ESQUEMA SIMPLE, FIABLE Y RENTABLE DE
IDENTIFICACIÓN PARA LEVADURA EN EL
LABORATORIO CLÍNICO
Agar cromogenico
Agar harina de maíz-Tween 80
API353 AISLAMIENT
OS
PROCEDIMIENTOS DE REFERENCIA •Utilizan y los estudios
morfológicos, bioquímicos y temperatura.
•No son viables para el laboratorio clínico.
•Duran varias semanas
SISTEMAS ENVASADOS•Ampliamente utilizados•Son caros•Están limitadas por el
tamaño de sus bases de datos
SISTEMAS AUTOMATIZADOS•Mismas limitaciones
IDENTIFICACION DE ESPECIES
• SE UTILIZÓ EL ASPECTO DE LA COLONIA EN CMA EN COMBINACIÓN CON MORFOLOGÍA EN AGAR HARINA DE MAÍZ-TWEEN 80 Y SE COMPARARON LAS IDENTIFICACIONES CON LOS RESULTADOS OBTENIDOS CON EL SISTEMA DE API 20C AUX O EL SISTEMA API 32C.
MATERIAL Y METODOS
• MEDIOS DE AISLAMIENTO RUTINARIO.• LOS AISLAMIENTOS FUERON SUBCULTIVADOS EN ASD.• SE INCUBARON A 30° C DURANTE 48 H.• SE AJUSTÓ A ESCALA DE MCFARLAND CON UN
ESPECTROFOTÓMETRO.• SE SEMBRÓ EN UNA PLACA DE CMA.• CTA FUE INOCULADA POR EL MÉTODO DE DALMAU • LAS TIRAS DE API SE INTERPRETARON CON EL SOFTWARE DE
IDENTIFICACIÓN.
RESULTADOS
CÁNDIDA ALBICANSCARACTERÍSTICAS DE LA COLONIA EN CMA:
-COLONIAS DE COLOR VERDE; APARIENCIA DISTINTIVA CONSISTENTECARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS EN CTA:
-PRESENTA CLAMIDOSPORAS , ABUNDANTES PSEUDOHIFAS, ALGUNAS HIFAS VERDADERAS, AGRUPACIONES DE BLASTOSPORAS JUNTO A PSEUDOHIFAS LA IDENTIFICACIÓN CON CMA ADEMÁS CTA:-LA IDENTIFICACIÓN ES PRECISA CON AMBOSIDENTIFICACIÓN POR API 20C AUX O EL SISTEMA API 32C:
-UNA CEPA FUE IDENTIFICADA COMO C. PARAPSILOSIS
CÁNDIDA DUBLINIENSIS
CARACTERÍSTICAS DE LA COLONIA EN CMA:
-COLONIAS DE COLOR VERDE OSCURO
CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS EN CTA:
-PRESENCIA DE ABUNDANTES CLAMIDOSPORAS PSEUDOHIFAS, ALGUNAS HIFAS VERDADERAS, LAS AGRUPACIONES DE BLASTOSPORAS JUNTO PSEUDOHIFAS
LA IDENTIFICACIÓN CON CMA ADEMÁS CTA:
- LA IDENTIFICACIÓN ES PRECISA CON AMBOS
IDENTIFICACIÓN POR API 20C AUX O EL SISTEMA API 32C:
- NO SE ENCUENTRA EN LA BASE DE DATOS API, IDENTIFICADO COMO CÁNDIDA SAKE CON BAJO NIVEL DE CONFIANZA
CÁNDIDA TROPICALISCARACTERÍSTICAS DE LA COLONIA EN CMA:
-AZUL OPACO, COLONIAS A VECES COLOR ROSA; TODOS DESARROLLADOS DE HALO PÚRPURA DE PIGMENTO QUE DIFUNDE EN AGAR CIRCUNDANTE; ASPECTO DISTINTIVO
CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS EN CTA:
-PSEUDOHIFAS ABUNDANTE CON FRECUENCIA SE IRRADIA CON RACIMOS DE BLASTOCONIDIOS EN EL CENTRO; ASPECTO VARIABLE
LA IDENTIFICACIÓN CON CMA ADEMÁS CTA:
-LA IDENTIFICACIÓN PRECISA CON CMA
IDENTIFICACIÓN POR API 20C AUX O EL SISTEMA API 32C:
- IDENTIFICA TODAS LAS CEPAS COMO C. TROPICALIS
TRICHOSPORON BEIGELIICARACTERÍSTICAS DE LA COLONIA EN CMA:
