TEMA 1. Introducción a La Bq

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  • 7/24/2019 TEMA 1. Introduccin a La Bq

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    CFGS LABORATORIO DE DIAGNSTICO CLINICO. TECNICAS DE ANALISIS BIOQUIMICO.TEMA 1. INTRODUCCION A LA BIOQUMICA.

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    TEMA 1. INTRODUCCIN A LA BIOQUMICA

    ESQUEMA:

    1.

    Concepto de Bioqumica Clnica.

    2.

    Etapas de un Anlisis Bioqumico.3.

    Tcnicas y mtodos de Anlisis Bioqumico.4. Control de Calidad en el Laoratorio.

    1. CONCEPTO DE BIOQUMICA CLNICA.

    Labioqumicaes una ciencia muy !o"en que deri"a de 2 lneas matrices#

    1$% &e la medicina y 'isiolo(a )in"esti(aci*n de san(re+ te!idos y orina,.2$% &e la qumica or(nica )estudio a cerca de la estructura de los compuestos or(nicos,.

    Las mo!cua" #aa$a" %& a ma'%(ia )i)a o biomo!cua"contienen compuestos or(nicos decarono en los cuales el elemento carono se -alla relati"amente reducido o -idro(enado. Los compuestos

    or(nicos presentes en la materia "i"a presentan enorme "ariedad y la mayor parte son etraordinariamentecomple!os.

    A/n las clulas ms sencillas )acterias, contienen un ele"ado n/mero de di'erentes molculasor(nicas0 as por e!emplo la Esc-eric-ia Coli contiene aproimadamente . compuestos or(nicos di'erentesy entre ellos 3. clases di'erentes de protenas y 1. di'erentes tipos de cido nucleicos.

    Estas molculas son macromolculas )porque tienen un peso molecular muy (rande, queparad*!icamente estarn construidas con pilares o molculas sencillas+ cada una de las cuales desempean msde una 'unci*n en las clulas "i"ientes.

    E!emplo# los aminocidos son pilares de molculas proteicas pero tamin sonprecursores de -ormonas.

    La bioqumica c&ica "% ocu*adel estudio de los aspectos qumicos de la "ida -umana+ en lasalud y en la en'ermedad+ mediante la aplicaci*n de los mtodos qumicos de laoratorio para el dia(n*stico+ el

    se(uimiento+ el control del tratamiento+ la pre"enci*n y la in"esti(aci*n de la en'ermedad. Los aspectosqumicos de la "ida -umana comprenden el estudio de los procesos meta*licos en relaci*n a los camios'isiol*(icos+ patol*(icos y a los inducidos por manioras teraputicas.

    Lo" ob+%'i)o" "o &ia(n*stico# es una -ip*tesis que se con'irma en 'unci*n de los resultados otenidos en una

    analtica de laoratorio# un aumento de la enima 56T indica+ por lo (eneral+ a'ectaci*n del -(ado. 7e(uimiento y e"oluci*n# se estalecen "alores de re'erencia a los que se les -ace un control

    peri*dico. Control del tto# "alorar la e'icacia de determinados 'rmacos se(/n sus ni"eles en san(re+ su

    toicidad+ e'ectos secundarios etc. 8re"enci*n de en'ermedades# se estalecen 9seales de alarma: que suelen preceder a los

    si(nos y sntomas clnicos0 tamin los pro(ramas de detecci*n preco de en'ermedades como ladiaetes+ la 'enilcetonuria etc.

    ;n"esti(aci*n de en'ermedades# usamos el de 9"alores dere'erencia:+ de los que eisten dos tipos#

    1.

    Basados en un indi"iduo# son datos pre"ios del mismo indi"iduo otenidos cuando se encontraa en undeterminado estado de salud y que sir"en para "alorar la e"oluci*n de ese paciente.

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    2. Basados en una polaci*n# se otienen por procedimientos estadsticos a partir de una polaci*n de su!etosien de'inidos )edad+ seo+ estado de salud estalecido mediante determinados criterios+ etc,.

    Estos son los "alores a los que se alude en las tcnicas de laoratorio como 9ndices de inter"alo: en el q seconsidera q los indi"iduos son saludales con respecto a ese dato clnico.

    Es importante q el TELrealice su traa!o con#

    ciencia# para la comprensi*n su'iciente del traa!o y su disciplina+ es necesario 'ormaci*n te*rico%prctica.

    conciencia# los 9tuos: son pacientes y de un resultado puede depender su salud. 8aciencia# ser meticulosos y crticos con el mtodo clnico. ;nstrumentaci*n# desarrollando un conocimiento sico de aparatos e instrumentos cada "e ms

    so'isticados acortando el tiempo y aumentando la sensiilidad.

    -. ETAPAS DE UN ANLISIS BIOQUMICO.

    8etici*n de prueas

    Toma de ?uestras Transporte 8rocesamiento o manipulaci*n de la muestra

    @ealiaci*n del anlisis

    &etecci*n de la respuesta analtica

    Clculo de resultados

    ;n'orme de los resultados@epasar los apuntes de ?B0 aquello de petici*n de prueas y su documentaci*n+ la etracci*n de san(re+

    los colores de los tuos+ la toma de muestras de orina+ etc.

    /. T0CNICAS M0TODOS DE ANLISIS BIOQUMICOS.

    En el laoratorio clnico se realian di'erentes tipos de anlisis en di'erentes muestras iol*(icas paradetectar la presencia de determinadas sustancias )llamadas analitos, y estalecer siempre que sea posile sucuanti'icaci*n0 como los resultados se aplican a un paciente -an de ser estudiados antes de implantar undeterminado mtodo+ para tener la (aranta de que los datos que proporciona son 'iales.

    T!c&ica a&a'ica# es el principio cient'ico+ ya sea qumico+ 'sico+ 'sico%qumico+ etc que nos

    proporciona in'ormaci*n sore la presencia o ausencia+ concentraci*n+ acti"idad o cualquier otrama(nitud de un determinado parmetro )e! (lucosa, en una muestra iol*(ica.

    Asorci*n de lu

    &ispersi*n de la lu &istriuci*n de los componentes de una mecla entre dos 'ases

    M!'o$o a&a'ico# es la adaptaci*n de una tcnica para la medida concreta de un parmetro en una

    muestra iol*(ica. Las instrucciones para la realiaci*n del mtodo se conocen como PROTOCOLO.

    Cules son esos mtodos y sus caractersticasD

    1. Po( % 'i*o $% m%$i$a qu% (%ai2a&:

    1.1.

    ?todos cualitati"os# solo detectan la presencia o no del analito0 por e!# san(re oculta en -eces.

    1.2.

    ?todos semicuantitati"os#indican el ran(o aproimado de concentraci*n del analito0 e!# tiras reacti"asde orina q utilian una escala de color.

    1.3.

    ?todos cuantitati"os# epresan la concentraci*n con o F eactitud del analito en la muestra0 e!#determinaci*n de (lucosa en suero.

