Verificacion de Equipo Hematologico Scielo

8/17/2019 Verificacion de Equipo Hematologico Scielo

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cta bioquí m. clí n. latinoam. vol.48 no.1 La Plata mar. 2014

HEMATOLOGÍA

Estudio de eficiencia y sensibilidad de alarmas de dosanalizadores hematológicos en un hospital peditrico!

Study of efficiency and sensitivity of alarms of two hematology analyzersin a pediatric hospital

Estudo de eficiência e sensibilidade o alarmes de dois analisadores dehematologia em um hospital pediátrico

"i#iana Osta$% &elia 'egura$% Gladys Tissera$% &laudia Ayuso$

Sección Hemocitología. Laboratorio Central. Hospital de Niños Dr. Ricardo Gutiérrez. Gallo!!". #$%&' Ciudad (utónoma de )uenos (ires* (rgentina

(esumen

Con el ob+eti,o de me+orar el -lu+o de traba+o en el Laboratorio de Hemocitología se e,aluó eldesempeño analítico / e-iciencia del sistema de alarmas de dos contadores 0ematológicos de1ltima generación* Coulter LH2&" / (bbott C3LD4N Rub/* para la resolución de muestraspatológicas en una población de pacientes pedi5tricos* considerando como método dere-erencia la re,isión microscópica / la realización del recuento di-erencial leucocitario en -ormamanual de los e6tendidos de sangre peri-érica. Se procesaron 27 muestras seleccionadas dela carga de traba+o diario del Laboratorio en ambos contadores* se analizaron los reportesemitidos / se realizó el di-erencial manual. Se encontró una e6celente concordancia entre losdos instrumentos para el recuento de leucocitos* eritrocitos* 0emoglobina* 8C9 / pla:uetas* /entre el di-erencial manual / el reportado por ambos e:uipos. La e-iciencia de las alarmas enambos analizadores -ue similar* 22; para C3LLD4N Rub/ / 2*!; para LH2&". La tasa de

-alsos negati,os -ue de !*$; / $*"; respecti,amente. La tasa de -alsos positi,os en ambose:uipos -ue 2;. Se puede concluir :ue los analizadores e,aluados presentan un desempeñocomparable. Cada laboratorio debe considerar las características de la población de pacientes:ue recibe para establecer criterios estrictos / sistem5ticos para la re,isión del -rotis.

)alabras cla#e* contadores 0ematológicos < alarmas < e-iciencia < re,isión microscópica

'ummary

The goal of the hematology laboratory is to improve workflow efficiency by optimizinginstrument results and flagging sensitivity with its daily manual blood smears requirements. Twohematology analyzers (Coulter LH!" and C#L$%&' uby )bbott* were evaluated to determine

analytical performance and efficiency in daily work at the Central Laboratory of a +ediatricHospital. ,icroscopic revision was considered the reference method. ) total of - pathological blood samples randomly selected from ambulatory and in$patients were analyzed in both


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analyzers. )n e/cellent correlation between both instruments for leukocytes0 erythrocytes0hemoglobin0 ,C1 and platelet count was observed2 also close agreement of results betweenmanual differential and automated count. The efficiency of alarms triggered by the automatedhematology analyzer was similar. Total efficiency of Cell$%yn uby was 3 and -.43 in theLH!". The false negative rate was 4.53 and 5."3 for the LH!" and uby respectively. Thefalse positive rate was -3 for both instruments. 6t can be concluded that the two analyzers

tested have a comparable analytical performance and each clinical laboratory must consider thecharacteristics of their population in order to establish critical and systematic criteria for manualmicroscopic review.

Key words: hematology analyzers 2 flags 2 efficiency2 microscopic review

(esumo

) fim de melhorar o flu/o de trabalho no Laborat7rio de Hematologia avaliou$se o desempenhoanal8tico e a eficiencia do sistema de alarmes dos dois contadores de hematologia de 9ltimagerag:o0 Coulter LH!" e )bott C#L$%&' uby0 para a resolug:o de amostras patol;gicasnuma populag:o de pacientes pediatricos. Considerou$se como m


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error m5s importante es el estadístico debido a :ue est5 in,ariablementerelacionado al n1mero total de células analizadas / es particularmenteimportante en el caso del recuento de ciertas poblaciones celulares como losmonocitos / basó-ilos. 3ste tipo de error estadístico de muestreo implicaesencialmente :ue los límites de con-ianza para el porcenta+e obser,ado de

cual:uiera de las poblaciones leucocitarias est5n directamente relacionadoscon el n1mero de células contadas #'#%'.

