UNIVERSIDAD TÉCNICA ESTATAL DE...

UNIVERSIDAD TÉCNICA ESTATAL DE QUEVEDO

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

CARRERA DE INGENIERÍA AGRONÓMICA

Título del Proyecto de Investigación:

“Evaluación de la actividad insecticida de aceites esenciales de menta (Mentha pulegium) Y

eucalipto (Eucalyptus melliodora) para el control del gorgojo de maíz (Sitophilus zeamais)”

Autor:

Morales Velasco María José

Director de Tesis:

Dra. Mayra Carolina Vélez Ruiz

Quevedo – Los Ríos – Ecuador

2019

Proyecto de Investigación previo a

la obtención de título de Ingeniero

Agrónomo.

ii

DECLARACIÓN DE AUTORÍA Y CESIÓN DE DERECHOS

Yo, Morales Velasco María José, declaro que el trabajo aquí descrito es de mi autoría; que no

ha sido previamente presentado para ningún grado o calificación profesional; y, que he

consultado las referencias bibliográficas que se incluyen en el presente documento.

La Universidad Técnica Estatal de Quevedo, puede hacer uso de los derechos correspondientes

a este trabajo, según lo establecido por la Ley de Propiedad Intelectual, por su Reglamento y

por la normatividad institucional vigente.

Morales Velasco María José

iii

CERTIFICACIÓN DE CULMINACIÓN DE PROYECTO DE

INVESTIGACIÓN

La suscrita, Dra. Mayra Carolina Vélez Ruiz Docente de la Universidad Técnica Estatal de

Quevedo, certifica que la estudiante Morales Velasco María José, realizó el Proyecto de

investigación previo a la obtención del título de Ingeniero Agrónomo titulado “Evaluación de

la actividad insecticida de aceites esenciales de menta (Mentha pulegium) y eucalipto

(Eucalyptus melliodora) para el control del gorgojo de maíz (Sitophilus zeamais)”, bajo mi

dirección, habiendo cumplido con todas las disposiciones reglamentarias establecidas.

Atentamente,


DIRECTORA DEL PROYECTO DE INVESTIGACIÓN

iv

CERTIFICACIÓN DEL REPORTE DE LA HERRAMIENTA DE

PREVENCIÓN DE COINCIDENCIA Y/O PLAGIO ACADÉMICO

La suscrita Dra. Mayra Carolina Vélez Ruiz , Docente de la Universidad Técnica Estatal de

Quevedo, en calidad de Directora de Proyecto de Investigación titulado “Evaluación de la

actividad insecticida de aceites esenciales de menta (Mentha pulegium) y eucalipto (Eucalyptus

melliodora) para el control del gorgojo de maíz (Sitophilus zeamais)”, perteneciente a la

estudiante Morales Velasco María José, CERTIFICA: el cumplimiento de los parámetros

establecidos por el SENECYT, y se evidencia al reporte de la herramienta de prevención y

coincidencia y/o plagio académico (URKUND) con un porcentaje de coincidencia de 7%.

_______________________________


DIRECTORA DEL PROYECTO DE INVESTIGACIÓN

v

UNIVERSIDAD TECNICA ESTATAL DE QUEVEDO

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

CARRERA DE INGENIERÍA AGRONÓMICA

TÍTULO DEL PROYECTO DE INVESTIGACION

Título:

“Evaluación de la actividad insecticida de aceites esenciales de menta (Mentha pulegium) y

eucalipto (Eucalyptus melliodora) para el control del gorgojo de maíz (Sitophilus

zeamais)”.

Presentado a la Comisión Académica como requisito previo a la obtención del título de

Ingeniero Agrónomo.

Aprobada por:

Quevedo – Los Ríos – Ecuador

2019

____________________________

MIEMBRO DEL TRIBUNAL

Dr. Daniel Vera Áviles

____________________________

MIEMBRO DEL TRIBUNAL

Dra. Marisol Rivero Herrada

______________________________________

PRESIDENTE DEL TRIBUNAL

Dr. Fernando Abasolo Pacheco

vi

AGRADECIMIENTO

Agradezco a Jehová todopoderoso que con su inmensa bondad me guió y me dio fuerzas

para seguir adelante en mi camino, con tropiezos, pero aprendiendo valiosas lecciones para

aprender cada día a ser una mejor persona, digna de él y útil para esta sociedad.

A mis padres, José Morales y Nilda Velasco y a mi hermana Johanna Morales por el apoyo

que me brindaron y por cada sacrificio que cada uno tuvo que hacer para que yo pueda

culminar este objetivo en mi vida, ellos fueron el motor y combustible en mis días para no

rendirme.

Agradezco profundamente a mi tutora la Dra. Mayra Vélez por el apoyo y la paciencia que

incondicionalmente me brindó para la realización de mi trabajo de investigación, además de

gratitud siento una profunda admiración por ella, porque ha demostrado ser una excelente

docente y valiosa persona, con valores inquebrantables y llena de pasión por su trabajo.

Le agradezco de todo corazón al Ing. José Meza por ser una de las personas más importantes

en mi vida, y por el apoyo incondicional que me brindó en el transcurso de mi trabajo

investigativo y en mi día a día dándome la fuerza para no decaer y para seguir adelante con

mis metas profesionales y personales.

Le agradezco al Dr. Hayron Canchignia y al equipo de trabajo del Laboratorio de

Biotecnología por la ayuda que me brindaron para la realización de la presente investigación.

Mis más sinceros agradecimientos a mis amigos cercanos Ing. Helen Olvera, Ing. Branyph

Moreira, Ing. Diego Mackenzie que me brindaron su apoyo moral durante todos los años

que compartimos de amistad, a mis compañeros de aula por el tiempo compartido en este

camino que nos forjó como profesionales y a mis profesores por compartir sus conocimientos

y prepararnos para la vida.

vii

DEDICATORIA

Este trabajo se lo dedico a Jehová que supo guiarme, protegerme de toda maldad, por darme

las fuerzas para no rendirme en el camino que recorrí sola durante varios años, en una cuidad

lejana de mi hogar.

A mi madre, que es la luz y el motor de mi vida, además de mi madre es mi mejor amiga,

quien me brinda su apoyo incondicionalmente, que vivió desde lejos este camino conmigo,

y compartió junto a mí, mis alegrías, decepciones, lágrimas y logros que se presentaron en

mi vida; la persona que más admiro en el mundo y mi ejemplo a seguir, por el amor que

alberga en su corazón, por la fuerza con la que empieza cada uno de sus días y por demostrar

ser una madre inquebrantable.

A mi padre, que me apoyo durante todos los años de mi vida universitaria ya que con su

trabajo pudo sacarme adelante y ser incondicional para que yo culmine con mis estudios.

A mi novio, amigo y colega José Meza que me acompañó, me motivó, me cuidó durante

todo el tiempo que estuvo junto a mí, demostrándome su amor, su cariño y su respeto, quiero

expresarle mi profunda gratitud por tener el privilegio de conocer un hombre tan valioso, y

por jamás soltar mi mano, sin importar las adversidades que se nos presentaron en el camino.

A cada una de las personas que formaron parte en mi vida, durante este proceso de formación

largo y sufrido que fue culminar mi carrera como Ingeniera Agrónoma.

viii

RESUMEN EJECUTIVO

El uso de aceites esenciales extraídos de plantas aromáticas ha demostrado ser eficientes en

el control del gorgojo del maíz; además su uso no afecta el medio ambiente ni al hombre. El

gorgojo de maíz es una de las principales plagas que ataca a granos almacenados de maíz en

el mundo, las pérdidas que ocasiona este insecto oscilan entre 15 y 25 %. La principal forma

de control del gorgojo del maíz es a través del uso de insecticidas y gases como la fosfina

que son altamente tóxicos y que perjudican la salud del agricultor y de los agroecosistemas.

Alternativas menos perjudiciales para el control del gorgojo de maíz son necesarias,

especialmente para los pequeños agricultores que cultivan maíz como medio de subsistencia.

La presente investigación tuvo como objetivo evaluar la actividad insecticida de aceites

esenciales de menta (M. pulegium) y eucalipto (E. melliodora) para el control del gorgojo

de maíz (Sitophilus zeamais), para ello, la investigación fue desarrollada en el Laboratorio

de uso básico, perteneciente a la Universidad Técnica Estatal de Quevedo usando una

población de S. zeamais que fue colectada en el cantón El Empalme y mantenida bajo

condiciones controladas. Los experimentos realizados fueron distribuidos en un diseño

completamente al azar (DCA) en el cual se evaluó cuatro concentraciones con cinco

repeticiones por cada aceite esencial (menta y eucalipto) en insectos expuestos a papel filtro

y granos de maíz tratados con los aceites antes mencionados. Las concentraciones de los

aceites esenciales de menta (M. pulegium) y eucalipto (E. melliodora) que se usaron en los

ensayos con papel filtro tanto para repelencia como para mortalidad fueron de: 0,078 µl/cm2;

0,16 µl/cm2; 0,31 µl/cm2; 0,63 µl/cm2; mientras que, para los ensayos con granos de maíz

tanto para repelencia como para mortalidad fueron de: 0,075 µl/g; 0,15 µl/g; 0,3 µl/g; 0,6

µl/g. Los resultados obtenidos no mostraron diferencias entre las concentraciones utilizadas

en los ensayos de mortalidad de S. zeamais al utilizar aceites de menta y eucalipto, sin

embargo, efectos de repelencia fueron observados especialmente al usar aceite de eucalipto;

lo que sugiere que el uso de aceites esenciales podría ser considerada como alternativa para

el manejo de S. zeamais.

Palabras clave: repelencia; mortalidad; concentración letal media; tiempo letal medio.

ix

ABSTRACT

The use of essential oils extracted from aromatic plants has proven efficient in controlling S.

zeamais; corn weevil is one of the main pests that attacks stored corn grains in the world.

The losses caused by this insect range between 15% and 25%. The main form of controling

the maize weevil is through the use of insecticides and gases such as phosphine that are

highly toxic, which harm the health of the farmer and agroecosystems. Less harmful

alternatives to control corn weevil are necessary especially for small farmers who grow corn

as a livelihood. In addition, its use does not affect the environment nor it affects men. The

purpose of this research was to evaluate the insecticidal activity of essential oils of

peppermint (M. pulegium) and eucalyptus (E. melliodora) for the control of the S. zeamais.

For this purpose, the research was developed in the Laboratorio de uso básico, belonging to

the Universidad Técnica Estatal de Quevedo using a population of S. zeamais that was

collected in the El Empalme canton and kept under controlled conditions. The experiments

performed were distributed in a completely randomized design (DCA) in which four

concentrations were evaluated with five repetitions for each essential oil (mint and

eucalyptus) in insects exposed to filter paper and corn kernels treated with the oils before

mentioned. The concentrations of the essential oils of peppermint (M. pulegium) and

eucalyptus (E. melliodora) that were used in the tests with filter paper for both repellency

and mortality were: 0,078 µl/cm2; 0,16 µl/cm2; 0,31 µl/cm2; 0,63 µl/cm2, while, for trials

with corn grains for both repellency and mortality were: 0.075 µl/g; 0,15 µl/g; 0,3 µl/g; 0,6

µl/g. The results obtained did not show differences between the concentrations used in the

mortality tests of S. zeamais when using peppermint and eucalyptus oils. However,

repellency effects were observed especially when using eucalyptus oil; suggesting that the

use of essential oils could be considered as an alternative for the management of the S.

zeamais.

Keywords: repellency, mortality, mean lethal concentration, mean lethal time.

x

CÓDIGO DUBLIN

Titulo:

Evaluación de la actividad insecticida de aceites esenciales de menta

(Mentha pulegium) y eucalipto (Eucalyptus melliodora) para el control del

gorgojo de maíz (Sitophilus zeamais)

Autor: Morales Velasco María José

Palabras

claves: Repelencia Mortalidad Concentración letal media

Resumen:

Hasta 300

(palabras)

El uso de aceites esenciales extraídos de plantas aromáticas ha demostrado

ser eficientes en el control del gorgojo del maíz; además su uso no afecta el

medio ambiente ni al hombre. El gorgojo de maíz es una de las principales

plagas que ataca a granos almacenados de maíz en el mundo, las pérdidas

que ocasiona este insecto oscilan entre 15 y 25 %. La principal forma de

control del gorgojo del maíz es a través del uso de insecticidas y gases como

la fosfina que son altamente tóxicos y que perjudican la salud del agricultor

y de los agroecosistemas. Alternativas menos perjudiciales para el control

del gorgojo de maíz son necesarias, especialmente para los pequeños

agricultores que cultivan maíz como medio de subsistencia. La presente

investigación tuvo como objetivo evaluar la actividad insecticida de aceites

esenciales de menta (M. pulegium) y eucalipto (E. melliodora) para el

control del gorgojo de maíz (Sitophilus zeamais), para ello, la investigación

fue desarrollada en el Laboratorio de uso básico, perteneciente a la

Universidad Técnica Estatal de Quevedo usando una población de S.

zeamais que fue colectada en el cantón El Empalme y mantenida bajo

condiciones controladas. Los experimentos realizados fueron distribuidos en

un diseño completamente al azar (DCA) en el cual se evaluó cuatro

concentraciones con cinco repeticiones por cada aceite esencial (menta y

eucalipto) en insectos expuestos a papel filtro y granos de maíz tratados con

los aceites antes mencionados. Las concentraciones de los aceites esenciales

de menta (M. pulegium) y eucalipto (E. melliodora) que se usaron en los

ensayos con papel filtro tanto para repelencia como para mortalidad fueron

de: 0,078 µl/cm2; 0,16 µl/cm2; 0,31 µl/cm2; 0,63 µl/cm2; mientras que, para

los ensayos con granos de maíz tanto para repelencia como para mortalidad

fueron de: 0,075 µl/g; 0,15 µl/g; 0,3 µl/g; 0,6 µl/g. Los resultados obtenidos

no mostraron diferencias entre las concentraciones utilizadas en los ensayos

de mortalidad de S. zeamais al utilizar aceites de menta y eucalipto, sin

embargo, efectos de repelencia fueron observados especialmente al usar

aceite de eucalipto; lo que sugiere que el uso de aceites esenciales podría ser

considerada como alternativa para el manejo de S. zeamais.

