triatominos como la medida en grado de la

cantidad de viviendas y/o lugares (entendiéndose por lugares aquellos depósitos,

corrales, chozas, anexos de bahareque, que estén alrededor de la vivienda o

peridomicilio) que contengan vectores (triatominos) infectados o no con T. cruzi11

. El

Indice de Infección del Vector se define como el número de vectores infectados con T.

cruzi del total de triatominos capturados. El Indice de Colonización está representado

por el número de viviendas donde se encontraron ninfas entre total de viviendas

infestadas. El Indice de Dispersión es el resultado de la relación entre el número de

comunidades donde se encontraron vectores y el número de comunidades estudiadas. Y

finalmente el Indice de Coinfección se determina por la relación entre el número de

viviendas donde se encontraron 2 especies de vectores y el número de casas infectadas.

El examen clínico del paciente chagásico debe ser siempre complementado con

un electrocardiograma, Radiofrafía de tórax a fin de evaluar su estado actual y elaborar

un pronóstico aproximado. Otros estudios no invasivos que pueden emplearse en

pacientes con serología positiva pueden ser electrocardiografía dinámica holter y

ecocardiograma5.

La Enfermedad de Chagas se encuentra ampliamente distribuida, se estima 1

millón de casos nuevos anuales de esta parasitosis que causa la muerte a 45.000

personas. Según la Organización Mundial de la Salud (OMS 1999) los países más

afectados son Brasil, Argentina, Chile, Venezuela, Colombia, Guatemala, Perú, Bolivia,

Paraguay, El salvador, Honduras, Panamá, Costa Rica y Uruguay 9.

Se ha realizado en Latinoamérica una amplia investigación, para el año 1994 en

Paraguay, se llevó a cabo un estudio el cual hace referencia sobre la necesidad de

mejoramiento de la vivienda, fumigaciones, preparación de las comunidades para la

aplicación del insecticida, evaluación del efecto residual del mismo sobre las ninfas,

acción educativa y participación comunitaria como medidas para el control de la

Enfermedad de Chagas9.

En 1998 en Argentina, se ejecutó un estudio en el cual se aplicaron las técnicas

de hemoaglutinación, ELISA e inmunofluorescencia indirecta para la detección de la

Enfermedad de Chagas en 16.768 pacientes, resultando con serología reactiva 1.645

individuos9.

Debido a que el agente etiológico de la Enfermedad de Chagas se mantiene en la

naturaleza parasitando gran cantidad de reservorios entre ellos los perros; en Argentina

se realizó un estudio que reportó 41% de perros infectados y 39% de gatos infectados

por Trypanosoma cruzi12.

En el mismo ámbito, en Costa Rica; Reyes, L. y otros (2002) estudiaron la

seropositividad por Trypanosoma cruzi en perros callejeros y mascota en zonas

endémicas y no endémicas, encontrándose en perros mascota de zonas endémicas un

5.2% mientras que en zonas no endémicas fue de 1.6%; en perros callejeros el

porcentaje de positividad fue de 12% independiente de si fueron capturados en zonas

endémicas o no endémicas12.

Durante los últimos cinco años, en el país se han realizado diversos trabajos,

entre los cuales se encuentra el elaborado por Añez y Carrasco (1999); el cual reportó

una prevalencia de 16.3% (289 casos positivos de una muestra de 1776 sujetos) a

Trypanosoma cruzi en Venezuela, con la siguiente distribución de frecuencia por

estados: Monagas 55%, Cojedes 30.8%, Barinas 25,7%, Trujillo 23,8%, Portuguesa

19,4%, Mérida 7,3% y Falcón 1.5%13.

Así mismo; Travieso, en 1999 en un estudio de seroprevalencia realizado en el

banco de sangre del Hospital Central de San Felipe Estado Yaracuy, en 3.807 muestras

de donantes examinados desde Enero de 1994 hasta Febrero de 1995, determinó un

promedio de infección de 1.5 %9.

Según la OMS/OPS, la Enfermedad de Chagas en Venezuela es considerada de

riesgo, para aproximadamente 6.000.000 de personas que viven en 198 municipios de

14 entidades federales para el año 2000. Los estados con mayor tasa de prevalencia para

este mismo año fueron Carabobo (35.7%), Lara (15.8%), Anzoátegui (9.9%),

Portuguesa (9.7%), Táchira (9.5%) y Cojedes (8.9%)14.

Para el año 2003; Cannova, D. y colaboradores realizaron un estudio sobre

aspectos epidemiológicos asociados a la Tripanosomiasis Americana en la comunidad

Las Cuevas, Estado Carabobo, donde se evaluaron el 95% de las viviendas, de las

cuales el 68% presentaban características de rancho, 79% con paredes de bahareque y

un 57,9% con techo de palma aptos para el vectores. Se evaluó serológicamente el 74%

del total de la población, de los cuales el 49% eran menores de 18 años. El 100% de los

seropositivos eran mayores de 44 años y habitaban en ranchos con paredes de

bahareque, 53% con techo de palma y 46,2% con techos de zinc14.

La situación en el Estado Lara no es diferente; para el año 1999, Bonfante, R. y

colaboradores realizaron un estudio seroepidemiológico de Chagas en comunidades

rurales del Estado Lara, con 1855 individuos analizados de los municipios Torres,

Crespo y Andrés Eloy Blanco. Detectaron 104 pacientes positivos (5,6%) de los cuales

la mayoría manifestó conocer el chipo y habitar en casas de bahareque y techo de paja.

En estos municipios se recolectaron 143 triatominos de las especies Panstrongylus

geniculatus 138 y 5 Rhodnius prolixus resultando positivos para T. cruzi 9, 79%14.

Por otro lado; en Noviembre del 2002 a Noviembre del 2003 se realizó un

estudio en Cauderales (Municipio Urdaneta), Guariquito (Municipio Moran) y

Municipio Nirgua, comunidades pertenecientes a los estados Lara y Yaracuy

respectivamente; en las cuales se encontró que 60 especimenes de los recolectados en

Guariquito correspondían a Panstrongylus geniculatus, de los cuales 15% estaban

infectados, en Cauderales 225 especimenes de Triatoma maculata, de los cuales 1,08%

estaba infectado. En Nirgua se recolectó 1 espécimen de Rhodnius prolixus y 22 de

Panstrongylus geniculatus, de los cuales 8.7% estaba infectado. La seroprevalencia de

anticuerpos anti-Trypanosoma cruzi fue del 11.40% en Cauderales, 6.80% en

Guariquito y 5.6% en Nirgua15.

En el mismo ámbito, García A. y otros con el propósito de determinar la

seroprevalencia de la enfermedad de Chagas y los factores de riesgo presentes en cuatro

comunidades rurales del Municipio Torres (Diciembre 2003 – Abril 2004) llevó a cabo

un estudio en 154 habitantes, los resultados obtenidos mostraron una seroprevalencia

total de 3.9%. Los factores de riesgo relevantes fueron el desorden peridomicilio con

98,9%, intradomiciliario 97,7% y plantaciones alrededor de la vivienda 93.1%, por otra

parte el principal vector reconocido en esta área fue Triatoma maculata9.

Las investigaciones antes mencionadas demuestran tasas de seroprevalencia para

la Enfermedad de Chagas elevadas, no solo a nivel Mundial sino también en el Estado

Lara, afectando principalmente áreas rurales con bajo nivel de desarrollo.

La enfermedad de Chagas es una parasitosis exclusiva del continente

Americano, se estima que cada año la enfermedad de Chagas produce un millón de

nuevos casos y causa la muerte de 45.000 personas. Venezuela no escapa de esta

realidad, según la OMS-OPS (2000) en Venezuela la enfermedad de Chagas es

considerada de riesgo en aproximadamente 6 millones de personas que viven en 198

municipios de 14 entidades federales, dentro de un territorio de 101.488 Km2. Los

estados con mayor tasa de prevalencia para el periodo de 1992-2000 son: Carabobo,

Lara, Anzoátegui, Portuguesa, Táchira y Cojedes. El estado Lara es la segunda entidad

con mayor afectación de dicha parasitosis, donde se mantiene la prevalencia de la

enfermedad de Chagas y permanece por lo tanto la transmisión activa de ésta. Dentro

del estado Lara, el Municipio Urdaneta es el de mayor pobreza y ocupa el cuarto lugar

entre los municipios más pobres de Venezuela. En este Municipio la enfermedad de

Chagas es endémica y presenta la mayor prevalencia debido a la presencia de todos los

factores de riesgo que favorecen la existencia de la enfermedad.

En Venezuela no se llevan registros ni estadísticas que indiquen cual es la

prevalencia de la enfermedad de Chagas en especies domésticas, así como estudios que

evalúen el rol que desempeñan los mismos en la cadena epidemiológica de la misma, y

aún más cuando se conoce que el ciclo domiciliar del vector de la enfermedad es cada

vez más importante en su transmisión. Lo que obliga a evaluar si los animales

domésticos caninos están desempeñando un rol importante como reservorios de ésta

dentro del domicilio. A tal efecto se llevo acabo una investigación de tipo analítica de

corte transversal, orientada a determinar la seroprevalencia de anticuerpos anti

Trypanosoma cruzi, infestación ambiental, infección de vectores y factores

epidemiológicos para la Enfermedad de Chagas en el área influencia del ambulatorio

rural tipo I La Unión, Parroquia San Miguel perteneciente al Municipio Urdaneta.

Estado Lara. Junio- Noviembre 2005.

De la misma forma, se determinó la seroprevalencia de anticuerpos anti

Trypanosoma cruzi, en la población humana y canina, correlacionó la seropositividad de

anticuerpos anti Trypanosoma cruzi en la población humana con la seropositividad de

anticuerpos anti Trypanosoma cruzi en la población canina que co- habitan en el mismo

domicilio, se determinó la especie de triatominos predominante, porcentaje de infección

a Trypanosoma cruzi en los vectores capturados y recolectados en los domicilios y

lugares, así como los factores de riesgo relacionados con la enfermedad de Chagas en

las comunidades antes mencionadas.

La población estuvo constituida por 277 viviendas pertenecientes a cuatro

comunidades dependientes del área de influencia del Ambulatorio Rural tipo I La

Unión: La Unión (121), La Parada (66), La Loma (40) y El Turagual (50); se seleccionó

una muestra de 140 viviendas, escogidas a través de un muestreo aleatorio simple por

lotería, tomando como criterio de inclusión todas las personas y caninos que habitan en

las mismas. El total de humanos muestreados fue de 594 personas y 122 caninos. Las

muestras sanguíneas fueron procesadas en el Laboratorio de Enzimología de parásitos

de la facultad de Ciencias de la Universidad de los Andes, Estado Mérida; donde se

aplicaron a cada una las técnicas de ELISA y MABA para la determinación serológica

de anticuerpos anti Trypanosoma cruzi. Para la recolección de datos se utilizaron dos

instrumentos; guía de observación y entrevista estructurada, que incluyeron las variables

de interés. La recolección de los vectores se realizó a través de la captura activa y

recolección pasiva por parte de los habitantes de dichas comunidades.

