Post on 11-Apr-2017
Álvarez Monroy MarilynCorrea Gallegos Jaime Moisés
Gómez Flores ValeriaPérez Hernández Luz Alejandra
Rangel César Araceli Edith
ENTEROBACTERIAS
ENTEROBACTERIAS 1
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES IZTACALA
Licenciatura en OptometríaMicrobiología Aplicada
Profesor(a): Dra. Alicia Vázquez Mendoza Grupo: 2202
OBJETIVOS
• Conocer las principales características biológicas de las enterobacterias: su morfología, patogenicidad y virulencia, sus medios de cultivo y los métodos de identificación en el laboratorio para estos microorganismos.
• Describir la capacidad de las enterobacterias para producir infecciones en el ser humano.
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3.2 Enterobacterias
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La familia Enterobacteriaceae constituye un grupo grande y heterogéneo de bacterias gramnegativas. Reciben su nombre por la localización habitual como saprofitos en el tubo digestivo, aunque se trata de gérmenes ubicuos, encontrándose de forma universal en el suelo, el agua y la vegetación, así como formando parte de microbiota de los animales incluido el humano.
Principales características microbiológicas de la familia EnterobacteriaceaeCaracterísticas típicas y distintivas de las enterobacterias
Son aerobios no formadores de esporas que pueden crecer en anaerobiosis(anaerobios facultativos)
Reducen los nitratos a nitritos (con algunas excepciones)No licuan el alginato
Fermentan la glucosa a ácido con producción de gas o sin ellaSon oxidasa-negativos, a excepción de Plesiomonas
Producen catalasa
No ven favorecido su crecimiento por la presencia de NaCl
La mayoría son móviles (con flagelos peritricos)No formadores de esporas
Enterobacteriaceae
Estructura
Los miembros de la familia Enterobacteriaceae son microorganismos con forma de bastón, por lo general de 1-3 μm de largo y 0,5 μm de diámetro.Su envoltura celular se caracteriza por una estructura multilaminar.
La membrana interna (o citoplasmática) consiste en una doble capa de fosfolípidos que regula el paso de nutrientes, metabolitos y macromoléculas. La capa siguiente, o capa externa,consiste en un peptidoglucano delgado junto con un espacio periplásmico que contiene una elevada concentración de proteínas.
La membrana externa compleja consiste en otra doble capa de fosfolípidos que incluyen lipopolisacáridos (LPS) (en la parte más externa, son un importante factor de virulencia de estas bacterias), lipoproteínas (que están fijadasal peptidoglucano), proteínas porinas multiméricas (que facilitanel paso de diversas sustancias,incluidos los antibióticos betalactámicos) y otras proteínas de la membrana externa.
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Entre estas proteínas hay algunas organelas complejas queirradian hacia el exterior: • Los flagelos: estructuras que se utilizan
para la locomoción y que provienen de una estructurabasal localizada en la membrana interna• Las fimbrias (o pili
comunes), con importante función como adhesinas• Pili sexuales, estructuras presentes en las bacterias que contienen plásmidos
conjugativos y que las bacterias utilizan para mediar la transferencia conjugativa de ADN del plásmido.
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https://yhoo.it/2lBprIK
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3.2.1 Características generales de patogenicidad y virulencia
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Patogenia y factores de virulencia.
Cápsula (proporciona propiedades antifagocitarias).
Pilli ( proporciona adherencia).
Toxinas, son de 2 tipos:
Endotoxina (lípido A), Gram (-), produce los síntomas fiebre, leucopenia, hemorragia capilar, hipotensión, colapso respiratorio.
Enterotoxinas (afectan al aparato gastrointestinal), pueden producir diarrea. Las más conocidas son E.coli, Salmonella, Shigella
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MODOS DE TRANSMISIÓN
Los modos de transmisión a los seres humanos son:
Infecciones nosocomiales: (E. coliKlebsiella
Ingesta de alimentos o agua:Salmonella ShigellaYersinia
MEDIOS DE CULTIVO
Agar Mac Conkey
•Utilizado para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clínicas, de agua y alimentos.
•Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.
Agar Salmonella Shigella
•Utilizado para el aislamiento de Salmonella y de algunas especies de Shigella a partir de heces, alimentos
•Es un medio de cultivo selectivo y diferencial.10
http://bit.ly/2lxkz90
Agar eosina azul de metileno
También denominado E.A.M. Es utilizado para el aislamiento Selectivos de bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas lasespecies de la familia Enterobacteriaceae.
Agar XLD (Xilosa – Lisina – Desoxicolato) Para el aislamiento y diferenciación de enteropatógenos especialmente de los géneros Shigella y Salmonella a partir de diversas muestras.