Descripción hojas: dimensiones, 29 x 21cm + CD-ROM 6162

URI

xi

TABLA DE CONTENIDO

DECLARACIÓN DE AUTORÍA Y CESIÓN DE DERECHOS………..…………………ii

CERTIFICACIÓN DE CULMINACIÓN DE PROYECTO DE INVESTIGACIÓN ......... iii

CERTIFICACIÓN DEL REPORTE DE LA HERRAMIENTA DE PREVENCIÓN DE

COINCIDENCIA Y/O PLAGIO ACADÉMICO ................................................................ iv

RESUMEN EJECUTIVO .................................................................................................. viii

ABSTRACT ......................................................................................................................... ix

CÓDIGO DUBLIN ............................................................................................................... x

TABLA DE CONTENIDO .................................................................................................. xi

ÍNDICE DE TABLAS ......................................................................................................... xv

ÍNDICE DE FIGURAS ...................................................................................................... xvi

ÍNDICE DE ANEXOS ...................................................................................................... xvii

INTRODUCCIÓN ................................................................................................................. 1

CAPITULO I. CONTEXTUALIZACIÓN DE LA INVESTIGACIÓN

1.1. Problema de investigación ......................................................................................... 4

1.1.1. Planteamiento del problema. ...................................................................................... 4

1.1.2. Formulación del problema. ........................................................................................ 4

1.1.3. Sistematización del problema. ................................................................................... 4

1.2. Objetivos. ................................................................................................................... 5

1.2.1. Objetivo General. ....................................................................................................... 5

1.2.2. Objetivos Específicos. ................................................................................................ 5

1.3. Justificación. .............................................................................................................. 6

CAPITULO II. FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA DE LA INVESTIGACIÓN

2.1. Marco teórico ............................................................................................................. 8

2.1.1. Maíz (Zea mayz). ....................................................................................................... 8

2.1.2. Importancia del maíz en el Ecuador. ......................................................................... 8

2.1.3. Plagas de maíz post cosecha. ..................................................................................... 9

xii

2.1.4. Insecticidas para el control de insectos-plaga en granos almacenados. ................... 11

2.1.5. Fumigantes: gas fosfina. .......................................................................................... 12

2.1.6. Aceites esenciales como insecticidas. ...................................................................... 13

2.1.7. Menta (Mentha pulegium). ...................................................................................... 14

2.1.8. Eucalipto (Eucalyptus melliodora) .......................................................................... 16

CAPITULO III. METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN

3.1. Localización.............................................................................................................. 20

3.2. Tipo de investigación. .............................................................................................. 20

3.3. Métodos de investigación. ........................................................................................ 20

3.4. Fuentes de recopilación de información. .................................................................. 20

3.5. Diseño de la investigación. ....................................................................................... 20

3.5.1. Diseño Experimental ............................................................................................... 20

3.6. Instrumentos de investigación. ................................................................................ 21

3.6.1. Factor de estudio. ..................................................................................................... 21

3.6.2. Tratamientos ............................................................................................................ 21

3.6.3. Descripción de los bioensayos. ................................................................................ 22

3.6.4. Manejo del experimento. ......................................................................................... 24

3.6.5. Registro de datos y forma de evaluación. ................................................................ 28

3.8. Recursos y materiales .............................................................................................. 31

CAPITULO IV. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

4.1. Resultados. ............................................................................................................... 33

4.1.1. Repelencia de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro tratado con

aceites de menta (M. pulegium). .............................................................................. 33

4.1.2. Mortalidad de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro tratado con

aceite esencial de menta (M. pulegium). .................................................................. 33

4.1.3. Curvas de sobrevivencia de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro

tratado con aceite esencial de menta (M. pulegium). ............................................... 34

xiii

4.1.4. Tiempo letal medio de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro tratado

con aceite esencial de menta (M. pulegium). ........................................................... 35

4.1.5. Concentración letal media (CL50) de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a papel

filtro tratado con aceite esencial de menta (M. pulegium). ...................................... 35

4.1.6. Repelencia de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro tratado con

aceites de eucalipto (E. melliodora). ....................................................................... 36

4.1.7. Mortalidad de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro tratado con

aceites de eucalipto (E. melliodora). ....................................................................... 37

4.1.8. Curvas de sobrevivencia de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro

tratado con aceites de eucalipto (E. melliodora). .................................................... 37

4.1.9. Tiempo letal medio gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro tratado

con aceites de eucalipto (E. melliodora). ................................................................. 38

4.1.10. Concentración letal media (CL50) gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a papel

filtro tratado con aceites de eucalipto (E. melliodora)............................................. 38

4.1.11. Repelencia de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a granos de maíz tratados


4.1.12. Mortalidad de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a granos de maíz tratados


4.1.13. Curvas de sobrevivencia de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a granos de

maíz tratados con aceite esencial de menta (M. pulegium). ..................................... 40

4.1.14. Tiempo letal medio de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a granos de maíz

tratados con aceite esencial de menta (M. pulegium). ............................................. 41

4.1.15. Concentración letal media (CL50) de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a

granos de maíz tratados con aceite esencial de menta (M. pulegium). .................... 41

4.1.16. Repelencia de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a granos de maíz tratados

con aceite esencial de eucalipto (E. melliodora). .................................................... 42

4.1.17. Mortalidad de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a granos de maíz tratados

con aceite esencial de eucalipto (E. melliodora). .................................................... 43

4.1.18. Curvas de sobrevivencia de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a granos de

maíz tratados con aceite esencial de eucalipto (E. melliodora). .............................. 43

xiv

4.1.19. Tiempo letal medio de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a granos de maíz

tratados con aceite esencial de eucalipto (E. melliodora). ....................................... 44

4.1.20. Concentración letal media (CL50) de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a

granos de maíz tratados con aceite esencial de eucalipto (E. melliodora). ............. 44

4.2. Discusión. ................................................................................................................ 46

CAPITULO V. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

5.1. Conclusiones. ........................................................................................................... 51

5.2. Recomendaciones. ................................................................................................... 52

CAPÍTULO VI. BIBLIOGRAFIA

6.1. Citas Bibliográficas. ................................................................................................ 54

CAPITULO VII. ANEXOS

7.1. Anexos. .................................................................................................................... 61

xv

ÍNDICE DE TABLAS

Tabla 1. Tratamientos utilizados en ensayos de repelencia en papel filtro tratado con aceite

de menta y eucalipto. .......................................................................................... 21

Tabla 2. Tratamientos utilizados en ensayos de repelencia en granos de maíz tratados con

aceite de menta y eucalipto. ................................................................................ 21

Tabla 3. Tratamientos utilizados en ensayo de mortalidad en papel filtro tratados con aceite

de menta y eucalipto. .......................................................................................... 22

Tabla 4. Tratamientos utilizados en ensayo de mortalidad en granos de maíz tratados con

aceite de menta o eucalipto. ................................................................................ 22

Tabla 5. Porcentaje de repelencia de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro

tratado con aceites de menta (Mentha pulegium). Los resultados son presentados

como la media ± error estándar de cuatro concentraciones. ............................... 33


tratado con aceites de eucalipto (Eucalyptus melliodora). Los resultados son

presentados como la media ± error estándar de cuatro concentraciones. ........... 36

Tabla 7. Porcentaje de repelencia de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a granos de

maíz tratados con aceites de menta (Mentha pulegium). Los resultados son

presentados como la media ± error estándar de cuatro concentraciones. ........... 39


maíz tratados con aceites de eucalipto (Eucalyptus melliodora). Los resultados

son presentados como la media ± error estándar de cuatro concentraciones. ..... 42

xvi

ÍNDICE DE FIGURAS

Figura 1.Porcentaje de mortalidad de S. zeamais expuestos a papel filtro tratado con aceite

esencial de menta (M. pulegium). ....................................................................... 34

Figura 2. Curvas de sobrevivencia de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro

tratado con aceite esencial de menta (M. pulegium) en diferentes concentraciones.

............................................................................................................................. 35

Figura 3. Porcentaje de mortalidad de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro

tratado con aceite esencial de eucalipto (E. melliodora). ................................... 37

Figura 4. Curvas de sobrevivencia del gorgojo de maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro

tratado con aceite esencial de eucalipto (E. melliodora) en diferentes

concentraciones. .................................................................................................. 38

Figura 5. Porcentaje de mortalidad de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a granos de

maíz tratados con aceite esencial de menta (M. pulegium). ................................ 40

Figura 6. Curvas de sobrevivencia de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a granos de

maíz tratados con aceite esencial de menta (M. pulegium) en diferentes



maíz tratados con aceite esencial de eucalipto (E. melliodora). ......................... 43


maíz tratados con aceite esencial de eucalipto (E. melliodora) en diferentes


xvii

ÍNDICE DE ANEXOS

Anexo 1.Tablas de Kruskal-Wallis del porcentaje de repelencia en los ensayos con

exposición al aceite de eucalipto (E. melliodora) en papel filtro, en la hora 1, 2

y 3 frente a gorgojo de maíz (S. zeamais)……………………………………. 61

Anexo 2. Tablas de Kruskal-Wallis del porcentaje de repelencia en los ensayos con

exposición al aceite de menta (M. pulegium) en papel filtro, en la hora 1, 2 y 3

frente a gorgojo de maíz (S. zeamais). .............................................................. 62


exposición al aceite de eucalipto (E. melliodora) en granos de maíz, en la hora

1, 2 y 3 frente a gorgojo de maíz (S. zeamais). ................................................. 63


exposición al aceite de menta (M. pulegium) en granos de maíz, en la hora 1, 2

y 3 frente a gorgojo de maíz (S. zeamais). ........................................................ 64

Anexo 5. Tabla de Kruskal-Wallis para porcentaje de mortalidad del aceite esencial de

eucalipto (E. melliodora) en papel filtro frente a gorgojo de maíz (S. zeamais).

.......................................................................................................................... 65

Anexo 6. Tabla de Kruskal-Wallis para porcentaje de mortalidad del aceite esencial de menta

(M. pulegium) en papel filtro frente a gorgojo de maíz (S. zeamais). .............. 65


eucalipto (E. melliodora) en granos de maíz frente a gorgojo de maíz (S.

zeamais). ........................................................................................................... 66


(M. pulegium) en granos de maíz frente a gorgojo de maíz (S. zeamais). ........ 66

Anexo 9. Tabla de comparación múltiple por pares (método Holm-Sidak) para evaluación

de curvas de sobrevivencia. En insectos expuestos a papel filtro tratado con

aceite esencial de menta (M. pulegium). ........................................................... 67


de curvas de sobrevivencia. En insectos expuestos a papel filtro tratado con

aceite esencial de eucalipto (E. melliodora). .................................................... 67

Anexo 11. Líneas de regresión probit, del log de la concentración (µl/cm2) del aceite de

menta (M. pulegium), en ensayos en papel filtro para el control de gorgojo de

maíz (S. zeamais). ............................................................................................. 68

xviii


eucalipto (E. melliodora), ensayos en papel filtro para el control del gorgojo de

maíz (S. zeamais). ............................................................................................. 68

Anexo 13. Líneas de regresión probit, del log de la concentración (µl/g) del aceite de menta

(M. pulegium), ensayos en granos de maíz para el control del gorgojo de maíz

(S. zeamais). ...................................................................................................... 69

Anexo 14. Líneas de regresión probit, del log de la concentración (µl/g) del aceite de

eucalipto (E. melliodora), ensayos en granos de maíz para el control del gorgojo

de maíz (S. zeamais). ........................................................................................ 69

Anexo 15. Cría y reproducción de S. zeamais. .................................................................... 70

Anexo 16. Separación de los insectos de las cámaras de reproducción. ............................. 70

Anexo 17. Envases para los ensayos. .................................................................................. 71

Anexo 18. Preparación de soluciones con aceites esenciales. ............................................. 71

Anexo 19. Montaje de los ensayos de repelencia en granos de maíz .................................. 72

Anexo 20.Montaje de los ensayos de repelencia en papel filtro. ........................................ 72

Anexo 21. Montaje de los ensayos de mortalidad en papel filtro. ...................................... 73

Anexo 22. Montaje de los ensayos de mortalidad en granos de maíz. ................................ 73

Anexo 23. Gorgojos de maíz (S. zeamais) utilizados en los ensayos. ................................. 74

1

INTRODUCCIÓN

El maíz es uno de los principales cereales cultivados a nivel mundial, debido a que es un

cultivo de importancia en los sistemas de producción, su consumo se lo realiza desde el

estado lechoso, hasta el grano seco (Ortigoza, 2019).

Como en la mayoría de los cultivos agrícolas el maíz presenta una serie de problemas

fitosanitarios que impide el correcto desarrollo del cultivo reduciendo drásticamente sus

rendimientos. Los insectos-plaga son uno de los principales problemas fitosanitarios que

tiene el maíz. (Rojas, 2015).

Entre los insectos-plaga que afectan el maíz durante su etapa de almacenamiento

encontramos al gorgojo del maíz. Los mayores daños que provocan al grano los ocasionan

las larvas y los adultos. La hembra perfora el grano para ovipositar y completar su ciclo de

vida dentro del grano (Intagri, 2015).

El control de S. zeamais, en granos de maíz almacenado está basado en el uso a gran escala

de insecticidas sintéticos protectores y fumigantes, que, a pesar de ser eficientes y en muchos

casos de bajo costo, pueden provocar efectos indeseables, como intoxicaciones al personal

que lo aplica, presencia de residuos tóxicos en los granos, aumento de los costos en el

almacenamiento, contaminación al medio ambiente y desarrollo de poblaciones de insectos

resistentes (Tapondjou, 2002).

