S E N A , C e n t r o P a r a l a
F o r m a c i ó n C a f e t e r a
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Materiales y equipos de laboratorio
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MATERIALES Y EQUIPOS DE LABORATORIO
Presentado Por: Luisa Fernanda Osorno
Diana Lorena Ochoa
José Alejandro Tunubala
Presentado a: Laura Patricia Bermeo
SENA, Regional Caldas
Manizales, Caldas
06/09/2015
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Tabla de contenido
1. ¿Qué es bioseguridad? ........................................................................................ 3
2. ¿Cuáles son las normas básicas de bioseguridad en un laboratorio de
microbiología? ............................................................................................................ 3
3. ¿Cuáles son los equipos utilizados en el laboratorio de microbiología?. ............. 7
4. Materiales de laboratorio e implementos. .......................................................... 11
5. Principales reactivos usados en el laboratorio usos y para qué sirven. ............. 18
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1. ¿Qué es bioseguridad?
La bioseguridad son las prácticas que tienen por objeto eliminar o minimizar el
factor de riesgo que puede llegar a afectar la salud o la vida de las personas o puede
contaminar el ambiente.
2. ¿Cuáles son las normas básicas de bioseguridad en un laboratorio de
microbiología?
Acceso
a) El símbolo y signo internacional de peligro biológico deberá colocarse en las
puertas de los locales donde se manipulen microorganismos del grupo de riesgo
2 o superior.
b) Sólo podrá entrar en las zonas de trabajo del laboratorio el personal autorizado.
c) Las puertas del laboratorio se mantendrán cerradas.
d) No se autorizará ni permitirá la entrada de niños en las zonas de trabajo del
laboratorio.
Protección personal
El personal y los usuarios de los laboratorios deben procurar en el laboratorio.
a) Usar en todo momento trajes, batas o uniformes especiales para el trabajo en el
laboratorio.
b) Se usarán guantes protectores apropiados para todos los procedimientos que
puedan causar contacto directo o accidental con sangre, líquidos corporales y
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otros materiales potencialmente infecciosos. Una vez utilizados, los guantes se
retirarán de forma aséptica y a continuación se lavarán las manos.
c) El personal deberá lavarse las manos después de manipular materiales
infecciosos, así como antes de abandonar las zonas de
trabajo del laboratorio.
d) Se usarán gafas de seguridad, viseras u otros dispositivos
de protección cuando sea necesario proteger los ojos y el
rostro de salpicaduras, impactos y fuentes de radiación
ultravioleta artificial.
e) Estará prohibido usar las prendas protectoras fuera del
laboratorio, por ejemplo en cantinas, cafeterías, oficinas,
bibliotecas, salas para el personal y baños.
f) No se usará calzado sin puntera.
g) En las
zonas de trabajo estará prohibido comer,
beber, fumar, aplicar cosméticos o
manipular lentes de contacto.
h) Estará prohibido almacenar
alimentos o bebidas para consumo
humano en las zonas de trabajo del
laboratorio.
i) La ropa protectora de laboratorio no
se guardará en los mismos armarios o
taquillas que la ropa de calle.
Procedimientos
Por seguridad en los laboratorios todo el personal y los usuarios deben atender las
siguientes recomendaciones:
a) Estará estrictamente prohibido pipetear con la boca.
b) No se colocará ningún material en la
boca ni se pasará la lengua por las
etiquetas.
c) Todos los procedimientos técnicos se
practicarán de manera que se reduzca al
mínimo la formación de aerosoles y
gotículas.
d) Se limitará el uso de jeringuillas y
agujas hipodérmicas, que no se utilizarán en
lugar de dispositivos de pipeteo ni con
ningún fin distinto de las inyecciones por vía parenteral o la aspiración de líquidos
de los animales de laboratorio.
e) Todos los derrames, accidentes y exposiciones reales o potenciales a materiales
infecciosos se comunicarán al supervisor del laboratorio.
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f) Se elaborará y seguirá un procedimiento escrito para la limpieza de todos los
derrames.
g) Los líquidos contaminados deberán descontaminarse (por medios químicos o
físicos) antes de eliminarlos por el colector de saneamiento. Puede ser necesario
un sistema de tratamiento de efluentes, según lo que indique la evaluación de
riesgos del agente con el que se esté trabajando.
h) Los documentos escritos que hayan de salir del laboratorio se protegerán de la
contaminación mientras se encuentren en éste.