-DIMINUTAS COLONIAS DE ÁSPERO, SUCIO AZUL-GRIS DE ASPECTO DISTINTIVO Y SECOCARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS EN CTA:
-PSEUDOMICELIO Y ABUNDANTE MICELIO VERDADERO RUPTURA EN ARTROSPORAS; APARIENCIA DISTINTIVALA IDENTIFICACIÓN CON CMA ADEMÁS CTA:
- IDENTIFICACIÓN PRECISA CON AMBOSIDENTIFICACIÓN POR API 20C AUX O EL SISTEMA API 32C:
- IDENTIFICA TODAS LAS CEPAS COMO T. BEIGELII
CÁNDIDA KRUSEICARACTERÍSTICAS DE LA COLONIA EN CMA:
-COLONIAS GRANDES, DIFUSAS DE COLOR ROSA PÁLIDO PLANAS CON SUPERFICIES MATE; APARIENCIA DISTINTIVACARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS EN CTA:
- PSEUDOMICELIO AMPLIO RAMIFICADO CON CADENAS DE CÉLULAS ALARGADAS QUE DAN LA APARIENCIA EN FORMA DE ÁRBOL; CADENAS EN RACIMOS DE BLASTOSPORAS JUNTO CON PSEUDOHIFAS; APARIENCIA DISTINTIVA CONSISTENTELA IDENTIFICACIÓN CON CMA ADEMÁS CTA:
-PRECISA IDENTIFICACIÓN CON AMBOSIDENTIFICACIÓN POR API 20C AUX O EL SISTEMA API 32C:
- LAS CEPAS IDENTIFICADAS COMO C.KRUSEI CON UN 50% CONFIANZA
CÁNDIDA GLABRATACARACTERÍSTICAS DE LA COLONIA EN CMA:
-COLONIAS GRANDES DE COLOR ROSA PÁLIDO A PÚRPURA BRILLANTECARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS EN CTA:
- SIN PSEUDOHIFAS O HIFAS; CÉLULAS DE LEVADURA SON; 2,5 X 4UM; APARIENCIA DISTINTIVA CONSISTENTELA IDENTIFICACIÓN CON CMA ADEMÁS CTA:
- IDENTIFICACIÓN PRECISA, MORFOLOGÍA ESENCIALIDENTIFICACIÓN POR API 20C AUX O EL SISTEMA API 32C:
- IDENTIFICA TODAS LAS CEPAS COMO C.GLABRATA
C. PARAPSILOSISCARACTERÍSTICAS DE LA COLONIA EN CMA:
- COLONIAS DE BLANQUECINO A COLOR ROSA PÁLIDO; ASPECTO VARIABLECARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS EN CTA:
-CADENAS RAMIFICADAS DE LAS CÉLULAS ALARGADAS CON RACIMOS DE BLASTOSPORAS; CÉLULAS GIGANTES OCASIONALES; ASPECTO VARIABLELA IDENTIFICACIÓN CON CMA ADEMÁS CTA:
-NO SIEMPRE CAPAZ DE IDENTIFICARIDENTIFICACIÓN POR API 20C AUX O EL SISTEMA API 32C:
- IDENTIFICA TODAS LAS CEPAS COMO C.PARAPSILOSIS
C. NEOFORMANSCARACTERÍSTICAS DE LA COLONIA EN CMA:
- COLONIAS DE COLOR ROSA, A VECES MUCOIDESCARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS EN CTA:
- SIN PSEUDOHIFAS O HIFAS; GRANDES CÉLULAS DE LEVADURA ESFÉRICA; 3-7,5 UM DE DIÁMETRO; ASPECTO DISTINTIVOLA IDENTIFICACIÓN CON CMA ADEMÁS CTA:
- IDENTIFICACIÓN PRECISA, MORFOLOGÍA ESENCIALIDENTIFICACIÓN POR API 20C AUX O EL SISTEMA API 32C:
- IDENTIFICADAS COMO C.NEOFORMANS
CANDIDA GUILLIERMONDII
CARACTERÍSTICAS DE LA COLONIA EN CMA:
- COLONIAS PEQUEÑAS DE COLOR ROSA A PÚRPURA; ASPECTO VARIABLECARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS EN CTA:
- PSEUDOHIFAS CON RACIMOS DE BLASTOSPORAS DE ASPECTO VARIABLELA IDENTIFICACIÓN CON CMA ADEMÁS CTA:
- NO SIEMPRE SE PUEDEN IDENTIFICARIDENTIFICACIÓN POR API 20C AUX O EL SISTEMA API 32C:
- API32C IDENTIFICA CEPAS CON 53,7% CONFIANZA
SACCHAROMYSES CEREVISIAE
CARACTERÍSTICAS DE LA COLONIA EN CMA:
- PEQUEÑAS COLONIAS PURPURASCARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS EN CTA:
- CÉLULAS OVALES CON MUY CORTA BROTACIÓN MULTILATERALLA IDENTIFICACIÓN CON CMA ADEMÁS CTA:
- IDENTIFICACIÓN PRECISA DE LAS CEPAS EXAMINADAS, MORFOLOGÍA ESENCIALIDENTIFICACIÓN POR API 20C AUX O EL SISTEMA API 32C:
-IDENTIFICO UNA CEPA COMO CRYPTOCOCCUS LAURENTII
PROTOTHECA WICKERHAMII
CARACTERÍSTICAS DE LA COLONIA EN CMA:
- GRANDES CÉLULAS ESFÉRICAS DE TAMAÑO VARIABLE, QUE CONTIENE, ALGUNOS ESPORANGIOS; ASPECTO DISTINTIVOCARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS EN CTA:
- GRANDES CÉLULAS ESFÉRICAS DE TAMAÑO VARIABLE, 2-16, MM, QUE CONTIENE ALGUNOS ESPORANGIOS; ASPECTO DISTINTIVOLA IDENTIFICACIÓN CON CMA ADEMÁS CTA:
- IDENTIFICACIÓN PRECISA, MORFOLOGÍA ESENCIALIDENTIFICACIÓN POR API 20C AUX O EL SISTEMA API 32C:
- NO SE ENCUENTRA EN LA BASE DE DATOS DE LA API; IDENTIFICADO LA CEPA COMO C.GLABRATA
DISCUSIÓN
• C. GLABRATA NO PODÍA DISTINGUIRSE POR SU APARIENCIA EN PLACAS CMA.
• C. KRUSEI FIABLE SE PUEDE IDENTIFICAR CON LA COMBINACIÓN DE CMA Y CTA, EN API NO FUNCIONAN CORRECTAMENTE.
• C. TROPICALIS EN CMA PERMITE LA DISCRIMINACIÓN DE ESTA ESPECIE CON CONFIANZA> 99%.
• TRICHOSPORON BEIGELII VARIABLE, PERO DISTINTIVA EN CMA CON PEQUEÑAS COLONIAS DE ASPECTO SECO, Y LA FORMACIÓN DE ARTROCONIDIAS EN CTA ES CONFIABLE.
• C. NEOFORMANS COLONIAS EN CMA SON UN COLOR DE ROSA LEVADURA REDONDAS GRANDES, A MENUDO CON LA PRESENCIA DE LAS CÁPSULAS.
• P. WICKERHAMII TIENE MORFOLOGÍA SIMILAR A LAS LEVADURAS EN SABURAUD Y AGAR SANGRE, API IDENTIFICA COMO C. GLABRATA PORQUE AMBAS ESPECIES ASIMILAN SÓLO GLUCOSA Y TREHALOSA.
• C. DUBLINIENSIS A 42 ° C ES POBRE RESPECTO A LA DE C. ALBICANS Y C. DUBLINIENSIS NO CRECEN EN ABSOLUTO A 45 ° C Y EN CMA PRESENTA COLONIAS MAS OSCURAS.
• EL TIEMPO DE RESPUESTA DE 48 H PARA EL ESQUEMA DE CMA Y CTA ES SIMILAR A LA DE LOS SISTEMAS DE KIT COMERCIAL, QUE REQUIEREN DE 24 A 72 H. EL TIEMPO MEDIO EMPLEADO POR UN PERSONAL CON EXPERIENCIA PARA LEER PLACAS CMA Y CTA SE ENCUENTRA A 3 MINUTOS POR AISLAMIENTO, MIENTRAS QUE EL TIEMPO NECESARIO PARA LEER UNA TIRA DE API ES DE 10 A 15 MIN.
• ES IMPORTANTE QUE LAS COLONIAS AISLADAS SE OBSERVAN EN CMA PORQUE LAS DESCRIPCIONES SE BASAN EN LA IDENTIFICACIÓN DE LA FORMA, EL COLOR Y LA PRODUCCIÓN DE PIGMENTOS DE COLONIAS INDIVIDUALES.
• LA OBSERVACIÓN CUIDADOSA DE LA MORFOLOGÍA DE LA LEVADURA PUEDE AÑADIR CONFIANZA A LA IDENTIFICACIÓN DE LAS ESPECIES.
• LA MALA IDENTIFICACIÓN PUEDE TENER GRAVES IMPLICACIONES CLÍNICAS.