En la búsqueda de alternativas que permitan el control del gorgojo del maíz varias

investigaciones han sido realizadas y algunas confirman la eficiencia de insecticidas de

origen vegetal como alternativa de control. Los insecticidas de origen vegetal son productos

que además de ser eficientes son amigable con el medio ambiente y con el operador que

contantemente está expuesto a insecticidas sintéticos altamente peligrosos (de Assis, 2014).

A pesar de que los insecticidas de origen vegetal son menos tóxicos para el operador y

fácilmente biodegradables pueden ser considerados como alternativas para la protección de

granos y productos almacenados contra el ataque de insectos plaga (Isman, 2006).

2

Extractos de plantas como menta (Mentha spp.) y eucalipto (Eucalyptus spp.) han sido

utilizadas como insecticidas naturales para el control de S. zeamais e inclusive el uso de sus

aceites esenciales se ha tornado en una alternativa que ha despertado interés entre los

investigadores (Cayuela, 2018), sin embargo, en el Ecuador existe escasa información sobre

el uso de aceites esenciales de menta y eucalipto, en el control de poblaciones de gorgojos

del maíz.

Por este motivo la presente investigación evaluó el efecto insecticida de diferentes

concentraciones de aceites esenciales de menta (M. pulegium) y eucalipto (E. melliodora)

en adultos de S. zeamais en granos de maíz y en papel filtro tratados con estos aceites.

3

CAPITULO I

CONTEXTUALIZACIÓN DE LA INVESTIGACIÓN

4

1.1. Problema de investigación

1.1.1. Planteamiento del problema.

El gorgojo del maíz es considerada uno de los insectos-plaga de mayor importancia

económica en la postcosecha de granos almacenados, tanto larvas como adultos se alimentan

de los granos de maíz, los daños que realizan favorecen el ataque de otras especies de

insectos y de agentes patógenos que contaminan el grano reduciendo su calidad y

repercutiendo directamente en la economía del productor.

La principal forma de control del gorgojo del maíz se basa en el uso de insecticidas altamente

tóxicos (ej. piretroides, organofosforados) y fumigantes (ej. fosfina) que contaminan el

medio ambiente, estimulan el desarrollo de poblaciones resistentes a estos productos, afectan

la salud del hombre e inclusive causar su muerte (ATSDR, 2016). En el Ecuador no se

dispone de alternativas de control para el gorgojo del maíz que sean amigables con el medio

ambiente ni con el productor, por este motivo existe la preocupación de retomar esfuerzos

con herramientas adicionales de control que sean eficientes y que causen menor impacto en

la vida del productor y de los agroecosistemas.

El uso de aceites esenciales de plantas con propiedades insecticidas puede tornarse en una

alternativa para el control del gorgojo del maíz, sin embargo, muy poco se sabe sobre su

forma de aplicación, concentración o eficiencia. El conocimiento de esta y otras

informaciones proveerá especialmente a los pequeños productores de maíz de herramientas

adicionales para el control del gorgojo del maíz, alternativas menos tóxicas que evitarán

pérdidas económicas durante el almacenamiento de granos de maíz en el Ecuador y que

podrían ser incorporadas dentro de los programas de manejo integrado de esta plaga.

1.1.2. Formulación del problema.

¿Qué aceite esencial pulverizado sobre granos de maíz y papel filtro y en qué concentración

muestra actividad repelente y mayor eficiencia en el control del gorgojo de maíz?

1.1.3. Sistematización del problema.

¿Con qué aceite y qué concentración S. zeamais muestra mayor actividad repelente?

¿Cuál fue la concentración letal media (CL50) de los aceites de menta y eucalipto con la que

se obtuvo mayor mortalidad de S. zeamais?

5

1.2. Objetivos.

1.2.1. Objetivo General.

Evaluar la actividad insecticida de aceites esenciales de menta (Mentha pulegium) y

eucalipto (Eucalyptus melliodora) para el control del gorgojo de maíz (Sitophilus zeamais).

1.2.2. Objetivos Específicos.

Determinar la concentración letal media (CL50) que presenta la mayor mortalidad de

gorgojos del maíz (S. zeamais).

Verificar el efecto repelente de los aceites esenciales de menta y eucalipto en gorgojos

del maíz (S. zeamais) tratados con granos de maíz.

Verificar el efecto repelente de los aceites esenciales de menta y eucalipto en gorgojos

del maíz (S. zeamais) tratados en superficies de papel filtro.

6

1.3. Justificación.

Considerando que el maíz constituye uno de los cultivos de mayor importancia para la

población ecuatoriana, no solamente por formar parte de su dieta alimenticia sino también

por ser una importante fuente generadora de empleo, es indispensable buscar alternativas

que permitan el control de insectos-plagas tales como el gorgojo del maíz (S. zeamais).

El gorgojo de maíz (S. zeamais) es un insecto de distribución mundial y una de las plagas

más destructivas de los granos de de maíz. Sus daños causan pérdidas que repercuten

directamente a la economía del productor. Desafortunadamente, el principal método para

controlar este insecto-plaga radica en el uso de insecticidas y fumigantes altamente tóxicos

que afecta la salud del medio ambiente y de los seres humanos.

Las plantas en su constitución presentan varios compuestos químicos que pueden ser tóxicos

para los insectos, algunas de esos compuestos se los puede encontrar en sus aceites

esenciales. Los aceites esenciales dependiendo de la planta poseen compuestos tales como

el α-pineno, el limoneno, 1,8-cineol, terpinoleno, el citronelol, el citronelal, el alcanfor y el

timol, β- cariofileno que son tóxicos para los insectos.

Aceites esenciales a base de menta y eucalipto han mostrado efectos tóxicos y repelentes

sobre algunas especies de insectos como el barrenador grande del grano (Prostephanus

truncatus), la palomilla de los granos (Sitotroga cereallela), inclusive en el gorgojo del maíz

(S. zeamais), sin embargo, se desconoce su efecto en gorgojos del maíz del Ecuador. Con

estos antecedentes es necesario realizar investigaciones que permitan verificar la eficiencia

de aceites de menta y eucalipto en el control de los gorgojos del maíz, las concentraciones

adecuadas para causar su mortalidad y los efectos repelentes de estos aceites sobre los granos

de maíz y superficies de papel filtro tratados, para así tener una alternativa para el control de

esta plaga y que los productores de maíz tengan una opción natural para poder combatir esta

plaga.

7

CAPITULO II

FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA DE LA INVESTIGACIÓN

8

2.1. Marco teórico

2.1.1. Maíz (Zea mayz).

El maíz es una planta anual, originaria de América del sur, los aborígenes lo cultivaban para

aprovechar el valor alimenticio de sus granos. En la actualidad el cultivo de maíz se ha

extendido a muchas de las regiones templadas y cálidas del mundo (Fuster, 1974).

En cuanto al origen geográfico del maíz, hay evidencias que lo sitúan en México con

anterioridad al año 5000 A.C. En el centro sur de México y Centroamérica se originó el

maíz y un origen secundario de diversidad genética a los valles altos como: Perú y Bolivia.

Tiene una amplia distribución geográfica se le encuentra desde las regiones este y sur este

de Estados Unidos., México, América Central y del Sur (Cazco, 2006).

2.1.2. Importancia del maíz en el Ecuador.

El maíz (Z. mays), es considerado el tercer cultivo más importante del mundo, después del

trigo y del arroz, debido a que se adapta ampliamente a las diversas condiciones ecológicas

y edáficas, se lo cultiva en casi todo el mundo y se constituye, en alimento básico para

millones de personas, especialmente en América latina (Ortigoza, 2019).

La producción de maíz duro en la región Costa del Ecuador se concentra en las provincias

de: Los Ríos (40%), Manabí (18%), y Guayas (19%) y 3% entre Esmeralderas y El Oro; en

la Sierra, la mayor producción se encuentra en las provincias de Loja y Bolívar, en la región

amazónica encontramos el tres 3% de la producción nacional (Quiroz, 2016).

El maíz forma parte de la dieta de los ecuatorianos, ha sido utilizado como materia prima en

la elaboración de diferentes platos típicos creados por nuestros antepasados y hasta la

actualidad se le da uso en diferentes formas, sea en estado tierno (choclo) o maduro. El maíz

duro-seco se utiliza principalmente para uso industrial y es esta precisamente la razón que

justifica la expansión tanto en superficie cultivada como en producción y rendimiento. Este

producto tiene una amplia demanda por parte de la agroindustria, destinada principalmente

a la producción avícola y de alimentos balanceados. Esta industria presenta en el país un

consumo interno creciente y muy dinámico (Bravo, 2005).

9

2.1.3. Plagas de maíz post cosecha.

El almacenamiento de granos es la etapa donde se originan las mayores pérdidas por

problemas referentes a las condiciones de conservacion. Se estima que el 25% de los cereales

alimenticios almacenados se pierde en los países del mundo en desarrollo a causa de la

incorrecta manipulación, deterioro y plagas (Blancas, 2007).

Uno de los factores más importantes en el deterioro de los granos almacenados son los

insectos, ya que además de alimentarse de ellos, causan contaminación del grano con partes

de sus cuerpos y excrementos; cuando los niveles son mayores a nueve insectos por

kilogramo califican un lote de granos como infestado (Blancas, 2007).

Según (Flores, 2011), entre los principales insectos plaga de granos almacenados podemos

mencionar los siguientes:

Barrenillo de los granos (Rhizopertha dominica).

Tiene bastante difusión en el mundo por el daño que causa a casi todos los granos; tanto los

adultos como las larvas son voraces y se alimentan de productos almacenados,

principalmente de cereales y granos sanos.

Barrenador de los granos (Prostephanus truncatus).

Este insecto es similar en apariencia y hábitos al barrenillo de los granos, con la diferencia

que es un poco más grande; comienza su ataque en el campo poco antes de la cosecha y

cuando la larva emerge empieza a devorar el grano en su proceso alimenticio.

Gorgojos castaños de la harina (Tribolium confusum y T. castaneum).

Estos dos insectos que se encuentran en todo tipo de harina; suelen estar en lugares oscuros,

húmedos, donde el grano no ha sido removido durante un periodo prolongado. Ataca una

gran variedad de productos como, granos, harinas, polvo de hornear y otros materiales

almidonosos. Solamente se alimentan de granos cuando están quebrados o triturados o

cuando han sido atacados por picudos, barrenadores y palomillas. El daño más importante

10

que causa es la contaminación de las harinas y productos derivados de granos. Se reproducen

fácilmente en granos sucios y quebrados.

Palomilla de los graneros (Sitotroga cerealella).

Esta plaga abunda y se reproduce rápidamente en los trópicos y climas cálidos; inicia su

infestación en el campo y continúa reproduciéndose en el granero, debido a que las bajas

temperaturas la afectan; únicamente en el estado larvario se alimenta de maíz (mazorca y

granos), de trigo y otros granos almacenados.

Gorgojo del maíz (Sitophilus zeamais).

El gorgojo de maíz es un pequeño escarabajo de color negro o marrón, es una de las

principales plagas de los granos almacenados, se le reconoce por presentar un “pico” con el

cual se alimenta perforando los granos (Control SAC, 2015). Estos insectos son ampliamente

conocidos por los daños que ocasionan a los granos almacenados, y en general se les llama

picudos o gorgojos de los granos. El picudo del maíz (S. zeamais), ocasionalmente, inicia su

infestación en el campo y, cuando llega el maíz al almacén se reproducen rápidamente.

a) Taxonomia del gorgojo de maíz (S zeamais).

Clasificación taxonómica del gorgojo de maíz (Motschulsky, 1855).

Phylum: Anthropoda

Clase: Insecta

Orden: Coleoptera

Suborden: Polyphaga

Familia: Curculionidae

Subfamilia: Curculionoidea

Género: Sitophilus

Especie: Sitophilus zeamais

b) Morfología del gorgojo de maíz (S zeamais).

La cabeza del gorgojo del maíz se proyecta en forma de pico y su tórax es alargado y cónico,

con manchas ovales en el dorso, se caracterizan por tener su aparato bucal masticador en el

11

extremo de una probóscide que puede ser relativamente masiva o larga y estrecha, según las

especies, las antenas quedan resguardadas en unos surcos a lo largo de la probóscide, su

cuerpo ovalado esta cubierto de un tegumento áspero y duro y presenta una únca sutura

medial en la parte inferior de la cabeza. El tamaño es generalmente pequeño (2.5 a 5 mm de

largo) (Garcia, 2007).

c) Ciclo Biológico.

Las hembras horadan el grano y depositan en cada diminuta perforación un huevecillo que

posteriormente es cubierto con una secreción, por lo que su presencia pasa inadvertida. Cada

hembra deposita de 300 a 400 huevos que tardan entre cuatro y seis semanas en

transformarse en adultos. La larva, carente de patas, se alimenta, se transforma en pupa y

finalmente en adulto, dentro del grano. El adulto vive de cuatro a cinco meses. La hembra

alcanza su máxima actividad de oviposición después de tres semanas de haber emergido. Se

considera una plaga primaria porque los adultos son capaces de perforar los granos

(Velásquez, 1983).

d) Daños.

Los gorgojos del maíz infestan las mazorcas en el campo durante el secado del grano y antes

de la cosecha, o cuando el grano es almacenado. Los mayores daños al grano los ocasionan

las larvas y los adultos. Los adultos perforan el grano para ovipositar, mientras que las larvas

forman surcos en el endospermo al alimentarse. La presencia del gorgojo favorece el ataque

de otros insectos. Cuando hay mucha humedad y los insectos atacan el grano, se crea un foco

de infección que ocasiona calentamiento en el maíz y, en consecuencia, fuertes infestaciones

(Garcia, 2007). Entre los daños causados por el tratamiento químico contra los insectos, los

más importantes son los costos de los insecticidas, los equipos utilizados en el tratamiento

fitosanitario y en los residuos tóxicos, que afectan al trabajador y al consumidor (FAO,

1983).

2.1.4. Insecticidas para el control de insectos-plaga en granos

almacenados.