La Enfermedad de Chagas constituye una amenaza permanente para casi la

cuarta parte de toda la población de América Latina, con predominio en áreas rurales. Si

bien la enfermedad se encuentra presente en gran parte de América Latina, sus

manifestaciones y características epidemiológicas son altamente variables entre una y

otra zona endémica. Existe una gran diversidad en las tasas de seroprevalencia, factores

de riesgo, vectores y reservorios. Esta investigación muestra información actualizada

sobre la Enfermedad de Chagas en las en las comunidades del área influencia del

ambulatorio rural tipo I La Unión, Parroquia San Miguel perteneciente al Municipio

Urdaneta. Estado Lara., constituyendo un aporte al Ministerio de Salud y Desarrollo

Social para que desarrollen protocolos y modelos de vigilancia, control serológico, así

como la planificación y ejecución de acciones integrales de eliminación del vector,

control de reservorios domésticos y educación sanitaria.

Más que cualquier otra enfermedad parasitaria, la enfermedad de Chagas se

relaciona con el desarrollo económico y social de la población. La mayor parte de los

pacientes se presentan en poblaciones rurales, donde la característica principal es un

nivel socioeconómico bajo, que condiciona la existencia de viviendas inadecuadas, los

datos estadísticos aportados por este estudio muestran los diversos factores de riesgo de

la Enfermedad de Chagas presentes en las comunidades estudiadas, lo que brinda a los

habitantes un panorama de la situación de su comunidad permitiendo a los mismos

implementar programas dirigidos a la eliminación física a través de la limpieza

mecánica y crear talleres educativos con el objeto de lograr un cambio de

comportamiento para evitar la acumulación de estos enseres y otros objetos dentro de

las habitaciones y alrededor de la vivienda. Por otra parte constituye un aporte a las

autoridades Gubernamentales para implementar programas dirigidos a la mejora de las

mismas.

II. MATERIALES Y METODOS

Se realizó una investigación de tipo analítica de corte transversal, orientada a

determinar la seroprevalencia de anticuerpos anti Trypanosoma cruzi en la población

humana y canina, infestación ambiental, infección de vectores y los factores

epidemiológicos de riesgo en el área de influencia del Ambulatorio Rural tipo I La

Unión, Parroquia San Miguel, perteneciente al Municipio Urdaneta, Estado Lara,

durante el período Junio – Noviembre 2005.

El Municipio Urdaneta es el segundo municipio en extensión del Estado Lara

con 3.623 Km2, se encuentra ubicado en la región Norte del mismo (Anexo 1). Tiene

una población aproximada de 54.725 habitantes repartida en cuatro parroquias:

Siquisique, Moroturo, San Miguel y Xaguas16. Se escogió el área de influencia del

Ambulatorio rural Tipo I La Unión, el cual tiene 6 comunidades dependientes del

mismo: La Unión, El Turagual, La Loma, La Parada, Tunere y Las Playitas,

pertenecientes a la Parroquia San Miguel. De éstas solo se tomaron las cuatro primeras,

ya que fueron las que se mostraron interesadas en participar en el estudio, mediante la

realización de mapas de cada comunidad y de un censo de los individuos y caninos que

habitan en cada una de las viviendas.

El procedimiento se inició con la revisión de antecedentes y bases teóricas

sobre la enfermedad de Chagas en humanos y en caninos. Previo a la visita del equipo

de investigación, un grupo coordinado por una socióloga encargada del plan de

desarrollo endógeno del Municipio Urdaneta, procedió a contactar los jefes de las juntas

de vecinos, luego se realizó un diagnóstico comunitario por medio del levantamiento de

croquis de las comunidades (Anexo 2) con la finalidad de determinar el número, tipo y

ubicación de las viviendas, así como el número de personas y caninos que habitaban en

cada una de las mismas, posteriormente se convocó a los habitantes de cada comunidad

a una reunión donde se les explicó los procedimientos del estudio y los objetivos del

mismo, con el fin de obtener la colaboración de los integrantes del área. La unidad de

muestreo fue la vivienda.

La población estuvo constituida por 277 viviendas pertenecientes a las cuatro

comunidades de influencia del Ambulatorio Rural tipo I La Unión: La Unión (121), El

Turagual (50), La Loma (40) y La Parada (66)17. El tamaño de la muestra se estimó en

98 casas, teniendo como criterio de inclusión todas las personas y caninos que habiten

en dichas viviendas escogidas a través de un muestreo aleatorio simple por lotería. Se

calculó con una varianza de 11, asumiendo una prevalencia del 11 % según estudios

previos, un 95 % de confianza y 3,9 % de error.

Se seleccionó una muestra de 140 casas: La Unión (59), El Turagual (34), La

Loma (23) La Parada (24). Esto representa el 50 % del total de las viviendas. La

variación del muestreo entre las diferentes comunidades se debió en la negativa de

algunos individuos a formar parte de la investigación. El total de humanos muestreados

fue de 594 personas y 122 caninos.

Para expresar los factores de riesgo presentes en las viviendas, las mismas se

dividieron en subconjuntos de acuerdo a las siguientes características: viviendas

consolidadas (piso de cemento o cerámica, paredes de bahareque o bloque frisadas,

techo de acerolit, tejas o platabanda) y no consolidadas, en las cuales se incluyen las

chozas (piso de tierra, techo y/o paredes de caña, palma o acho -esqueleto de madera de

los cardones-) y los ranchos (piso de tierra o de cemento, techo de zinc y paredes de

bahareque no frisado).

Se realizaron 3 visitas a las comunidades antes mencionadas, una de 5 días

consecutivos y 2 visitas de 3 días. El equipo de trabajo a su vez se dividió en 3 sub-

equipos integrados por dos personas que fueron acompañados por 1 persona de cada

comunidad. Se dividió el área de trabajo de manera aleatoria. Se acudió a cada una de

las casas seleccionadas, informándole a las familias los objetivos de la investigación, y

luego de haber obtenido el consentimiento de la persona o de su representante para

ingresar al estudio se les tomaron los datos correspondientes a una entrevista

estructurada (Anexo 3) y luego se tomaron las muestras humanas, donde se procedió

a la extracción de 5 a 7 cc de sangre por venopunción a cada uno de los individuos que

aceptaron participar en la investigación. Luego de que la muestra sanguínea se coagula,

la misma se centrifuga obteniéndose el suero que es guardado en pequeñas alícuotas. En

caso de que los individuos fuesen menores de 5 años, o la extracción por venopunción

fuese difícil, la toma de la muestra se realizó por punción con lanceta en el pulpejo del

dedo índice o pulgar con el capilar heparinizado. Posteriormente, se coloca el contenido

completo del capilar en porciones de papel de filtro Whattman No 1. Las muestras

sanguíneas de los perros se obtuvieron por punción de las venas safena o radial, previa

autorización y colaboración de su dueño para sujetar y colocarle el bozal al canino y

siguiendo las normas éticas de manejos de animales, además se contó con el apoyo de

un docente y 2 estudiantes de veterinaria. Las muestras fueron procesadas en el

Laboratorio de Enzimología de Parásitos de la Facultad de Ciencias de la ULA, Estado

Mérida, bajo la supervisión del Doctor Juan Luís Concepción y donde se aplicó a cada

una de ellas las técnicas de ELISA y MABA 9,10 (Anexo 4 y 5) para la determinación

serológica de anticuerpos anti Trypanosoma cruzi. En todos los casos se utilizó un

antígeno recombinante de enzimas del glicosoma del parásito. Los individuos o caninos

que resultaron positivos con la técnica de ELISA se les realizó la técnica de MABA

para confirmar el diagnóstico. De las muestras que resultaron negativas para la técnica

de ELISA, se tomó un 10% y se les realizó la técnica de MABA para detectar falsos

negativos. Se tuvo como pauta para el diagnóstico serológico del individuo y del

canino: positivo cuando dos pruebas son reactivas y negativa si una o ambas pruebas

eran no reactivas. Finalmente se procedió a recoger los datos correspondientes a una

guía de observación de la vivienda y del peridomicilio (anexo 6), la cual fue realizada

por una o dos personas en un tiempo que varió de 15 a 30 minutos.

La entrevista estructurada y la guía de observación fueron tomadas de la tesis de

Loyo, Y. y cols. y modificada de acuerdo a los objetivos específicos planteados en el

presente trabajo 13 . La entrevista estructurada está dividida en 4 partes y tuvo como

objetivo recoger información cuyo pronóstico fundamental radicó en detectar la

presencia de factores de riesgo para la Enfermedad de Chagas en las comunidades

estudiadas. La I parte recogió información sobre la identificación y grado de

instrucción del entrevistado presente al momento de realizar la misma. La II parte

estaba conformada por 25 ítems, donde se realizaron preguntas cerradas acerca del

conocimiento del vector y antecedentes relevantes para la Enfermedad de Chagas:

reconocimiento del vector y tipo de triatomino reconocido, lugar donde ha visto a el

vector y tiempo en que notó la presencia del mismo, picadura del triatomino, examen de

despistaje realizado y resultado del mismo, haber residido en lugares donde se hallan

encontrado vectores, transfusión y/o donación de sangre, si ha comido carne de

animales silvestres o de caza y si la madre del mismo ha sido picada por el triatomino.

Si fuma, come chimó o toma alcohol y con que frecuencia, si es alérgico, diabético,

hipertenso, si sufre de enfermedades autoinmunes, infecciones a repetición y

helmintiasis. En la III parte se reportaron los resultados de las técnicas serológicas

(ELISA y MABA) para Trypanosoma cruzi realizada a los individuos estudiados. En la

IV parte se reportó información sobre el perro que habitaba en la vivienda o en el

peridomicilio de la misma (nombre y edad del perro) y el resultado de las técnicas

serológicas (ELISA y MABA) para Trypanosoma cruzi realizadas al canino.

La guía de observación (Anexo 6) está dividida en 3 partes: I parte

Identificación: nombre y apellido del jefe de familia presente en el momento de realizar

la observación, nombre de la comunidad y número de la vivienda. La II parte consta

de 14 ítems, teniendo como objetivo principal determinar la presencia de factores de

riesgo para la Enfermedad de Chagas, los cuales son: presencia de espacios en la

vivienda, especificando el número de los mismos (dormitorios, sala, comedor, cocina,

estar, baños, sala-comedor, sala-comedor-cocina, depósitos, un solo ambiente u otros).