11https://yhoo.it/2lQaepD
3.1.3 Métodos de laboratorio para el diagnóstico
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La identificación de las diferentes especies de enterobacterias se realiza estudiando la actividad metabólica del microorganismo sobre los sustratos (carbohidratos, proteínas, etc.).
SE NECESITA: • Muestras frescas y que sean representativas del
lugar de la infección en condiciones asépticas.• Heces.• Orina.• Frotis rectales• Sangre.• Pus.• Exudados (obtenidos por aspiración por jeringa).
TSI (triple azúcar de hierro TS)
• En el medio TSI se observa el metabolismo fermentativo de los carbohidratos, (Glucosa, Sacarosa y Lactosa).• Cuando la glucosa es metabolizada hay viraje de color
amarillo en el fondo del tubo por metabolismo en ausencia de oxígeno. Todas las enterobacterias metabolizan la glucosa.
• Cuando metaboliza otros carbohidratos el viraje es en todo el tubo porque la concentración de lactosa y sacarosa es mayor.
• La producción de H2S toma un color negro que es variado• La LIA se observa el metabolismo de la lisina que permanece
de color violeta y no metabolizada la lisina cuando cambia de color el fondo (amarillo)
• El citrato en el tubo es de color verde cuando la bacteria utiliza el carbono como fuente de energía; cuando el medio vira al alcalino y toma un color azul.
PRUEBAS BIOQUÍMICAS
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TSI
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Formación de sulfuros
La fermentación de la lactosa y sacarosa se observa en la superficie y de la glucosa en el fondo, con formación de ácido que se manifiesta por cambio de color del indicador rojo de fenol que vira de anaranjado rojizo a amarillo.La combinación del citrato férrico de amonio y tiosulfato de amonio permite la detección de sulfuro de hidrógeno por la formación de un precipitado negro.
- Ácida/ácida: Bacterias fermentadoras de lactosa: E. coli, Klebsiella
- Alcalina/ácida: Bacterias no fermentadoras de lactosa. Salmonella (H2S+), Shigella (H2S -), Yersinia.
Agar lisina descarboxilasa LIA
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•Se evidencia la descarboxilación del aminoácido lisina en la diamina cadaverina y la desaminación de la lisina en un alfa cetoácido.
•Se manifiestan por el viraje del indicador púrpura de bromocresol.
• La formación de H2S se manifiesta por la presencia del tiosulfato sódico
•Puede verificarse la formación de gas a partir de la degradación de la glucosa.
Citrato de Simmons
Se basa en el citrato como única fuente de carbono.
Cuando utilizan el citrato, el medio se alcaliniza y cambia de color verde (neutro) a color azul (alcalino: prueba positiva)La reacción negativa --> ausencia de crecimiento → no hay cambio de color.1.- Citrato positivo: citrato como fuente de carbono.Ej.: Klebsiella pneumoniae2.- Citrato negativo: no consume el citrato como fuente de carbono.Ej.: Escherichia coli
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Caldo urea
Se observa la degradación de urea por medio de la enzima ureasa formando amoniaco y carbonato de amonio, que alcalinizan el medio provocando un color rojo cereza.
Bacterias úrea + rápida: Proteus y Providencia
Bacterias urea + retardada: Klebsiella
Bacterias urea negativa: Escherichia coli, Salmonella, Shigella
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3.2.4 Ejemplos
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3.2.4.1 Salmonella
•Morfología microscópica: Bacilo• Tamaño: 1µ de diámetro por 3µ de
longitud• Movilidad: presenta flagelos peritricos y
cápsula de polisacáridos • Metabolismo: Anaeróbico facultativo• Hábitat natural: Carne cruda, productos
de aves y bebidas contaminadas
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• Patogenicidad y virulencia
Salmonella se adquiere a través de la ingesta de alimentos y bebidas contaminadas.Adquiriendo un inóculo de 106 (UFC) o más para producir infección .La primera barrera con la que se enfrenta la Salmonella es la acidez del estómago, el cual reduce el inóculo bacteriano. La llegada de Salmonella al intestino delgado se verá afectada también por la microbiota autóctona, así como los movimientos peristálticos intestinales.
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Medios de CultivoAgar MacConkey
Agar Salmonella- Shigella
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Medio de eosina azul de metileno ht
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bit.l
y/2k
SFZ
1M
http://bit.ly/2kSr0oA
ENFERMEDADES ASOCIADAS GASTROENTERITIS Cuadro clínico que tiene un periodo de incubación de ocho o más de veinticuatro horas caracterizado por náuseas y vómitos seguidos por dolor abdominal y diarrea acompañada de moco con o sin sangre.