Los insecticidas para el control de insectos plaga en granos almacenados pueden dividirse

en tres grupos: preventivos, curativos y de rápida acción. Para los fines preventivos se

12

utilizan insecticidas residuales líquidos o en polvo, capaces de evitar una infestación por un

tiempo prolongado después de su aplicación. Éstos se aplican sobre las instalaciones vacías

antes de recibir el grano o bien sobre el grano mismo, cuando se encuentra en movimiento.

Los insecticidas líquidos o en polvo controlan adultos y algunas fases juveniles, pero son

incapaces de eliminar los estadios que se desarrollan en el interior del grano.Para el control

del gorgojo de maiz, los insecticidas mayormente usados son los curativos, es decir controlar

plagas ya presentes en los granos (Abadía, 2013).

2.1.5. Fumigantes: gas fosfina.

El fumigante más utilizado en la actualidad para el control de plagas en granos almacenados

es la fosfina. La fosfina es un gas letal para los insectos, capaz de eliminar todos sus estadios

de desarrollo, incluso los de las plagas primarias, ya que se difunde hacia el interior del

grano. El éxito del tratamiento con fosfina depende de la hermeticidad del recinto y del

tiempo de exposición. La fosfina no posee poder residual, de modo que no ofrece protección

posterior, y no afecta el poder germinativo de las semillas, pero es un gas altamente tóxico

para los insectos, roedores, humanos y otros animales (Abadía, 2013).

El fosfuro de hidrógeno o también llamado fosfina (PH3) es un gas incoloro, inflamable, que

explota a temperatura ambiente y que huele a ajo. Pequeñas cantidades ocurren naturalmente

provenientes de la degradación de materia orgánica. Es levemente soluble en agua y es

extremadamente venenoso (ATSDR, 2016). La fosfina se genera comúnmente por

descomposición de fosfuros metálicos (de aluminio o de magnesio), al entrar en contacto

con la humedad del aire (Abadía, 2013).

Los fosfuros metálicos se encuentran disponibles en diferentes formulaciones comerciales:

Pastillas: cada unidad pesa 3 gramos y libera 1 gramo de fosfina. Es la formulación más

utilizada en Argentina. Las pastillas son más seguras que los comprimidos a altas

temperaturas, dado que se descomponen más lentamente,

Comprimidos: cada unidad pesa 0,6 gramos y libera 0,2 gramos de fosfina.

Placas y bolsas: se utilizan para fumigar productos en los que no se admite la presencia

del polvo residual de la fumigación (por ejemplo, harinas).

La exposición a la fosfina puede causar dolor abdominal, náusea y vómitos, en casos más

severos altos niveles puede causar debilidad, bronquitis, edema pulmonar, falta de aliento,

13

convulsiones y la muerte. La fosfina se ha encontrado en por lo menos 7 de los 1,585 sitios

de la Lista de Prioridades Nacionales identificados por la EPA (Agencia de Protección del

Medio Ambiente de EE. UU) (ATSDR, 2016).

El uso exesivo y las altas concentraciones usadas del gas fosfina para el control de insectos

plaga ha generado que los organismos vayan generando resistencia a la exposicion a fosfina,

lo que implica que un porcentaje de las próximas generaciones de insectos serán resistentes

al gas fosfina y esto hace que el control de las poblaciones de insectos plaga sea más dificil

de controlar (Valmas, 2006).

La resistencia se define como la capacidad adquirida por individuos de una población de

insectos para sobrevivir a dosis de químicos que generalmente son letales para una población

normal (Nari, 1999). Esta definición que coincide con la OMS (Organización Mundial de la

Salud), es en realidad una simplificación máxima de un proceso biológico extremadamente

complejo, la coevolución (Russo, 2013).

En el año 1989, la Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y la

Agricultura (FAO) había registrado 504 casos de resistencia especialmente en los insectos

de los órdenes Diptera, Lepidoptera, Coleoptera y Acarina (Rodríguez, 2008).

La resistencia a la fosfina en las plagas de grano almacenado, demuestra que, el uso de dosis

inadecuadas promueve la selección de insectos resistentes. Hubo evidencia de dos genes que

controlan la resistencia a la fosfina, en S. oryzae uno es un gen semidominante principal,

heterocigoto, que muestra una menor resistencia que los homocigotos resistentes (Athié,

2005).

2.1.6. Aceites esenciales como insecticidas.

Los aceites esenciales se definen como productos volátiles de naturaleza compleja,

producidos por ciertos vegetales a los que confieren un olor agradable. Habitualmente se

denominan esencias, aunque este término es mucho más amplio, porque engloba no solo a

los aceites esenciales sino también a otras sustancias obtenidas por métodos de extracción

muy diversos (Kuklinski, 2000).

14

En la actualidad el uso de productos químicos sintéticos para el control de los insectos

plantea interrogantes relacionados con el medio ambiente y la salud de los seres humanos

(Aboua, 2010).

La mayoría de estos productos ocasionan intoxicaciones agudas que resultan en náuseas,

dolores abdominales, diarrea, mareos, ansiedad y confusión, efectos que pueden llegar a ser

graves (CESA, 2012).

El uso de aceites esenciales ha demostrado tener una buena eficacia para el control de

insectos-plaga, siendo además respetuosos con el medio ambiente ya que no dejan residuos

tóxicos en el suelo agua o alimentos (Cayuela, 2018). Algunos aceites esenciales han sido

ampliamente evaluados por sus propiedades repelentes e insecticidas. Propiedades basadas

principalmente en los efectos sinérgicos de sus componentes (Cayuela, 2018).

Entre las plantas con aceites esenciales como repelentes e insecticidas, podemos mencionar:

hierba luisa (Cymbopogon spp.), mirtos de miel. (Melaleuca spp.), menta (Mentha spp.),

geranio (Geranium ssp.) y al eucalipto (Eucalyptus spp.) Los compuestos individuales o

moléculas aromáticas presentes en estas plantas aromáticas, que poseen una elevada

actividad repelente, incluyen: el α-pineno, el limoneno, 1,8-cineol, terpinoleno, el citronelol,

el citronelal, el alcanfor y el timol, β- cariofileno (Cayuela, 2018).

Se ha reportado que los aceites esenciales (AE) de especies vegetales pertenecientes a las

familias: Meliacea, Rutaceae, Verbenacea, Asteraceae, Lamiaceae, y Piperaceae, presentan

propiedades insecticidas en contra de plagas de importancia económica, como los Coleoptera

(Aboua, 2010).

La utilización de especies vegetales con efecto insecticidas es una alternativa para el control

de gorgojo del maíz almacenado, principalmente por los pequeños productores, los cuales

pueden obtener las plantas en sus propias fincas reduciendo así el costo en el control de esta

plaga (Tavares, 2002).

2.1.7. Menta (Mentha pulegium).

Clasificación taxonómica (Linneo, 1753).

15

Reino: Plantae

División: Magnoliophyta

Clase: Magnoliopsida

Orden: Lamiales

Familia: Lamiaceae

Subfamilia: Nepetoideae

Tribu: Mentheae

Género: Mentha

Especie: Mentha pulegium L.

2.1.7.1. Características morfológicas.

La especie de M. pulegium, presenta tallo cuadrangular, de subglabro a tomentoso,

sushojas,son desubglabras a tomentosas, con peciolo corto, ovales u oblongas, obtusas o

subagudas, denticuladas o casi enteras, con nervios prominentes en el envés. Presentan

tricomas glandulares y tectores en ambas caras. Los tricomas tectores son más largos y

abundantes en los nervios. Brácteas florales semejantes a las hojas, generalmente de menor

tamaño. Cáliz de 2-3 mm, con diez nervios prominentes, pubescente, glanduloso, tubular,

con la garganta cerrada por pelos conniventes, subbilabiado, con cinco dientes desiguales,

ciliados, los dos inferiores más estrechos y largos. Corola de 4-6 mm, rosa o lila, tubulosa,

con cuatro lóbulos casi iguales, glándulas y tricomas tectores, algunos muy largos, anchos y

flexuosos. Cuatro estambres divergentes, soldados a la corola. Ovario súpero, tetralocular;

estilo ginobásico. El fruto es una tetranúcula. En todos los órganos se observan glándulas

redondeadas, grandes, más abundantes en las hojas, brácteas y cáliz (Muñoz, 1998).

2.1.7.2. Composición química.

La esencia de M. pulegium también conocida como poleo contiene fundamentalmente

cetonas, destacando entre ellas la pulegona (85-96%), cetona terpénica no saturada, cuya

proporción más o menos elevada determina la calidad de la esencia. Otras cetonas presentes

en menor concentración son: 1-mentona, d-isomentona, piperitona, piperitenona,

isopiperitenona. Además, han sido identificados alcoholes (mentol, 3-octanol, linalol,

isomentol, neomentol, neoisomentol); ésteres, como el acetato de mentilo, e hidrocarburos

16

(alfa y beta-pineno, limoneno, p-cimeno, dipenteno, canfeno). Influyendo en la proporción

de cada componente el estado de desarrollo de la planta, así como los factores climáticos y

ecológicos (Batllori, 1990).

2.1.7.3. Efecto insecticida de menta (Mentha pulegium).

Estudios evaluaron el efecto insecticida de aceites esenciales en gorgojos del género

Sitophilus, en donde se probaron aceites extraídos de plantas aromáticas y medicinales, el

efecto insecticida fue determinado mediante el porcentaje de mortalidad después de 24 y 48

horas de exposición. Varios extractos fueron tóxicos para esta plaga, sin embargo, la

actividad más fuerte se atribuyó a lo esencial aceite de M. pulegium (100% de mortalidad)

(Lamiri, 2001).

Además del efecto insecticida de aceites esenciales de plantas aromáticas en gorgojos del

género Sitophilus también se ha demostrado el potencial insecticida de los polvos vegetales

de C. citratus, D. stramonium, H. verticillata y M. pulegium para considerarse como una

alternativa de control del gorgojo del maíz en granos almacenados ha sido demostrado

anteriormente (Granados, 2016). La selección del gorgojo del maíz se vio afectada por los

polvos vegetales derivados de hojas de C. citratus, D. stramonium y M. pulegium, que

actuaron como repelente en todas las concentraciones evaluadas.

La aplicación de polvo vegetal de M. pulegium sobre S. zeamais a 0.03 (p/p) de

concentración presentó datos de mortalidad del 30 %, por otra parte, al emplear la

concentración al 0.04 (p/p) se logró registrar más del 40% a los 10 días, observando un

incremento significativo a los 15 días, al presentar mortalidad de 63.33 y 81.67 %

respectivamente (Granados, 2016).

2.1.8. Eucalipto (Eucalyptus melliodora)

Clasificación taxonómica (A.Cunn. ex R.T.Baker & H.G.Sm. 1843).

Reino: Plantae

División: Magnoliophyta

Clase: Magnoliopsida

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Subclase: Rosidae

Orden: Myrtales

Familia: Myrtaceae

Subfamilia: Myrtoideae

Tribu: Eucalypteae

Género: Eucalyptus

Especie: E. melliodora

2.1.8.1. Características morfológicas.

El eucalipto es un árbol con una copa amplia y ramillas péndulas. La corteza es persistente,

subfibrosa a escamosa, grisácea, caduca en ramas fajas irregulares, las hojas adultas tienen

un tamaño entre 9-12 cm de largo y 0.8-2 cm de ancho, alternas, con un ápice agudo y la

base cuneada, sus flores 7 dispuestas en inflorescencias simples, axilares, a veces en

panículas subterminales, el tamaño de los pedunculos oscilan entre 0.5-1 cm de largo,

angulosos. Los frutos de 0.5-0.7 cm de diámetro, pedicelados. Valvas entre 4-5 o a nivel

(INBUY, 2011).

2.1.8.2. Composición química.

Los aceites esenciales son considerados mezclas complejas de más de 100 componentes que

incluyen compuestos alifáticos de bajo peso molecular. En la mayoría de los casos poseen

dos o tres elementos en altasconcentraciones mayormente terpenos y terpenoides con el

resto, incluídos los fenil propanoides en proporciones mucho menores (Russo, 2013).

En la composición química del aceite esencial de eucalipto se encontró que su principal

componente es el cineol (1,8-cineol 57,49 %) o eucaliptol (eter óxido terpénico). Contiene

también: terpineol, carburos terpénicos (alfapineno), alcoholes alifáticos y sesquiterpénicos

(eudesmol), aldehídos (butírico, valeriánico, capróico) y cetonas. Posee además tanino

(sustancia detoxificante), pigmentos flavónicos (heterópsidos del quercetol) y un

18

heterópsido fenólico complejo, el caliptósido, ácidos fenólicos (gállico, caféico), resina y un

principio amargo (Russo, 2013).

2.1.8.3. Efecto insecticida de eucalipto (Eucalyptus spp.).

El trabajo investigativo de (Russo, 2013) confirma la acción repelente de las esencias de las

hojas adultas y juveniles de eucalipto (E. globulus), y lo acredita como un bioplaguicida

preventivo, ya que pueden impedir la entrada de coleópteros que atacan los granos

almacenados.

Además, los altos valores de mortalidad obtenidos, que superaron el 50% con las

concentraciones más altas ensayadas, confirman el potencial de estos aceites esenciales

como productos bioinsecticidas, y los señalan como alternativa para el reemplazo parcial de

dos de los fumigantes más utilizados, la fosfina y el bromuro de metilo, evitando así los

riesgos asociados a estos plaguicidas (Russo, 2013).

19

CAPITULO III

METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN

20

3.1. Localización.

La presente investigación se realizó en el Laboratorio de uso básico perteneciente a la

Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad Técnica Estatal de Quevedo (UTEQ),

ubicado en el km 1.5 vía Quevedo-Santo Domingo, sus coordenadas geográficas son 01° 01”

de latitud Sur y 79° 47” de longitud Occidental, altura de 73 msnm.

3.2. Tipo de investigación.

La investigación que se realizó fue de tipo experimental, partiendo de la información de

diferentes fuentes bibliográficas en las que se indica el efecto insecticida de los aceites

esenciales en el control del gorgojo de maíz (S. zeamais).