Las características de las paredes (paredes de acho, caña y/o palma, bahareque frisado o

no, bloque frisado o no), del techo (techo de acho, caña y/o palma, zinc, asbesto,

acerolit, tejas y platabanda) y piso (piso de tierra, de cemento, de cerámica o de

granito) de las viviendas, presencia de grietas en las paredes de las mismas, presencia de

animales domésticos en la vivienda o alrededor de las mismas y tipo de animal

doméstico (perros, gatos, ovinos, caprinos, porcinos, gallinas, palomas, gansos, bovinos,

pavos, pájaros u otros), presencia de animales silvestres en la vivienda o sus alrededores

y tipo de animal silvestre (roedores, rabipelados, cachicamos, perezas, osos

hormigueros, murciélagos, otros). Dentro de la vivienda se observó si existía adecuada

distribución de espacios o desorden (objetos, mobiliario y/o ropa mal arreglados;

artefactos viejos, dañados y/o desechos acumulados; materiales de construcción;

limpieza inadecuada de la vivienda; desechos de basura) y presencia en el peridomicilio

de adecuada distribución de los espacio o desorden (desechos de vidrio, plástico o

metal, botellas, latas, recipientes vacíos y/o cauchos, escombros y materiales de

construcción, basura, artefactos viejos, dañados y/o desechos acumulados, limpieza

inadecuada del peridomicilio). Se observó además si existían en el peridomicilio (0-12

metros) corrales, depósitos, gallineros, construcciones de bahareque, cuevas de animales

silvestres y de cual animal, palomares, nidos de pájaros especificando cuantos y de que

tipo de pájaros. Se observó también la presencia de triatominos en sus diferentes

estadios en la vivienda o en el peridomicilio. La III parte consta de 4 ítems, los cuales

aportaron información sobre si se le entregó envases identificados para la recolección

de vectores a los habitantes de las viviendas y cuantos envases. También se recogió

información sobre la recolección pasiva de los triatominos (lugar y hora de la captura) y

si el Xenodiagnóstico de Brumpt (Anexo 7) realizado a los mismos era negativo o

positivo para Trypanosoma cruzi.

La recolección de los vectores se realizó de dos maneras: captura activa y

recolección pasiva, en ambos casos, los vectores recolectados fueron colocados en

recipientes previamente identificados con el número de la casa donde se consiguieron,

especificando fecha, hora y lugar de la recolección del mismo. Para la captura activa se

procedió a revisar cada casa de manera sistemática por áreas, además de la revisión

manual con pinzas y linternas, se colocó insecticida diluido como excitante en las

grietas, rendijas y espacios pequeños de difícil acceso para facilitar la salida de los

vectores. En el peridomicilio (hasta 12 metros del domicilio) se revisaron los árboles,

arbustos, cuevas, nidos, corrales, acumulo de enseres o desperdicios y construcciones

adjuntas. La recolección pasiva fue realizada por los habitantes de las comunidades

sobre los vectores que atraídos por la luz llegaron a sus viviendas en horas nocturnas o

fuesen capturados durante sus faenas laborales en las áreas de la comunidad. Los

triatominos capturados fueron llevados al Laboratorio de Parasitología de la UCLA,

Barquisimeto donde se clasificaron de acuerdo a sus características morfológicas y se

les realizó examen del contenido intestinal. Posteriormente se determinaron los índices

de infección del vector, de infestación domiciliaria, de colonización de las viviendas

infestadas, índice de dispersión e índice de coinfección. (Anexo 8).

Los resultados son presentados en valores absolutos, porcentajes e índices y

expuestos en tablas descriptivas y/o analíticas y gráficos. Para analizar la asociación de

un factor de riesgo y la seropositividad se utilizaron tablas de contingencia, las cuales

fueron analizadas mediante la prueba de Chi2 y calculado el riesgo relativo, aceptando

como significativo valores de p< 0,05 y riesgos relativos cuyos intervalos de confianza

no fuesen nulos. El análisis estadístico fue realizado usando los programas Excel y

Prism 4.0.

III. RESULTADOS

GRAFICO Nº 1

DISTRIBUCION DE LA SEROPREVALENCIA DE ANTICUERPOS ANTI- Trypanosoma cruzi EN HUMANOS EN LAS COMUNIDADES

DEPENDIENTES DEL AMBULATORIO RURAL TIPO I LA UNIÓN. PARROQUIA SAN MIGUEL.

MUNICIPIO URDANETA. ESTADO LARA. JUNIO – NOVIEMBRE 2005

La prevalencia de anticuerpos Anti-Trypanosoma cruzi en las comunidades estudiadas

fue de 9.3 %.

90,7%

9,3%

Seronegativos

Seropositivos

CUADRO Nº 1

DISTRIBUCION DE LOS PACIENTES SEROPOSITIVOS Y SERONEGATIVOS PARA ANTICUERPOS ANTI – Trypanosoma

cruzi SEGÚN LAS COMUNIDADES DEPENDIENTES DEL AMBULATORIO RURAL TIPO I LA UNIÓN,


JUNIO-NOVIEMBRE 2005.

DISTRIBUCIÓN DE LOS PACIENTES

COMUNIDAD SEROPOSITIVOS SERONEGATIVOS

Nº % Nº %

La Unión 20 8.3 220 91.7

La Loma 9 8.7 94 91.3

La Parada 16 14 98 86

El Turagual 10 7.3 127 92.72

TOTAL 55 9.3 539 90.7

De un total de 539 individuos que participaron en el estudio, 55 fueron seropositivos, el

mayor porcentaje se observó en La Parada con 14% y el menor en El Turagual con

7.3%.

24%

76%

Seropositivas

Seronegativas

GRÀFICO Nº 2

PREVALENCIA DE VIVIENDAS CON INDIVIDUOS SERPOSITIVOS PARA ANTICUERPOS ANTI-Trypanosoma cruzi EN LAS COMUNIDADES

DEPENDIENTES DEL AMBULATORIO RURAL TIPO I LA UNIÓN. PARROQUIA SAN MIGUEL. MUNICIPIO

URDANETA. ESTADO LARA. JUNIO – NOVIEMBRE 2005

Del total de viviendas estudiadas, el 24% resultó con individuos

seropositivos.

GRAFICO No3

DISTRIBUCION DE LA SEROPREVALENCIA DE ANTICUERPOS ANTI- Trypanosoma cruzi DE ACUERDO A LA EDAD EN LAS

COMUNIDADES DEPENDIENTES DEL AMBULATORIO RURAL TIPO I LA UNIÓN. PARROQUIA SAN MIGUEL.


<1010

-1920

-2930

-3940

-4950

-5960

-6970

-7980

-89

90-1

000

10

20

30

40

50

60

Rango de Edad

Pre

vale

nci

a(%

)

En el presente gráfico se presenta la prevalencia en función de la edad expresada

en rangos de 10 años. Se puede observar que no hay prevalencia de la Enfermedad de

Chagas en menores de 10 años; aparece entre los 10 a 39 años, para disminuir hacia los

40 años y aumentar entre los 50 y 89 años.

GRAFICO No4

DISTRIBUCIÒN DE LA SEROPREVALENCIA DE ANTICUERPOS ANTI- Trypanosoma cruzi SEGUN EL SEXO EN LAS COMUNIDADES

DEPENDIENTES DEL AMBULATORIO RURAL TIPO I LA UNIÓN. PARROQUIA SAN MIGUEL. MUNICIPIO

URDANETA. ESTADO LARA. JUNIO – NOVIEMBRE 2005

Masculino Femenino0

25

50

75

100SeropositivosSeronegativo

Sexo

Pre

vale

ncia

(%)

En el presente gráfico presenta la seroprevalencia de anticuerpos Anti-

Trypanosoma cruzi en individuos femeninos y masculinos, expresando a los

seronegativos con el color azul claro y a los seronegativos con azul oscuro. Se puede

observar que la seroprevalencia es similar en ambos sexos.

CUADRO Nº 2

DISTRIBUCION DE LOS FACTORES DE RIESGO DE LA ENFERMEDAD DE

CHAGAS EN RELACION A LA PRESENCIA DE INDIVIDUOS SEROPOSIVOS O SERONEGATIVOS EN LAS VIVIENDAS

DE LAS COMUNIDADES DEPENDIENTES DEL AMBULATORIO RURAL TIPO I LA UNIÓN.



FRN: Factor de Riesgo Negativo o individuos con ausencia del factor de riesgo; FRP: Factor de Riesgo Positivo o individuos con presencia del factor de riesgo.

Se presentan los factores de riesgo para la Enfermedad de Chagas relacionados a

la vivienda, los cuales son analizados en función de la presencia o no de individuos

seropositivos en ellas. El número total de viviendas muestreadas fue de 140, de las

cuales en 107 (76.43%) moraban individuos seropositivos y en 33 (23.57%) individuos

seronegativos. En el cuadro se muestra: 1) la frecuencia de observación del factor

analizado, en relación a las viviendas totales; 2) la frecuencia de individuos

seropositivos en las viviendas donde no se observó el factor de riesgo y 3) la

frecuencia de individuos seropositivos en las viviendas donde si se observó el factor de

riesgo.

De los 3 factores mostrados sólo la vivienda no consolidada estuvo asociada con

una mayor presencia de individuos seropositivos.

FRECUENCIA DE CHAGAS FACTOR DE

RIESGO FRECUENCIA DEL FACTOR FRP

% FRN

%

Relación FRP/FRN

p

Amplitud de la vivienda < 4

espacios 42.14 20.34 25.93 0.78 0.44

Vivienda no consolidada

56.43 31 13 2.39 0.01

Presencia del vector

7.1 40 22.3 1.79 0.20

CUADRO Nº 3

DISTRIBUCION DE LOS FACTORES DE RIESGO RELACIONADOS AL DESORDEN DEL DOMICILIO Y PERIDOMICILIO CON LA PRESENCIA

DE INDIVIDUOS SEROPOSIVOS O SERONEGATIVOS PARA LA ENFERMEDAD DE CHAGAS EN LAS VIVIENDAS DE LAS COMUNIDADES DEPENDIENTES DEL AMBULATORIO

RURAL TIPO I LA UNIÓN. PARROQUIA SAN MIGUEL. MUNICIPIO URDANETA. ESTADO

LARA. JUNIO-NOVIEMBRE 2005.


En este cuadro se observa la relación al desorden peridomiciliario presentó una

prevalencia del 55.71 %, por otra parte la prevalencia para el desorden domiciliario fue

de 44.52 %.

Se presentan los factores de riesgo para la Enfermedad de Chagas relacionados

al desorden peridomiciliario la vivienda, los cuales son analizados en función de la

presencia o no de individuos seropositivos en ellas. El número total de viviendas

muestreadas fue de 140, de las cuales en 107 (76.43%) moraban individuos

seronegativos y en 33 (23.57%) individuos seropositivos. En el cuadro se muestra: 1) la

frecuencia de observación del factor analizado, en relación a las viviendas totales; 2) la

frecuencia de individuos seropositivos en las viviendas donde no se observó el factor de

riesgo y 3) la frecuencia de individuos seropositivos en las viviendas donde si se

observó el factor de riesgo.

De los 2 factores mostrados sólo el desorden domiciliario estuvo asociado con

una mayor presencia de individuos seropositivos.