Su explicación puede ser dada por la invasión de las células mucosas por Salmonella.
ENTEROBACTERIAS 24http://bit.ly/2kIonl1
FIEBRE TIFOIDEA (ENTÉRICA)
• La bacteria que causa la fiebre tifoidea, Salmonella typhi, se propaga a través de alimentos, agua o bebidas contaminadas.Si se come o bebe algo que esté contaminado, las bacterias ingresan al cuerpo. Viajan hacia el intestino y luego hacia el torrente sanguíneo. En la sangre viajan a los nódulos linfáticos, la vesícula, el hígado, el bazo y otras partes del cuerpo.
• MANIFESTACIONES CLÍNICAS• Cefalea, debilidad y la fatiga. • Tos seca, persistente• Pérdida del hambre• Dolores abdominales• Diarrea o bien estreñimiento
ENTEROBACTERIAS 25http://bit.ly/2lfsMiY
3.2.4.2. Klebsiella
Morfología microscópica: bacilos Tinción: gramnegativaTamaño: 0.5μ de diámetro por 3 μ de
longitudMetabolismo: anaerobio facultativo.Reproducción entre 30 y 37°CEspecies: K.pneumoniae, K. ozanae, K.
rhinoscleromatis, k. oxytoca
Especies patógenas: K.pneumoniae, k.
oxytoca
Medio de cultivo: agar Mac Conkey, agar xilosa-lisina-desoxicolato (XLD), agar chocolate, agar sangre, agar soya tripcaseina y agar infusión cerebro corazón
http://bit.ly/2lzRDev
Hábitat natural• Presente en ambientes acuáticos ricos en nutrientes , aguas
contaminadas y sistemas de distribución de agua• Se encuentran en heces (entre 5 y 38%)• En el humano: mucosa de nasofaringe (1-6%) y el intestino
Vías de exposición: Nosocomial ( transmisión asociada con la manipulación frecuente de los pacientes); hospitales, centros sanitarios,agua y aerosoles contaminados.
https://yhoo.it/2lzZyIS
Patogenicidad y virulencia
• Cápsula de polisacáridos y de LPS: evita fagocitosis y migración de leucocitos al área de la infección
• Sistema de complemento: se activa en presencia de LPS (tipo 01) alejado de la membrana bacteriana
• Adhesinas: pili tipo • Sideróforos: Klebsiella genera sustancias capaces de
captar hierro (enterobactina, aerobactina) para crecer y multiplicarse
• Enzimas (catalasa, ureasa) y carbohidratos (lactosa) → formación de ácidos fuertes en sus procesos metabólicos
https://yhoo.it/2lsaIlc
http://bit.ly/2lg8HGR https://yhoo.it/2m5oAyO
K. oxytoca sin agrupación definida K. pneumoniae en agar Mac Conkey
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k. pneumoniae en agar XLDhttps://yhoo.it/2kOpdMj
https://yhoo.it/2kCudsk
ENFERMEDADES ASOCIADAS-Neumonía destructiva y lobar-Tracto gastrointestinal -Abscesos pulmonares-Bacteremia del tracto biliar, peritonitis
y meningitis-Infecciones de las vías urinarias,
biliares y respiratorias-Síndrome de sepsis (sindrome de
respuesta inflamatoria sistémica) Absceso pulmonar
https://yhoo.it/2kXsqwc
Manifestaciones clínicas de K.pneumoniae
- Tos- Esputo sanguinolento- Problemas respiratorios- Fiebre alta- Debilidad- Escalofríos- Dolor de pecho- Náuseas- Congestión en el pecho- Cianosis (labios y uñas azules)
- Secreción nasal- Cefalea- Sibilancias- Respiración rápida- Confusión
https://yhoo.it/2kcW3Le
3.2.4.3 Shigella
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Morfología microscópica: Bacilos cortos
Tinción: Gramnegativos
Cápsula: No la presentan
Tamaño: 0.7 µ de ancho por 3 µ de largo
Metabolismo: Anaerobio facultativo
Hábitat natural: Colon del humano
Movilidad: No presenta
Especies principales: S. dysenteriae , S. boydii, S. sonnei, S. flexneri. http://bit.ly/2l28yZD
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MEDIOS DE CULTIVO Agar sangre
Agar chocolate
Agar nutritivo
Agar Eosina- azul de metileno (EMB)
Agar MacConkey
Agar Salmonella- Shigella (SS)
Agar Helkoen
Agar Endo
Se toman muestras de las heces fecales
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VÍAS DE EXPOSICIÓN • Esta alcanza al intestino grueso por vía oral
• Es transmitida través de los alimentos, sino también a través del agua y por contacto directo entre niños en las guarderías.
