tema 3 inmunologia-javier carbone
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IMPACTO DE LA INMUNOLOGIA EN EL LABORATORIO DE DIAGNOSTICO CLINICO
TEMA 3. LA INMUNOLOGÍA EN EL LABORATORIO DE DIAGNÓSTICO CLINICO EN EL SIGLO 21.
Dr. Javier Carbone
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Metodología del Laboratorio Diagnóstico de Inmunología
Las pruebas analíticas de base inmunológica que se realizan en los laboratorios, reflejan los avances producidos en la Inmunología en los últimos años.
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Metodología del Laboratorio Diagnóstico de Inmunología
Estos avances se deben a:La investigación básica.A una mejor comprensión de las bases inmunológicas y moleculares de las enfermedades.A las observaciones empíricas y de investigación clínica efectuadas en los pacientes.
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Definición de la Inmunología: OMS
La Inmunología es una disciplina que trata del estudio, diagnóstico y tratamiento de pacientes con enfermedades causadas por alteraciones de los mecanismos inmunológicos y de las situaciones en las que las manipulaciones inmunológicas forman una parte importante del tratamiento y/o de la prevención.
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Metodología del Laboratorio Diagnóstico de Inmunología
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El Enfoque traslacional: Debe haber una proyección del dato de laboratorio hacia su uso en el paciente.
La investigación básica debe estar orientada a su potencial aplicabilidad en el diagnóstico y tratamiento de enfermos
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La investigación clínica debe servir para orientar las pruebas que son necesarias y útiles.
El Enfoque traslacional: Debe haber una proyección de la clínica hacia el laboratorio.
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INMUNOQUIMICA-I
Inmunoglobulinas IgG, IgA, IgM, IgD, IgE. Subclases de IgG e IgA.IgA secretora.Anticuerpos específicos (anti-antígenos proteicos y polisacáridos).Inmunoglobulinas en otros fluidos biológicos.Complemento: componentes y funcional.Proteina ligadora de manosa.Productos de activación del complemento.
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INMUNOQUIMICA-II
Proteínas inflamatorias (Proteina C Reactiva).Inmunocomplejos circulantes.Inmunoglobulinas y bandas oligoclonales de IgG en líquido céfalo raquídeo.Paraproteínas. Crioglobulinas. Citocinas, quimiocinas y receptores solubles en el plasma y en fluidos del organismo.Adenosindesaminasa y purín-nucleótido fosforilasa.
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INMUNOALERGIA
Métodos in vitroCuantificación de IgE total IgE específica.IgG específica
Métodos in vivoPruebas cutáneasHipersensibilidad inmediata y tardíaProvocaciones
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INMUNIDAD CELULAR-I
Subtipos y estado funcional de linfocitos.Fenotipo y función de fagocitos (neutrófilos, monocitos/macrófagos)Fenotipo de células stem. Clonalidad de las células linfoides.
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INMUNIDAD CELULAR-II
Respuesta proliferativa in vitro (Proliferación, CFSE).Producción de inmunoglobulinas, citocinas.Pruebas cutáneas de hipersensibilidad retardada.Citotoxicidad. Apoptosis linfocitaria.Quimiotaxis.Fagocitosis.
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AUTOINMUNIDAD
Ac. No órganoespecíficos
Ac. Organospecíficos
Células T autoreactivas
Células B autoreactivas
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Inmunogenética
Diagnóstico prenatal y herencia de enfermedades inmunitarias de origen genético.Diagnóstico molecular de inmunodeficiencias:Expresión y actividad de proteínas alteradas.Inactivación del cromosoma X.Polimorfismo de conformación de cadenas sencillas.Polimorfismos de la longitud de fragmentos de restricción.
Diagnóstico de síndromes linfoproliferativosReordenamiento de las cadenas pesadas de inmunoglobulinas y del receptor de célula T.
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Inmunogenética e inmunología del trasplante Tipaje HLA (técnicas serológicas y moleculares).
Ac. citotóxicos anti-antígenos HLA:Prueba cruzada. PRA, citometría de flujo, Luminex, ELISA.Respuesta celular específica frente a antígeno de donante (ELISPOT).
Sistema KIR
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Genómica y proteómica
• Diagnóstico de enfermedades.• Predisposición a enfermedad.• Genes y proteinas implicados en
mecanismos de enfermedad.• Genes y proteinas implicados en
mecanismos de la respuesta inmune.
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Técnicas de base inmunológica en Hematología
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Hematologia
• Aglutinación: Test de coombs, grupos sanguíneos.
• ELISA: serología VHB, VHC: Bancos de sangre.
• Citometría de flujo: subpoblaciones linfocitarias: TMO, leucemia, linfoma.
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Técnicas de base inmunológica en Anatomía Patológica
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Anatomía PatológicaInmunohistoquímica I • Diagnóstico, clasificación y estadiaje de
tumores sólidos y sindromes linfoproliferativos.
• Antígenos asociados a tumores (ACE).• Predicción del comportamiento del tumor,
potencial invasor, potencial metastásico (catepsina D).
• Expresión de oncogenes (N-myc, c-myc) o genes supresores.
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Anatomía Patológica
Inmunohistoquímica II • Analisis de moléculas de adhesión,
proliferación tumoral (Ki-67, PCNA)• Angiogenesis tumoral.• Predicción de respuesta a tratamiento
(receptor estrógeno, receptor de progesterona).
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Anatomía Patológica
• Inmunofluorescencia directa e indirecta: diagnóstico de enfermedad cutánea o renal (vasculitis).
• Microscopía inmunoelectrónica• Depósitos de C4d en injertos.
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Técnicas de base inmunológica en Bioquímica Clínica
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Bioquímica clínica• Radioinmunoensayo: hormonas (PTH),
receptores de hormonas, peptidos (péptido C), digoxina, beta-2-microglobulina.
• Inmunoensayo de polarización fluorescente (FPIA): ciclosporina, bilirrubina.
• ELISA con detección de fluorescencia: hormonas.
• ELISA con detección de quimioluminiscencia: hormonas.
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Técnicas de base inmunológica en Microbiología
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Microbiología
• ELISA: Serología IgG o gM: anticuerpos anti-CMV, toxoplasma, rubeola, herpes, etc.
• Inmunoensayo en fase sólida• Inmunoblot: Western-blot: confirmación
VIH; RIBA: VHC.• Fluorescencia: IFD: treponema.
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Microbiología
• DTH: tuberculosis, lepra.• Ac. Neutralizantes anti antígenos
virales.• Aglutinación (anti-H, anti-O salmonella)• Fijación del complemento.• Citometría de flujo: detección de células
infectadas, detección directa de virus.