TRANSCRIPCION EN EUCARIOTES

PRESENTADO POR:

WERNER MENDOZA B.

En Eucariotes hay 3 ARN polimerasas nucleares.

Los promotores de estos genes son diferentes:

- Los promotores de ARN pol I y II se localizan corriente arriba.

- Los promotores de ARN pol III se localizan corriente arriba y abajo.

- Las ARN pol dependen de factores de transcripción (proteínas) que favorecen la,localización o anclaje de la ARN pol al sitio de iniciación de la transcripción.

- Los factores de transcripción (FT) interactúan específicamente con secuencias de ADN (en la zona

promotora) con otros factores proteicos y con la ARN pol.

- Los FT contienen diversos motivos (estructuras super secundarias) que interactúan con secuencias de

ADN específicas.- Los α-hélices de los FT están orientados de modo tal que se ubican en el Surco > de ADN, en donde

sus átomos establecen interacciones van der Waals y puentes de H con átomos del ADN.

FACTORES DE TRANSCRIPCION:

• Proteínas de homeodominio.

• Proteínas con dedos de Zinc.

• Proteínas con hélice alada (en lengüeta de flecha).

• Proteínas con cremallera de Leucina /básica (b Zip, del ingles: basic Zipper).

• Proteínas hélice bucle hélice.

Las ARN pol I y III reconocen un conjunto restringido de promotores, en conjunción con sus FT correspondientes, denominados

FT-I y FT-III, respectivamente.

La ARN pol II interacciona con un gran número de promotores diferentes.

MECANISMOS DE LA TRANSCRIPCION

INICIACION• La ARN pol II no contiene el factor σ de los

procariotes, que reconoce al promotor y abre la doble hélice. Estas funciones son cumplidas por un grupo de proteínas llamadas FT generales.

• La ARN pol II esta asociada con 6 FT generales, designados como TFIIA, TFIIB,TFIID, TFIIE, TFIIF y TFIIH.

INTENSIFICADORES O AMPLIFICADORES

• Los promotores reconocidos por la ARN pol II poseen en su mayoria la secuencia o caja TATA (o de Hogness), localizada a unos 25 pb corriente arriba del punto de iniciación (es reconocida por la TFIID).

• El TFIID es una proteína con una masa de alrededor 750KDa. Consiste en una proteína ligadora de la caja TATA (TBP) y factores asociados a la TBP (TAFs).

• La TBP es un monómero que se pliega para formar una estructura en silla de montar.

THREE-dimensional

structures of TBP

•Una vez que la TBP se ha fijado a la caja TATA, entonces puede unirse el TFIIB.

•Tras la fijación del TFIIB se une un complejo preformado de TFIIH (tetramero α2 β2).

•El TFIIH abre el duplex de ADN. Despues del desenrrollamiento, la ARN pol II y menos de 5 factores de trasncripción van a formar un complejo de preiniciación (PIC).

ELONGACION:

•En presencia de ATP, la actividad Helicasa del TFIIH desenrrolla el duplex de ADN y permite que la pol II forme un complejo abierto.

•Si se añade los trifosfatos de ribonucleosidos, la pol II comienza a transcribir el ADN ARN.

• La subunidad mas grande de la pol II contiene un segmento de 7 AAs que se repiten muchas veces casi con precisión absoluta.

•Esta repetición heptapeptidica, se conoce como el dominio carboxiterminal (CTD).

•In vitro, para iniciar las transcripción se utiliza una pol II con un CTD no fosforilado, pero que se fosforila mientras la polimerasa se aleja del promotor.

•In vivo, el análisis de cromosomas politenicos de Drosophila indica que el CTD también es fosforilado durante la transcripción.

•La subunidades de la proteína TFIIH también son necesaria para otros dos procesos:

*La activación de las proteínas cinasas requeridas para la entrada en la fase S y la reparación del daño del ADN, mediante reparación por escisión.

TERMINACION

•Los genes eucariotes poseen una señal poli-A localizada corriente abajo del ultimo exon.

•Esta señal es usada para añadir una serie de residuos de Adenilato durante el procesamieto del ARN.

• La transcripción a menudo termina 0.5-2Kb corriente debajo de la señal poli-A, pero el mecanismo no es claro.

 

PROCESOS POSTRANSCRIPCIONALES