Di-erentes publicaciones con-irman :ue* cuando las muestras de sangreperi-érica no presentan alteraciones signi-icati,as en ninguna de las tres series0ematológicas* el desempeño analítico de la ma/oría de los contadores0ematológicos es altamente satis-actorio con di-erencias mínimas entre losdistintos instrumentos #'#!'#$'. Los par5metros tales como el recuento deleucocitos / 0ematíes* la concentración de 0emoglobina* o el ,olumencorpuscular medio #8C9'* presentan por lo general un desempeño analíticoe6celente* en tanto :ue otros par5metros* en particular ciertos componentes del

di-erencial leucocitario* reticulocitos o el recuento de pla:uetas* especialmentea ba+as concentraciones* e,idencian un desempeño menos satis-actorio #&'. 3lrecuento de basó-ilos es el :ue presenta la ma/or imprecisión e ine6actituddebido a :ue los contadores autom5ticos tienden a subestimar el recuento enpresencia de una baso-ilia ,erdadera* / en algunos casos suelen arro+ar unrecuento de basó-ilos ele,ado como resultado de arte-actos producidos por lapresencia de células anormales como blastos* células plasm5ticas o células dellin-oma #?7'.

(dem5s de los par5metros tradicionales del recuento celular / del recuentodi-erencial leucocitario* los analizadores pro,een una serie de alarmaso flags cualitati,as. 3stas alarmas pueden indicar la presencia de células :uenormalmente no se encuentran en el -rotis de sangre peri-érica como blastos*lin-ocitos reacti,os* células granulocíticas inmaduras #G@s' o glóbulos ro+osnucleados #GRN'* / también pueden ser generadas por inter-erencias analíticasdebidas a la presencia de partículas :ue inter-ieren en el recuento autom5ticode las células sanguíneas* o por problemas técnicos* lo :ue conduce a lanecesidad de la re,isión manual del -rotis. Si bien estas alarmas son 1tiles* con-recuencia no son lo su-icientemente sensibles* resultando en -alsos negati,os*o pueden clasi-icar en -orma errónea ciertos tipos celulares resultando en -alsospositi,os. 3sto 0ace :ue continuamente se per-eccionen las tecnologías para

me+orar el sistema de alarmas* aumentando su sensibilidad / especi-icidad*disminu/endo así el n1mero de -rotis :ue deben ser re,isadosmicroscópicamente* con el ob+eti,o de me+orar el -lu+o de traba+o / el tiempo derespuesta de los resultados #A'.

3ntre las alarmas :ue se presentan con ma/or -recuencia en la tarea diaria /:ue re:uieren la re,isión del -rotis de sangre peri-érica se encuentra lapresencia de G@s. 3stas células est5n aumentadas en condiciones tales comoin-ecciones bacterianas* en-ermedades in-lamatorias agudas* c5ncer#particularmente con met5stasis en médula ósea'* necrosis tisular* rec0azoagudo de trasplante* cirugía / trauma ortopédico* en-ermedades

mieloproli-erati,as* uso de esteroides* / en el embarazo #-undamentalmentedurante el tercer trimestre'. 3n estos casos* el aumento de G@s est5


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acompañado generalmente por un aumento de neutró-ilos* :ue son liberadosdel pool marginal / de la médula ósea. Sin embargo* en algunas circunstancias*especialmente en la ,e+ez* neonatos / pacientes mielosuprimidos* el aumentode neutró-ilos puede estar ausente /* en condiciones tales como la sepsis*puede detectarse neutropenia. 3n estas situaciones* el aumento de G@s #B%;'*

a1n en -orma aislada* puede ser 1til para identi-icar una in-ección nosospec0ada #"'#'.

tro aspecto a tener en cuenta* -undamentalmente en pacientes pedi5tricos* esel recuento de eritroblastos. 3ste presenta las limitaciones típicas en laimprecisión e ine6actitud del recuento de una población de células poco-recuentes cuando se realiza el recuento total de células nucleadas. Sucorrecta enumeración es clínicamente importante /a :ue en la ma/oría de lassituaciones indican un desorden en la eritropo/esis o una eritropo/esis deestrés #%'#!'.

3n algunos laboratorios el recuento de GRN se realiza sólo ante la solicitudmédica en situaciones clínicas especí-icas o cuando aparece una alarma en elrecuento automatizado. 3n la actualidad ! de los analizadores de 1ltimageneración #(bbott Sapp0ire* )ecman Coulter LH 2&" / Siemens (D8@( %%"'realizan el recuento de GRN en -orma predeterminada en todas las muestrasen las cuales se realiza el recuento di-erencial leucocitario. 3n otrosanalizadores* la determinación de este par5metro debe ser especialmenteprogramada.