    -. Po( % *(oc%$imi%&'o 3"ico4Qumico qu% u'ii2a&:

    2.1. ?. mecnicos# al(unos de ellos son#

    1. Giltraci*n+ ultra'iltraci*n y dilisis# dependen de la eclusi*n por el tamao a tra"s de los poros dedeterminadas memranas.

    2.

    Centri'u(aci*n y ultracentri'u(aci*n+ 'lotaci*n y decantaci*n# se separan las sustancias se(/n el tamao+ lamasa+ la densidad.

    3. &estilaci*n# separa por e"aporaci*n.

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    4. E%c'(o,o(%"i"# las partculas se(/n su car(a elctrica y su masa+ emi(ran cuando son sometidas a uncampo elctrico.

    . C(oma'o5(a,a:los componentes de la muestra+ son separados entre dos 'ases.

    H.

    Etracci*n con disol"entes+ etc.

    2.2. Tcnicas *pticas#detectan la radiaci*n lumnica y entre ellas estn las de uso ms com/n#

    1. E"*%c'(o,o'om%'(a o %"*%c'(o"co*ia $% %mi"i6 cuando un tomo es ecitado por una 'uente deener(a+ sus electrones pueden alcanar ni"eles oritales de ener(a mayor0 cuando el electr*n "uel"e a suestado de reposo emite una @E?.&entro de ella tenemos# Espectroscopia de emisi*n at*mica o 'otometra de llama# determina Ia+ J y Li en lquidos iol*(icos0 se

    asa en la emisi*n de lu0 cuando se ponen en contacto con la ener(a calor'ica de una llama cadaelemento de una muestra+ desprende una lu con una lon(itud de onda di'erente+ tpica de cada uno+ y conuna intensidad luminosa directa> proporcional al nK d tomos+ lo que es proporcional a la concentraci*n enla muestra.

    Espectroscopia de 'luorescencia o 'luorimetra# la 'luorescencia es la capacidad q tienen las sustancias deemitir una lu "isile cuando se las iluminan con radiaci*n M0 una molcula asore lu de unadeterminada lon(itud de onda )ener(a, y emite lu de una lon(itud de onda superior )F E,0 la intensidadde la radiaci*n es N a la cantidad asorida que a su "e es N a la cantidad de molculas que asoren.

    Ouimioluminiscencia# emisi*n de lu de di'erentes sustancias al oidarse0 no precisan aporte eterno delu.

    Espectroscopia de 'os'orescencia o 'os'orimetra+ espectroscopia de rayos P etc.

    2. E"*%c'(o"co*ia $% ab"o(ci6&: se usa para Ca+ ?(+ Qn+ Cu+ 8 y otros metales y (ran cantidad decompuestos iol*(icos y se asa en la asorci*n de lu por lo que la radiaci*n emitida ser de F intensidad quela inicial y N a la concentraci*n de la sustancia en la muestra.

    &entro de ella tenemos# E. d asorci*n molecular M%M e ;@+ se(/n la ona del espectro de @E? en la q traa!e. E. d asorci*n at*mica.

    @esonancia ma(ntica Iuclear# se coloca la muestra en un campo ma(ntico eterno y se irradia condeterminada radio'recuencia0 parte de los n/cleos de E in'erior la asoren0 el aparato de @esonancia

    ma(ntica Iuclear detecta esta asorci*n de E. Etc.3. E"*%c'(o,o'om%'(a $% $i"*%("i6 son principalmente dos tcnicas que se asan en el -ec-o de quecuando un -a d lu c-oca con una partcula en suspensi*n+ parte de la lu es dispersada+ parte re'le!ada+ parteasorida y parte transmitida.

    Turidimetra# disminuci*n de la intensidad de un -a de lu incidente cuando pasa a tra"s de unasuspensi*n de partculas0 se usa sore todo para la determinaci*n de proteinas en orina.

    Ie'elometra# medida de la lu dispersada en n(ulos di'erentes al de incidencia0 uso principal es endeterminaci*n de protenas espec'icas.

    4. E"*%c'(o"co*ia $% (%,%7i6& o (%,%7om%'(a# es la llamada 9qumica seca:.. 9 de (%,(acci6& o (%,(ac'(om%'(a8de di'racci*n)di'racci*n de @ayos P, etc.

    2.3. T!c&ica" im&u&oqumica":siempre sore la ase d una reacci*n A(%Ac detectan seales d color+ d

    radioacti"idad etc. Las R importantes# @;A+ E;A+ ;nmuno'luorescencia+ inmunone'elometra etc.2.4. ?todos trmicos# como la osmometra+ que detecta camios en el punto de con(elaci*n de unasoluci*n.2.. T!c&ica" %%c'(oqumica"# detectan seales elctricas+ como la 8otenciometra+ Conductimetra+ etc.2.H. T!c&ica" $% Bioo5a mo%cua(# asadas en tcnicas de -iridaci*n de andas de A&I+ por e!+ otcnicas de ampli'icaci*n+ mediante 8C@ )@eacci*n en Cadena de la 8olimerasa,.

    /. Po( % u"o a qu% "% $%"'i&a&:

    3.1. ?todos de'initi"os# se usan para calirar materiales0 tienen un error sistemtico muy a!o )(raneactitud, y alta precisi*n.3.2. ?todos de re'erencia# son realiados por personal altamente cuali'icado en laoratorios clnicos oindustriales y con materiales calirados para otener "alores estndar con los que comparar resultadosotenidos con otros mtodos.3.3. ?todos de elecci*n#son los que utilia un laoratorio determinado para su traa!o de rutina.

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    9. CONTROL DE CALIDAD EN EL LABORATORIO:

    9.1. Co&c%*'o" (%acio&a$o" co& % Co&'(o $% Cai$a$.

    S% %&'i%&$% *o( Co&'(o $% Cai$a$ a un con!unto de medidas sistemticas encaminadas a oser"ary a conser"ar la 'iailidad d un mtodo analtico. Esto incluye una detecci*n de los errores cometidos y una

    pre"enci*n de la aparici*n de los mismos0 su o!eti"o principal+ es ase(urar que los "alores otenidos con undeterminado mtodo+ presentan una adecuada eactitud y precisi*n y que por tanto+ son cient'icamente"lidos.

    A5u&o" co&c%*'o" (%acio&a$o" co& % mi"mo "o

    1. Eactitud# es el (rado de concordancia entre el "alor de concentraci*n de la sustancia prolema+ que se-a determinado con una tcnica analtica+ y el "alor real )el otenido con una tcnica de re'erencia, deesa concentraci*n.

    8uede calcularse mediante la si(uiente '*rmula#

    E NS M M@ > M@ . 1

    E NS Eactitud en N0 MS el "alor q yo oten(o0 M@S Malor real. A R cerca d R eacta.7uele aceptarse una E N F 1N para sustancias no enimticas y F 2N para las enimticas0 de todos

    modos en los protocolos+ "ienen indicados dic-os lmites.Cuando la ineactitud es constante y de similar cuanta+ se conoce como ses(o.

    2.