PREVALENCIA DE CHAGAS FACTOR DE

RIESGO

FRECUENCIADEL FACTOR

%

FRP %

FRN %

RELACIÓN FRP/FRN

p

Desorden domiciliario

44.52 39.92 15.78 2.18 0.01

Desorden peridomiciliario

55.71 25.64 20.96 1.22 0.52

CUADRO Nº 4

DISTRIBUCION DE LOS FACTORES DE RIESGO DEL PERIDOMICILIO ENRELACIÓN A LA PRESENCIA DE INDIVIDUOSSEROPOSITIVOS

PARA LA ENFERMEDAD DE CHAGAS ENLAS VIVIENDAS DE LAS COMUNIDADES DEPENDIENTESDEL AMBULATORIO

RURAL TIPO I LA UNIÓN. PARROQUIA SAN MIGUEL. MUNICIPIOURDANETA. ESTADO LARA.




% FRN

%

RELACIÓNFRP/FRN

p

Corrales 22.14 25.80 22.93 1.12 0.74

Depósitos 17.85 28 22.60 1.23 0.57

Gallineros 45.71 31.25 17.10 1.82 0.05

Anexos de bahareque

35 32.65 18.68 1.74 0.06

Palomares 7.85 36.36 22.48 1.61 0.30


En este cuadro estudiamos la presencia de corrales de animales, depósitos de

enseres domésticos y del trabajo, gallineros, anexos de bahareque y palomares; y su

relación con la presencia de individuos seropositivos en la vivienda. Se presentan los

factores de riesgo para la Enfermedad de Chagas relacionados al desorden

peridomiciliario la vivienda, los cuales son analizados en función de la presencia o no

de individuos seropositivos en ellas. El número total de viviendas muestreadas fue de

140, de las cuales en 107 (76.43%) moraban individuos seronegativos y en 33 (23.57%)

individuos seropositivos. En el cuadro se muestra: 1) la frecuencia de observación del

factor analizado, en relación a las viviendas totales; 2) la frecuencia de individuos

seropositivos en las viviendas donde no se observó el factor de riesgo y 3) la

frecuencia de individuos seropositivos en las viviendas donde si se observó el factor de

riesgo.

Los factores de riesgo con mayor frecuencia fueron: Gallineros con un 45.71 %

y en segundo lugar anexos de bahareque con un 35 %.

CUADRO Nº 5

DISTRIBUCION DE LOS FACTORES DE RIESGO EPIDEMIOLOGICOS CON LA PREVALENCIA DE LA ENFERMEDAD DE CHAGAS EN LAS

COMUNIDADES DEPENDIENTES DEL AMBULATORIO RURALTIPO I LA UNIÓN. PARROQUIA SAN MIGUEL.

MUNICIPIOURDANETA. ESTADO LARA. JUNIO-NOVIEMBRE 2005.

FACTORES EPIDEMIOLOGICOS

FRECUENCIA DEL FACTOR

%

PREVALENCIA DE CHAGAS FRP % FRN

%

RELACIÓN FRP/FRN

p

Edad > 50 años 18.68 50 3.87 12.92 0.0001*

Sexo masculino 49.83 10.14 8.08 9.25 0.39

Instrucción deficiente2 28.10 20.78 6.09 3.41 0.0001

Conocimiento del vector

60 13.69 5.97 2.29 0.008

Reconocimiento del vector

58.85 14.72 5.74 2.56 0.003

Vivienda anterior no consolidada

72.57 13.42 4.90 2.74 0.01

Contacto con el vector 13.53 18.57 7.6 2.44 0.006

Transfusiones 5.49 30.44 9.11 3.34 0.01

Ingesta de animales silvestres

53.47 12.29 6.69 1.83 0.03

Madre con chagas1 14.65 15.00 8.79 1.71 0.08

FRN: Factor de Riesgo Negativo o individuos con ausencia del factor de riesgo; FRP: Factor de Riesgo Positivo o individuos con presencia del factor de riesgo; 1: madre con antecedentes epidemiológicos para Chagas; 2: individuos que no superaron la educación primaria, * Factor con asociación significativa.

En este cuadro se presentan los factores de riesgo de la Enfermedad de Chagas

presentes en los individuos estudiados. El número total de individuos muestreados fue

de 594, de las cuales 55 (9.3 %) fueron individuos seropositivos y 539 (90.7 %)

individuos seronegativos. En la tabla se muestra: 1) la frecuencia de observación del

factor analizado en relación a los individuos estudiados (n= 594), la prevalencia de

individuos seropositivos en individuos donde no se observó el factor de riesgo y la

prevalencia de individuos seropositivos en relación a los individuos donde si se observó

el factor de riesgo.

Los factores de riesgo con mayor frecuencia fueron: vivienda anterior no

consolidada 72.57%, conocimiento del vector 60%, reconocimiento del vector 58.85%.

El factor con una asociación significativa a la Enfermedad de Chagas fue la Edad con

una p=0.0001.

CUADRO Nº 6 DISTRIBUCION DE LOS FACTORES DE RIESGO RELACIONADOS A LOS

RESERVORIOS DOMÈSTICOS CON LA PREVALENCIA DE LA ENFERMEDAD DE CHAGAS EN LAS COMUNIDADES

DEPENDIENTES DEL AMBULATORIORURAL TIPO I LA UNIÓN. PARROQUIA SAN MIGUEL.

MUNICIPIO URDANETA. ESTADO LARA. JUNIO-NOVIEMBRE 2005.



% FRN

%

RELACIÓN FRP/FRN

p

Caninos 64.29 31.00 16.00 1.94 0.12

Felinos 26.42 32.43 20.38 1.59 0.14

Ovinos 9.28 30.77 22.83 1.35 0.52

Caprinos 9.37 25.00 23.43 1.06 0.90

Porcinos 18.57 23.07 23.68 0.97 0.95

Gallinas 64.28 30.00 12.00 2.5 0.016

Palomas 10.71 47.00 20.80 2.25 0.026

Gansos 2.14 66.66 22.62 2.94 0.08

Pavos 10.71 33.00 22.40 1.47 0.35

Pájaros 17.85 26.00 20.85 1.72 0.11


Se presentan los factores de riesgo para la Enfermedad de Chagas relacionados a

los reservorios domésticos de la vivienda, los cuales son analizados en función de la








Los reservorios domésticos con mayor frecencia lo constituyeron los caninos

con un 64.29%, y en segundo lugar las gallinas con un 64.28%.

CUADRO Nº 7 DISTRIBUCION DE LOS FACTORES DE RIESGO RELACIONADOS A LOS

RESERVORIOS SILVESTRES CON LA PREVALENCIA DE LA ENFERMEDAD DE CHAGAS EN LAS COMUNIDADES

DEPENDIENTESDEL AMBULATORIO RURAL TIPO I LA UNIÓN. PARROQUIASAN MIGUEL.

MUNICIPIO URDANETA. ESTADO LARA. JUNIO-NOVIEMBRE 2005.



% FRN

%

RELACIÓN FRP/FRN

p

Roedores 65 24.17 22.44 1.07 0.82

Rabipelados 44.28 29.03 19.23 1.50 0.18

Cachicamos 17.85 36 20.86 1.72 0.11

Perezas 3.57 80 21.48 3.72 0.0025

Osos hormigueros

2.14 100 21.89 4.56 0.002

Murciélagos 48.57 29.41 18.05 1.62 2.50


En este cuadro se presentan los factores de riesgo para la Enfermedad de Chagas

relacionados a los reservorios silvestres, los cuales son analizados en función de la








Los reservorios silvestres con mayor presencia lo constituyeron los roedores con

un 65 %, y en segundo lugar los murciélagos con un 48.57%.

CUADRO Nº 8

DISTRIBUCION DE LOS FACTORES DE RIESGO RELACIONADOS A LOS HÁBITOS BIOLÓGICOS CON LA PREVALENCIA DE LA ENFERMEDAD

DE CHAGAS EN LAS COMUNIDADES DEPENDIENTES DEL AMBULATORIO RURAL TIPO I LA UNIÓN. PARROQUIA

SAN MIGUEL. MUNICIPIO URDANETA. ESTADO LARA. JUNIO-NOVIEMBRE 2005.

FACTORES DE RIESGO

PREVALENCIA DEL FACTOR

%

PREVALENCIA DE CHAGAS

FRN % FRP %

INDICE FRN/FRP

p

Cigarrillo 4.41 12.86 0 0 0.096

Chimo 8.24 9.02 20 2.21 0.018

Alcohol 22.05 10.61 8.33 0.79 0.46









el factor de riesgo.

El hábito alcohólico predominó con una prevalencia del 22.05%. Resultando el

hábito chimoico un factor con asociación significativa, p=0.

CUADRO Nº 10

DISTRIBUCION DE LOS FACTORES DE RIESGO RELACIONADOS A ANTECEDENTES PERSONALES Y FAMILIARES CON LA

PREVALENCIA DE LA ENFERMEDAD DE CHAGAS EN LAS COMUNIDADES DEPENDIENTES DEL

AMBULATORIO RURAL TIPOI LA UNIÓN. PARROQUIA SAN MIGUEL. MUNICIPIO

URDANETA. ESTADO LARA. JUNIO-NOVIEMBRE 2005.

FACTORES DE RIESGO

PREVALENCIA DEL FACTOR

%

PREVALENCIA DE CHAGAS

FRP % FRN %

INDICE FRP/FRN

p

Alergias 17.40 9.5 11.58 1.22 0.54

Diabetes Mellitus 3.30 9.11 27.77 3.05 0.009

Hipertensión Arterial

7.89 7.57 37.21 4.92 0.0001*

Enfermedades Autoinmunes

1.28 9.44 42.86 4.54 0.0032

Helmintiasis 50.18 11.44 8.93 0.74 0.24

Infecciones 6.58 9.78 11.11 1.14 0.80

FRN: Factor de Riesgo Negativo o individuos con ausencia del factor de riesgo; FRP: Factor de Riesgo Positivo o individuos con presencia del factor de riesgo. * Factor con asociación significativa.








el factor de riesgo. Los factores de riesgo con mayor frecuencia fueron: el antecedente

personal de helmintiasis con un 50.18 %. El factor de mayor asociación fue la

Hipertensión Arterial con una p= 0.0001.

GRÀFICO Nº 5

DISTRIBUCIÒN DEL VECTOR SEGÙN LAS ESPECIES RECONOCIDAS Y CAPTURADAS EN LAS COMUNIDADES DEPENDIENTES

DEL AMBULATORIO RURAL TIPO I LA UNIÓN. PARROQUIA SAN MIGUEL. MUNICIPIO

URDANETA. ESTADO LARA. JUNIO – NOVIEMBRE

RP TM PG Dos0

40

80

120

160

Especie Reconocida

Fre

cuen

cia

(n)

RP TM PG0

5

10

15

20

Especie Capturada

Fre

cuen

cia

(n)

La especie Triatoma maculata fue la más reconocida y capturada en las

comunidades estudiadas.