3.3. Métodos de investigación.

Se utilizó el método deductivo porque considera que la conclusión se encuentra implícita

dentro de las premisas, esto quiere decir que en base al experimento se obtienen conclusiones

para una posible generalización.

3.4. Fuentes de recopilación de información.

La información recolectada en este trabajo de investigación fue acerca de la observación de

cada fase de la presente investigación (fuentes primarias), así también como fuentes

secundarias: libros, artículos científicos, internet y revistas.

3.5. Diseño de la investigación.

3.5.1. Diseño Experimental

Los experimentos de mortalidad fueron distribuidos según el diseño completamente al azar

(DCA) donde se evalúo cuatro concentraciones y el control (metanol), con cinco repeticiones

obteniendo veinticinco unidades experimentales, por cada aceite esencial evaluado. Los

experimentos de mortalidad se efectuaron en dos condiciones (papel filtro y maíz).

21

Los experimentos de repelencia fueron distribuidos según el diseño completamente al azar

(DCA) donde se evalúo cuatro concentraciones con cinco repeticiones, obteniendo veinte

unidades experimentales, por cada aceite esencial evaluado.

3.6. Instrumentos de investigación.

3.6.1. Factor de estudio.

El factor de estudio en esta investigación, fueron tres: los aceites esenciales de menta y de

eucalipto, las condiciones de los bioensayos en papel filtro y en granos de maíz y las

concentraciones de los aceites esenciales que fueron cuatro.

3.6.2. Tratamientos

Los bioensayos que se estudiaron son los siguientes:

Bioensayo 1.

Tabla 1. Tratamientos utilizados en el bioensayo de repelencia en papel filtro tratado con

aceite de menta y eucalipto.

TRATAMIENTO CONCENTRACIÓN

T1 0,078 µl/cm²

T2 0,16 µl/cm²

T3 0,31 µl/cm²

T4 0,63 µl/cm²

Bioensayo 2.

Tabla 2. Tratamientos utilizados en el bioensayo de repelencia en granos de maíz tratados

con aceite de menta y eucalipto.


T1 0,075 µl/g

T2 0,15 µl/g

T3 0,3 µl/g

T4 0,6 µl/g

22

Bioensayo 3.

Tabla 3. Tratamientos utilizados en el bioensayo de mortalidad en papel filtro tratados con

aceite de menta y eucalipto.


T1 Control (Metanol)

T2 0,078 µl/cm²

T3 0,16 µl/cm²

T4 0,31 µl/cm²

T5 0,63 µl/cm²

Bioensayo 4.

Tabla 4. Tratamientos utilizados en el bioensayo de mortalidad en granos de maíz tratados

con aceite de menta y eucalipto.

TRATAMIENTO CONCENTRACION

T1 Control (Metanol)

T2 0,075 µl/g

T3 0,15 µl/g

T4 0,3 µl/g

T5 0,6 µl/g

3.6.3. Descripción de los bioensayos.

a) Descripción del bioensayo de repelencia en papel filtro tratado con aceite de menta y

eucalipto.

Tratamiento 1 (T1). El tratamiento uno consistió en la aplicación de 7,5 µL de aceite de

menta o eucalipto según corresponda y 992,5 µL de metanol pulverizado sobre un papel

filtro circular de 11 cm de diámetro en una concentración de aceite de 0,078 µl/cm².

Tratamiento 2 (T2). El tratamiento dos consistió en la aplicación de 15 µL de aceite de



23

Tratamiento 3 (T3). El tratamiento tres consistió en la aplicación de 30 µL de aceite de



Tratamiento 4 (T4). El tratamiento cuatro consistió en la aplicación de 60 µL de aceite de



b) Descripción del bioensayo de repelencia en granos de maíz tratados con aceite de menta

y eucalipto.

Tratamiento 1 (T1). El tratamiento uno consistió en la aplicación de 7,5 µL de aceite de

menta o eucalipto según corresponda y 992,5 µL de metanol pulverizado sobre 100 gramos

de maíz libre de insecticidas y con una concentración de aceite de 0,075 µl/g.

Tratamiento 2 (T2). El tratamiento uno consistió en la aplicación de 15 µL de aceite de









c) Descripción del bioensayo de mortalidad en papel filtro tratados con aceite de menta o

eucalipto.

Tratamiento 1 (T1). El tratamiento uno (Control) consistió en la aplicación de 1000 µL de

metanol pulverizado sobre un papel filtro circular de 94,98 cm2 de área.

Tratamiento 2 (T2). El tratamiento dos consistió en la aplicación de 7,5 µL de aceite de


filtro circular de 94,98 cm2 de área en una concentración de aceite de 0,078 µl/cm².

24







Tratamiento 5 (T5). El tratamiento cinco consistió en la aplicación de 60 µL de aceite de



d) Descripción del bioensayo de mortalidad en granos de maíz tratados con aceite de

menta y eucalipto.

Tratamiento 1 (T1). El tratamiento uno (Control) consistió en la aplicación de 1000 µL de

metanol pulverizado sobre 100 gramos de maíz libre de residuos de insecticida.

Tratamiento 2 (T2). El tratamiento dos consistió en la aplicación de 7,5 µL de aceite de


de maíz libre de residuos de insecticida en una concentración de aceite de 0,075 µL/g.







Tratamiento 5 (T5). El tratamiento cinco consistió en la aplicación de 60 µL de aceite de



3.6.4. Manejo del experimento.

a) Insectos (Población de gorgojos del maíz).

La población de gorgojos del maíz fue obtenida previamente del cantón El Empalme

(Provincia del Guayas), los insectos fueron criados en una sala acondicionada del

25

Laboratorio de uso básico perteneciente a la Universidad Técnica Estatal de Quevedo

(UTEQ).

b) Tratamiento del maíz para la multiplicación de gorgojos del maíz.

Para la multiplicación de gorgojos del maíz se utilizó maíz libre de insecticida comprado a

granel en el mercado local de la ciudad de Quevedo. El maíz pasó por un proceso de

refrigeración durante una semana para eliminar posibles insectos/ácaros plaga alojados en

los granos. Posterior a la refrigeración, el maíz fue expuesto por 48 horas a temperatura

ambiente 25 ± 2°C para utilizarlo en la cría y multiplicación del gorgojo, así como para los

ensayos de la investigación.

c) Cría y multiplicación de gorgojos de maíz.

Para la cría y multiplicación de los gorgojos del maíz se colocaron grupos de 100 insectos

en envases plásticos de 3l de capacidad provistos de 4 libras de maíz libre de contaminantes

o plagas como mencionado anteriormente (Anexo 15). Los gorgojos fueron criados a una

temperatura aproximada de 27 ± 3°C, humedad relativa de 84% y un fotoperiodo de 12 horas

luz y 12 horas de oscuridad. Los insectos que se usaron en los bioensayos toxicológicos

fueron adultos con edades entre 7 y 21 días (Anexo 16 y 18).

d) Preparación de aceite esencial de menta (M. pulegium) y eucalipto (E.

melliodora).

Para la preparación de los aceites se utilizó la metodología propuesta por (SENA, 2012).

Recepción. Se obtuvo la parte vegetativa de plantas de menta (M. pulegium) y de

eucalipto (E. melliodora) en mercados locales de la ciudad de Santo Domingo y Ambato.

Pre-tratamiento de la materia prima (limpieza). La limpieza de las hojas tanto de las

platas de menta y de eucalipto consistió en separar materiales como polvo, raíces, tallo

y otros.

Maceración: Macerar el material vegetal en un mortero, con alcohol etílico en una

proporción 1:1 donde 100g de materia vegetal en 100 ml de etanol (peso volumen), hasta

que el alcohol se torne de color verde oscuro.

26

Filtrar: Se filtra la maceración en un filtro hecho con tres gasas.

Recuperación: Una vez filtrado se recupera la parte liquida de proceso.

Mezcla: la parte liquida recuperada se mezcla con aceite mineral en una proporción

0,1:100 donde 0,1 de aceite mineral en 100 ml parte liquida recuperada.

Ebullición: Se calentó en un termobloque a 80ºC, hasta que se evapore el etanol (durante

6 horas).

Separación del aceite: una vez fría la preparación se procede a recuperar la parte oleosa,

que es el producto final.

Envasado y Almacenamiento. Los aceites extraídos se los coloca en envases de vidrio

herméticamente sellados.

e) Repelencia de gorgojos de maíz expuestos a papel filtro tratado con

aceites de menta y eucalipto.

Para la evaluación de repelencia de gorgojos del maíz en papel filtro se utilizó la metodología

propuesta por (Tapondjou, 2005). En la presente investigación se usaron discos de papel

filtro de 11 cm de diámetro los cuales fueron pulverizados con un aerógrafo eléctrico en las

concentraciones de 0,078 µL/cm2; 0,16 µL /cm2; 0,31 µL/cm2; 0,63 µL/cm2, utilizando como

solvente metanol. Para el ensayo de repelencia el disco de papel filtro pulverizado se cortaba

por la mitad y se colocaba adherido con cinta transparente a la otra mitad de papel filtro

pulverizado únicamente con metanol (control), (Anexo 20).

Las diferentes soluciones con las concentraciones establecidas fueron aplicadas con la ayuda

de una micro pipeta calibrada de forma uniforme.

Tanto el área tratada con metanol (control) como la mitad del papel filtro tratada con aceite

esencial se dejaron secar a temperatura ambiente por cinco minutos con el objetivo de dejar

evaporar el solvente, para facilitar la adherencia en el fondo de recipientes plásticos

transparentes de medio litro. Los discos tratados se los adhirió al fondo del recipiente plástico

utilizando goma en barra (Descamps, 2008).

En el centro de cada recipiente, fueron colocados 10 insectos adultos con edades entre 7 y

21 días criados bajo condiciones controladas y se tapó el recipiente plástico. Se realizaron

cinco repeticiones para cada concentración y cada aceite (menta y eucalipto).

27

f) Repelencia de gorgojos de maíz expuestos a granos de maíz tratado con


Para la evaluación de repelencia de gorgojos del maíz expuestos a granos de maíz tratado

con aceites de menta y eucalipto se utilizó el método de área de preferencia descrito por

Tapondjou, (2005). En este experimento se utilizaron bandejas plásticas de 22 cm de largo

y 13,5 cm de ancho con orificios realizados manualmente en la tapa (Anexo 17).

El aceite esencial de menta o eucalipto fue pulverizado con un aerógrafo eléctrico en grupos

de 100 gramos de maíz en las siguientes concentraciones de 0,075 µL/g; 0,15 µL /g; 0,3

µL/g; 0,6 µL/g y utilizando como solvente el metanol. Cada bandeja plástica contenía 50

gramos de maíz tratado con el aceite esencial a diferentes concentraciones a un extremo y

50 gramos de maíz tratado con metanol en el otro extremo (Anexo 19).

En el centro de la bandeja, fueron colocados 10 insectos adultos con edades entre 7 y 21 días

criados bajo condiciones controladas y se tapó el recipiente. Se realizaron cinco repeticiones

por cada concentración y cada aceite (menta y eucalipto).

g) Mortalidad de gorgojos de maíz expuestos a papel filtro tratado con


Para el desarrollo del experimento de mortalidad de gorgojos expuestos a papel filtro tratado

con aceites esenciales de menta y eucalipto se pulverizó discos de 11 cm de diámetro de

papel filtro en las siguientes concentraciones: 0,078 µL/cm2; 0,16 µL/cm2; 0,31 µL/cm2;

0,63 µL/cm2, además se utilizó como control discos de papel filtro utilizando metanol. En

cada papel filtro se utilizó 1000 µL de la solución que le correspondía (Anexo 21).

Posteriormente, el papel filtro se dejó secar a temperatura ambiente por 5 minutos con el

objeto de evaporar el solvente, para luego ser adheridos en el fondo de recipientes plásticos

de medio litro con goma en barra. En el centro de cada recipiente, fueron colocados 10

insectos adultos con edades entre 7 y 21 días criados bajo condiciones controladas. Se

realizaron cinco repeticiones por cada concentración y aceite (menta y eucalipto).

28

h) Mortalidad de gorgojos de maíz expuestos a granos de maíz tratados

con aceites de menta y eucalipto.

Para la evaluación de mortalidad de gorgojos de maíz expuestos a granos de maíz tratado

con aceites de menta y eucalipto se utilizó grupos de 100 g de maíz en el cual el aceite

esencial de menta o eucalipto fue pulverizado con un aerógrafo eléctrico en las siguientes

concentraciones: 0,075 µL/g; 0,15 µL /g; 0,3 µL/g; 0,6 µL/g, además se utilizó como control

maíz tratado con metanol como control. En cada grupo de 100 gramos se aplicó 1000 µL de

la solución que le correspondía (Anexo 22).

En el centro de cada recipiente, fueron colocados 10 insectos adultos con edades entre 7 y

21 días criados bajo condiciones controladas. Se realizaron cinco repeticiones por cada

concentración y aceite (menta y eucalipto).

3.6.5. Registro de datos y forma de evaluación.

a) Repelencia de gorgojos de maíz expuestos a papel filtro y granos de maíz tratado


Porcentaje de insectos repelidos

Para verificar el porcentaje de insectos repelidos se contabilizó el número de insectos

presentes en el área del disco de papel filtro o granos de maíz tratados con metanol (control)

después de un periodo de tiempo de 1, 2 y 3 horas. Los resultados fueron expresados en

porcentaje de insectos repelidos (%).

b) Mortalidad de gorgojos de maíz expuestos a papel filtro y granos de maíz tratado


Porcentaje de insectos muertos

Para verificar el porcentaje de insectos muertos se contabilizó el número de insectos muertos

que fueron expuestos a papel filtro tratado con aceites (menta y eucalipto) y el tratamiento

control por un periodo de 96 horas. En cuanto al porcentaje de insectos muertos en granos

29

de maíz se realizó el mismo procedimiento, sin embargo, el tiempo de evaluación fue mayor

(720 horas). Los resultados fueron expresados en porcentaje de insectos muertos (%).