Los resultados publicados sobre el recuento autom5tico de eritroblastosmuestran un e6celente desempeño en términos de imprecisión #C8E";' eine6actitud* aun cuando esta 1ltima es e,aluada en base a la comparación conla microscopia o citometría de -lu+o con anticuerpos monoclonales* mostrandocoe-icientes de correlación entre "*A" / "*AA #%' #$2'. Los límites dedetección* dependiendo del e:uipo utilizado ,arían entre / % GRNF""leucocitos. Ha/ :ue tener en cuenta :ue en a:uellos analizadores :ue norealizan el recuento de GRN en -orma predeterminada con el recuentodi-erencial leucocitario* cuando aparece la alarma de GRN se estaríasobrestimando el recuento total de leucocitos / se estaría tambiénsobrestimando el recuento de lin-ocitos* /a :ue la ma/oría de los contadoresinclu/en los GRN en -orma total o parcial dentro de la población de lin-ocitos.

=or lo tanto* en estos casos se debe 0acer la corrección del recuento deleucocitos de acuerdo al n1mero de eritroblastos contados al realizar elrecuento di-erencial leucocitario en -orma manual siguiendo lasrecomendaciones publicadas por el Conse+o @nternacional para la3standarización en Hematología / el CLS@ #protocolo H%"(%' #7'#A'.

3l recuento de GRN es luego e6presado como el n1mero presente por cada"" leucocitos / el recuento de leucocitos es subsecuentemente a+ustadomatem5ticamente.

tra alteración :ue puede conducir a una re,isión microscópica del -rotis es la

pseudotrombocitopenia inducida por 3D(. 3n estos casos se obtiene unrecuento -alsamente disminuido de pla:uetas* :ue se debería a la


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aglutinación in vitro por anticuerpos de tipo @gG* @g9 o @g( dirigidos contra lasglicoproteínas @@bF@@@a de las pla:uetas #%"'#%'. 3n un estudio pre,io #%%'realizado en este laboratorio sobre !%&$ muestras de pacientes pedi5tricosprocesadas* se encontró una pre,alencia de trombocitopenia del &*2;#7?F!%&$'. De éstas* el &$; #"F7?' correspondió a

pseudotrombocitopenias inducidas por 3D( con-irmadas por la re,isión del-rotis / el resto de los casos #7&F7?' correspondió a trombocitopenias,erdaderas.

na alarma :ue siempre debe conducir a la re,isión del -rotis es a:uella :uesugiere la presencia de Icélulas bl5sticasI. Del mismo modo* dependiendo delcontador :ue se esté utilizando / de las características de la población :ueconcurre al laboratorio* la alarma de Ilin-ocitos atípicosI o Ilin-ocitos ,ariantesItambién debe ser una indicación para la obser,ación microscópica dele6tendido* /a :ue esta alarma en algunos casos puede indicar la presencia deblastos.

3l laboratorio central del Hospital de Niños Dr. R. Gutiérrez atiende unapoblación de pacientes pedi5tricos con patologías comple+as* :ue inclu/e tantopacientes internados como ambulatorios. Cabe mencionar :ue* en el caso demuestras pedi5tricas* a la comple+idad propia de la muestra debida a la alta-recuencia de aparición de células granulocíticas inmaduras* GRN / lin-ocitosatípicos o ,ariantes* se suma el pe:ueño ,olumen de muestra del :ue sedispone. Se procesan apro6imadamente &" 0emogramas diarios en los :uese realiza el recuento di-erencial leucocitario manual en el ""; de los -rotis desangre peri-érica. 3sto 0ace :ue constantemente se intente me+orar lae-iciencia del -lu+o de traba+o* analizando minuciosamente los resultadosobtenidos del analizador / la sensibilidad clínica de las alarmas. Resulta por lotanto -undamental :ue cada laboratorio conozca la e-iciencia del sistema dealarmas del contador 0ematológico con :ue cuenta* para agilizar el proceso deobser,ación microscópica de los e6tendidos.