Zonas de trabajo del laboratorio
Para evitar incidentes o contaminación del personal, las zonas de trabajo deberán:
a) El laboratorio se mantendrá ordenado, limpio y libre de materiales no
relacionados con el trabajo.
b) Las superficies de trabajo se descontaminarán después de todo derrame de
material potencialmente peligroso y al final de cada jornada de trabajo.
c) Todos los materiales, muestras y cultivos contaminados deberán ser
descontaminados antes de eliminarlos o de limpiarlos para volverlos a utilizar.
d) El embalaje y el transporte de material deberán hacerse de forma cuidadosa y en
recipiente, embalajes adecuados.
e) Las ventanas que puedan abrirse estarán equipadas con rejillas que impidan el
paso de artrópodos.
Gestión de la bioseguridad
Debido a la particularidad que pueden presentar los laboratorios en cuanto los
microorganismos de trabajo, pruebas, equipos, barreras de contención y demás, es
necesario que:
a) El responsable del laboratorio deberá garantizar la elaboración y adopción de un
instructivo de seguridad, el cual debe estar disponible en el laboratorio.
b) El responsable del laboratorio o una persona designada deberá velar por que se
proporcione capacitación periódica en materia de seguridad en el laboratorio
especialmente al personal o usuarios nuevos.
c) Se informará al personal de los riesgos especiales y se le exigirá que lea el
instructivo de seguridad o de trabajo y siga las prácticas y los procedimientos
normalizados. El responsable debe asegurar que todo el personal los comprenda
debidamente.
d) Habrá un programa de lucha contra los artrópodos y los roedores.
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Material de laboratorio
Contar con material seguro en el laboratorio favorece la reducción del riesgo, cuando
se trabaje con agentes biológicos que entrañen peligro. Para elegir el material de
laboratorio habrá que cerciorarse de que responda a los siguientes principios
generales:
a) Que su diseño permita limitar o evitar los
contactos entre el trabajador y el material
infeccioso.
b) Que esté construido con materiales
impermeables a los líquidos, resistentes a la
corrosión y acordes con las normas de
resistencia estructural.
c) Que carezca de rebabas, bordes cortantes y
partes móviles sin proteger.
d) Que esté diseñado, construido e instalado con miras a simplificar su manejo y
conservación, así como a facilitar la limpieza, la descontaminación y las pruebas
de certificación; siempre que se pueda, se evitará el material de vidrio y otro
material rompible.
Material de bioseguridad indispensable
Algunos equipos o materiales son indispensables para el manejo de
microorganismo, dentro de estos materiales están:
a) Dispositivos de pipeteo para evitar que se pipetee con la boca.
b) Cámara de Seguridad Biológica CSB se utilizarán en los siguientes casos:
Siempre que se manipule material infeccioso; ese material puede ser
centrifugado en:
El laboratorio ordinario si se utilizan vasos de centrifugadora con tapas
herméticas de seguridad y si éstos se cargan y descargan en una CSB. Cuando
haya un alto riesgo de infección transmitida por vía aérea.
Cuando se utilicen procedimientos con grandes posibilidades de producir
aerosoles,
como la centrifugación, trituración, homogeneización, agitaciones o mezcla
vigorosa, desintegración ultrasónica, apertura de envases de materiales
infecciosos cuya presión interna pueda diferir de la presión ambiental, inoculación
intranasal a animales y recolección de tejidos infecciosos de animales y huevos.
c) Asas de siembra de plástico desechables. También pueden utilizarse
incineradores eléctricos de asas dentro de la CSB para reducir la formación de
aerosoles.
d) Frascos y tubos con tapón de rosca.
e) Autoclaves u otros medios apropiados para esterilizar el material contaminado
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f) Pipetas de Pasteur de plástico desechables, cuando estén disponibles, en
sustitución del vidrio.
g) Los aparatos como las autoclaves y las CSB deben ser validados con métodos
apropiados antes de usarlos. A intervalos periódicos deben ser nuevamente
verificados, de acuerdo con las instrucciones del fabricante
3. ¿Cuáles son los equipos utilizados en el laboratorio de microbiología?
hacer descripción y fotos.
Mechero de alcohol o ron
Sirve para calentar sustancias con alcohol o ron.
Mechero Bunsen
Todas las manipulaciones deben realizarse
en un radio de 10-15cm de la llama del
mechero (zona aséptica).