Análisis de sobrevivencia y tiempo letal medio (TL50)

Para realizar el análisis de sobrevivencia y tiempo letal medio (TL50) se utilizaron 50

insectos por cada tratamiento (concentración) en donde se evaluó el número de insectos

muertos por un periodo de tiempo establecido, inicialmente se evaluó cada hora durante las

primeras 6 horas, posteriormente cada 6 y finalmente cada 12 horas hasta cumplir 96 horas

de evaluación para el ensayo con papel filtro y hasta 720 horas para el ensayo en donde se

utilizó granos de maíz. Todos los datos fueron organizados en una tabla de Excel

categorizando a los insectos nominalmente y señalando a los insectos muertos con el número

0 y los insectos vivos con el número 1.

Concentración letal media (CL50)

Para realizar el análisis de concentración letal media se utilizaron los datos de la mortalidad

total de insectos por tratamiento y su transformación a porcentaje. El procedimiento descrito

anteriormente se realizó para los insectos expuestos a papel filtro y a granos de maíz tratados

con los aceites de menta y eucalipto. Los datos fueron tabulados y organizados en una tabla

de Excel.

3.7. Tratamiento de los datos.

Los supuestos de normalidad y heterogeneidad fueron verificados en todos los datos

obtenidos de los experimentos usando los tests de Bartlett’s y Shapiro–Wilk’s

respectivamente.

Los datos de número de insectos repelidos (insectos ubicados en área tratada con metanol)

fueron transformados a porcentaje en cada uno de los tratamientos tanto para el experimento

con papel filtro como para el experimento con granos de maíz, posteriormente fueron

analizados con la prueba no paramétricas de Kruskal-Wallis en donde se verificó las

diferencias estadísticas entre los tratamientos. Las medias de los porcentajes de insectos

30

repelidos y el error típico fueron utilizadas para expresar los resultados por concentración y

horas de evaluación (1, 2, 3 horas).

El número de insectos muertos expuestos a papel filtro o maíz tratado a diferentes

concentraciones de aceite de menta y eucalipto fueron analizados con la prueba no

paramétricas de Kruskal-Wallis en donde se verificó las diferencias estadísticas entre los

tratamientos. Los datos de número de insectos muertos fueron transformados a porcentaje

en cada uno de los tratamientos tanto para el experimento con papel filtro como para el

experimento con granos de maíz en diferentes concentraciones para realizar un análisis

descriptivo.

Los resultados de sobrevivencia fueron sometidos al análisis de sobrevivencia de Kaplan

Meier para obtener las curvas de sobrevivencia y el tiempo letal medio (TL50). Las

similitudes generales entre las curvas obtenidas fueron sujetas a la prueba de X2 Log-Rank

(P<0.05) y para las comparaciones por pares se usó el método de Holm-Sidak’s (P<0.05).

Los datos de mortalidad fueron utilizados para determinar la Concentración letal media

(CL50) y estos fueron sometidos al análisis Probit.

Para realizar los análisis estadísticos de las diferentes variables se utilizaron los programas

R studio e infostat, así como herramientas estadísticas proporcionadas por Microsoft Excel.

31

3.8. Recursos y materiales

Materiales

Envases plásticos de 3lt.

Tela organza

Material genético (gorgojo de maíz)

Recipientes de medio litro

transparentes

Bandejas plásticas

Colador de aluminio

Aceites esenciales (menta y eucalipto)

Metanol

Guantes desechables

Papel filtro

Maíz (reproducción y ensayos)

Aguja

Material vegetal (menta y eucalipto)

Etanol

Aceite mineral

Herramientas

Tijera.

Equipos

Pulverizador (Aerógrafo marca

Truper).

Pipetas.

Puntas.

Mechero de alcohol.

Vasos de precipitación

Mortero

Termobloque

Pistilo

Termómetro

Bureta

Insumos de oficina

Cuadernos

Lapiceros

Goma en barra

Computadora

Cinta adhesiva transparente.

32

CAPITULO IV

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

33

4.1. Resultados.

4.1.1. Repelencia de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro

tratado con aceites de menta (M. pulegium).

Los resultados de repelencia de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro

tratado con aceites de menta (M. pulegium) son presentados como el promedio del porcentaje

de repelencia ± error estándar (X±SE). Los datos fueron obtenidos después de que los

gorgojos estuvieron expuestos durante periodos de tiempo de 1, 2 y 3 horas (Anexo 2). El

número de insectos en el área tratada con aceite de menta en diferentes concentraciones

fueron comparadas con el número de insectos encontrados en el área del control.


tratado con aceites de menta (M. pulegium). Los resultados son presentados como la media

± error estándar de cuatro concentraciones.

Medias del porcentaje de repelencia (%) ± SEa

Hora/Concentración 0,078 µl/cm² 0,16 µl/cm² 0,31 µl/cm² 0,63 µl/cm²

1 46 ± 9,27 a 52 ± 8,60 a 66 ± 5,09 a 48 ± 11,58 a

2 44 ± 6,78 a 50 ± 7,07 a 64 ± 8,72 a 58 ± 8,60 a

3 50 ± 11,40 a 46 ± 6,78 a 64 ± 9,27 a 48 ± 8,00 a

a Medias con letras iguales no representan diferencias significativas según el test de Kruskal-

Wallis (P=0,05).

De acuerdo a los resultados obtenidos no se encontraron diferencias estadísticas entre los

tratamientos en ninguna de las tres horas en las que los gorgojos fueron evaluados, , sin

embargo se observa una diferencia numérica en el tratamiento 3 en el que utilizó la

concentración 0,31 µl/cm² en cada una de las horas de exposición ( hora 1: 66% de

repelencia, hora 2: 64% de repelencia y hora 3: 64% repelencia), los valores son superiores

comparados con los otros tratamientos durante las tres horas de evaluación.

4.1.2. Mortalidad de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro

tratado con aceite esencial de menta (M. pulegium).

Una vez realizada la prueba de Kruskal Wallis (Anexo 6), se observó que el porcentaje de

mortalidad de los gorgojos de maíz evaluados en papel filtro pulverizado con diferentes

34

concentraciones de aceite de menta no presentaron diferencias estadísticas entre los

tratamientos, (H= 4,7, df= 4; P = 0,2997).

Figura 1.Porcentaje de mortalidad de S. zeamais expuestos a papel filtro tratado con aceite

esencial de menta (M. pulegium).

4.1.3. Curvas de sobrevivencia de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos

a papel filtro tratado con aceite esencial de menta (M. pulegium).

El análisis de sobrevivencia realizado muestra que, existe diferencia estadísticamente

significativa entre los tratamientos en donde los gorgojos de maíz fueron expuestos a

diferentes concentraciones de aceite de menta (M. pulegium) en papel filtro (Log-rank test:

X2= 11,011, df = 4, P= 0,026). De acuerdo al método de Holm-Sidak (Anexo 9), solo fue

posible detectar diferencias significativas entre el tratamiento 1 (control) en el cual no se

aplicó ninguna concentración de aceite de menta y el tratamiento 4 con la concentración 0,31

µl/cm²). El aceite esencial de menta en las concentraciones utilizadas interfiere en la

sobrevivencia de los gorgojos del maíz.

46 72 68 74 620

10

20

30

40

50

60

70

80

90

0,000µl/cm² 0,078µl/cm² 0,16µl/cm² 0,31µl/cm² 0,63 µl/cm²

PO

RC

ENTA

JE D

E M

OR

TALI

DA

D

CONCENTRACIÓN

Porcentaje de Mortalidad

35

Figura 2. Curvas de sobrevivencia de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro

tratado con aceite esencial de menta (M. pulegium) en diferentes concentraciones.

4.1.4. Tiempo letal medio de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a

papel filtro tratado con aceite esencial de menta (M. pulegium).

El tiempo letal medio (TL50) de los gorgojos de maíz expuestos a papel filtro tratado con

diferentes concentraciones de aceite de menta (M. pulegium) se muestran a continuación:

TL50 en la concentración: 0,078 µl/cm²= 84 horas; TL50 en la concentración 0,16 µl/cm²=

84 horas; TL50 en la concentración: 0,31 µl/cm² =72 horas TL50 en la concentración 0,63

µl/cm² =84 horas. No se encontraron diferencias significativas entre los tratamientos

(P>0,05).

4.1.5. Concentración letal media (CL50) de gorgojos de maíz (S. zeamais)

expuestos a papel filtro tratado con aceite esencial de menta (M. pulegium).

Basado en la periodicidad de la mortalidad de los gorgojos de maíz expuestos a papel filtro

tratado con aceite esencial de menta (M. pulegium) fue calculada la ecuación para expresar

36

la línea de regresión con las concentraciones en estudio. La línea de regresión marcada en el

Anexo 11 está basada en la concentración de aceite y mortalidad de los gorgojos de maíz, la

línea mostró una correlación negativa y los valores probit obtenidos varían de 5,31 a 5,64

µl/cm². El cálculo de la concentración letal media (CL50) del aceite de menta (M. pulegium)

en donde gorgojos del maíz fueron expuestos a papel filtro tratado fue de 42,66 µl/cm².

4.1.6. Repelencia de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro

tratado con aceites de eucalipto (E. melliodora).

Los resultados de repelencia de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro

tratado con aceites de eucalipto (E. melliodora) son presentados como el promedio del

porcentaje de repelencia ± error estándar (X±SE). Los datos fueron obtenidos después de

que los gorgojos estuvieron expuestos durante periodos de tiempo de 1, 2 y 3 horas (Anexo

1). El número de insectos en el área tratada con aceite de eucalipto en diferentes

concentraciones fueron comparadas con el número de insectos encontrados en el área del

control.


tratado con aceites de eucalipto (E. melliodora). Los resultados son presentados como la

media ± error estándar de cuatro concentraciones.


Hora/Concentración 0,078 µl/cm² 0,16 µl/cm² 0,31 µl/cm² 0,63 µl/cm²

1 68 ± 3,74 a 52 ± 9,70 a 42 ± 6,63 a 58 ± 8,60 a

2 60 ± 7,07 a 60 ± 11,40 a 50 ± 3,16 a 70 ± 12,65 a

3 48 ± 9,70 a 48 ± 10,19 a 58 ± 10,19 a 64 ± 10,20 a


Wallis (P=0,05).


tratamientos en ninguna de las tres horas en las que los gorgojos fueron evaluados, sin

embargo, se observa una diferencia numérica en el tratamiento 4 en el que utilizó la

concentración 0,63 µl/cm² en la hora 2 en donde se obtuvo el mayor porcentaje de repelencia

(70%).

37

4.1.7. Mortalidad de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro

tratado con aceites de eucalipto (E. melliodora).

Una vez realizada la prueba de Kruskal Wallis (Anexo 5), se muestra que hay significancia

estadística, los tratamientos T1, T2 y T3 son estadísticamente superiores a los demás

tratamientos obteniendo el porcentaje de mortalidad más alto del ensayo, (H= 9,83, df= 4; P

= 0,0393).

Figura 3. Porcentaje de mortalidad de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro

tratado con aceite esencial de eucalipto (E. melliodora).

4.1.8. Curvas de sobrevivencia de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos

a papel filtro tratado con aceites de eucalipto (E. melliodora).

El análisis de sobrevivencia realizado muestra que, existe diferencia estadísticamente

significativa entre los tratamientos en donde los gorgojos de maíz fueron expuestos a

diferentes concentraciones de aceite de eucalipto (E. melliodora) en papel filtro (Log-rank

test: X2= 24,542, df = 4, P= <0,001). De acuerdo al método de Holm-Sidak (Anexo 10). El

tratamiento 1 (control) en el cual no se aplicó ninguna concentración de aceite de eucalipto

difiere significativamente del tratamiento 4 (0,31µl/cm²) así como también con el

tratamiento 5 (0,63 µl/cm²), de la misma manera fue posible detectar diferencias entre los

tratamientos 3 (0,16 µl/cm²) y el tratamiento 4 (0,31 µl/cm²). El resto de tratamientos y sus

combinaciones no difieren estadísticamente. El aceite esencial de menta en las

30 42 50 72 640

10

20

30

40

50

60

70

80

0,000µl/cm² 0,078µl/cm² 0,16µl/cm² 0,31µl/cm² 0,63 µl/cm²

PO

RC

ENTA

JE D

E M

OR

TALI

DA

D

CONCENTRACIONES


38

concentraciones utilizadas interfiere en la sobrevivencia de los gorgojos de maíz, al menos

en las concentraciones: (0,16 µl/cm²; 0,63 µl/cm²; 0,31 µl/cm²).

Figura 4. Curvas de sobrevivencia del gorgojo de maíz (S. zeamais) expuestos a papel filtro

tratado con aceite esencial de eucalipto (E. melliodora) en diferentes concentraciones.

4.1.9. Tiempo letal medio gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a papel

filtro tratado con aceites de eucalipto (E. melliodora).

De acuerdo al análisis realizado para verificar el tiempo letal medio (TL50) obtenido de los

insectos expuestos a diferentes concentraciones de aceite de eucalipto (E. melliodora) se

consiguió determinar que en la concentración 0.16 µl/cm² el (TL50) = 96 horas; la

concentración 0,31 µl/cm² el (TL50) = 84 horas, y en la concentración 0,63 µl/cm² el (TL50)

= 84 horas de exposición.

4.1.10. Concentración letal media (CL50) gorgojos del maíz (S. zeamais)

expuestos a papel filtro tratado con aceites de eucalipto (E. melliodora).

Basado en la periodicidad de la mortalidad de los gorgojos de maíz expuestos a papel filtro

tratado con aceite esencial de eucalipto (E. melliodora) fue calculada la ecuación para

39

expresar la línea de regresión con las concentraciones en estudio. La línea de regresión

marcada en el Anexo 12 está basada en la concentración de aceite y mortalidad de los

gorgojos de maíz, la línea mostró una correlación positiva y los valores probit obtenidos

varían de 4,8 a 5,58 µl/cm². El cálculo de la concentración letal media (CL50) del aceite de

eucalipto (E. melliodora) en donde gorgojos del maíz fueron expuestos a papel filtro tratado

fue de 0,13 µl/cm².