CUADRO Nº 11

INDICE DE INFESTACIÒN DE LOS HOGARES A TRIATOMINOS,

INDICE DE INFECCIÒN TRIATOMINICA A Trypanosoma cruzi, ÍNDICE DE COLONIZACIÓN DE VIVIENDAS INFESTADAS, ÍNDICE DE DISPERSIÓN E ÍNDICE DE COINFECCIÓN EN COMUNIDADES DEPENDIENTES DEL AMBULATORIO RURAL TIPO I LA UNIÓN. PARROQUIA SAN MIGUEL.

MUNICIPIO URDANETA.ESTADO LARA. JUNIO – NOVIEMBRE 2005

POBLACIÒN DE

REFERENCIA TOTAL

POBLACIÒN AFECTADA

INDICE (%)

Índice de infección del

vector 231 0 0

Índice de infestación

domiciliaria 1402 10 7.14

Índice de colonización de

viviendas infestadas

103 15 10

Índice de dispersión

44 46 100

Índice de coinfección

103 17 10

1: Vectores capturados, 2: número de viviendas encuestadas, 3: número de viviendas infestadas, 4:

número de comunidades estudiadas, 5: número de viviendas con ninfas, 6: número de comunidades donde

se capturaron vectores, 7: número de viviendas donde se capturaron 2 especies de triatominos.

Este cuadro muestra que del total de triatominos capturados (23) ninguno estaba

infectado con T. cruzi. Se encontraron vectores en las 4 comunidades estudiadas. En una

sola vivienda se capturaron 2 especies de triatominos. Sólo se encontraron ninfas en

una casa.

CUADRO Nº 12

CORRELACIÓN DE PERROS SEROPOSITIVOS O SERONEGATIVOS PARA ANTICUERPOS ANTI- Trypanosoma cruzi CON VIVIENDAS CON

INDIVIDUOS SEROPOSITIVOS O SERONEGATIVOS EN LAS COMUNIDADES DEPENDIENTES DEL AMBULATORIO RURAL TIPO I LA UNIÓN. PARROQUIA SAN MIGUEL.


VIVIENDAS CON

INDIVIDUOS SEROPOSITIVOS

VIVIENDAS CON INDIVIDUOS

SERONEGATIVOS TOTAL

Perros seronegativos 14 47 61

Perros seropositivos 1 3 4

TOTAL 15 50 65

Chi2: 1.613; p = 0.204.

Del total de viviendas con individuos seropositivos; solo una presentó un perro

seropositivo, no existiendo asociación entre ellas.

GRÀFICO Nº 6

DISTRIBUCIÒN DE LA SEROPREVALENCIA DE ANTICUERPOS ANTI- Trypanosoma cruzi EN PERROS DE LAS COMUNIDADES

DEPENDIENTES DEL AMBULATORIO RURAL TIPO I LA UNIÓN. PARROQUIASAN MIGUEL.


97%

3%

Seropositivos

Seronegativos

La prevalencia de anticuerpos Anti-Trypanosoma cruzi de la población

canina en las comunidades estudiadas fue del 3 %.

IV. DISCUSIÓN

La enfermedad de Chagas es una parasitosis crónica generada por un

protozoario denominado Trypanosoma cruzi. Según la OMS/OPS, es considerada de

riesgo para aproximadamente 6.000.000 de personas para el año 2000 14. El Estado Lara

es la segunda entidad con mayor afectación por dicha parasitosis. El Municipio

Urdaneta presenta una alta prevalencia debido a la presencia de gran cantidad de

factores de riesgo para la enfermedad. Los síntomas son muy variables, en la etapa

aguda los mismos se enmascaran con afecciones de otra naturaleza; y en su etapa

crónica, se desarrolla en la mayoría de los casos la miocardiopatía chagásica, la cual

representa un problema de salud pública.

La seroprevalencia global para la Enfermedad de Chagas en las cuatro

comunidades rurales pertenecientes al área de influencia del Ambulatorio rural Tipo I

La Unión, Parroquia San Miguel, Municipio Urdaneta, obtenida al realizar las técnicas

serológicas ELISA y MABA a los individuos estudiados fue de 9,3 %, presentando

mayor porcentaje la comunidad de La Parada con 14 % y el menor para El Turagual con

7.3 %. Del total de viviendas estudiadas, el 24 % resultó con individuos seropositivos.

Estos datos son similares a los reportados por Briceño (2003) para la comunidad de

Cauderales, donde se observó una prevalencia del 11,4 %7.

De acuerdo a la distribución de los seropositivos según los grupos de edad, los

resultados mostraron que la mayor seroprevalencia se encuentra en edades

comprendidas entre los 60 y 69 años; estos datos guardan relación con los hallazgos

obtenidos por Cannova para el año 2003 14 donde la mayoría de los individuos

seropositivos eran mayores de 44 años. Por lo tanto, se concluye que a medida que

aumenta la edad, ascienden los índices se seroprevalencia, lo que sugiere ser producto

de la alta tasa de infección en décadas anteriores y que la probabilidad de contacto de

los individuos con el vector aumenta con la edad. Es importante resaltar que no hubo

casos seropositivos en el grupo etario menor a 10 años, indicando que no existe

transmisión activa de la enfermedad en la región estudiada en la última década y por lo

tanto la incidencia de la enfermedad es 0. Este hecho contrasta con lo reportado por la

OMS/OPS para las regiones central y occidental del país, donde para el año 2000 el

índice de seroprevalencia en menores de 10 años fue del 1 %. Con relación al sexo se

demostró que no es factor de riesgo para la Enfermedad de Chagas, ya que no hubo una

diferencia significativa entre hombres y mujeres afectados por esta enfermedad.

La Enfermedad de Chagas es una parasitosis endémica exclusiva del continente

americano, con predominio en las áreas rurales en donde persisten determinados

factores de riesgo que favorecen la infección por el Trypanosoma cruzi. Entre los

factores de riesgo epidemiológicos relacionados con la Enfermedad de Chagas

reportados en la bibliografía figura tener un nivel socioeconómico bajo, el cual

condiciona la existencia de viviendas inadecuadas (paredes de bahareque y presencia de

grietas en las mismas, techos de palma y la presencia de desorden intra y

extradomiciliario). Para el año 2003, en el Estado Carabobo, Cannova 14 encontró que el

68 % de las viviendas tenían características de rancho. En el presente trabajo se observó

que la presencia de viviendas no consolidadas (rancho o choza) y/o aquellas que

presentaran menos de cuatro espacios constituyen un factor de riesgo para la

enfermedad, ya que la mayor prevalencia de individuos seropositivos habitan en

viviendas no consolidadas, con un 31 %. Así mismo se encontró que la presencia de

desorden domiciliario obtuvo una prevalencia del 44,52% y el desorden peridomiciliario

un 55,71 % de las viviendas analizadas, por otro lado, el desorden domiciliario tuvo una

asociación mayor con los individuos seropositivos que habitaban en la vivienda (39.42

%). De allí que el desorden dentro de la vivienda favorece la domiciliación de vectores

y mantiene la cadena epidemiológica del agente infeccioso y por ende de la

Enfermedad de Chagas.

Con respecto a presencia de factores de riesgo en el peridomicilo, la mayor

frecuencia lo representaron los gallineros con un 45,71 %, cuya presencia se asoció a

una mayor prevalencia de la Enfermedad de Chagas en las viviendas. Este hecho

favorece y explica la presencia y supervivencia del Triatoma maculata, el vector mas

frecuentemente reconocido y capturado en las comunidades objeto de estudio. El

Triatoma maculata tiene hábitos peridomiciliarios y su fuente de alimentación reportada

como mas importante es la sangre de las gallinas.

El bajo nivel educativo conlleva al desconocimiento de la enfermedad por parte

de la población. En nuestro trabajo, la mayoría de los individuos seropositivos no

superaban el grado de instrucción primaria. Este hallazgo condiciona al mantenimiento

de costumbres que constituyen factores de riesgo para esta parasitosis, especialmente

relacionadas a la transmisión vectorial.

De los factores de riesgo relacionados con el conocimiento, reconocimiento y

contacto con el vector, se encontró una significativa asociación entre estos y la

seropositividad de los individuos estudiados. Con respecto al contacto con el vector, el

18,57 % de los individuos seropositivos refirió haber sido picado por el triatomino, en

contraste con un 7,6 % de los mismos que no refirieron contacto con el vector. Estos

datos coinciden por el estudio realizado por Loyo en el Municipio Nirgua 13.

Un 12,29 % de los individuos seropositivos refirieron haber ingerido carne de

animales silvestres, respecto a un 6,69 % que lo negó, siendo significativa la asociación

de este factor con dicha seropositividad. Este hecho nos sugiere la importancia de la vía

digestiva como posible vía de transmisión de la enfermedad, como lo indica Storino

M.2.

Con respecto a los factores de riesgo biológicos para la enfermedad de Chagas,

la respuesta inmune ante la presencia de un antígeno depende de la situación del

huésped en un momento determinado, es decir, si éste huésped presenta enfermedades

concurrentes, recibe tratamiento farmacológico o tiene un hábito particular a través del

cual se introduce sustancias farmacológicamente activas al organismo. Los individuos

que consumen chimó y cigarrillo introducen a su cuerpo nicotina, la cual causa por un

lado trastornos de la respuesta inmune y por otro lado activa receptores nicotínicos

presentes en el parásito, lo cual activa su movilidad y proliferación18, 19. Del alcohol, es

bien conocido su efecto sobre el sistema inmune.

Los pacientes con enfermedades como Diabetes Mellitus e Hipertensión Arterial

están sujetos a tratamientos que podrían alterar la respuesta inmune y la proliferación

parasitaria. Las infecciones parasitarias y las enfermedades autoinmunes cambian las

características inmunológicas de los individuos y por lo tanto la respuesta inmune ante

la presencia de un antígeno determinado es diferente; por otra parte, las enfermedades

inmunes presentan un fenotipo ante ciertas enfermedades, el cual podría favorecer la

infección por el parásito, además, se producen autoanticuerpos que detectan la presencia

de proteínas del antígeno parasitario los cuales presentan a su vez una secuencia similar

a las proteínas del huésped, ello conlleva a producir reacciones cruzadas y a presentar

falsos negativos. En nuestro trabajo se encontró que el hábito alcohólico presentó una

prevalencia del 22.05%, mientras que el factor con mayor asociación significativa fue

el hábito chimoico, p=0. 018. Por otro lado, el antecedente personal de helmintiasis

presentó un 50.18 % de prevalencia, mientras que el factor con mayor asociación

significativa fue Hipertensión Arterial, p=0.0001.

La epidemiología de la enfermedad de Chagas involucra a los vectores

hemípteros de la subfamilia Triatominae, infectados con Trypanosoma cruzi. El

contacto con los mismos es la causa principal de la transmisión de la enfermedad. En

Venezuela las especies de triatominos epidemiológicamente importantes son Rhodnius

prolixus, Rhodnius robustus, Triatoma maculata y Panstrongylus geniculatus7

.