    8recisi*n# es el (rado de dispersi*n encontrado entre los "alores otenidos al repetir una mismadeterminaci*n sore la misma muestra0 en el laoratorio clnico se usa mas el trmino contrario+ esdecir+ imprecisi*n+ q se de'ine como la "ariailidad q se otiene al repetir las medidas de una muestra.

    8ara calcularla se utilia principalmente el Co%,ici%&'% $% ;a(iaci6& P 1 de unas 2 o 3 determinaciones de la misma muestra y que no dee ser del N.

    3. 7ensiilidad# es la capacidad para di'erenciar dos seales muy parecidas del mismo analito0 tamin sede'ine como la capacidad de un mtodo para producir un camio en la seal ante un camio de'inido dla cantidad. Io solo depende de la tcnica sino del equipo instrumental+ del tipo de analito y de lamuestra.

    @elacionado con este concepto#-

    Lmite de detecci*n# es la ms pequea concentraci*n de analito que puede ser detectada por unmtodo.

    - Lmite de cuanti'icaci*n# es el resultado ms pequeo que puede di'erenciarse del lanco.

    Tamin es sensiilidad la capacidad que tiene un mtodo analtico para detectar el analito )o sea+ dar unresultado positi"o "erdadero, en todas las muestras que realmente lo conten(an.

    7i con 2 mtodos representamos de manera (r'ica la "ariaci*n de la seal que se detecta al analiaruna soluci*n patr*n+ el mtodo mas sensile es el que da lu(ar a una recta de caliraci*n de mayor pendiente0esto si(ni'ica+ que con la misma concentraci*n+ un mtodo de mayor sensiilidad re(istra una seal de "alorsuperior y tamin+ que con soluciones de concentraci*n similares+ es capa de detectar la di'erencia que eisteentre ellas.

    La ecuaci*n de la recta "iene de'inida por la '*rmula#

    y S a R

    donde 9: es la pendiente de la recta+ 9a: es el punto donde la recta corta al e!e U denominndose ordenada enel ori(en+ 9y: es la "ariale dependiente y 9: la "ariale independiente.

    Esta ecuaci*n nos permite predecir los "alores de una "ariale )9y:,+ en 'unci*n de otra con la que estrelacionada )9:,.

    4.

    Especi'icidad o 7electi"idad# es la capacidad de un mtodo para determinar eclusi"a> el analito en cuesti*nsin reaccionar con otras sustancias similares que se pueden encontrar en la mecla0 por e!+ un mtodo paradeterminar (lucosa+ ser espec'ico si solo determina (lucosa aunque en la muestra se encuentren otras-eosas.

    Las tcnicas inmunoqumicas+ son las R espec'icas+ siempre y cuando el Ac no de reacciones cruadasapreciales con molculas parecidas.

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    La especi'icidad analtica puede "erse a'ectada sustancias que se encuentran normal> en suero o plasma+como ilirruina+ + lpidos etc que pueden inter'erir por su color+ turide o por sus caractersticas 'isico%qumicas.

    . @an(o analtico o linealidad# es el "alor mimo de la concentraci*n de un analito para el que la sealre(istrada el aparato y la concentraci*n son directa> proporcionales0 es el ran(o de concentraci*n de

    las muestras sore el q se puede aplicar el mtodo+ sin tener que -acer nin(una modi'icaci*n.8ara determinar el ran(o+ se analian una serie de muestras normal> patrones de "arias concentraciones ydeterminamos la cur"a de caliraci*n correspondiente.

    El ;CA o inter"alo de concentraci*n aplicale o inter"alo de medici*n+ es el inter"alo de "alores en el que elprocedimiento de medida se aplica sin modi'icaciones y est comprendido entre el Lmite de detecci*n ocuanti'icaci*n y el Lmite de Linealidad.

    H. ?edidas del lanco# son seales o lecturas )cantidad de asorancia, oser"adas durante el proceso demedida del analito+ que se deen al reacti"o o a los componentes de la muestra que se estoser"ando+ pero no al analito. En espectro'otometra M%M estas medidas pueden anularse utiliandolos lancos para calirar la asorancia a "alor cero+ o utilindolos en un sistema de dole -a.

    8ueden otenerse eperimental> midiendo lo si(uiente#

    -

    n lanco de reacti"o# es decir+ los reacti"os sin la muestra y -acemos una lectura inicial aseliminamos las inter'erencias propias del reacti"o.

    - n lanco de muestra# la lectura inicial se -ace con el suero diluido en la misma proporci*n que se le"a a ec-ar al reacti"o y as eliminamos las inter'erencias de la muestra antes de q se produca lareacci*n.

    Como es de esperar+ cuanto R a!os sean los "alores del lanco de un mtodo+ me!or ser la eactitud y laprecisi*n q se otienen con ese mtodo.Es importante que el TEL ten(a en cuenta la ma(nitud de las medidas del lanco ya que stas contriuyen alerror total del proceso de medida.

    V.

    ;nter'erencias# son el e'ecto producido por uno o ms compuestos sore un analito+ alterando laeactitud de su medida.

    Cuanto mayor es la especi'icidad de un mtodo o tcnica+ menos se "e a'ectado porlas inter'erencias que daran lu(ar a una lectura err*nea del parmetro que se estanaliando.

    Es prcticamente imposile determinar todas las inter'erencias posiles para undeterminado mtodo+ de manera que en la prctica+ s*lo se tienen en cuenta lasinter'erencias si(ni'icati"as

    9.-. Lqui$o" $% (%,%(%&cia:

    7on aquellas soluciones que contriuyen a ase(urar la calidad de un procedimiento analtico0 puedenpresentarse de 'orma lquida o lio'iliado )-a de reconstituirse,.

    7uelen tener las si(uientes 'unciones#

    1.

    Calirar los instrumentos de medida.2.

    6tener resultados analticos+ como las cur"as de caliraci*n+ sore las que etrapolar nuestros resultados.

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    3. &emostrar y controlar la 'iailidad d los resultados otenidos en el la+ por e!+ al ser analiadas !unto conlas muestras.

    4.

    E"aluar la "alide de los procedimientos de medida.

    8uede ser destinado a di'erentes usos#

    1.

    Como patr*n o estndar# se usa para otener resultados analticos ya que contiene el analito a unaconcentraci*n conocida0 se usa sore todo en las determinaciones espectro'otomtricas a punto 'inal+ paracalcular la concentraci*n de los analitos en las muestras+ por comparaci*n de las di'erentes asoranciasotenidas en stas y en el estndar.

    Tamin se pueden utiliar "arios patrones+ que contienen el analito a di'erentes concentraciones de "alorconocido+ para construir cur"as patr*n que sir"an posteriormente para interpolar los "alores de asoranciamedidos en las muestras y determinar las concentraciones que les corresponden.

    2.

    Como calirador# se emplea para a!ustar los resultados proporcionados por los aparatos de medida a losque te*rica> deieran dar+ se(/n la in'ormaci*n 'acilitada por el laoratorio comercial que prepara elcalirador utiliado0 esta caliraci*n dee -acerse diaria> y antes de comenar las determinaciones de lasmuestras.