En caso de utilizar mechero nunca se debe
coger material por encima de la llama
Antes de comenzar a trabajar se procurará
disponer de todo el material necesario para
el procesamiento de la muestra
Tomar las medidas necesarias para evitar
la contaminación de las muestras o/ y
cultivo por microorganismos ambientales
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Estufa de incubación
Es una cámara de temperatura controlada
para cultivo de microorganismos.
Se utiliza para facilitar el desarrollo de los
microorganismos a su temperatura óptima de
crecimiento (generalmente 35-37º).
Frigorífico o cámaras refrigeradas
Se utilizan para conservar tanto materiales (medios de
cultivo, reactivos) como microorganismos.
Generalmente están a una temperatura fija de 4ºC.
Congeladores
Se utilizan para la conservación de
reactivos y microorganismos a
temperaturas inferiores a 0ºC, llegando a -
80ºC (los más frecuentes son -20º, -40º y -
80º).
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Microscopio óptico
El microscopio se emplea para aumentar o
ampliar las imágenes de objetos y organismos
no visibles a simple vista. Se trata de un
instrumento óptico que contiene una o varias
lentes que permiten obtener una imagen
aumentada del objeto y que funciona por
refracción.
Centrífuga
Aparato que aplica sobre los tubos una fuerza
centrífuga lo que permite la separación de los distintos
componentes de la muestra mediante la precipitación
en el fondo del tubo de las partículas en suspensión.
Cámaras de flujo con sistema de filtros.
Las cabinas de flujo laminar son ampliamente
utilizadas en laboratorios y se utilizan
generalmente para trabajar con cultivos y otras
muestras que requieran un entorno limpio y estéril,
presenta filtros de esta forma el área de trabajo es
barrida constantemente, evitando que se
depositen partículas.
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Balanzas
La balanza es un instrumento que sirve para
medir la masa de los objetos, muestras,
colorantes, componentes de medios de
cultivo etc.
Agitador/ mezclador
Un agitador, a veces llamado mezclador,
es un dispositivo que se utiliza en los
laboratorios a para mezclar líquidos o
preparar disoluciones y suspensiones.
PH-metros
El pH-metro es un sensor utilizado en el método
electroquímico para medir el pH de una disolución.
Autoclave
Es el equipo más utilizado.
Es un procedimiento de esterilización
mediante calor húmedo. Se realiza en al
autoclave durante 15 ó 20 min, según el
volumen, a 115°C ó 121°C, según la
naturaleza del material que se desee
esterilizar.
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Horno de Pasteur
Emplea altas temperaturas (160-180º C) durante
un tiempo prolongado (1.5 a 3 horas). Debido a su
poca capacidad de penetración se usa para
esterilizar vidrio y metales. Actúa principalmente
desnaturalizando las proteínas y secundariamente
oxidando los compuestos celulares.
Contador de colonias
Es un aparato que mediante la iluminación de la placa
y una lupa, nos permite observar con mayor nitidez
las colonias y por tanto facilita su recuento.
4. Materiales de laboratorio e implementos.
Placas de Petri
Recipientes para la preparación de medios de cultivo
sólidos
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Matraz erlenmeyer
Se utiliza para mezclar disoluciones que, durante a mezcla,
hay que agitar para que reaccionen más rápidamente.
Beaker
Son utensilios que permiten calentar sustancias hasta
obtener precipitados.
Balon
Se usa principalmente en los procesos de destilación para
calentar uniformemente muestras.
Fiolas
Es un recipiente de vidrio que se utiliza sobre todo para
contener y medir líquidos, se emplean en operaciones de
análisis químico cuantitativo, para preparar soluciones de
concentraciones definidas.
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Buretas con llave de paso
Es una tuvo largo de vidrio, abierto por su extremo
superior y cuyo extremo inferior, terminado en punta,
está provisto de una llave. Al cerrar o abrir la llave se
impide o se permite, incluso gota a gota, el paso del
liquido. El tubo esta graduado, generalmente, en
decimas de centímetro cubico.
Tubos de ensayo
Los tubos de ensayo son muy indispensables en el
laboratorio, ya que nos permite las preparaciones, como
guardado de cultivos, y podemos encontrar en diversos
modelos.
Pipetas
Son instrumentos para graduar o medir la cantidad de
reactivo para una determinada muestra, existen variedades
de pipetas, y son exactas y confiables para medir.