El vector mas frecuentemente reconocido y capturado en las comunidades

estudiadas fue el Triatoma maculata, con un índice de infección del 0 %, un indice de

infestación domiciliaria del 7.14 % y un índice de colonización de las viviendas

infestadas del 10 %, índice de dispersión de 100 % y un índice de coinfección del 10 %.

Estos datos indican la presencia de un vector sin capacidad infectiva y con capacidad de

colonización limitada, sin embargo, su presencia predice un problema potencial a largo

plazo cuando el vector aumente su adaptabilidad al domicilio y en el ecosistema

aparezcan reservorios infectados con T. cruzi. La ausencia de vectores infectados es

explicada por el hecho de que la principal fuente de alimentación de esta especie son las

aves. Investigaciones realizadas en el Municipio Urdaneta durante el año 2003 por

Bonfante R, coinciden con los resultados de este trabajo, al igual que con los de Loyo

(2004), cuyos índices de infestación domiciliaria fueron del 6%. También, García A.

(2004) aporta datos que indican que el principal vector reconocido en comunidades del

Municipio Torres, Edo. Lara, fue el Triatoma maculata, a diferencia de Loyo, donde la

especie Panstrongylus geniculatus fue la predominante13.

En nuestro país no existen reportes de casos, ni estadísticas que indiquen cual es

la prevalencia de la Enfermedad de Chagas en caninos, así como estudios que evalúen el

rol que éstos desempeñan en la cadena epidemiológica de la misma. Se obtuvo una

prevalencia de anticuerpos Anti- Trypanosoma cruzi en la población canina estudiada

de 3%; a diferencia de la seroprevalencia en humanos que fue del 9.3%, en vista de que

el índice de infección vectorial es de 0% y de que no hay transmisión activa de la

enfermedad demostrada por la ausencia de individuos seropositivos en el rango menores

de 10 años, una posible explicación de la infección en caninos podría ser la transmisión

de la enfermedad a través de otra vía, la vía digestiva, como lo plantea Storino M.2 en

humanos; concluimos esto debido a que los hábitos alimenticios de los animales

domésticos en las áreas rurales son frecuentemente animales silvestres. Todo esto

sugiere que no existe difusión de la infección domiciliaria, estableciendo que los

caninos no desempeñan un rol importante como reservorios de la Enfermedad de

Chagas dentro del domicilio. Sin embargo, Estos resultados difieren con un estudio

realizado en Argentina donde la Enfermedad de Chagas mantiene gran cantidad de

reservorios, este reportó: 41% de perros infectados y 39% de gatos infectados por T.

cruzi12

. En el mismo ámbito, en Costa Rica, Reyes L. y otros (2002) estudiaron la

seropositividad por Trypanosoma cruzi en perros callejeros y mascotas en zonas

endémicas y no endémicas, encontrándose en perros mascota de zonas endémicas un

5,2%, mientras que, en zonas no endémicas fue de 1,6%; en perros callejeros el

porcentaje de positividad fue de 12% independientemente si fueron capturados en zonas

endémicas o no endémicas12.

Tomando en cuenta la situación reflejada en esta investigación, se sugiere las

siguientes recomendaciones dirigidas a:

Ministerio de Salud y Desarrollo Social:

- Fomentar programas educativos sobre la Enfermedad de Chagas y los

principales factores que contribuyen su transmisión en áreas endémicas.

- Promover estrategias de control para prevenir la Enfermedad de Chagas con

participación de la comunidad.

- Activar programas de vigilancia epidemiológica en las comunidades rurales

del Municipio Urdaneta.

- Implementar programas dirigidos a la determinación de anticuerpos anti

Trypanosoma cruzi en habitantes de áreas endémicas del Estado Lara.

- Garantizar en el Centro Hospitalario del Municipio Urdaneta consultas

especializadas a los individuos seropositivos, para la atención integral de los

mismos y prevención de incapacidad en edades productivas.

Decanato de Medicina Dr. Pablo Acosta Ortiz:

- Darle continuidad a esta línea de investigación para ampliar el conocimiento

de dicha área.

- Promover actividades educativas que difundan los conocimientos sobre la

Enfermedad de Chagas en las comunidades endémicas del Estado Lara.

- Apoyar con recursos físicos, económicos y humanos la elaboración de

trabajos de investigación sobre la Enfermedad de Chagas.

A los Líderes comunitarios:

- Promover la participación de la comunidad en las actividades educativas

sobre conocimientos de la Enfermedad de Chagas que se realicen en la

misma.

- Detectar los factores de riesgo que contribuyen la transmisión de la

Enfermedad de Chagas en la comunidad.

- Plantear a las autoridades correspondientes las necesidades de viviendas

consolidadas y servicios básicos de la comunidad.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Conmemoración del descubrimiento de la Enfermedad de Chagas (90 años).

Agosto 2000. (Consulta: Junio 30 2005); http//www.en

colombia.com/medicina/academedicina/220253.htm.

2. Revisado por: Bonfante R, y col. El sistema colinérgico muscarínico y las

endotelinas en la miocardiopatía chagásica crónica. 2005.

3. Travieso, L. Seroepidemiología de la Enfermedad de Chagas en la comunidad de

Caballito.1998.

4. Meléndez, E. Parasitología Medica Básica – Protozoarios. Ediciones Fundaeduco.

2da edición.1994.p 32-34.

5. Storino M. Enfermedad de Chagas.Editorial Mosby, Doyma Argentina. Cap1, 5,12

y 13.

6. Schimunis G. Prevention of transfusional Trypanosoma cruzzi infection in Latin

America. Memorias del Instituto Oswaldo Cruz. 1999; 94:93-101.

7. Material no Publicado (Actualmente en Revisión): Mogollón, A. Estudio de la

Dinámica de la Enfermedad de Chagas en la Población Canina en las comunidades

de Cauderales (Municipio Urdaneta) y Guariquito (Municipio Morán).Estado Lara.

8. Salones O, Santoya L, Sibulo C, Suárez S, Terán L. Estudio Electrocardiográfico

de individuos seropositivos y seronegativos para la Enfermedad de Chagas de la

Comunidad Rural de Arenales, Municipio Torres. Estado Lara. (Tesis de Pregrado)

Barquisimeto, Decanato de Medicina. UCLA.2004.p 13-17.

9. García A, García M, Martínez L, Miraldo A, Mogollón M, Mujica R.

Seroprevalencia de anticuerpos para Trypanosoma cruzzi y factores de riesgo para

la enfermedad de Chagas en comunidades rurales del Municipio Torres. Estado

Lara. (Tesis de Pregrado) Barquisimeto, Decanato de Medicina. UCLA.2004.p 14

– 15.

10. Noya O, Abarcon de Noya B. The multiple antigen blot assay (MABA): a simple

immunoenzymatic technique for simultaneous screening of multiple antigens.

Inmuno lett. 1998 Aug; 63 (1): 53-6.

11. Guhl, F.1999. Programas en la eliminación de la transmisión de la Enfermedad de

Chagas en Colombia. http: // www/ anm. Fepafem org/ ag – 03 amoncayo htm.

12. Reyes L, Silesky E, Cerdas C, Chinchilla M, Guerrero O. Presencia de anticuerpos

contra Trypanosoma cruzi en perros de Costa Rica. Parasitol Latinoam 2002;

57:66-68.

13. Loyo Y. Seroprevalencia de Trypanosoma cruzi, índice de infestación de los

hogares y lugares a triatominos y factores desencadenantes de riesgo en

comunidades rurales del Municipio Nirgua. Estado Yaracuy. ( Tesis de Posgrado)

Barquisimeto, Decanato de Medicina. UCLA.2003.p 6.

14. Castellano M, Contreras A, Dumont L, Escalona M, García M, Pérez C. Diseño,

Aplicación y Evaluación de un taller educativo sobre la prevención de la

enfermedad de Chagas dirigido a los docentes de la U.E “Dr. Cecilio Acosta”.

Área de influencia del ambulatorio Urbano tipo I “San Jacinto”. (Tesis de

Pregrado) Barquisimeto, Decanato de Medicina. UCLA.2004. p

15. Bonfante R, Rodríguez C, Aldana E, Superlano Y, Loyo Y, Lizano E, Gil A,

Jiménez E, Alvarez C. Nuevos aportes al conocimiento de la enfermedad de

Chagas en Venezuela. 2003.

16. FUDECO. Censo de población y vivienda 2001. Caracas, Instituto Nacional de

Estadísticas, 2002.

17. Censo del Distrito Sanitario Número 5.Auxiliares de Medicina Simplificada del

Ambulatorio Rural tipo I La Unión. Parroquia San Miguel. Municipio Urdaneta.

Estado Lara.

18. Hakki A, Pennypacker K, Eidizadeh S, Friedman H, Pross S. Nicotine inhibition of

apoptosis in murine immune cells Exp Biol Med (Maywood). 2001

Nov;226(10):947-53.

19. Skok M, Grailhe R, Changeux JP. Nicotinic receptors regulate B lymphocyte

activation and immune response. Eur J Pharmacol. 2005 Jul 11;517(3):246-51.

ANEXOS

ANEXO Nº 1

ANEXO Nº 2

MAPAS DE LAS COMUNIDADES: LA UNION, LA PARADA, LA LOMA Y EL TURAGUAL

ANEXO Nº 3

UNIVERSIDAD CENTROCCIDENTAL “LISANDRO ALVARADO”



ENTREVISTA

El objetivo del presente instrumento de investigación es recoger información

que permitirá detectar la presencia o no de factores de riesgo epidemiológicos para la

Enfermedad de Chagas en las comunidades rurales La Unión, El Turagual, La Parada y

La Loma dependientes del ambulatorio rural tipo I La Unión de la Parroquia San

Miguel, perteneciente al Municipio Urdaneta del Estado Lara.

La entrevista está conformada de 4 partes: I parte: la identificación del jefe de la

familia presente al momento de la entrevista. II parte: 25 ítems que permitirán detectar

los factores de riesgo para la Enfermedad de Chagas de dichas comunidades. III parte:

resultado de las Técnicas de ELISA y MABA para Trypanosoma cruzi realizadas a los

individuos. IV parte: Información acerca del perro que habite en la vivienda o el

peridomicilio y el resultado de las Técnicas de ELISA y MABA para Trypanosoma

cruzi realizada al canino.

I.- IDENTIFICACIÓN:

• Nombre la comunidad _________________

• Número de vivienda ________

• Nombres y Apellidos del jefe de la familia __________________________

• Cédula de identidad ___________________________

• Edad __________

• Genero : Femenino ________ Masculino ________

• Ocupación ________________

• Grado de instrucción:

- Analfabeta ____

- Sabe leer y escribir _____

- Primaria incompleta _____

- Primaria completa _____

- Secundaria incompleta ______

- Secundaria completa _____

- Técnica completa _____

- Técnica incompleta _____

- Universitaria completa ______

- Universitaria incompleta _____

II.- ENTREVISTA SOBRE FACTORES DE RIESGO PARA LA

ENFERMDEDAD DE CHAGAS.