    3.

    Como control# es un lquido iol*(ico )suero+ plasma o san(re total, procesado por un laoratorio comercial

    y del que se conocen las concentraciones de cada uno de los analitos que contiene0 puede ser 9normal: sicontiene los analitos a unas concentraciones 'isiol*(icas+ o 9patol*(ico: si estn encima o dea!o de loque se considera 'isiol*(ico.

    8uede ser utiliado para las si(uientes 'unciones# E"aluar la "alide de un procedimiento de medida. Malidar los resultados otenidos en el control de calidad interno del laoratorio0 para ello se introducen

    !unto con las muestras y se procesan i(ual que estas0 as "eri'icamos los resultados+ ya que si los o'recidospor el control son precisos y eactos+ los de las muestras procesadas con el+ tamin.

    Estudiar comparati"a> los resultados otenidos en el control de Calidad eterno en di'erentes laoratorios.

    4.

    8ool# consiste en la mecla de di"ersos sueros o plasmas+ realiada en el propio laoratorio analtico0 los"alores son desconocidos+ pero se aproiman a los que se consideran normales0 es el lquido de re'erencia

    mas parecido a las muestras.

    9./. =(>,ica" $% co&'(o:

    8ara -acer el se(uimiento de la precisi*n en el laoratorio de Oumica Clnica se utilian'undamentalmente procedimientos estadsticos que se re'le!an en tres tipos de (r'icas# de Le"ey%Wennin(s+ deUouden y las Cu7um.

    1. 5r'ica de Le"ey%Wennin(s# consiste en una cur"a de distriuci*n normal diu!ada de lado+ en la que semarcan puntos espec'icos correspondientes a los "alores de la media ms y menos una+ dos y tresdes"iaciones estndar+ que se prolon(an -acia la derec-a 'ormando la (r'ica en la que se representarn mstarde los "alores otenidos cada da para el control#

    Cuando se utilian estas (r'icas para el control de calidad+ -ay que preparar una para cada control ypara cada parmetro ioqumico.

    En una -o!a de papel milimetrado+ dispuesta de 'orma apaisada+ se traa un e!e de coordenadas+ demanera que en el e!e de ordenadas se sit/an los "alores de concentraci*n del analito y en ascisas los dascorrespondientes al periodo de se(uimiento.

    La escala de unidades de concentraci*n se traa de manera que queden dentro del anc-o del papel los"alores comprendidos entre la media )que se sit/a en el centro de la -o!a, y cuatro des"iaciones estndar porarria y por dea!o del "alor de la media.

    7e marcan los traos correspondientes a los "alores de la media+ en lnea continua+ y X1&E+ X2&E+X3&G+ %1&E+ %2&E y %3&E+ en lneas discontinuas.

    na "e que se -a preparado la (r'ica+ se anota el resultado del control diario y se aplican los criteriosque -aya adoptado el laoratorio para aceptar o rec-aar los resultados del anlisis.

    2. 5r'ica de Uouden# es el resultado de superponer dos (r'icas de Le"ey%Wennin(s de 'ormaperpendicular entre s.

    En este tipo de (r'icas se pueden re'le!ar los "alores de dos controles de di'erente concentraci*n de unmismo analito+ utiliando+ por e!emplo+ el (r'ico -oriontal para "alores clnicamente normales y el "erticalpara "alores patol*(icos.

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    3. 5r'ica Cusum# se llama as porque en ella se representan sumas acumuladas de las di'erencias entrelos "alores otenidos cada da y el "alor medio calculado a partir de determinaciones pre"ias

    8ara construir este tipo de (r'ica se marca en el centro del e!e de ordenadas el punto cero y se traauna lnea -oriontal. 8or encima y por dea!o de esta lnea se disponen los "alores positi"os y ne(ati"os

    respecti"amente. En el e!e de ascisas se marca el tiempo)das+ n/meros de lotes analiados+ etc,.

    Los datos que se sealan en la (r'ica corresponden a

    las sumas acumuladas+ que se otienen restando elresultado del control otenido cada da del "alor de la mediay acumulando a este "alor la di'erencia otenida el daanterior.

    La interpretaci*n de los resultados se asa en el tipode cur"a que traa la lnea Cusum+ con respecto a una cur"atipo sealada en una plantilla+ o puede estalecerse un "alornumrico lmite llamado 9Limite de decisi*n Cusum 9.

    En este caso+ la interpretaci*n es similar a la que serealia con las (r'icas de Le"ey%Wennin(s+ y tiene la "enta!ade que el control puede pro(ramarse en los analiadorespara que se realice de 'orma automatiada.

    Cuando se estalece en un laoratorio clnico un pro(rama de control de calidad+ lo que se pretende es

    tener un instrumento que -a(a posile tomar decisiones inmediatas con respecto a la "alide de los resultadosotenidos para las muestras de los pacientes+ asndose en la oser"aci*n de que los "alores del controlpermanecen dentro de unos lmites pre"iamente estalecidos. 7i el "alor del control se encuentra dentro deesos lmites+ se supone que los resultados de las muestras de los pacientes que se analiaron en el mismo loteque ste+ son "alores correctos.

    El lmite que se acepta con ms 'recuencia es que los "alores del control -an de encontrarsecomprendidos dentro del inter"alo de con'iana del Y+N+ es decir+ estos "alores -an de ser prcticamentei(uales al Y+ N de los datos otenidos con el control durante el periodo en el que se estaleci* el "alormedio.

    &e acuerdo con este criterio se considera que un "alor de control es aceptale si se encuentra dentro delrea comprendida entre la media y X2&E en la (r'ica de Le"eyZWennin(s+ o en la de Uouden. 7i un "alor delcontrol no cumple esta condici*n+ los resultados de los anlisis del lote no se aceptan.

    Aunque las (r'icas de Le"ey%Wennin(s son 'ciles de interpretar y proporcionan una uenarepresentaci*n "isual de la precisi*n+ tienen el incon"eniente de que se necesita muc-o tiempo para anotartodos los resultados da a da en ellas+ ya que son necesarias dos o tres para cada parmetro ioqumico )unapor control,.

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    ?odi'icaciones 'recuentes en los (r'icos de control#

    &ispersi*n# cuando los errores aleatorios o la imprecisi*n aumentan

    Tendencia# es la des"iaci*n sistemtica de los "alores oser"ados cuando el mtodo analticosu're un prolema en desarrollo pro(resi"o.

    &es"iaci*n# es una modi'icaci*n arupta o rusca con respecto al "alor medio estalecido.

    8ara -acer de 'orma ms prctica la toma de decisiones+ se -an ideado otras alternati"as. La msutiliada es el sistema de re(las m/ltiples de [est(ard

    1: / SD una oser"aci*n supera la media el lmite de 37&-: - SD dos oser"aciones consecuti"as superan la misma media 27&R: 9 SD dos oser"aciones consecuti"as se di'erencian ms de 47&9: 1 SD cuatro oser"aciones superan la media 17&1?: MEDIAdie oser"aciones caen a un mismo lado de la media.