3l ob+eti,o de este estudio -ue comparar la e-iciencia del contador 0ematológicoLH2&" con la de un e:uipo de características similares como el CellD/n Rub/.=ara ello se e,aluó>

. la concordancia entre los instrumentos*

%. la e-icacia en la resolución de muestras patológicas #sensibilidad /especi-icidad clínicas de las alarmas' con respecto a la obser,aciónmicroscópica del e6tendido de sangre peri-érica* determinando así el n1merode re,isiones innecesarias en cada uno de los instrumentos :ue podríanredundar en una me+ora en el tiempo de respuesta de los resultados.

Materiales y M,todos

3l contador LH2&" #)ecman Coulter* 9iami* JL' utiliza el método de impedancia para elrecuento de glóbulos blancos* ro+os / pla:uetas* absorción espectro-otométrica #&%& nm' parala determinación de 0emoglobina / la tecnología 8CS ,olumen* conducti,idad / dispersión de

luz l5ser (scatter* para el recuento celular completo* di-erencial autom5tico de & poblaciones /sus alarmas asociadas.


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3l CellD/n Rub/ #(bbott Diagnostic* Santa Clara* C(' utiliza métodos de detección por l5seróptico en todas las -acetas del an5lisis. 3l recuento de leucocitos / el di-erencial de & subpoblaciones son medidos a tra,és de la tecnología 9(=SS (,ulti )ngle +olarized ?catter?eparation* :ue signi-ica separación mediante dispersión # scatter* lumínico polarizado enm1ltiples 5ngulos / se basa en la dispersión de la luz en cuatro dimensiones. =ara clasi-icar lassubpoblaciones leucocitarias / obtener las alertas mor-ológicas se combinan estas cuatro

mediciones de -orma di,ersa. Los di-erentes detectores #"K amaño< "K Comple+idad< A"K Lobularidad< A"K Despolarizado Granularidad' analizan características especiales de cadaelemento.

3l recuento de glóbulos blancos / el recuento leucocitario di-erencial se pueden procesar en unmodo de lisis e6tendida / de recuento óptico de células nucleadas #NC' para a:uellasmuestras :ue pueden mostrar inter-erencias por glóbulos ro+os resistentes a la lisis. =ara elan5lisis de los eritrocitos / pla:uetas se utiliza la detección óptica de la dispersión de luz cones-erización de los glóbulos ro+os e,itando de esa manera ,ariaciones en la medición deacuerdo a la posición en :ue la célula ingresa al sistema. =ara la medición de 0emoglobinautiliza absorción espectro-otométrica #L3D a &&& nm'.

(mbos analizadores -ueron calibrados pre,iamente al estudio de acuerdo a las

recomendaciones del -abricante. 3l programa de control de calidad inclu/ó la e,aluación de !ni,eles del control de calidad interno pro,isto por los respecti,os -abricantes :ue se procesarondiariamente / una muestra :uincenal de un control de calidad e6terno internacional #R@(S'.

Se e,aluaron 27 muestras de pacientes pedi5tricos* internados / ambulatorios* seleccionadasde la carga de traba+o diaria del laboratorio* :ue -ue representati,a de la población de pacientes:ue se atienden regularmente en el Hospital. 3l estudio se desarrolló durante un período de $días / se siguieron las recomendaciones del CLS@ guía H%"(% #A'. Las muestras recogidasen tubos con 3D(Mg #*! mL ,olumen -inal'* :ue presentaban un ,olumen residual su-iciente*-ueron procesadas en los dos analizadores dentro de las $ 0oras posteriores a la e6tracción*para e,itar los e-ectos del en,e+ecimiento de la muestra sobre los resultados / con menos de %0oras de di-erencia entre las corridas en ambos e:uipos. Siempre -ueron procesadas en primer

lugar en el contador LH2&".

3l an5lisis estadístico se realizó con el programa 3= 3,aluator So-tare* #Data @nno,ations*Sout0 )urlington* 8* 33.'. La concordancia se e,aluó a tra,és del coe-iciente decorrelación de =earson solamente en a:uellos par5metros :ue son directamente medidos /calibrados #recuento de leucocitos* 0ematíes / pla:uetas* 0emoglobina / 8C9'* e6clu/endo deeste an5lisis a a:uellos índices calculados :ue se pueden ,er a-ectados por los errores demedición :ue presentan los par5metros de los cuales deri,an. Se consideró signi-icati,o un,alor de pE"*"&. La e-iciencia clínica -ue e,aluada en base a los resultados de sensibilidad /especi-icidad clínicas obtenidos en el primer procesamiento de cada muestra en ambose:uipos.