1.- ¿Conoce usted al “chipo” o “quipito”?

Si _____ No _____

2.- Al mostrarle al entrevistado el vector, este lo reconoce:

Si _____ No _____

3.- Si la respuesta anterior es afirmativa, cual vector reconoció?

• Rodnius prolixus ______

• Triatoma maculata ______

• Pastrongylus geniculatus ______

• Reconoció más de una especie ______

4.- ¿De donde conoce usted al “chipo” o “quipito”?

A.- Lo vio en la vivienda actual _________

B.- Lo vio en la vivienda o peridomicilio de sus padres ________

C.- Lo vio en la vivienda o peridomicilio de otros familiares _______

D.- Lo vio en la vivienda o peridomicilio de amigos ________

E.- Lo vio en el campo ______

F.- Lo vio en estudios en unidad educativa o por charlas de Malariología

5.- En caso de que la opción “A” anterior sea afirmativa responda en que lugar de

la vivienda lo vio y hace cuanto tiempo noto la presencia del Chipo en la misma?

Lugar de la vivienda donde observó al chipo:

• Único espacio ____

• Dormitorios ____

• Baños ___

• Sala ____

• Comedor ____

• Cocina ____

• Estar o terraza ____

• Peridomicilio _____

• Más de un ambiente ______

Tiempo de haber visto al Chipo:

• En el último año _____

• Hace menos de 5 años _____

• Hace más de 5 años _____

• No recuerda _____

6.- ¿Ha vivido en algún lugar o comunidad donde hallan encontrado “chipos” o

“quipitos”?

Si _____ No ______ No sabe _______

7.- ¿Ha vivido anteriormente en viviendas con paredes de bahareque?

Si _____ No ______ No sabe _____

8.- ¿Ha vivido anteriormente en viviendas con techo o pared de palma o acho?

Si _____ No ______ No sabe ______

9.- ¿Usted ha sido picado por el “chipo” o “quipito”?

Si _____ No _____ No sabe ______

10- ¿Alguna vez se ha realizado un examen de despistaje para la enfermedad de

Chagas?

Si _____ No _____ No recuerda _____

11- Si la respuesta anterior es afirmativa, el resultado fue:

• Positivo ______

• Negativo ______

• No recuerdo _____

12.- ¿Ha recibido transfusiones de sangre?

Si _____ No _____ No sabe _____

13.- ¿Ha donado sangre alguna vez?

Si _____ No _____ No sabe _____

14.- Ha comido carne de animales silvestres o de caza?

Si _____ No _____ No sabe _____

15.- Su madre ha sido o fue picada por el “chipo” o “quipito”?

Si _____ No _____ No sabe _____

16.- Usted fuma?

Si _____ No _____

Si la respuesta es afirmativa diga con que frecuencia:

Todos los días ______ Ocasionalmente ______

17.- Usted como chimó?

Si _____ No _____

Si la respuesta es afirmativa diga con que frecuencia:

Todos los días ______ Ocasionalmente ______

18.- Usted toma alcohol?

Si _____ No _____

Si la respuesta es afirmativa diga:

- Frecuencia:

Todos los días ______ Los días de fiesta y fines de semana ____

Ocasionalmente ______

- Tipo de alcohol:

Cerveza ____ Ron ____ Cocuy ____ Caña blanca ____

Ha ingerido más de un tipo de licor _____

19.- Usted sufre de alergias?

Si _____ No _____ No sabe _____

20.- Usted es diabético?

Si _____ No _____ No sabe _____

21.- Usted es hipertenso?

Si _____ No _____ No sabe _____

22.- Usted ha sufrido o sufre de enfermedades autoinmunes?

Si _____ No _____ No sabe _____

23.- Usted ha sufrido de Amigdalitis a repetición?

Si _____ No _____ No sabe _____

24.- Usted ha botado lombrices ?

Si _____ No _____ No sabe _____

III.- RESULTADOS DE TÉCNICAS SEROLÓGICAS PARA Trypanosoma

cruzi REALIZADAS A LOS INDIVIDUOS ESTUDIADOS.

• Técnica de ELISA para T. cruzi:

Positivo _____ Negativo _____

• Técnica de MABA para T. cruzi:


IV.- INFORMACION DEL PERRO:

• Nombre del perro ____________________________

• Edad _______

Resultados de Técnicas serológicas para T. cruzi en el perro:

• Técnica de ELISA para T. cruzi:


• Técnica de MABA para T. cruzi:


ANEXO Nº 4

TECNICA DE ENSAYO INMUNOENZIMÁTICO (ELISA)

Preparación del antígeno:

Los parásitos mantenidos y cosechados mediante la técnica de aglutinación

directa serán procesados y empaquetados, posteriormente diluidos 3 veces su volumen

en PBS a pH 7,2 adicionándosele 2nM de p-hidroximercuribenzoato, N-L-P tosil-

fenilalanina clorometilcetona y fenilmetil sulfonil fluoruro, los cuales actúan como

inhibidores de las proteasas. Seguidamente, los parásitos serán sinicados durante cuatro

minutos fraccionados en cuatro tiempos, en los cuales se observará la muestra y se

evitará su desnaturalización.

Los parásitos sonicados se centrifugan a 1000 r.p.m. y a 4 º C durante 15

minutos, para separar la porción soluble de los parásitos contenida en el sobrenadante.

Posteriormente, se determinará la concentración de proteínas siguiendo el método de

Bradford (1977). El antígeno soluble de Trypanosoma Cruzi será almacenado en viales

de plástico en volúmenes de 50 Ul y a – 70 º C hasta su uso.

Titulación del antígeno de Trypanosoma Cruzi

Se obtendrá las placas de micro titulación de 96 pozos de 8 filas y 12 columnas

de fondo plano y con una capacidad por pozo de 0,35 ml. Luego serán sensibilizados

colocando en la primera fila, a excepción del primer pozo, 200 ul del antígeno diluido a

una concentración de 100 ug/ml.

En las filas restantes se colocará 100 ul del tampón unión de carbono a pH 9,6

constituido por Na2CO3 (1,99 g); NaHCO3 (2,93 g) y agua destilada c.s.pp. 1000 ml.

Con una pipeta automática multicanal de 8 puntas se toma 100 ul del antígeno

colocando en la primera fila y se pasa a la segunda fila mezclándolos varias veces con

los de 100 ul del tampón unión, continuando el pasaje de 100 ul de fila en fila hasta la

última fila de la cual se descartará los 100 ul restantes.

La placa de microtitulación se colocará en una bolsa plástica a 4 º C durante

toda la noche. A las 24 horas la placa será lavada 3 veces con PBS a pH 7,2 al cual se le

agregará Tween 20. La placa de microtitulación se bloqueará durante una hora

colocando 100 ml de PBS-caseína (200 ml de PBS a pH 7,2 más 4 g de leche

descremada) en cada pozo, lavando una vez con Tween.

En los pozos se colocará 100 ul de los sueros (problema, control positivo y

control negativo) diluidos 1:100 en PBS-caseína, dejando la primera columna sin

muestra para el blanco, incubando durante 1 hora a temperatura ambiente y lavando 5

veces con PBS-Tween. Se colocará 100 ul del antisuero antihumano polivalente

conjugado con peroxidasa diluido 1:15000 en PBS-caseína en todos los pozos. La placa

será incubada durante 1 hora a temperatura ambiente y luego será lavada 3 veces con

PBS-Tween.

La solución reveladora se preparará agregando 10 ml de solución substrato; 10

ml de peróxido de hidrógeno y 2 mg de orto-fenilendiamina (OPD) 5 minutos antes de

su uso. 100 ul de esta solución será agregada en cada pozo de la placa y dejándose

incubar en oscuridad durante 45 minutos. La solución sustrato estará constituida por:

Acido cítrico (5,19g), Na2HO4 (7,19 g) y agua destilada c.p.s. 1000 ml ajustándose a

pH 5. Finalmente se agregará 40 ul de ácido sulfúrico 1N en cada pozo e

inmediatamente la placa se leerá en un lector “Microwell System” a 420 mm de

longitud de onda.

Ejecución de la técnica:

Se procederá a descongelar el antígeno soluble de T. cruzi, diluyendose en

tampón a pH 9,6 hasta obtener una concentración de 1 mg/ml, 100 ul del antígeno

diluido será agregado en cada pozo de las placas e incubado a 4 º C durante toda la

noche con la finalidad de sensibilizarlas. Las placas serán lavadas 3 veces con PBS.

Tween y luego bloqueadas con 100 ul de PBS-caseína durante 1 hora a temperatura

ambiente para luego lavarlas una vez con PBS.Tween. Los sueros (problema, control

positivo y control negativo) serán diluidos 1:100 en PBS-caseína colocándose 100 ul de

cada uno en el primer pozo de cada columna (excepto en la primera fila, la cual será

dejada en blanco). En los orificios restantes se colocarán 100 ul de PBS-caseína y con

una micropipeta multicanal los sueros se diluyen con PBS-caseína, quedando así diluido

desde 1:100 hasta 1:12800. Las placas incubadas durante 1 hora a temperatura

ambiente, son lavadas 5 veces con PBS-Tween, 100 ul de conjugado antihumano IgG

peroxidasa diluido 1:15000 con PBS-caseína es colocado en cada pozo incubándose

durante 1 hora a temperatura ambiente, lavándose luedo 3 veces con PBS-Tween. El

revelado se realiza agregando 100 ul de una solución (10 ml de solución substrato a pH

5,2 ul, peróxido de hidrógeno y 2 mg de OPD) preparad a pocos minutos en la

oscuridad, para luego agragarles 40 ul de ácido sulfúrico 1N a cada pozo. Las placas

serán leídas inmediatamente en el lector “Microwell System” a una longitud de onda de

420 mm. 9

ANEXO Nº 5

TECNICA DE ENSAYO DE TRANSFERENCIA DE MULTIPLES ANTIGENOS

(MABA)

La técnica MABA (The multiple antigen blot assay) permite la investigación

simultánea de 28 antígenos diversos basados en la metodología de ELISA. Usando un

dispositivo acrilico (miniblotter) que contiene 28 canales paralelos, multiples antígenos

son distribuidos e inmobilizados en la membrana de nitrocelulosa. Las tiras entonces se

cortan perpendicularmente y se exponen al suero immune17.

Técnica:

1) Preparación del antígeno: 1 y 2 µg de Pgr24 hasta 60 µl, en buffer de unión (Na2CO3

0.015 M, Na2HCO3 0.035 M; pH 9.6) o buffer de transferencia (trizma base 0.025 M,

glicina 0.19 M), por canal de Miniblotter 28S1 (Immunetics Inc.).

