Treponema expo lucy
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MESA 1: VIERNESMIC
RO
IOLO
GÍA
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CO
ALUMNO: RAYMUNDO GÓMEZ JOSÉ LUIS
TREPONEMA PALLIDUM
Lesiones Sifilíticas
Chancro sifilítico (úlcera)
Rash en sífilis secundaria
Gomas en paladar duro
TREPONEMA PALLIDUM
ETAPAS DE LA SÍFILIS
SÍFILIS: Diagnostico laboratorio Identificación del T. pallidum
• Microscopio de campo oscuro• Espiroqueta : 0.1 a 0.2 X 6 – 20 um. • Movimiento rotacional• Raspados del chancro duro• No útil en lesiones de boca
• PCR• Biopsia
TREPONEMA PALLIDUM• INMUNOLOGIA – V.D.R.L. Y R.P.R
SÍFILIS: Diagnostico Laboratorio SEROLOGIA• Pruebas no Treponémicas• VDRL• RPR • Pruebas Treponémicas• FTA – ABS= (Absorción de anticuerpos
fluorescentes para treponema) • TPHA= Prueba de Hemoaglutinación del
Treponema Pallidum (agente causante de la sífilis). • MHA-TP = Micro hemaglutinación
Treponema Pallidum• ELISA IgM : basado en la captura del Ac
IgM. Útil en la Sífilis neonatal• ELISA IgG • Western Blot: gran valor en S, congénita.
Alta sensibilidad y especificidad• ELISA, IFI• Pruebas Rápidas
SEROLOGIA DE LA SÍFILIS
MÉTODO DIAGNÓSTICO DE SÍFILIS MEDIANTE SEROLOGÍA
CUADRO SINÓPTICO DE LAS PRUEBAS A REALIZARSE EN LOS DIFERENTES ESTADIOS
Lesión
Campo oscuro o inmunofluorescencia
Tratamiento
Repetir a la semana,1 mes y 3 meses
Falso positivoFTA-ABS
VDRL o RPR
TratamientoPositivo
Dudosoo negativo
No reactivo
Reactivo
Reactivo
No reactivo
Figura 1. Serología en el diagnóstico y el tratamiento de la sífilis temprana (primaria y secundaria) (6)
Lesión
Campo oscuro o inmunofluorescencia
Tratamiento
Repetir a la semana,1 mes y 3 meses
Falso positivoFTA-ABS
VDRL o RPR
TratamientoPositivo
Dudosoo negativo
No reactivo
Reactivo
Reactivo
No reactivo
Lesión
Campo oscuro o inmunofluorescencia
Tratamiento
Repetir a la semana,1 mes y 3 meses
Falso positivoFTA-ABS
VDRL o RPR
TratamientoPositivo
Dudosoo negativo
No reactivo
Reactivo
Reactivo
No reactivo
Figura 1. Serología en el diagnóstico y el tratamiento de la sífilis temprana (primaria y secundaria) (6)
Figura 2. Serología en el diagnóstico y el tratamiento de la sífilis latente (6)
Historia sospechosade sífilis
RepetirVDRL o RPR
FTA-ABS
Punción lumbar para VDRL de Líquido cefalorraquídeo
Tratamiento para sífilis latente o tardía
FTA-ABS
Falso positivo
Falso positivo
Tratamiento sífilis temprana
Repetir VDRL o RPR
Serología reactivade menos de 1 año
Serología reactivade duración desconocidao mayor de 1 año
No reactivo
Reactivo
Reactivo
No reactivo
No reactivo
Reactivo
Reactivo
Reactivo
Figura 2. Serología en el diagnóstico y el tratamiento de la sífilis latente (6)
Historia sospechosade sífilis
RepetirVDRL o RPR
FTA-ABS
Punción lumbar para VDRL de Líquido cefalorraquídeo
Tratamiento para sífilis latente o tardía
FTA-ABS
Falso positivo
Falso positivo
Tratamiento sífilis temprana
Repetir VDRL o RPR
Serología reactivade menos de 1 año
Serología reactivade duración desconocidao mayor de 1 año
No reactivo
Reactivo
Reactivo
No reactivo
No reactivo
Reactivo
Reactivo
Reactivo
Historia sospechosade sífilis
RepetirVDRL o RPR
FTA-ABS
Punción lumbar para VDRL de Líquido cefalorraquídeo
Tratamiento para sífilis latente o tardía
FTA-ABS
Falso positivo
Falso positivo
Tratamiento sífilis temprana
Repetir VDRL o RPR
Serología reactivade menos de 1 año
Serología reactivade duración desconocidao mayor de 1 año
No reactivo
Reactivo
Reactivo
No reactivo
No reactivo
Reactivo
Reactivo
Reactivo
Figura 3. Serología en el diagnóstico y el tratamiento de la sífilis tardía (6)
Tratamiento para sífilis tardía
Reactivo
Punción lumbarpara VDRLde líquidocefalorraquídeo
Repetir
Falso positivo
Evolucióndesconocida
No sífilis
FTA-ABS
VDRL o RPR
Sospecha clínica FTA-ABS Falsopositivo
Reactivo No Reactivo
No Reactivo
Si
No Reactivo
Reactivo
No reactivoReactivo
Reactivo
Figura 3. Serología en el diagnóstico y el tratamiento de la sífilis tardía (6)
Tratamiento para sífilis tardía
Reactivo
Punción lumbarpara VDRLde líquidocefalorraquídeo
Repetir
Falso positivo
Evolucióndesconocida
No sífilis
FTA-ABS
VDRL o RPR
Sospecha clínica FTA-ABS Falsopositivo
Reactivo No Reactivo
No Reactivo
Si
No Reactivo
Reactivo
No reactivoReactivo
Reactivo
Tratamiento para sífilis tardía
Reactivo
Punción lumbarpara VDRLde líquidocefalorraquídeo
Repetir
Falso positivo
Evolucióndesconocida
No sífilis
FTA-ABS
VDRL o RPR
Sospecha clínica FTA-ABS Falsopositivo
Reactivo No Reactivo
No Reactivo
Si
No Reactivo
Reactivo
No reactivoReactivo
Reactivo
SEROLOGICAS (V.D.R.L.)