    Las re(las 1#37& y @# 47& (eneralmente su(ieren un error aleatorio. Las re(las 2#27&+ 4#17& y 1#?E&;A suele ser un error sistemtico.

    9.9. P(o'ocoo $% b@"qu%$a $% %((o(%".

    asta en los laoratorios ms eperimentados y capacitados se producen en ocasiones+ situaciones enlas que los resultados de los controles se encuentran 'uera de los lmites permitidos. En estos casos loimportante es a"eri(uar las causas y resol"erlas rpidamente+ por lo que si se tiene estalecido un protocolo de/squeda de errores la tarea se 'acilita consideralemente.

    A continuaci*n+ de 'orma esquemtica y sin pretensiones de -aer aarcado todas las situacionesposiles se indica un e!emplo de c*mo se puede estalecer una pauta a se(uir en estas situaciones que en laprctica+ no resultan nada 'ciles de in"esti(ar. El e!emplo se centra en la preparaci*n y desarrollo tcnicasespectro'otomtricas MZ M#

    1. B/squeda de errores en la preparaci*n del anlisis#

    1.1. @eacti"os# en la conser"aci*n# se -a sorepasado la 'ec-a de caducidad o la estailidadD se -an (uardado-ermticamente cerrados+ en ausencia de lu y a la temperatura adecuadaD si no se est se(uro de que todoesto se -a -ec-o ien+ desec-ar el \it y co(er uno nue"o.

    en el tratamiento# se -a utiliado a(ua de calidad apropiada para su preparaci*nD los reacti"ospreparados -an pasado material "olumtricosucioD se -an diluido con la cantidad correcta de diluyenteDde!an residuo s*lidoD se -an disuelto sin prdida de sustanciaD

    1.2. Controles#

    en la conser"aci*n# lo mismo que en los reacti"os. en el tratamiento# se -a utiliado a(ua de calidad apropiada para su preparaci*nD se -andisuelto con la cantidad adecuada de a(uaD se -an disuelto sin prdida de sustanciaD se -a esperado eltiempo de reacti"aci*n antes de usarlosD se -an con(elado correctamente las 'raccionesD se -an con(elado y

    descon(elado reiteradamenteD se -a e"itado la 'ormaci*n de espumaD2. B/squeda de errores en la realiaci*n del anlisis#

    2.1. so de pipetas# se -an utiliado pipetas sucias o desportilladasD se -an utiliado pipetas demasiado(randes para "ol/menes muy pequeosD )por e!+ pipetas de ml para medir microlitros, se -an utiliadopipetas -/medasDera correcto el ni"el del menisco oser"ado a la altura de los o!osDse -an "aciado o llenadodemasiado deprisa las pipetas automticasDse -a a!ustado correctamente el "olumen en los dosi'icadoresD

    2.2. Temperatura y tiempo. se -an atemperado su'icientemente los reacti"os+ controles y muestrasDse -acolocado correctamente la temperatura en el ao maraDse -a tenido en cuenta que las cuetas de plsticonecesitan ms tiempo para atemperarse que las de "idrioDse -a medido ien el tiempo de incuaci*nD

    2.3. Got*metro# se -a a!ustado ien el ceroD-a estado la lmpara encendida el tiempo su'icienteD-a -aido'allos en el suministro de corriente elctricaD-a entrado lu en el compartimento de prueasD-a en"e!ecido la

    lmparaD-ace muc-o tiempo que no -a sido re"isado por el ser"icio tcnicoD

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    2.4.%Cuetas# se -an utiliado cuetas sucias o rayadasDse -an situado por los lados correctos en el paso deluD-an estado -/medas por 'ueraD-an estado su'icientemente llenasD-aa uru!itas en la cuetaD

    2..%Clculos# se -an -ec-o correctamente las operaciones con decimalesDse -a utiliado correctamente el'actorDse -a tenido en cuenta la diluci*nDse -a calculado en las unidades adecuadasDse -a tenido en cuentael lanco de reacti"o o de prueaD

    En ocasiones+ aunque los controles dan resultados correctos+ el "alor encontrado para la muestra de unpaciente es incomprensile. Las causas suelen estar 'uera del propio laoratorio+ pero es a ste al que lecorresponde estalecer relaciones con los dems ser"icios del -ospital o de la instituci*n sanitaria en la que seencuentra uicado+ de manera que se puedan or(aniar pro(ramas con!untos de (aranta de calidad quease(uren que la otenci*n+ traslado+ conser"aci*n y preparaci*n de las muestras se -an -ec-o correctamente.

    9.. ;ai$aci6& $% (%"u'a$o":

    Consiste en la re"isi*n (loal de los resultados+ encaminada a comproar que el sistema analtico esta!o control y que los resultados otenidos con l+ son co-erentes o con(ruentes con las caractersticas clnicasdel paciente.

    8ara realiarla#1K se -a constatado que el control interno de la calidad y la "alidaci*n tcnica no -a detectado anomalas

    analticas y esto se -ace en ase a los inter"alos de decisi*n 'i!ados para cada analito y en# I&,o(maci6& ac%(ca $% *aci%&'%: se conoce su procedencia )Atenci*n 8rimaria o Atenci*n

    Especialiada,+ su dia(n*stico y sus datos de 'iliaci*n+ as como si -uo incidencias en la toma de lamuestra.

    I&,o(maci6& ac%(ca $% a mu%"'(a: el TEL re"isa la muestra antes de introducirla en el analiador yconoce los ndices sricos y por tanto el (rado de ictericia+ -em*lisis o lipemia de la muestra.

    I&,o(maci6& ac%(ca $% m!'o$o: diariamente se caliran los aparatos al comieno de la !ornadaestaleciendo el control de calidad analtico para todos los componentes.

    2K se procede a la re"isi*n de todos los in'ormes de resultados que realia el 'acultati"o responsale dellaoratorio+ mediante un pro(rama in'ormtico0 se clasi'ican en tres (rupos#

    =(u*o I: i&,o(m%" %"'(ic'am%&'% &o(ma%"# todos los resultados de los parmetros estudiados estncomprendidos en los lmites considerados normales y+ adems+ corresponden a su!etos que no padecen una

    en'ermedad conocida que pueda alterar estos parmetros. =(u*o II# i&,o(m%" a&o(ma%" *%(o co#%(%&'%": los resultados estn 'uera de los lmites normales peroson co-erentes con el estado de salud del paciente.

    =(u*o III: i&,o(m%" i&co#%(%&'%": contienen resultados que por al(una ra*n no parecen tenerconei*n con el estado de salud del paciente.

    Terminado el proceso+ el in'orme es en"iado al peticionario.

    P(%5u&'a" $% (%*a"o:Concepto y o!eti"os de la ioqumica clnica.Malores de re'erencia.Concepto de control de calidad.Eactitud+ precisi*n+ sensiilidad y especi'icidad# aplicaciones a protocolos de traa!o

    @an(o analtico o linealidad.?edidas del lanco e inter'erencias.Lquidos de re'erencia# tipos+ 'unciones+ caractersticas y usos.Criterios de selecci*n de una muestra control.@esol"er e interpretar una (r'ica de Le"ey%Wennin(s.@esol"er prolemas de diluciones>disoluciones.