4.1.11. Repelencia de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a granos de

maíz tratados con aceite esencial de menta (M. pulegium).

Los resultados de repelencia de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a granos de maíz

tratado con aceites de menta (M. pulegium) son presentados como el promedio del porcentaje

de repelencia ± error estándar (X±SE). Los datos fueron obtenidos después de que los

gorgojos estuvieron expuestos durante periodos de tiempo de 1, 2 y 3 horas (Anexo 4). El

número de insectos en el área tratada con aceite de menta en diferentes concentraciones

fueron comparadas con el número de insectos encontrados en el área del control.


maíz tratados con aceites de menta (M. pulegium). Los resultados son presentados como la

media ± error estándar de cuatro concentraciones.


Wallis (P=0,05).




concentración 0,075 µl/g en la hora 3 en donde se obtuvo el mayor porcentaje de repelencia

(64%).


Hora/Concentración 0,075 µl/g 54 ± 6,00 a 0,3 µl/g 0,6 µl/g

1 48 ± 8 a 50 ± 8,94 a 52 ± 3,74 a 42 ± 4,50 a

2 60 ± 4,47 a 60 ± 4,47 a 46 ± 9,27 a 37,5 ± 8,54 a

3 64 ± 4,00 a 54 ± 6,00 a 57,5 ± 7,5 a 46 ± 6,78 a

40

4.1.12. Mortalidad de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a granos de


Realizando el análisis con la prueba de Kruskal Wallis (Anexo 8), se observó que el

porcentaje de mortalidad de los gorgojos de maíz evaluados en granos de maíz pulverizados

con diferentes concentraciones de aceite de menta no presentaron diferencias estadísticas

entre los tratamientos, (H= 0,67; df= 4; P = 0,9482).



4.1.13. Curvas de sobrevivencia de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos

a granos de maíz tratados con aceite esencial de menta (M. pulegium).

Los resultados obtenidos mostraron que de acuerdo al análisis, el rango logarítmico

estadístico para las curvas de sobrevivencia no es lo suficientemente bueno como para

excluir la posibilidad de que la diferencia se deba a la variabilidad del muestreo aleatorio.No

se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre los tratamientos (P = 0,972).

14 10 12 12 160

2

4

6

8

10

12

14

16

18

20

0,000µl/g 0,075µl/g 0,15µl/g 0,3µl/g 0,6 µl/g

PO

RC

ENTA

JE D

E M

OR

TALI

DA

D

CONCENTRACIONES


41


maíz tratados con aceite esencial de menta (M. pulegium) en diferentes concentraciones.


granos de maíz tratados con aceite esencial de menta (M. pulegium).

No se consiguió determinar el tiempo letal medio (TL50) en ninguna de las concentraciones

del aceite esencial de menta (M. pulegium) a las que fueron sometidos los gorgojos del maíz

(S. zeamais) porque los individuos en estudio no alcanzaron el 50% de mortalidad.


expuestos a granos de maíz tratados con aceite esencial de menta (M.

pulegium).

Basado en la periodicidad de la mortalidad de los gorgojos de maíz expuestos a granos de

maíz tratados con aceite esencial de menta (M. pulegium) fue calculada la ecuación para


42



varían de 3,72 a 4,01 µl/g. El cálculo de la concentración letal media (CL50) del aceite de

menta (M. pulegium) en donde gorgojos del maíz fueron expuestos a granos de maíz tratados

fue de 2238,72 µl/g.

4.1.16. Repelencia de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a granos de

maíz tratados con aceite esencial de eucalipto (E. melliodora).

Los resultados de repelencia de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a granos de maíz

tratado con aceites de eucalipto (E. melliodora) son presentados como el promedio del

porcentaje de repelencia ± error estándar (X±SE). Los datos fueron obtenidos después de

que los gorgojos estuvieron expuestos durante periodos de tiempo de 1, 2 y 3 horas (Anexo

3). El número de insectos en el área tratada con aceite de eucalipto en diferentes

concentraciones fueron comparadas con el número de insectos encontrados en el área del

control.


maíz tratados con aceites de eucalipto (E. melliodora). Los resultados son presentados como

la media ± error estándar de cuatro concentraciones.


Hora/Concentración 0,075 µl/g 0,15 µl/g 0,3 µl/g 0,6 µl/g

1 72 ± 7,35 a 74 ± 8,12 a 58 ± 4,90 a 50 ± 7,07 a

2 74 ± 7,48 a 76 ± 6,78 a 54 ± 8,12 a 52 ± 5,83 a

3 74 ± 5,10 a 74 ± 6,78 a 60±7,07 a 64 ± 6,78 a


Wallis (P=0,05).




concentración 0,15 µl/g en la hora 2 en donde se obtuvo el mayor porcentaje de repelencia

(76%).

43

4.1.17. Mortalidad de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos a granos de


Los análisis realizados con la prueba de Kruskal Wallis (Anexo 7), mostraron que el

porcentaje de mortalidad de los gorgojos de maíz evaluados en granos de maíz pulverizados

con diferentes concentraciones de aceite de eucalipto no presentaron diferencias estadísticas

entre los tratamientos, (H= 1,62; df= 4; P= 0,7755).



4.1.18. Curvas de sobrevivencia de gorgojos de maíz (S. zeamais) expuestos

a granos de maíz tratados con aceite esencial de eucalipto (E. melliodora).

Los análisis evidenciaron que el rango logarítmico estadístico para las curvas de

sobrevivencia no es lo suficientemente grande como para excluir la posibilidad de que la

diferencia se deba a la variabilidad del muestreo aleatorio. No se encontraron diferencias

estadísticamente significativas entre los tratamientos (P = 0,909).

14 12 8 14 140

2

4

6

8

10

12

14

16

18

0,000µl/g 0,075µl/g 0,15µl/g 0,3µl/g 0,6 µl/g

PO

RC

ENTA

JE D

E M

OR

TALI

DA

D

CONCENTRACIONES


44


maíz tratados con aceite esencial de eucalipto (E. melliodora) en diferentes concentraciones.


granos de maíz tratados con aceite esencial de eucalipto (E. melliodora).

No fue posible determinar el tiempo letal medio (TL50) en ninguna de las concentraciones

del aceite esencial de eucalipto (E. melliodora) a las que fueron sometidos los gorgojos del

maíz (S. zeamais), porque los individuos en estudio no alcanzaron el 50% de mortalidad.


expuestos a granos de maíz tratados con aceite esencial de eucalipto (E.

melliodora).

Basado en la periodicidad de la mortalidad de los gorgojos de maíz expuestos a granos de

maíz tratados con aceite esencial de eucalipto (E. melliodora) fue calculada la ecuación para


45



varían de 3,59 a 3,92 µl/g. El cálculo de la concentración letal media (CL50) del aceite de

eucalipto (E. melliodora) en donde gorgojos del maíz fueron expuestos a granos de maíz

tratados fue de 10000µl/g.

46

4.2. Discusión.

En el bioensayo en el que se utilizó aceite de menta (M. pulegium) pulverizado sobre papel

filtro, se observó que la concentración que tuvo un mayor porcentaje de repelencia fue la de

0,31 µl/cm² durante la primera hora con un 66%. En cuanto al efecto del aceite de menta en

S. zeamais expuesto a granos de maíz, la concentración de 0,075 µl/g en la tercera hora se

observó un 64% de repelencia.

Los resultados sobre los efectos de repelencia de aceite de menta han sido descritos

anteriormente por Granados (2016), en donde confirma la actividad repelente de M.

pulegium para un control alternativo del gorgojo de maíz. Probablemente el efecto

insecticida de menta sobre los gorgojos del maíz se debe a la presencia de moléculas

aromáticas presentes en la planta tales como pulegona, 1-mentona, d-isomentona, piperitona,

piperitenona, isopiperitenona. Además, han sido identificados alcoholes (mentol, 3- octanol,

linalol, isomentol, neomentol, neoisomentol); ésteres, como el acetato de mentilo, e

hidrocarburos (alfa y beta-pineno, limoneno, p-cimeno, dipenteno, canfeno) (Batllori, 1990).

En lo que respecta a los efectos del aceite esencial de menta sobre la mortalidad del gorgojo

del maíz expuestos a papel filtro y a granos de maíz tratados, no se encontraron diferencias

en las concentraciones utilizadas, aunque se observó la mayor mortalidad de los gorgojos de

maíz expuestos a papel filtro con la concentración de 0,31 µl/cm² (74%) y expuestos a maíz

con la concentración 0,6 µl/g (16%); resultados que difieren con el estudio realizados por

Lamiri (2001), en donde se obtuvieron diferencias significativas entre los tratamientos, sin

embargo, las concentraciones utilizadas por este autor fueron diferentes a las que se

utilizaron en el presente estudio. La concentración recomendada por Lamiri (2001) para

causar la mayor mortalidad con aceite de menta fue una dosis de 5 µl (concentración de

0,088 µl/cm2) y 10 µl (concentración de 0,18 µl/cm2) para causar el 50% de mortalidad, pero,

las dosis de aceites esenciales usados por Lamiri (2001) no fueron diluidos en un solvente

tal como fue realizado en el presente trabajo en el cual el aceite esencial fue mezclado con

metanol.

Utilizando el aceite esencial de menta (M. pulegium) pulverizado sobre papel filtro fue

posible diferenciar los tiempos letales medios (TL50) utilizando diferentes concentraciones,

47

donde el mejor tiempo fue obtenido en la concentración 0,31 µl/cm² con 72 horas. No fue

posible determinar el tiempo letal en los ensayos realizados en granos de maíz porque no se

evidenció mortalidad suficiente para efectuar los análisis.

La concentración letal media (CL50) de los gorgojos de maíz expuestos a aceite de menta

pulverizado sobre papel filtro fue de 42,66 µl/cm² y expuestos a maíz tratado fue de 2238.72

µl/g. Estos valores difieren de Lamiri (2001), en donde muestra que la concentración letal

media utilizando papel filtro fue una dosis de 5 µl con una concentración de 0,088 µl/cm2.

Es posible evidenciar en este experimento que se requiere una menor concentración del

aceite esencial al utilizarlo en papel filtro comparado con la utilizada sobre los granos de

maíz. La concentración requerida para causar mayor mortalidad de los gorgojos de maíz

sobre los granos tratados fue mayor, posiblemente por una característica morfológicas de los

granos de maíz, ya que el pericarpio de la semilla de maíz es impermeable impidiendo la

absorción del aceite en el grano de maíz por un tiempo mayor (UNAM, 2013), situación que

no se observa al pulverizar el aceite esencial directamente sobre el papel filtro en el cual

aparentemente la eficiencia del aceite es mayor.

En el ensayo en los que se utilizó aceite de eucalipto (E. melliodora) pulverizado sobre papel

filtro, fue posible observar que en la segunda hora la concentración de 0,63 µl/cm² obtuvo el

mayor porcentaje de repelencia (70%) y en granos de maíz pulverizados con este mismo

aceite se observó que a con la segunda hora la concentración de 0,15 µl/g se obtuvo el mayor

porcentaje (76%). Estos resultados indican que el aceite de eucalipto tiene efectos repelentes

sobre S. zeamais, coincidiendo con Russo (2013), en donde también confirma la actividad

repelente del eucalipto sobre gorgojo de maíz, inclusive recomienda su uso como método de

prevención para evitar los daños de esta plaga.

El mayor porcentaje de mortalidad obtenido en el presente estudio fue de 72% para la

concentración 0,31 µl/cm², estos resultados difieren con las obtenidas por Lamiri (2001), en

donde se alcanzó mortalidades de 63% con una dosis de 20 µl correspondiente a la

concentración 0,35 µl/cm2. Diferencias significativas en la mortalidad de gorgojos del maíz

fueron posibles evidenciar únicamente en este experimento (pulverización de eucalipto sobre

papel filtro), además se observó que este aceite producía un efecto de knockdown (noqueo)

en los gorgojos de maíz (S. zeamais), efecto que es muy común cuando los insectos están

48

expuestos a residuos de productos insecticidas químicos como la deltametrina (Palomino,

2007).

El efecto de noqueo ha sido relatado antes por Palomino (2007) en donde se definió también

como el efecto de volteo (knockdown) como la incapacidad que tiene un insecto de caminar

normalmente, aunque puede parecer que está vivo.

El comportamiento de noqueo observado en gorgojos de maíz tratados con aceite de

eucalipto puede ser considerado como un aspecto interesante dentro del control de esta plaga,

pero, son necesarias nuevas investigaciones para evidenciar su aplicación.

Al utilizar el aceite esencial de eucalipto (E. melliodora) pulverizado sobre papel filtro fue

posible evidenciar los tiempos letales medios de las concentraciones en estudio (TL50).

Donde se observó que las concentraciones 0,31 µl/cm² y 0,63 µl/cm² presentaron 84 horas

con TL50. Para este ensayo al igual que en el aceite de menta tampoco fue posible determinar

el tiempo letal de los gorgojos expuestos a granos de maíz tratado porque no se evidenció

mortalidad suficiente para realizar los análisis.

El aceite tanto de menta como de eucalipto se volatilizan mucho más rápido cuando está en

contacto con los granos de maíz, estos resultados difieren de lo mencionado por Lacouture

(2004), donde el aceite esencial de eucalipto evaluado en granos de maíz en dosis de 3, 6 y

10 cc por kilogramo de semillas obtuvo un 100% de eficacia sobre S. zeamais.

La concentración letal media (CL50) del aceite de eucalipto pulverizado sobre papel filtro

fue de 0,13 µl/cm² y al ser expuestos a maíz tratado la CL50 fue de 10000µl/g. Los resultados

obtenidos muestran que se requiere concentraciones y cantidades altas para que el aceite

esencial sea eficiente en el control de los gorgojos de maíz tal como lo confirma Lamiri

(2001), donde usa una dosis de 20 µl correspondiente a la concentración 0,35 µl/cm2, además

que las dosis usadas por mencionado autor no implican una mezcla del aceite esencial con

un solvente, es decir es mucho más efectivo si se usa el aceite esencial como único

ingrediente insecticida.