1. SEROLOGICAS (V.D.R.L.).• COMPONENTES:
– Lecitina– Cardiolipina– Colesterol– Buffer
REACTIVO DE V. D. R. L.
Antígeno no Treponémico
1. PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS.El antígeno de V.D.R.L. no es necesario preparar todo el frasco de 500 pruebas, por que una ves preparado tiene una duración máxima de 48 horas.Ejemplo:1) 1 ml. solución buffer salina, 20 gotas
antígeno (P/ 50 pruebas) 2) 0.5 ml. solución buffer salina 10 gotas
antígeno (P/25 pruebas) 3) 0.25 ml. solución buffer salina 05 gotas
antígeno (P/12 pruebas) Muestra:
–Suero o plasma–ANTIGENO– 20 l para cada prueba
PRUEBA V.D.R.L. CUALITATIVO
PROCEDIMIENTO:
1.Extraer sangre venosa 2 ml. aproximadamente con anticoagulante o sin anticoagulante.
2.Centrifugar cuidadosamente a 2,500 r.p.m. por 5 minutos.
3.Inactivar el suero a 56 por 30 minutos en baño María.(VDRL)
4. Tomar el suero inactivado 50 l. en una superficie plano con anillo y una gota de antígeno preparado con una aguja calibre Nº l8.
5. Homogeneizar y colocar la lámina en un rotador eléctrico por 4 minutos a l80 Rpm.
6. Lectura al microscopio con lente de 40 x.
180 r p m
METODOLOGIA - REPORTE DE RESULTADOS
• REPORTE DE RESULTADOS• Reactivo: Grumos medianos a grandes• Reactivo Débil: Grumos pequeños con partículas de antígeno libre.• No Reactivo: Sin grumos (antígeno libre)
( + ) ( - )
PRUEBA DE V.D.R.L. CUANTITATIVO
1.Numerar 5 tubos y colocar en tubos del 1º al 5º 0.5 ml. de suero fisiológico.
2.En el 1º tubo colocar 0.5 ml de suero problema, homogeneizar y tomar 0.5 ml para el 2º tubo, homogeneizar y tomar 0.5 para el tercer tubo y así sucesivamente hasta el 5º tubo.
3.De esta manera tenemos que las diluciones del suero están en orden creciente, 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32 diluciones.
4.Tomando el contenido de cada tubo, realizar el mismo procedimiento que para una prueba cualitativa.
5.Adicionar 01 gota de antígeno a cada uno de los círculos del 1º al 5º , homogeneizar y rotar por 8 minutos.
6.La lectura sigue los mismos parámetros que para la prueba cualitativa.
7.Reportar el título en términos de la más alta dilución en que se produzca un resultado reactivo (Reactivo débil) .
SUERO FISIOLOG.
0.5
SUERO HSUERO F
1 2 3 4 5
0.5 ml
HOMOGENIZAR Y RETIRAR PARA EL TUBO 1, 0.5 ml. Y PARA T. 2 ,3 Y ASI SUCESIVAMENTE
SEROLOGICAS ( R.P.R. )
COMPONENTES
• Cardiolipina– Lecitina– Colesterol– EDTA– Acetil colina– Carbón
R. P. R. (REAGINA PLASMATICA RAPIDA).
( Antígeno no Treponémico)
PRUEBA R.P.R. CUALITATIVO
Preparación de la Prueba:• La suspensión del antígeno se presenta listo para su uso, solo requiere que antes de su
procesamiento debe estar a temperatura ambiente y homogeneiza bien antes de su uso.