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    REPASO DE CONCEPTOS BASICOS DE DISOLUCIONES DILUCIONES.

    1

    I;&A&E7 U GACT6@E7 &E C6IME@7;6I. EL 7;7TE?A ;ITE@IAC;6IAL.2

    &;76LC;6IE7.3 &;LC;6IE7.

    1 UNIDADES 3ACTORES DE CON;ERSIN. EL SISTEMA INTERNACIONALLos resultados de las prueas+ procedimientos y tcnicas realiadas en el laoratorio deen ser epresados enunidades sicas inteli(iles para todos los pases del mundo+ son las unidades del Si"'%ma I&'%(&acio&a)7;,+ creado con el o!eti"o de uni'icar las unidades de los resultados otenidos en el laoratorio.

    El 7; asi(na la unidad madre de medida por cada una de las di'erentes ma(nitudes# lon(itud+ peso+ masa+

    cantidad de materia y "olumen0 cada una de estas unidades madre tiene un smolo y di'erentes m/ltiplos y

    sum/ltiplos desi(nados por un pre'i!o+ la con"ersi*n de stos en la unidad madre se realia mediante los

    'actores de con"ersi*n.

    Las unidades madre son# de lon(itud el metro )m,0 de peso )masa sometida a la 'uera de la (ra"edad, el\ilo(ramo )J(,0 de tiempo el se(undo )s,+ de temperatura el \el"in )J, y de cantidad de sustancia el mol.

    Las unidades deri"adas son aquellas que se otienen mediante la cominaci*n de dos o ms unidades madre atra"s de operaciones matemticas0 las de uso ms com/n en el laoratorio son el m] para el "olumen+ el m^para la super'icie y las unidades de concentraci*n que "eremos ms adelante.

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    - DISOLUCIONES.

    na de las prcticas ms corrientes en el laoratorio es la preparaci*n de disoluciones (eneralmente lquidas+ apartir de productos comerciales. na disoluci*n es una mecla -omo(nea de dos o ms componentes s*lidos+lquidos o (aseosos. El componente que determina el estado de la disoluci*n+ y que est en mayor proporci*n+es el$i"o)%&'%. La sustancia dispersada en el disol"ente y que se encuentra en menor proporci*n se llama

    "ou'o. Tanto el disol"ente como el soluto pueden ser lquidos+ s*lidos o (aseosos+ pero las disoluciones msutiliadas en el laoratorio tienen como disol"ente un lquido.

    7e(/n el tamao del soluto o 'ase dispersada en el disol"ente+ las disoluciones se clasi'ican en#

    Tamao ,a"% $i"*%("a$a Ca"% $% $i"ouci6&7uperior a +1 _m &isoluci*n (rosera

    Entre +1 y +1 _m &isoluci*n coloidal;n'erior a +1 _m &isoluci*n "erdadera

    Las $i"oucio&%" 5(o"%(a"tamin se llaman dispersiones+ ya que las partculas dispersadas se "ena simple "ista+ por lo que pueden separarse del disol"ente por decantaci*n o 'iltraci*n. Las $i"oucio&%"cooi$a%"tamin llamadas coloides 'orman emulsiones. Las partculas s*lo se "en con el ultramicroscopio ypara poder separarlas del disol"ente -ay que utiliar ultra'iltros con tamao de poro no superior a +1micras. Las $i"oucio&%" )%($a$%(a"son las ms utiliadas en el laoratorio+ las partculas dispersadas no sepueden "isualiar ni con el ultramicroscopio0 para separarlas del disol"ente -ay que utiliar tcnicas deseparaci*n comple!as como la cromato(ra'a o la destilaci*n.

    En (eneral+ cuando se -ala de disoluciones+ no re'erimos a las disoluciones "erdaderas+ stas son lasque trataremos en esta unidad.

    -.1. 3o(ma $% %7*(%"a( a com*o"ici6& $% a" $i"oucio&%":

    La relaci*n numrica entre los componentes de la disoluci*n es la co&c%&'(aci6&. Eisten di'erentes mtodosde epresar la concentraci*n de una disoluci*n#1.

    5.5ramos de soluto por litro de disoluci*n.

    2. M. ?olaridad# moles de soluto+ por litro de disoluci*n.

    M & mo%" i'(o&mo%" 5(amo"*m

    3. N. Iormalidad. Equi"alentes% (ramo de soluto+ por litro de disoluci*n.

    N Equi)a%&'% 5(amoi'(oE5 & mo%" )a%&cia

    4. m. ?olalidad. ?oles de soluto por \ilo de disol"ente.

    m & mo%" $% "ou'o F5 $i"o)%&'%

    . G PP. Tanto por ciento peso % peso. 5ramos de soluto por cada 1 ( de soluci*n.

    H. GP;.Tanto por ciento peso % "olumen. 5ramos de soluto por cada 1 ml de disoluci*n.

    V. G;;.Tanto por ciento "olumen % "olumen. ?ililitros de soluto por cada 1 ml de disoluci*n.

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    -.-. P(%*a(aci6& $% "oucio&%":

    1. C>cuo $% a ca&'i$a$ $% "ou'o &%c%"a(io# estos clculos se pueden -acer partiendo de las'*rmulas de concentraci*n antes citadas o ien a partir de otras '*rmulas que lo -acen ms 'cil#

    Mi Ci S M' C'

    )M1 C1, R )M2 C2, S )M1 R M2, C'

    7e usa para calcular concentraciones de meclas de dos soluciones de un mismo producto o de una disoluci*ncon a(ua. ay que tener en cuenta la *u(%2a o (iqu%2a del reacti"o empleado+ ya que muc-os no "ienencomercialiados con una purea del 1N.

    7i no est puro+ -ay que -acer la correcci*n correspondiente y -a de salir mas cantidad a tomar que siestu"iese puro0 por e!emplo+ el Cl del laoratorio est al 3N0 si necesito 1 ml de Cl -ara de tomar 2`+Vml del reacti"o al 3N+ que son los que contienen 1 ml de Cl.

    1 ml contienen 3 ml de CL * 1 ml -e de tomar para tener 3 ml de CLxml contendrn 1 ml de Cl * ml -ar de tomar para tener 1 ml de Cl

    S 1.1>3S 2`+V ml

    ?uc-as "eces el soluto no est en 'orma s*lida y pesarlo es complicado. 8ara trans'ormar masas en "ol/meneso "ice"ersa usaremos la $%&"i$a$de dic-o compuesto+ dSm>" y que epresa el peso en (ramos de un ml dedisoluci*n.

    8or e!emplo otienes un peso en (ramos )por cualquiera de las otras '*rmulas de -allar la concentraci*n, delreacti"o anterior y V (ramos de Cl es lo que te -ace 'alta para preparar tu disoluci*n0 el Cl est liquido y al3N y de densidad 1+` (>ml0 los pasos correctos son#

    1. Corri(es los (ramos totales que necesitas del reacti"o impuro#

    1 ( contienen 3 ( de Cl ( -e de tomar para tener V ( de Cl

    S V>3S 2 (2.