Laminas porta objetos
Estas láminas, nos permiten utilizarlas para poder
apreciar cultivos, en el microscopio, existen de
diversos tipos, planos, de arrastre, extremo
esmerilado, ondulado para ver muestras o cultivos
vivos.
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Laminas cubre objetos
Estas láminas, cubren a las láminas porta objetos, para
que los cultivos, no puedan ser llevados por animalitos
y causar daño.
Estiletes
Son usados para poner los cultivos a las láminas y ser
observados en el microscopio.
Buretas
Se utilizan para medir a grandes cantidades, y son muy
exactas y confiables para medir líquidos.
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Pipetas automáticas (micropipetas) y puntas de pipeta
Se utilizan para
pipetear pequeñas
cantidades de líquidos.
Se utilizan con puntas
desechables de distinto
tamaño y color según la
micropipeta. Existen cuatro tamaños: de 0,5-2µm; de 2-20 µm; de 20-200 µm y de
200-1000 µm.
Asas acodadas o Asas de Digralsky:
Se utilizan para la extensión de microorganismos sobre la
superficie de un medio de cultivo en placa Petri.
Asas de siembra
Se utilizan para sembrar. Pueden ser metálicas o de
plástico, curvas o rectas (para la siembra por picadura).
Cucharas y espátulas
Se utilizan para pesar muestras o medios de cultivo.
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Pinzas para tubo de ensayo
Permite sujetar tubos de ensayo y si estos se necesitan
calentar, siempre se hace sujetándolos con estas pinzas,
esto evita accidentes como quemaduras.
Gradillas
Una gradilla es una herramienta que forma parte del
material de laboratorio (principalmente en
laboratorios de biología molecular, genética y
química) y es utilizada para sostener y almacenar
gran cantidad de tubos de ensayo.
Tubos de centrifuga
Es un pequeño contenedor cilíndrico de plástico, con un
fondo cónico y típicamente una tapa unida al cuerpo del
tubo para evitar su desprendimiento. Son empleados
profusamente en biología molecular y bioquímica no solo
para la centrifugación, si no que, dado su bajo costo, se
emplean a menudo como simples viales contendores de
sustancias químicas.
Frasco Gotero
Permite contener sustancias, posee un gotero y por esa razón
permite dosificar las sustancias en pequeñas cantidades.
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Soporte universal
Es un utensilio de hierro que permite sostener varios
recipientes
Trípode
Se utilizan para sostener materiales que van a ser sometidos a
calentamiento.
Espátula
Es un utensilio que permite tomar sustancias químicas
evitando que los reactivos se contaminen.
Rejilla
Se utiliza para sostener utensilios que van a someter a
calentamiento ayudando a tener un calentamiento uniforme.
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Papel Kraft
Es un tipo de papel basto y grueso de color marrón, se
suele usar como envoltura.
5. Principales reactivos usados en el laboratorio usos y para qué sirven.
Alcohol acido: El alcohol ácido se emplea para decolorar la fucsina fenicada en las
bacterias:
Gram negativa
Gram positivas
BAAR positivas
BAAR negativas
Alcohol Etílico: obtenido de la destilación de jugo de la caña de azúcar. Se usa
para preparación de colorantes y como desinfectante de áreas de laboratorio
Alcohol Para Mechero: Liquido incoloro sin presencia de partículas suspendidas ni
precipitadas. Muy volátil e inflamable. Se usa en Mecheros de alcohol utilizados en
laboratorio
Fucsina fenicada: Solución Fenicada de fucsina empleada como colorante
primario en la coloración de Ziehl Neelsen. Liquido color fucsia translucido sin
presencia de partículas suspendidas, ni precipitadas.
Fucsina de Gram: Solución de Fucsina básica en metanol y agua con fenol, para la coloración de Gram.
Violeta de Genciana: Solución de Cristal violeta en agua alcohol para la coloración de Gram.
Nigrosina: (Tinción negativa). Se trata de un colorante aniónico, que no penetra en
el interior celular. Proporciona una visión de la forma y el tamaño celulares al
observarse los microorganismos brillantes sobre un fondo oscuro.