49

Según Fiori (1963), señala que algunos aceites minerales y vegetales interfieren en el

proceso respiratorio normal de los insectos además la volatilidad de los aceites minerales y

vegetales debe ser tan baja que su persistencia larga lo suficiente para interferir con el

intercambio respiratorio de gases por un periodo de 24 horas, siendo esta condición letal.

Entre los dos aceites evaluados (menta y eucalipto), el aceite de eucalipto mostró mejores

características para repeler y controlar al gorgojo de maíz, probablemente debido a que este

aceite según lo señalado por Fond Quer (1962) provoca dificultades respiratorias en los

insectos.

Es posible que el aceite de eucalipto ocasionara asfixia total o parcial en los adultos de S.

zeamais, causando mayor mortalidad y repelencia de los insectos; esta afirmación podría

explicar el efecto knockdown que se observó en los adultos de gorgojo de maíz tratados con

este aceite.

Existen variedad de productos químicos para el control de plagas en granos almacenados,

pero, los daños que provocan en el ambiente y en la salud del hombre son invaluables por

este motivo es necesario buscar nuevas alternativas de control eficientes y amigables con el

medio ambiente. El uso de aceites esenciales ha demostrado tener una buena eficacia contra

el control de diversas plagas incluyendo el gorgojo del maíz (Lacouture, 2004).

Aunque no se evidenciaron diferencias entre los tratamientos en estudio en donde se evaluó

el efecto de mortalidad del gorgojo del maíz expuestos a diferentes concentraciones de aceite

de menta y eucalipto tanto en papel filtro como en maíz, fue posible observar que, el aceite

de menta y eucalipto tienen efectos repelentes contra S. zeamais lo que sugiere que existe

potencial de uso de estos aceites para el manejo de esta plaga, sin embargo estudios

adicionales que muestren su aplicabilidad son necesarios.

50

CAPITULO V

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

51

5.1. Conclusiones.

La concentración letal media (CL50) de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a aceite

de menta (M. pulegium) en los ensayos en papel filtro fue de, 42,66 µl/cm² y en los

ensayos en granos de maíz fue de, 2238.72 µl/g.

La concentración letal media (CL50) de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a aceite

de eucalipto (E. melliodora) en los ensayos en papel filtro fue de, 0,13 µl/cm² y en los

ensayos en granos de maíz fue de, 10000µl/g.

Fue posible verificar el efecto repelente de los aceites esenciales de menta (M. pulegium)

y eucalipto (E. melliodora) en gorgojos del maíz (S. zeamais) tratados en papel filtro y

granos de maíz, sin embargo, no existieron diferencias entre las concentraciones

utilizadas y el tiempo de evaluación.

El tiempo letal medio (TL50) de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a diferentes

concentraciones de aceite de menta (M. pulegium) en los ensayos en papel filtro depende

de la concentración utilizada (concentración: 0,078 µl/cm²= 84 horas; concentración:

0,16 µl/cm²= 84 horas; concentración: 0,31 µl/cm² =72 horas; concentración: 0,63 µl/cm²

=84 horas).

El tiempo letal medio (TL50) de gorgojos del maíz (S. zeamais) expuestos a diferentes

concentraciones de aceite de eucalipto (E. melliodora) en los ensayos en papel filtro

depende de la concentración utilizada (concentración: 0,16 µl/cm²= 96 horas;

concentración: 0,31 µl/cm² =84 horas; concentración: 0,63 µl/cm² =84 horas).

No se encontraron diferencias en los ensayos de mortalidad de S. zeamais al utilizar

aceites de menta y eucalipto, sin embargo, efectos de repelencia fueron observados

especialmente con aceite de eucalipto; lo que sugiere que el uso de este aceite esencial

podría ser considerado dentro de las alternativas para el manejo del gorgojo de maíz.

52

5.2. Recomendaciones.

Se recomienda evaluar el efecto insecticida de aceites esenciales de menta y eucalipto

para el control de S. zeamais utilizando otros métodos de obtención de aceites en el

laboratorio (ej. Hidrodestilación).

Para los ensayos de repelencia se recomienda secar el papel filtro en una campana

extractora de gases; el papel filtro se secaría en menor tiempo y los experimentos serían

más eficientes conservando por mayor tiempo las propiedades repelentes de los aceites.

Aumentar la concentración de los aceites esenciales de menta (M. pulegium) y de

eucalipto (E. melliodora) para causar mayor repelencia y mortalidad del gorgojo de maíz

(S. zeamais).

Durante los ensayos en donde se realice pulverizaciones de aceites esenciales sobre

granos de maíz se recomienda aplicar previamente sobre los granos un coadyuvante que

permita mantener el efecto insecticida del aceite esencial.

El uso de aceites esenciales puede convertirse en una alternativa para el manejo del

gorgojo del maíz (S. zeamais); aunque, nuevos estudios utilizando aceites con mayor

pureza y con concentraciones más altas son necesarias para cumplir con este objetivo.

53

CAPÍTULO VI

BIBLIOGRAFIA

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6.1. Citas Bibliográficas.

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60

CAPITULO VII

ANEXOS

61

7.1. Anexos.

Anexo 1.Tablas de Kruskal-Wallis del porcentaje de repelencia en los ensayos con

exposición al aceite de eucalipto (E. melliodora) en papel filtro, en la hora 1, 2 y

3 frente a gorgojo de maíz (S. zeamais).

% Repelencia Eucalipto en papel filtro hora 2

Tratamiento Concentración Medias D.E. Medianas H P

T1 0,078 µl/cm² 60,00 15,81 60,00 2,20 0,5172

T2 0,16 µl/cm² 60,00 25,50 60,00

T3 0,31 µl/cm² 50,00 7,07 50,00

T4 0,63 µl/cm² 70,00 28,28 60,00



T1 0,078 µl/cm² 48,00 21,68 60,00 2,21 0,5178

T2 0,16 µl/cm² 48,00 22,80 60,00

T3 0,31 µl/cm² 58,00 22,80 50,00

T4 0,63 µl/cm² 64,00 23,02 60,00



T1 0,078 µl/cm² 68,00 8,37 70,00 5,03 0,1595

T2 0,16 µl/cm² 52,00 21,68 40,00

T3 0,31 µl/cm² 42,00 14,83 40,00

T4 0,63 µl/cm² 58,00 19,24 60,00

62


exposición al aceite de menta (M. pulegium) en papel filtro, en la hora 1, 2 y 3

frente a gorgojo de maíz (S. zeamais).

% Repelencia Menta en papel filtro hora 1


T1 0,078 µl/cm² 67,50 25,00 80,00 4,19 0,3695

T2 0,16 µl/cm² 45,00 17,32 50,00

T3 0,31 µl/cm² 57,00 12,58 60,00

T4 0,63 µl/cm² 50,00 24,49 55,00



T1 0,078 µl/cm² 44,00 15,17 40,00 3,41 0,3189

T2 0,16 µl/cm² 50,00 15,81 50,00

T3 0,31 µl/cm² 64,00 19,49 70,00

T4 0,63 µl/cm² 58,00 19,24 60,00



T1 0,078 µl/cm² 50,00 25,50 60,00 2,73 0,4204

T2 0,16 µl/cm² 46,00 46,00 40,00

T3 0,31 µl/cm² 64,00 64,00 70,00

T4 0,63 µl/cm² 48,00 48,00 50,00

63


exposición al aceite de eucalipto (E. melliodora) en granos de maíz, en la hora

1, 2 y 3 frente a gorgojo de maíz (S. zeamais).

% Repelencia Eucalipto en granos de maíz hora 1


T1 0,075 µl/gr 72,00 16,43 80,00 5,86 0,1070

T2 0,15µl/gr 74,00 18,17 80,00

T3 0,3 µl/gr 58,00 10,95 50,00

T4 0,6 µl/gr 50,00 15,81 50,00



T1 0,075 µl/gr 74,00 16,73 70,00 7,27 0,0567

T2 0,15 µl/gr 76,00 15,17 80,00

T3 0,3 µl/gr 54,00 18,17 50,00

T4 0,6 µl/gr 52,00 13,04 50,00



T1 0,075 µl/gr 74,00 11,40 70,00 3,13 0,3553

T2 0,15 µl/gr 74,00 15,17 70,00

T3 0,3 µl/gr 60,00 15,81 60,00

T4 0,6 µl/gr 64,00 15,17 60,00

64


exposición al aceite de menta (M. pulegium) en granos de maíz, en la hora 1, 2

y 3 frente a gorgojo de maíz (S. zeamais).

% Repelencia Menta en granos de maíz hora 1


T1 0,075 µl/gr 48,00 17,89 50,00 2,27 0,4798

T2 0,15 µl/gr 54,00 13,42 60,00

T3 0,3 µl/gr 52,00 8,37 50,00

T4 0,6 µl/gr 42,00 10,95 40,00



T1 0,075 µl/gr 60,00 10,00 60,00 3,75 0,2761

T2 0,15 µl/gr 50,00 20,00 40,00

T3 0,3 µl/gr 46,00 20,74 50,00

T4 0,6 µl/gr 37,50 17,08 35,00



T1 0,075 µl/gr 64,00 8,94 70,00 4,09 0,2102

T2 0,15 µl/gr 60,00 10,00 60,00

T3 0,3 µl/gr 57,50 15,00 60,00

T4 0,6 µl/gr 46,00 15,17 40,00

65


eucalipto (E. melliodora) en papel filtro frente a gorgojo de maíz (S. zeamais).

% mortalidad del aceite esencial de eucalipto en papel filtro


T1 0,000 µl/cm² 3,00 1,73 2,00 9,83 0,0393

T2 0,078 µl/cm² 4,20 0,84 4,00

T3 0,16 µl/cm² 5,00 2,74 5,00

T4 0,31 µl/cm² 7,20 1,79 7,00

T5 0,63 µl/cm² 6,40 2,51 5,00


(M. pulegium) en papel filtro frente a gorgojo de maíz (S. zeamais).

% mortalidad del aceite esencial de menta en papel filtro


T1 0,000 µl/cm² 4,60 2,19 3,00 4,77 0,2997

T2 0,078 µl/cm² 7,20 2,17 8,00

T3 0,16 µl/cm² 6,80 2,17 7,00

T4 0,31 µl/cm² 7,40 2,41 8,00

T5 0,63 µl/cm² 6,20 2,59 5,00

66


eucalipto (E. melliodora) en granos de maíz frente a gorgojo de maíz (S. zeamais).

% mortalidad del aceite esencial de eucalipto en granos de maíz


T1 0,000 µl/gr 1,40 0,89 2,00 1,62 0,7755

T2 0,075 µl/gr 1,20 0,84 1,00

T3 0,15 µl/gr 0,80 0,45 1,00

T4 0,3 µl/gr 1,40 1,52 1,00

T5 0,6 µl/gr 1,40 0,89 2,00


(M. pulegium) en granos de maíz frente a gorgojo de maíz (S. zeamais).

% mortalidad del aceite esencial de menta en granos de maíz


T1 0,000 µl/gr 1,40 1,14 1,00 0,67 0,9482

T2 0,075 µl/gr 1,00 0,00 1,00

T3 0,15 µl/gr 1,20 1,30 1,00

T4 0,3 µl/gr 1,20 0.84 1,00

T5 0,6 µl/gr 1,60 1,34 1,00

67


de curvas de sobrevivencia. En insectos expuestos a papel filtro tratado con aceite

esencial de menta (M. pulegium).

Comparisons Statistic P Value Significant

0,000 vs. 3,000 10,287 0,0133 Yes

0,000 vs. 1,000 7,436 0,0561 No

0,000 vs. 2,000 6,561 0,0804 No

0,000 vs. 4,000 4,267 0,242 No

3,000 vs. 4,000 0,837 0,932 No

1,000 vs. 4,000 0,342 0,983 No

2,000 vs. 3,000 0,316 0,967 No

1,000 vs. 3,000 0,188 0,962 No

2,000 vs. 4,000 0,143 0,913 No


de curvas de sobrevivencia. En insectos expuestos a papel filtro tratado con aceite

esencial de eucalipto (E. melliodora).

Comparisons Statistic P Value Significant?

0,000 vs. 3,000 20,217 0,0000691 Yes

0,000 vs. 4,000 13,055 0,00272 Yes

2,000 vs. 3,000 7,755 0,0421 Yes

1,000 vs. 3,000 7,194 0,0501 No

0,000 vs. 2,000 3,695 0,286 No

1,000 vs. 4,000 3,633 0,253 No

2,000 vs. 4,000 3,361 0,241 No

0,000 vs. 1,000 2,335 0,334 No

3,000 vs. 4,000 0,743 0,626 No

68


menta (M. pulegium), en ensayos en papel filtro para el control de gorgojo de

maíz (S. zeamais).


eucalipto (E. melliodora), ensayos en papel filtro para el control del gorgojo de

maíz (S. zeamais).

69

Anexo 13. Líneas de regresión probit, del log de la concentración (µl/g) del aceite de menta

(M. pulegium), ensayos en granos de maíz para el control del gorgojo de maíz

(S. zeamais).

Anexo 14. Líneas de regresión probit, del log de la concentración (µl/g) del aceite de

eucalipto (E. melliodora), ensayos en granos de maíz para el control del gorgojo

de maíz (S. zeamais).

70

Anexo 15. Cría y reproducción de S. zeamais.

Anexo 16. Separación de los insectos de las cámaras de reproducción.

71

Anexo 17. Envases para los ensayos.

Anexo 18. Preparación de soluciones con aceites esenciales.

72

Anexo 19. Montaje de los ensayos de repelencia en granos de maíz.

Anexo 20. Montaje de los ensayos de repelencia en papel filtro.

73

Anexo 21. Montaje de los ensayos de mortalidad en papel filtro.

Anexo 22. Montaje de los ensayos de mortalidad en granos de maíz.

74

Anexo 23. Gorgojos de maíz (S. zeamais) utilizados en los ensayos.

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