    Como el reacti"o est liquido+ usas la '*rmula de la densidad para saer cuntos ml de la disoluci*n impuratienes que tomar que pese los 2 ( )que tiene V ( puros,

    1+`S 2> mlS 1`+1 ml

    y sa es la cantidad lquida que contiene V ( puros de Cl

    -. P%"amo" % "ou'oen un "idrio de relo!+ si es s*lido+ o ien medimos su "olumen si es lquido.

    /. Lo ec-amos en un )a"o $% *(%ci*i'a$o H %&+ua5amo"el "idrio con un poco de disol"ente para queno quede en l nada de soluto.

    9. Aadimos un poco mas de disol"ente y con ayuda de una "arilla de "idrio+ lo $i"o)%mo"a(itandosua"emente. En ocasiones -ay que calentar la mecla para 'a"orecer la disoluci*n completa del soluto.

    . La mecla+ per'ectamente disuelta+ la '(a&")a"amo"con ayuda de un emudo a un matra a'oradode capacidad i(ual al "olumen total de la disoluci*n a preparar.

    . Aa$imo" $i"o)%&'%+ en!ua(ando el emudo+ la "arilla y el "aso de precipitado.J. E&(a"amo"el matra con ayuda de una pipeta.K. Tapamos el matra y meclamos por in"ersi*n.. Trasladamos la soluci*n a su recipiente de'initi"o+ lo etiquetamos y lo (uardamos si no se "a a usarinmediatamente.

    A "eces+ las instrucciones de al(/n producto dan "olumen total de disol"ente y no de disoluci*n+ en estoscasos+ se mecla todo el soluto con todo el disol"ente )pre"iamente medidos, en un "aso de precipitado+ sedisuel"e y se traslada al recipiente de'initi"o.

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    /. DILUCIONES:

    na operaci*n 'recuente en el laoratorio+ es la preparaci*n de soluciones de a!a concentraci*n )diludas,+ apartir de soluciones concentradas a las que se aade ms disol"ente0 ste proceso+ se conoce como diluci*n yal diluyente como disol"ente )(> a(ua,.

    Estos procesos quedan !usti'icados porque es ms 'cil medir "ol/menes pequeos de lquidos que pesarectamente pequeas cantidades de s*lidos.

    /.1. Mo$o $% %7*(%"a( a" $iucio&%":

    8ara epresar las diluciones tenemos muc-as 'ormas+ pero las ms utiliadas en los laoratorios son#

    Como una 'racci*n o ,ac'o( $% $iuci6&+ donde el numerador corresponde al n/mero de partes iniciales adiluir y el denominador representa las partes totales de la diluci*n 'inal.

    m S partes de muestra a diluir$ S partes de diluyenteT S partes totales )m R d,

    5eneralmente el resultado de esta 'racci*n se de!a indicado con la unidad en el numerador+ es decir como 1>a+para realiar esta trans'ormaci*n di"idiremos el numerador y el denominador por el numerador. Al diluirdisminuye siempre la concentraci*n del producto+ de tal 'orma que si saemos la concentraci*n inicial delmismo y la cantidad de diluyente aadida+ podemos calcular la concentraci*n 'inal ayudndonos de la re(la delas meclas "ista anteriormente.

    A 3 ml de suero se aaden H ml de a(ua destilada0 cul es la diluci*n resultanteD

    CS 3>3RH0 3>Y0 1>3CS 1>3

    Como ci'ras que representan las partes de muestra a diluir y las partes de diluyente+ estas dos ci'ras seseparan por dos puntos y nos indican las *(o*o(cio&%" (%a'i)a"de muestra y de diluyente#

    m # dEn el e!emplo anterior 1#2

    Como *o(c%&'a+%+ de las partes iniciales a diluir respecto a 1 partes totales de soluci*n 'inal. En el casoanterior 33+33N

    /.-. P(%*a(aci6& $% a" $iucio&%":

    Los pasos son#

    1.

    Clculo del "olumen de soluci*n inicial y disol"ente.2. Tcnica de diluci*n.3.

    Clculo de las concentraciones de las diluciones resultantes.

    C' S Ci 1>&1>&S 1>a 1> 1>c etc

    /./ Diucio&%" "%(ia$a" o ba&co $% $iucio&%":

    Cuando el 'actor de diluci*n uscado es muy (rande )para otener soluciones muy diludas, no se dee realiarla diluci*n directamente+ pues pueden cometerse (randes errores+ deido al pequeo "olumen que -ay quetomar de soluci*n inicial 'rente al de disol"ente a aadir. Lo que se -ace son una serie de diluciones sucesi"as0a estas diluciones en cadena+ se las denomina diluciones seriadas. El procedimiento es estndar para todasellas y -acerlo de manera ordenada y sistemtica+ 'acilita muc-o el traa!o0 el procedimiento sera#

    1.

    acer los clculos pertinentes en papel0 la cantidad de lquido a tras"asar depende del 'actor de diluci*n ydel "olumen que -ayan de tener los tuos+ que puede "enir limitado a un determinado "olumen )lo mascorriente, o ser a elecci*n del tcnico.

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    Las '*rmulas son#

    Volumen final no limitado#

    C )a>, S m>T

    CS concentraci*n pedida+ mS muestra+ $S diluyente+ TS total )mRd,

    E!emplo# @ealia un anco de diluciones a ra*n 1>3 con ml en cada tuo.

    1>3 S m>0 mS>30 mS 1+HHH1+HH es el "olumen a tras"asar de un tuo a otro

    Volumen final limitado#

    C )a>,S>RM'7S "olumen a tras"asar

    E!emplo# 8reparar un anco de diluciones a ra*n (eomtrica 1>3 limitando el M' de cada tuo a ml.

    1>3S >R0 3% S0 2S 0 S 2+ ml

    Como "emos+ siendo la diluci*n 1>3+ no es lo mismo que limiten o no el "olumen 'inal. Lo usual es limitar el"olumen de los tuos pues se limita el n/mero de manipulaciones.

    2.

    8reparar la mesa de traa!o con el material necesario se(/n -emos diseado en papel. 7e pone el papel de'iltro+ las (radillas con los tuos ordenados en 'ilas+ a(ua destilada en "aso de precipitado+ pipetas omicropipetas y puntas ordenadas+ reacti"os y material para la disoluci*n madre+ para'ilm si procede+ etc..3. Ec-ar primero el disol"ente en cada uno de los tuos de la diluci*n seriada.4. acer el tras"ase del mas concentrado al menos concentrado+ -omo(eneiando con cuidado y desec-andodel /ltimo la misma cantidad tras"asada y as todos los tuos de la serie+ tienen los mismos ml..

    7i -ay que -acer medidas en espectro'ot*metro+ el orden en que se leen es del menos al ms concentrado.