Alcohol cetona: El alcohol cetona se emplea para decolorar el cristal violeta en las:
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Gram negativa
Gram positivas
BAAR positivas
BAAR negativas
Rojo de metilo: es un indicador de pH. Actúa entre pH 4,2 y 6,3 variando desde rojo (pH 4,2) a amarillo (pH 6,3). Por lo tanto, permite determinar la formación de ácidos que se producen durante la fermentación de un carbohidrato. Para usos de laboratorio, análisis, investigación y química fina
Lugol de Gram: Solución de yodo yoduro en agua para la coloración de Gram
Azul de Lactofenol: Liquido acuoso de color azul claro traslucido, ligeramente
viscoso. La tinción de Azul de lactofenol se emplea para observar hongos. Es una
tinción simple (un sólo colorante) y como tal está basada en la afinidad del colorante
por componentes de las células, en este caso por las estructuras fúngicas. El azul de
lactofenol tiene tres características que lo hacen especial para observar dichas
estructuras en los hongos del tipo moho obtenidos en los cultivos por aislamiento.
Azul de metileno (Tinción positiva). Permite teñir el interior celular. Tiñe
microorganismos procarióticos (vivos o muertos). Los eucarióticos sólo se tiñen si
están muertos. Algunas estructuras, como los corpúsculos metacromáticos, se tiñen
más intensamente con este colorante que el resto de la célula.
Hidróxido de potasio al 20%: Solución de Hidróxido de Potasio en agua, para el
reconocimiento de hongos
Hidróxido de sodio al 10%: Solución de Hidróxido de Sodio en agua,
para el reconocimiento de hongos.
Buffer de Giordano: Solución amortiguadora del pH para la coloración de Wright.
Liquido incoloro sin presencia de partículas suspendidas, ni precipitadas.
Safranina de Gram: Solución acuosa de Safranina, empleada como colorante
alternativo en la coloración de Gram. Liquido Color rojo sangre sin presencia de
partículas suspendidas, ni precipitadas.
Decolorante de Gram: Mezcla de alcohol acetona en proporción 3:1 para la
coloración de Gram. Líquido inflamable y muy volátil, manéjese con precaución y
utilizando los elementos de seguridad en el laboratorio
Xilol: Mezcla comercial de tres isómeros orto, meta y para xilenos, Se utiliza ampliamente como disolvente.
Agua Amortiguada o Sales Amortiguadoras: Agua tamponada usada en la
coloración de FIELD. El pH de la solución puede variar dentro del rango de 6,7 a 6,9.
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Aplicar dos o tres mililitros a la lámina previamente fijada con la coloración de Gota
Gruesa.
Agua desionizada: Agua desionizada libre de minerales para uso en equipos de
laboratorio o disolvente de reactivos se usa De acuerdo a la técnica de aplicación
propia de cada laboratorio
Azul de Metileno Fosfatado: Solución de Azul de Metileno con pH regulado para la
tinción e identificación de hemoparasitos en una muestra biológica.
Deterlab Alcalino: Detergente líquido biodegradable alcalino para lavado de
material de vidrio de laboratorio. Ph 10 ± 1,0.
Deterlab Neutro: Detergente líquido biodegradable y neutro para lavado de material
de laboratorio con un pH de 7± 0.5.
Solución “A: Solución de Azul de Metileno-Azure B con pH regulado para la
determinación de hemoparasitos. Líquido de color azul intenso.
Solución “B”: Solución de Eosina amarilla hidrosoluble con pH regulado para la
determinación de hemoparasitos. Líquido transparente de color naranja-rojizo.
Bibliografía
BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO, universidad del valle, (Julio 2014)
disponible en:
http://gicuv.univalle.edu.co/documentos/documentos_laboratorios/lab_SI_hacen_ens
ayos/material_consulta/Bioseguridad_Laboratorios_Julio.pdf
Normas de seguridad en el laboratorio de microbiología, acceso (6 de septiembre del
2015), disponible en:
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_normas
_de_bioseguridad.pdf
Microbiología General y Bucal, (6 de septiembre del 2015), disponible en: http://campus.usal.es/~micromed/Practicas_odontologia/unidades/labv/LabMicro/practica1.html
Conocimiento de equipos y materiales de uso frecuente en el laboratorio de microbiología, (6 de septiembre del 2015), disponible en: http://es.slideshare.net/ELVISCHAVARRICHOLAN/conocimiento-de-equipos-y-materiales-de-uso-frecuente-en-el-laboratorio-de-microbiologia
Microbiología y parasitología, universidad católica sato Toribio de Mogrovejo, abril del 2009, disponible en: http://es.slideshare.net/jcustodio91/guia-ii
Laboratorios SAR LTDA, LABSAR, (6 de septiembre del 2015), disponible en: http://www.labsar.com/index.php?option=com_content&view=article&id=62&Itemid=26
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