Se realizaron / colorearon con 9a/ GrunaldGiemsa dos e6tendidos de todas las muestras

e,aluadas* :ue -ueron luego re,isados por dos obser,adores e6perimentados* :ue contaron%"" elementos en cada -rotis. =ara obtener el recuento leucocitario di-erencial de re-erencia sepromediaron ambos recuentos. 3n los casos en :ue se detectó un recuento discrepante :uee6cedía el inter,alo de con-ianza del A&; alrededor de la línea de identidad para alguno de lostipos celulares entre los obser,adores* un tercer obser,ador realizó un recuento de %""elementos :ue se promedió con el recuento original concordante. Los obser,adores nocontaban con el reporte de los e:uipos para no in-luenciar la obser,ación.

Se consideraron patológicas a:uellas muestras en las cuales se detectó al menos de lossiguientes criterios #modi-icados del6nternational Consensus @roup for Hema$tologyeview* #%!'>

B&; de neutró-ilos en ca/ado

B%; metamielocitos


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B; promielocitosFmielocitos

B; blastos

B&; lin-ocitos reacti,os

B; glóbulos ro+os nucleados

=la:uetopeniaE&"6"!FmL

3n este estudio no se consideraron positi,as a:uellas muestras con alarmas Ide-initi,asI #pore+emplo lin-ocitosis o microcitosis' /a :ue éstas dependen de los límites de normalidadde-inidos en el e:uipo por el -abricante. 3stos límites no tienen en cuenta las ,ariacionespropias de la edad :ue presentan los par5metros del 0emograma durante la edad pedi5trica.

=ara e,aluar el recuento de glóbulos ro+os nucleados se tomó como método de re-erencia elrecuento manual en %"" elementos.

=ara ,eri-icar la e6actitud del recuento automatizado de pla:uetas se utilizó el método de Joniomodi-icado :ue consiste en contar el n1mero de pla:uetas cada """ 0ematíes a partir del-rotis de sangre peri-érica* / luego re-erirlo al n1mero total de eritrocitos.

(esultados

Los coe-icientes de correlación mostraron una -uerte concordancia entre ambose:uipos* para leucocitos rO"*AA?* eritrocitos rO"*AA!* 0emoglobina rO"*AA&*8C9 rO"*A2& / rO"*A2A para pla:uetas. Los coe-icientes de correlación también-ueron altamente signi-icati,os entre el recuento leucocitario di-erencial manual/ ambos e:uipos* siendo respecti,amente para LH2&" / Rub/ de "*AA& / "*A""

para el porcenta+e de neutró-ilos* "*A%$ / "*A! para el porcenta+e de lin-ocitos*/ "*A%" / "*A& para el porcenta+e de eosinó-ilos. No se encontró correlaciónsigni-icati,a entre el recuento manual para monocitos / basó-ilos con elrecuento automatizado #abla @'.

Tabla +. Coeficientes de correlaci;n para leucocitos0 gl;bulos roAos0 hemoglobina0 volumencorpuscular medio y plaquetas entre ambos equipos0 y para el porcentaAe de neutr;filos0

linfocitos0 eosin;filos0 monocitos y bas;filos0 entre el diferencial manual y los dos equipos.

+ar:metro ,


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=la:uetas LH2&" Rub/ "*A&$ *& "*A2AP

;Neutró-Qlos Di-erencial manual LH2&" *"% "*""? "*A$?P

;Lin-ocitos Di-erencial manual LH2&" "*A2% %*? "*A%$P

;9onocitos Di-erencial manual LH2&" *?" *?$ "*&Aa

;3osinó-ilos Di-erencial manual LH2&" "*A$A "*%2" "*A%"P

;)asó-ilos Di-erencial manual LH2&" ?*%& "*"!A% "*"AA$a

;Neutró-ilos Di-erencial manual Rub/ *"% !*$& "*A""P

;Lin-ocitos Di-erencial manual Rub/ "*A&A "*A&A "*A!P

;9onocitos Di-erencial manual Rub/ %*?$ 2* "*!&a

;3osinó-ilos Di-erencial manual Rub/ "*A2& "*$"? "*A&P

;)asó-ilos Di-erencial manual Rub/ $*%! "*$$2 "*?"a

P p E"*"a p B"*"& #no signi-icati,o'.

De las 27 muestras e,aluadas $% resultaron patológicas durante laobser,ación del -rotis* presentando al menos una alteración en el recuentodi-erencial leucocitario /Fo en el recuento de pla:uetas.