2).La membrana de nitrocelulosa (BIORAD) se cortó con las siguientes medidas: 10 cm

de largo x 7.5 cm de ancho. Se trazó un punto sobre el papel como guía del canal

número 1. La membrana de nitrocelulosa se colocó seguidamente en agua mega pura o

buffer de unión, por espacio de 5 a 10 minutos.

3) Invertir la parte superior del Miniblotter con los canales hacia arriba y colocar encima

la membrana de nitrocelulosa con el punto guía hacia los canales. Colocar una esponja

sobre la membrana de nitrocelulosa, a fin de protegerla.

4) Colocar la pieza inferior del Miniblotter sobre la pieza superior invertida y luego

voltear todo el equipo para la colocación y ajuste de los tornillos. Apretar con mucho

cuidado, sin forzar.

5) Aspirar el exceso de agua en los canales del Miniblotter con la ayuda de una

micropipeta.

6) Introducir la solución con el antígeno (60 µl) en los canales numerados, ajustando

firmemente la punta de la micropipeta al canal y dispensar suavemente evitando la

formación de burbujas. Si se forman burbujas es conveniente retirar todo el volumen del

canal y volverlo a llenar.

Es muy importante evitar que la membrana de nitrocelulosa se seque excesivamente,

razón por la cual se deben colocar la solución con el antígeno, antes de los 15 minutos

siguientes al ensamblaje del equipo.

7) Colocar el Miniblotter en agitación constante a temperatura ambiente por 3 horas.

Ocasionalmente darle golpes lateralmente a fin de desplazar las pequeñas burbujas que

se puedan formar.

8) El lavado se realizó con el sistema Manifold, utilizando una inyectadora, con 60 ml

de PBS (Na2HPO4 80 mM, NaH2PO4 20 mM, NaCl 100 mM, pH 7.5) en tres ciclos de

lavados.

9) Abrir la cámara y retirar la membrana de nitrocelulosa, cortarla a la mitad y proceder

a bloquear con Na2HPO4 80 mM, NaH2PO4 20 mM, NaCl 100 mM, pH 7.5, 0.1% de

Tween 20 y 5% de leche descremada toda la noche a 5 oC o con Na2HPO4 80 mM,

NaH2PO4 20 mM, NaCl 100 mM, pH 7.5, 0.2% de Tween 20 y 0.5% de polivinyl-

alcohol (30-70 kDa), por espacio de 1 hora (a partir del minuto de bloqueo es suficiente

utilizando este polímero).

10) La membrana puede ser guardada entre dos hojas de papel de filtro en bolsas

plásticas a -20 oC. Cortar el exceso de membrana no sensibilizado, medir y marcar tiras

de 5 mm de ancho.

11) Marcar las tiras con un punto guía sobre el lado de la membrana sensibilizado y

cortarlas con hojillas de bisturí.

12) Diluir los sueros humanos (1:100) y de niños (papel de filtro) y perros (1:50) en

solución de incubación (Na2HPO4 80 mM, NaH2PO4 20 mM, NaCl 100 mM, pH 7.5 y

1% de leche descremada) y agitar constantemente durante 1 hora a temperatura

ambiente.

13) Realizar tres lavados de 5 minutos cada uno con PBS y 0.1% de Tween 20.

14) Diluir los conjugados: anti-IgG humano-Peroxidasa 1/4000 y anti-IgG perro-

Peroxidasa 1/500 en solución de incubación y agitar constantemente durante 1 hora a

temperatura ambiente.

15) Lavar de la forma descrita anteriormente.

16) La detección fue realizada con 10 mg de diaminobencidina en 20 ml de PBS, 50 µl

de CoCl2 al 1% y 7 µl de H2O2 al 3% con agitación suave. La reacción fue detenida a

los tres minutos en el caso de sueros humanos y 30 minutos en el caso de sueros de

niños (papel de filtro) y de perros, con agua destilada.

ANEXO Nº 6

UNIVERSIDAD CENTROCCIDENTAL “LISANDRO ALVARADO”



GUIA DE OBSERVACIÓN

Guía de observación de las viviendas y lugares de las comunidades rurales La Unión,

El Turagual, La Parada y La Loma dependientes del ambulatorio rural tipo I La Unión

de la Parroquia San Miguel, perteneciente al Municipio Urdaneta del Estado Lara.

Objetivo:

El objetivo de esta guía de observación es determinar la existencia de factores de

riesgo epidemiológicos para la Enfermedad de Chagas, así como la presencia de

triatominos en las viviendas y lugares adyacentes a la misma.

Instrucciones:

Esta guía será aplicada por los investigadores.

Marque una X en el espacio indicado.

I.- IDENTIFICACIÓN

Nombre y Apellido del jefe de familia presente: _____________________

Nombre de la comunidad: _______________________________

Vivienda Nº:________

II.- DETECCIÓN DE LOS FACTORES DE RIESGO PARA LA ENFERMEDAD

DE CHAGAS Y PRESENCIA DE TRIATOMINOS EN LAS VIVIENDAS Y

LUGARES DE LAS COMUNIDADES.

Hora de inicio de la revisión del domicilio: _______________

Hora de finalización de la revisión del domicilio: __________

Número de personas involucradas en la revisión: _____: Expertos____ : Inquilinos___

Hora de inicio de la revisión del peridomicilio: _______________

Hora de finalización de la revisión del peridomicilio: __________

Número de personas involucradas en la revisión: _____: Expertos____ : Inquilinos___

1.- La vivienda presenta los siguientes espacios:

• Dormitorios _____

• Sala _____

• Comedor _____

• Cocina _____

• Estar _____

• Baño _____

• Sala-Comedor _____

• Sala-Comedor-Cocina _____

• Depósitos _____

• Un solo ambiente _____

• Otros (describa) _____

2.-Construcción de la vivienda:

• Acho _______

• Palma y/o caña _______

• Bahareque no frisado _______

• Bahareque frisado _______

• Bloque no frisado _______

• Bloque frisado _______

• Otros (especifique) _______

3.- Presencia de grietas en las paredes:

Si ______ No______

4.- Características del techo de la vivienda:

• Acho ________

• Caña y/o palma _______

• Zinc _______

• Asbesto _______

• Acerolit _______

• Tejas _______

• Platabanda _______

5.- Características del piso de la vivienda:

• Tierra _____

• Cemento _____

• Cerámica _____

• Granito _____

6.- Presencia de animales domésticos en la vivienda o alrededor de la misma:

Si _____ No _____

7.- Si la respuesta anterior es afirmativa, qué tipo de animales domésticos se

encuentran en la vivienda o alrededor de la misma:

• Perros _____

• Gatos _____

• Ovinos _____

• Caprinos _____

• Porcinos _____

• Gallinas _____

• Palomas _____

• Gansos _____

• Bovinos _____

• Pavos _____

• Pájaros _____

• Otros _____

8.- Presencia de animales silvestres en la vivienda o sus alrededores (corrales,

depósitos, gallineros, otros)

Si _____ No_____

9.- Si la respuesta anterior es afirmativa, qué tipo de animales silvestres se

encuentran en la vivienda o sus alrededores (corrales, depósitos, gallineros, otros)

• Roedores _____

• Rabipelados _____

• Cachicamos _____

• Perezas _____

• Osos hormigueros _____

• Murciélagos _____

• Otros _____

10.- Presencia en la vivienda de:

• Adecuada distribución de los espacios _____

• Objetos, mobiliario y/o ropa mal arreglados _____

• Artefactos viejos, dañados y/o desechos acumulados _____

• Materiales de construcción _____

• Limpieza inadecuada de la vivienda _____

• Desechos de basura _____

11.- Presencia en el peridomicilio de:

• Adecuada distribución de los espacios _____

• Desechos de vidrio, plástico o metal _____

• Botellas, latas, recipientes vacíos y/o cauchos _____

• Escombros y materiales de construcción _____

• Basura _____

• Artefactos viejos, dañados y/o desechos acumulados _____

• Limpieza inadecuada del peridomicilio _____

12.- Presencia peridomiciliaria (0 – 12) metros de:

• Corrales _____


• Gallineros _____

• Anexos de bahareque _____

• Cuevas de animales silvestres ____ De cual animal ________

• Palomares _____

• Anexos de Acho _____

• Nidos de pájaros _____ Cuantos y tipo de pájaros ________

• Ninguno _____

13.- Presencia de vectores en sus diferentes estadios en la vivienda:

• Dormitorios _____

• Sala _____

• Comedor _____

• Cocina _____


• Otros _____

14.- Presencia de vectores en sus diferentes estadios en el peridomicilio:

• Corrales _____

• Gallineros _____

• Palomares _____

• Nidos _____

• Piedras _____

• Cardones _____

• Árboles _____

• Anexos de bahareque _____

• Cuevas _____

III.- RECOLECCION DE VECTORES:

1.- Le entregó envases identificados para la recolección de vectores a los habitantes

de la vivienda?

Si _____ Cuantos ______ Fecha: ________ No le entrego ____________

2.- Recolección pasiva de vectores en la vivienda y peridomicilio por los habitantes:

Si _____ No _____

3.- Si la respuesta anterior es afirmativa, indique:

• Lugar de la captura ______________________

• Hora ________

4.- Xenodiagnóstico de Brumpt realizado a los vectores encontrados:

• Negativo para Trypanosoma cruzi _____

• Positivo para Trypanosoma cruzi _____

ANEXO Nº 7

TECNICA DE XENODIAGNÓSTICO DE BRUMPT

Se realizará mediante la observación microscópica del contenido intestinal de los

triatominos. Para la búsqueda del flagelo del triatomino, en el laboratorio, se cortará el

último segmento intestinal por compresión del abdomen entre las dos ramas de la pinza

y el material será homogeneizado en un vidrio de reloj con algunas gotas de solución

salina; una gota de suspensión será colocada sobre una lámina portaobjetos y se cubrirá

con la laminilla para proceder a la observación al microscopio en seco. En los casos

considerados como positivos, se apreciaran flagelados de intensa movilidad que

abandonan rápidamente el campo microscópico. La observación de las formas

flageladas permitirá confirmar el diagnóstico, finalmente se practicará la coloración del

contenido intestinal del triatomino con Giemsa para determinar la morfología y especie

del Trypanosoma 9.

ANEXO Nº 8

INDICE DE INFESTACION DOMICILIARIA A Trypanosoma cruzi

IID= Nro. de Viviendas Infectadas X 100

Total de viviendas examinadas

INDICE DE INFECCION TRIATOMINICA A Trypanosoma cruzi

IIT= Nro. de triatominos positivos a Trypanosoma cruzi X 100

Total de triatominos examinados

INDICE DE COLONIZACION DOMICILIARIA

ICD= Nro. de casas con ninfas X 100

Total de viviendas con triatominos

INDICE DE DISPERSION

ID= Nro. de comunidades con triatominos X 100

Nro. de comunidades estudiadas

INDICE DE COINFECCION IC= Nro. de viviendas con 2 especies de triatominos X 100 Total de viviendas con triatominos

SEROPREVALENCIA DE ANTICUERPOS ANTI Trypanosoma...

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