Procedimiento:• Pipetear una gota de suero o plasma en el centro del dispositivo que trae el equipo.• Dejar caer una gota de reactivo (antígeno) y homogeneizar con la espátula descartable.• Llevar al rotador eléctrica, durante 8 minutos a 100 r.p.m.
Resultados:• Reacción Negativa.- Está dada por la acumulación de carbono en el centro del círculo.• Positivo Débil.- Se detecta por la acumulación de finos agregados negros circundados
por un área difusa de finos agregados negros.• Reacción Positiva.- Se observa la producción de agregados negros observados
normalmente por todo el círculo de la prueba.
PRUEBA DE R.P.R. SEMICUANTITATIVO
1.Colocar 50 l. de suero fisiológico al 0.9 % del 1º al 5º círculo de la tarjeta
2.Colocar 50 l. del suero problema en el primer círculo, mezcle bien y luego transfiera 50 l. al segundo círculo mezcle bien y transfiera 50 l. al tercero círculo, mezcle bien y transfiera 50 l. al 4º y 5º círculo, mezcle y descarte 50 l. del último círculo.
3.Usando un aplicador, extienda la mezcla en cada círculo comenzando en el 5º y terminando en el 1º círculo.
4.Adicionar 01 gota de antígeno a cada uno de los círculos del 1º al 5º , homogeneizar y rotar por 8 minutos.
5.La lectura sigue los mismos parámetros que para la prueba cualitativa.
6.Reportar el título en términos de la más alta dilución en que se produzca un resultado reactivo (Reactivo débil).
PRUEBA DE R.P.R. SEMICUANTITATIVO
1:2 1:4 1:8 1:16 1:32
suero 50 ul 25 ul 12.5 ul 6.25 ul 3.12 ul
1 2 3 4 5
SUERO FISIOLOG.
Suero fisiolog.50 ulSuero humano 50 ul.
50 ul50 ul100 ul
CUADRO DE TITULACION PARA LA PRUEBA DE R.P.R SEMICUANTITATIVA
DELUCIONES DEL SUERORESULTADO
1:2 1:4 1:8 1:16 1:32
RD N N N N REACTIVO 2 DILS.
R R N N N REACTIVO 4 DILS.
R R R N N REACTIVO 8 DILS.
R R R R N REACTIVO 16 DILS.
R R R R R REACTIVO 32 DILS.
50 ul 25 ul 12.5 ul
6.25 ul 3.12 ul
Leyenda: N = No Reactivo RD: Reactivo Débil R: Reactivo
INTERPRETACION DE RESULTADOS PRUEBAS NO TREPONEMAICAS - I y II
• Un resultado no reactivo sin evidencia clínica:– Puede indicar que no hay infección por treponemas o que el tratamiento fue
efectivo.• Un resultado reactivo puede indicar
– Infección presente o pasada con Treponemas patógenos.– Puede ser una reacción falso positiva, lo cual se detecta mediante una prueba
Treponémica..• Un resultado no reactivo con evidencia clínica:
– Puede observarse en sífilis primaria o en sífilis secundaria por exceso de anticuerpos
• El incremento en cuatro veces el título inicial indica Infección o re-infección y la disminución de cuatro veces el título indica un tratamiento efectivo.
1/21/2 1/41/4 1/81/8 1/161/16 1/321/32
Causas de resultados serológicos falso positivos
• Neumonía neumocócica• Endocarditis bacteriana sub
aguda• Chancroide• Adicción a drogas• Enfermedad del tejido conectivo• Enfermedad cardiaca
reumatoide• Enfermedad por Rickettsia• Malaria• Tripanosomiasis
• Múltiples transfusiones de sangre
• Embarazo• Tripanosomiasis• Adulto mayor• Vacunación• Enfermedad hepática crónica• Adicción a drogas• Enfermedad del tejido
conectivo• Enfermedad cardiaca
reumatoide
PRUEBAS CONFIRMATORIAS PARA SIFILIS
TPHA = Prueba de Hemoaglutinación del Treponema Pallidum (agente causante de la sífilis). El TPHA = es un equipo de diagnóstico para la detección de anticuerpos ESPECIFICOS al treponema Pallidum en suero humano, utilizando las técnicas de Hemoaglutinación. Hemaglutinación pasiva en la cual el suero humano diluido es enfrentado a glóbulos rojos de carnero o pollo sensibilizados con Treponema pallidum. Cuando en la muestra de suero existe anticuerpos contra Treponema se forma una malla de aglutinación.
GRADOS DE AGLUTINACION
• Ausencia de anticuerpos formación de botón
• Presencia de anticuerpos formación
PRUEBAS SEROLÓGICAS Y INTERPRETACION
GRACI
AS!!!...
«Lo que no te mata te hace más fuerte»
MIC
RO
IOLO
GÍA
MÉD
ICA