3l analizador LH2&" presentó resultados in,5lidos del di-erencial en el A*?;#2F27' de las muestras analizadas* de-iniendo como in,5lido un reporte en el

cual el analizador no reporta ,alores absolutos o relati,os para las di-erentespoblaciones leucocitarias e in-orma sólo el símbolo I>>>>I o in-orma el recuento


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leucocitario di-erencial con la le/enda I,eri-icar di-erencialI. De estas 2muestras* en no in-ormó el di-erencial / en ? casos lo in-ormó con elmensa+e de I,eri-icar di-erencialI. 3l analizador Rub/ arro+ó el di-erencialleucocitario en todas las muestras* detect5ndose en el %*7; de las muestras#&F27' resultados del recuento di-erencial leucocitario con alg1n tipo de

alarma.

3n el caso del recuento de pla:uetas el analizador LH2&" reportó recuentos-alsamente disminuidos en el *7; #%F27' de las muestras :ue por el -rotispresentaban recuentos de pla:uetas ma/ores a &"6"!F,6L. 3l analizadorRub/ reportó "*2; #AF27' de recuentos no ,5lidos de pla:uetas enmuestras con recuentos superiores a &"6"!F,iL.

=ara e,aluar sensibilidad / especi-icidad clínicas de las alarmas se tu,o encuenta la detección de células granulocíticas inmaduras* la presencia deglóbulos ro+os nucleados* la presencia de lin-ocitos reacti,os / la presencia de

pla:uetopenia. 3n la abla @@ se presentan los -alsos positi,os / -alsosnegati,os para cada una de las alteraciones e,aluadas.

La e-iciencia total del LH2&" #,erdaderos normales ,erdaderos patológicos' 6""Ftotal de muestrasT -ue del 2*!; / para el CellD/n Rub/ -ue de 22*";#abla lll'.

(mbos instrumentos presentaron una tasa aceptable de -alsos negati,os #E&;de acuerdo a las recomendaciones del @CGHR' siendo de !*$; para el LH2&"/ de $*"; para Rub/. Cabe mencionar :ue una muestra con un recuento deleucocitos de 7*&6"!FmL / &; de blastos en el e6tendido no -ue identi-icadapor el Rub/ / -ue señalada con la alarma Binmaduros -B por el LH2&". La tasade -alsos positi,os en ambos e:uipos -ue del 2;. 3n el caso del LH2&" lama/or parte de los -alsos positi,os se debió a la alarma de granulocitosinmaduros / en el caso del Rub/ a la de lin-ocitos ,ariantes #abla @@'.

3n de las 27 muestras e,aluadas se detectó la presencia de eritroblastosen la re,isión microscópica* siendo el rango de a ! GRNF"" leucocitos. Deestas muestras positi,as para GRN el LH2&" detectó 7* mientras el Rub/identi-icó correctamente ? de las muestras. Las muestras :ue no -uerondetectadas presentaron recuentos entre % / $ eritroblastosF"" leucocitos en el

recuento di-erencial manual. =ara determinar la e6actitud del recuento de GRNse compararon los recuentos automatizados con el método manual comométodo de re-erencia. No se encontró correlación signi-icati,a entre el recuentomanual de eritroblastos / el de los analizadores* mientras :ue se encontrósigni-icación estadística en la correlación entre el recuento de eritroblastos dele:uipo LH2&" vs el recuento del contador Rub/ (r O"*2"* pE"*"&'.

-iscusión y &onclusiones

Con la me+ora en el rendimiento de los contadores 0ematológicos* el rol de losanalizadores / de la re,isión microscópica del -rotis 0a ido cambiando. Los

sistemas autom5ticos son superiores en cuanto al recuento de leucocitos*0ematíes* pla:uetas / al recuento di-erencial leucocitario de los tipos celulares

http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572014000100010#tab3http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572014000100010#tab2http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572014000100010#tab3http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572014000100010#tab2


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bien caracterizados #células maduras'* mientras :ue el e6amen microscópicoes superior en la identi-icación de células inmaduras* /a :ue se basa en laobser,ación de di,ersas características citológicas como el patrón de lacromatina* la presencia de nucléolos* inclusiones citoplasm5ticas* etc.

3l recuento leucocitario di-erencial manual sigue siendo el método dere-erencia -rente al cual se debene,aluar los contadores 0ematológicos* /a :uees la 1nica -orma de identi-icar /Fo con-irmar -alsos positi,os / -alsos negati,os.

Tabla ++. esumen de las alteraciones detectadas en la observaci;n microsc;pica de lasmuestras y de la proporci;n de falsos positivos y falsos negativos que resultan del an5lisis de

las alarmas in-ormadas por los analizadores.