    En ellas -ay que distin(uir el 'actor de diluci*n de la primera diluci*n o disoluci*n madre y el 'actor de diluci*nde las restantes diluciones+ que pueden o no coincidir.

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    PRCTICAS.

    P1. CONTROL DE CALIDAD DE UN PIPETEO co& % E"*%c'(o,o'6m%'(o

    NOMBRE:

    1. 8reparar 1 ml de una disoluci*n madre de cloruro s*dico +1V ? )pm# `+, ala que aadimos 2 l de aul de metileno de concentraci*n mayor a 1#1.

    Eplica el procedimiento#

    2. Colocar la &? en un "aso de precipitado. Todas las personas de la misma mesausarn la misma pipeta para las dos mediciones+ estaleced el turno yor(aniaros.

    3. En una cueta de espectro'ot*metro "erter 1 ml de a(ua destilada.

    4.

    En la cueta anterior "erter 1 ml de &? y meclar con el a(ua destilada.. ?edir en el Espectro'ot*metro a una S H nm )a la que mas asore la &?, y

    anotar la medida de Asorancia que resulte.H. @epetir la operaci*n 1 "eces+ tirando el contenido de la cueta y repitiendo de

    nue"o todo el proceso.

    A1 A2 A3 A4 A AH AV A` AY A1

    allar el CM y sacar conclusiones al comparar tus resultados con los del resto dela mesa>clase#

    Gec-a y 'irma de la entre(a#

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    P-. CONTROL DE CALIDAD DE UN PIPETEO u"a&$o a baa&2a $%*(%ci"i6&.

    NOMBRE:

    1.

    8reparar 1 ml de una disoluci*n madre de (lucosa al 2 N. Eplica el procedimiento#

    2. Colocar la &? en un "aso de precipitado. Todas las personas de la mismamesa usarn la misma pipeta para las dos mediciones+ estaleced el turno yor(aniaros.

    3. En una cueta de espectro'ot*metro "erter 1 ml de a(ua destilada con unapipeta automtica.

    4.

    7uccionar con una pipeta automtica 1ml de &? y meclar con el ml anterior.. 8esar en la alana de precisi*n y anotar los resultados.H. @epetir la operaci*n 1>1 "eces+ tirando el contenido de la cueta y

    repitiendo de nue"o todo el proceso.

    81 82 83 84 8 8H 8V 8` 8Y 81

    allar el CM y sacar conclusiones al comparar tus resultados con los del resto dela mesa>clase#

    .

    Gec-a y 'irma de la entre(a#

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    P/. CONTROL DE CALIDAD DE UN ESPECTRO3OTMETRO.NOMBRE:

    1. 8repara 1 ml de una disoluci*n madre de Ia Cl +1V ? a la que aadimos 3l de metileno.

    Eplica el procedimiento#

    2. Llenar con 2 ml de la &? una cueta de espectro'ot*metro para -acer unpatr*n.

    3. Llenar con a(ua destilada otra cueta+ para -acer el lanco.4. 7eleccionamos de H nm.. ;ntroducimos el lanco y -acemos el .H. ;ntroducimos el patr*n y anotamos la medida de Asorancia que resulte.V. @epetimos 1 "eces+ anotando las medidas de Asorancia.

    A1 A2 A3 A4 A AH AV A` AY A1

    allar el CM y sacar conclusiones al comparar tus resultados con los del resto dela mesa>clase#

    .

    Gec-a y 'irma de la entre(a#

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    P9. PREPARACIN DE UN POOL DE SUEROS.

    NOMBRE:

    a un resumen de la preparaci*n de la prctica y de su desarrollo y comenta si-uo incidencias.

    Gec-a y 'irma de la entre(a#

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    P. RESUEL;E LOS SI=UIENTES SUPUESTOS PRCTICOS:

    NOMBRE:

    1. El mtodo que se "i(ila es un anlisis de (lucosa oidasa que se pasa dos otres "eces al da0 se analia durante 3 das para estalecer el ran(o lanco)media y &E,.

    ?ediaS 1 m(>dl&ES 2 m(>dl;nter"alo de con'iana del Y+N )P 2&E, 'ue de YH a 14 m(>dl.Los datos de los 1 primeros das 'ueron los si(uientes#

    3%c#a N $% %&"aHo ;ao(

    V%14 1 11 m(>dl

    2 1 m(>dl3 Y` m(>dl

    V%1 4 YY m(>dl 12 m(>dl

    V%1H H 13 m(>dlV Y` m(>dl

    V%1V ` 1 m(>dlY 11 m(>dl1 1 m(>dl

    Construye la (r'ica de Le"ey%Wennin(s. tilia papel milimetrado.a una interpretaci*n raonada de los datos.

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    2. 7e reco(en en la si(uiente tala los resultados del control de calidad de unlaoratorio para la 5lucosa con 2 sueros control+ uno normal )en el lmitesuperior del "alor de re'erencia, y otro patol*(ico.

    Da No(ma Pa'o65ico2 12 2413 123 24HH 11Y 242V 123 24H` 12 243Y 121 2411 122 24H13 123 2314 11V 23V

    1 11Y 2441H 12H 231V 124 22 12 2321 123 24`22 123 223 12 2424 12 24H2 11V 23V2H 11V 23V

    2Y 12 243 11Y 24Y

    a los clculos estadsticos y la (r'ica de Uouden. a una interpretaci*nraonada de los datos. tilia papel milimetrado.

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    3. A continuaci*n se presentan los resultados de 1 "alores de un ensayoconsecuti"o para el control de potasio en unidades mmol>l.

    ?edia# H+H mmol>l &E# +1 mmol>l

    O($%&co&"%cu'i)o $%

    co&'(o%";ao( S%a $% aa(ma

    R%5a %"'5a($qu% "% i&cum*%

    1 H+42 H+3 H+V4 H+4 H+3H H+HV H+` H+`Y H+Y1 H+Y

    @aona tus conclusiones#

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    4. tiliamos dos ni"eles de controles para el potasio0 los "alores de amosni"eles+ se dan se(/n se analiaron.

    ;ao(%" Ba&co co&'(o a'om%$ia:8 mmo

    DE: ?81 mmo

    ;ao(%" Ba&co co&'(o ba+om%$ia:/8 mmo

    DE: ?81 mmo

    O($%&co&"%cu'i)o

    co&'(o%";ao( S%a

    R%5a %"'5a($qu% "% i&cum*%

    1 a!o 3+H2 alto H+V3 a!o 3+34 alto H+4 a!o 3+VH alto H+3V a!o 3+` alto H+HY a!o 3+41 alto H+11 a!o 3+V12 alto H+`13 a!o 3+V14 alto H+Y

    @aona tus conclusiones#

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    . Aplicando las re(las de [est(ard interpreta las si(uientes (r'icas#

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    Conclusiones#

    Gec-a y 'irma de la entre(a#

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    P. RESUEL;E LOS SI=UIENTES SUPUESTOS PRCTICOS DEDISOLUCIONES DILUCIONES.

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    PJ. CON EL PROTOCOLO ADUNTO8 EPLICA EL CONTROL DE CALIDAD