,anual

LH!" uby

=alsos positivos

=alsosnegativos

=alsos positivos

=alsosnegativos

=resencia de G@s !2 %% " & &

=resencia de GRN ? ! & $

=la:uetopenia ! % " A "

=resencia de lin-ocitosreacti,os

% ? " %

G@s> Células granulocíticas inmaduras. GRN> Glóbulos ro+os nucleados.

Tabla +++. ?ensibilidad0 especificidad y eficiencia cl8nica de los analizadores Coulter LH!" y

C#L$%&' uby para detectar muestras patol;gicas tomando como m


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9uc0os laboratorios* con el ob+eti,o de optimizar costos / el tiempo de entregade los resultados* tratan de disminuir al m56imo el n1mero de muestras :uedeben ser re,isadas* sin a-ectar la calidad de los resultados ni poner en riesgola seguridad del paciente al in-ormar un resultado erróneo* especialmente los-alsos negati,os. Con el de,enir de los contadores 0ematológicos* la proporción

de muestras de sangre peri-érica :ue re:uieren re,isión microscópica del -rotis0a disminuido notoriamente 0asta ser de solo el "&; en algunos centros.Sin embargo* se puede obser,ar una gran di,ersidad de criterios entrelaboratorios /a :ue también e6isten reportes de una tasa de re,isiónmicroscópica ma/or al &"; #%$'. 3sto podría ser e6plicado solo en parte porlas di-erencias en las características de los pacientes / en el desempeño de losdi-erentes analizadores. 3l consenso publicado por la Sociedad @nternacionalde Laboratorios de Hematología en %""! #%!' -i+a criterios para realizar lare,isión del e6tendido de sangre peri-érica en base a los resultados / alarmas:ue proporcionan los contadores 0ematológicos. 3stas reglas tienen en cuentaadem5s de la edad del paciente* si e6isten di-erencias signi-icati,as con

respecto a resultados pre,ios del mismo. =or lo tanto* es -undamental conocerel desempeño analítico / la e-iciencia clínica del analizador :ue se utiliza* paradeterminar :ué muestras deben ser re,isadas* estableciendo criterios deacción estrictos / sistem5ticos para la re,isión microscópica de los e6tendidos*teniendo en cuenta las características de la población :ue es atendida en cadaLaboratorio. La re,isión del -rotis puede no solo pro,eer in-ormación adicional oidenti-icar alteraciones no detectadas por el analizador* sino :ue es-undamental para con-irmar ciertos resultados reportados por el e:uipo.

36isten contro,ersias en cuanto a la utilidad del recuento de los elementosinmaduros de la progenie mieloide* especialmente de células en banda oca/ados. 9ientras algunos autores consideran :ue es clínicamente 1til para eldiagnóstico de in-ecciones* especialmente de la sepsis neonatal* otros norecomiendan su uso en la pr5ctica clínica diaria debido a :ue* si bien e6iste unade-inición mor-ológica de estas células* la ,ariabilidad interobser,ador es tanalta :ue 0ace :ue este par5metro sea considerado de poca utilidad #%&%2'.tras células inmaduras como los metamielocitos* mielocitos / promielocitos*incluidos en el grupo de G@s* est5n me+or de-inidas mor-ológicamente / dado:ue también se 0a demostrado :ue su aumento es potencialmente 1til para eldiagnóstico de la sepsis neonatal* se los 0a propuesto como una 0erramientaalternati,a al recuento de ca/ados #'. 3studios publicados concuerdan en :ue

el recuento de G@s presenta una alta especi-icidad para la detección dein-ecciones :ue ,a del 7!; al A2;* 0abiéndose reportado una asociaciónsigni-icati,a entre el recuento ele,ado de G@s / la presencia de 0emoculti,ospositi,os. Sin embargo* la ba+a sensibilidad del recuento microscópico de G@s:ue ,a del !&; al $";* sumada a la imprecisión debida en parte a :ue seencuentran en ba+as concentraciones #E";'* 0ace :ue para algunos autoressu recuento no sea considerado como prueba de screening para el diagnósticode un proceso in-eccioso #'#"'.

tro aspecto a tener en cuenta en pediatría es el e-ecto de la presencia deeritroblastos sobre el recuento leucocitario di-erencial.


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Los eritroblastos est5n normalmente presentes a ba+as concentraciones en lose6tendidos de sangre peri-érica del neonato / pueden estar ele,ados en laen-ermedad 0emolítica neonatal* en neonatos prematuros* o en a:uellosa-ectados por 0ipo6ia en el periodo perinatal #%7'#%A'. ambién pueden serdetectados en pacientes adultos en condiciones tales como los síndromes

talasémicos* en-ermedades mieloproli-erati,as como la mielo-ibrosis* en lamet5stasis en médula ósea de tumores sólidos* la 0ematopo/esis e6tramedular / en todas las condiciones :ue impli:uen una eritropo/esis de estrés como enla septicemia* 0emorragia masi,a o 0ipo6ia se,era #7'#!"'. 3n estassituaciones* su presencia se correlaciona con el pronóstico o la se,eridad de laen-ermedad de base. 3l recuento de GRN también puede ser 1til para e,aluarla e-icacia de una trans-usión* como es el caso de los síndromes talasémicosen los cuales es recomendable mantener un recuento de GRN menor a &F""leucocitos #!'. Se 0a reportado también la e6istencia de asociación entre elincremento de la tasa de mortalidad / el aumento del recuento de GRN #!%'#!!'. 3n un estudio realizado en pacientes 0ospitalizados luego de una cirugía

general o cardiotor5cica / otras en-ermedades no 0ematológicas* se registró unincremento en la tasa de mortalidad con el aumento en el recuento de GRN*siendo de %*; en a:uellos pacientes en los :ue se obser,aban GRN en ele6tendido / del *%; para pacientes :ue no presentaban GRN en el e6tendidode sangre peri-érica #!%'.

3l recuento de eritroblastos también tiene ,alor en el paciente trasplantado. Lapersistencia de GRN en el e6tendido de sangre peri-érica en su+etos :ue 0ansido sometidos a un trasplante de células progenitoras 0a demostrado ser un-actor de mal pronóstico* detect5ndose un incremento de la tasa de mortalidadcon el aumento del recuento de GRN* siendo del ""; entre su+etos con unrecuento de GRN ma/or a "*%6"AFL #!$'. 3sto remarca la importancia dedetectar no solamente la presencia de eritroblastos* sino la estimación de surecuento.

Se 0a mencionado :ue la mor-ología 0eterogénea de los eritroblastos puedeconducir a un error signi-icati,o cuando se realiza el recuento de leucocitos conmétodo de impedancia. La presunción de :ue todos los GRN 0a/an sidoincluidos dentro del recuento total de leucocitos puede no ser completamentecierta debido a :ue los GRN de menor tamaño :ue el umbral para leucocitos*podrían no ser incluidos en el recuento. =or lo tanto* la corrección manual del

recuento de leucocitos en -unción del n1mero de GRN obser,ados en lare,isión microscópica podría conducir a un resultado erróneo del recuento deleucocitos debido a :ue se estarían restando elementos :ue no -ueroncontados por el analizador #A'.

Los resultados del presente estudio sugieren :ue los analizadores e,aluados#Coulter LH2&" / CellD/n Rub/ (bbott' presentan desempeños altamenteaceptables para resol,er las muestras patológicas :ue se procesan en elLaboratorio. 3l contador LH2&" mostró una ma/or sensibilidad clínica para ladetección de muestras anormales. =or su parte* el analizador Rub/ mostró unama/or especi-icidad clínica* es decir :ue presentó un ma/or n1mero de

muestras correctamente identi-icadas como patológicas* disminu/endo eln1mero de -alsos positi,os.


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Como ,enta+a del analizador LH2&" se puede mencionar :ue realiza elrecuento total de glóbulos ro+os nucleados en -orma predeterminada +unto conel recuento di-erencial leucocitario* mientras :ue en el Rub/ el recuento deeritroblastos surge como un test re-le+o :ue debe programarse en a:uellasmuestras :ue presentan la alarma de GRN / :ue necesitan por lo tanto ser

identi-icadas / reprocesadas en el modo de lisis e6tendida. 3sto puedeenlentecer el -lu+o de traba+o dependiendo de las características de la poblaciónestudiada. =or otra parte* el analizador Rub/ reporta el recuento de bandas /de células granulocíticas inmaduras mientras :ue el LH2&" solo in-orma laalarma de Iinmaduros Finmaduros %I e inclu/e estas células en el recuento-inal de neutró-ilos.

3n laboratorios donde se atienden pacientes pedi5tricos con patologíascomple+as es particularmente importante la obser,ación microscópica del -rotis:ue contin1a siendo una 0erramienta 1nica en el diagnóstico de patologíasespecí-icas como por e+emplo las leucemias* lin-omas / anemias 0emolíticas.

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Verificacion de Equipo Hematologico Scielo

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