http://bit.ly/2ky5eSO
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MANIFESTACIONES CLíNICAS
-Causan enteritis
-Diarrea acuosa leve, no disenteriforme a la típica diarrea invasiva con secreción mucosa y puis ( disentería bacilar) acompañada de fiebre dolor cólico abdominal, cefalea leucocitosis, calambres
-Esta alcanza al intestino grueso por vía oral
-Su complicación puede llegar a provocar megacolon tóxico, el síndrome hemolítico – urémico (SHU) y el síndrome de Reiter
3.2.4.4 Helicobacter
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Microorganismo Gram negativo que posee multiples flagelos en un solo lado , siendo un microorganismo de crecimiento lento.Morfología microscópica: Bacilos curvos espirilados Tamaño: De 5 µm de largo por 1 µm de ancho.Metabolismo: Micro aerofilo. Requieren concentraciones de oxígeno reducidas y elevadas de dióxido de carbono.Son de crecimiento lentoMovilidad: múltiples flagelos en un solo polo.Hábitat natural: Tracto gastrointestinal/ mucosa gástrica.
http://bit.ly/2lYmqoD
VÍAS DE TRANSMISIÓN
Se transmite principalmente por vía fecal/oral con vómitos o heces; en el caso de las heces, generalmente bajo la forma de aguas o alimentos contaminados.
Patogenicidad y virulencia -Flagelos.-Adhesinas.La colonización bacteriana del hospedero afecta el epitelio gástrico a través de lograr micronichos, utilizando recursos que se pueden considerar como señales para el hospederoEl hospedero desarrolla una úlcera o cáncer gástrico.
Posee la capacidad de sobrevivir en uno de los ambientes más ácidos del organismo: el estómago con un pH inferior a 4.
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Sensación de hinchazón del estómago.Saciedad rápida del hambre.Náuseas o vómitos.Pérdida de peso.Heces oscuras.Anemia.
Manifestaciones clínicas
http://bit.ly/2l5zqnL
Medios de cultivo• Directos:
Agar Mueller-Hinton (sangre de Cornero): Se representa mediante Color blanco
Agar Culumbia: Se representamediante blanco
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Indirectos:
•Ureasa: Se tiñe de color moradoEs una enzima que tiene la capacidad deHidrolizar amonio y carbamato
•Catalasa:Se representa meidante burbujasse realiza en agua oxigenada la cual liberaoxigeno
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Enfermedades asociadas
• Gastritis.• Úlceras pépticas.• Cancer Gastrico.
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http://bit.ly/2lk5LIY
3.2.4.5 Proteus
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Morfología microscópica: BacilosTinción: GramnegativosTamaño: 0.5µ de diámetro por 3µ de longitudMetabolismo: Anaerobico facultativo.Hábitat natural: Suelo, agua, heces de individuos en tratamiento de antibióticos. Microbiota intestinalMovilidad: flagelo peritricosMedios de cultivo : Agar MacConkey, de eoisna metileno, agar XLD. Fermenta lactosa en TSI.Especies patógenas: P. vulgaris, P. mirabilis, y P. penneri.
http://bit.ly/2kox2Nv
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PATOGENICIDAD Y VIRULENCIA
— Todas las especies de Proteus son resistentes a la ampicilina.*P. mirabilis es sensible a la penicilina.— Flagelos— Fimbrias— Proteínas de membrana→ permite actividad enzimática— Enzima ureasa → usan N de urea para desarrollarse— Producen fenilalanina desaminasa→ desamina la fenilalanina (Phe), aminoácido esencial del organismo— Hemolisinas → proteínas que facilitan la invasión tisular
ENFERMEDADES ASOCIADAS
Infecciones del tracto urinario Abscesos hepáticosMeningitisSíndrome de Proteus
50https://yhoo.it/2miSCA4
https://yhoo.it/2mdyym7
Manifestaciones clínicas
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Síndrome de Proteus: alteraciones pigmentarias, hipoplasia de nervio óptico, estrabismo, miopía.
Infecciones de tracto urinario (ITU)
Micción frecuentePicazón o comezón al orinarDolor al orinar y en las relacionees sexualesColor turbio de la orina (lechoso)Sangre en la orinaFiebre y escalofríosVómitos y náuseasDolor del costado o espalda
https://yhoo.it/2lxG09W
3.2.4.6 Escherichia coli
ENTEROBACTERIAS
http://bit.ly/2l9OuF6
• Es la especie bacteriana más común de la microbiota intestinal, la relación es benéfica (positiva) entre bacteria y hospedero.
• Crecen rápidamente en en medios de cultivo simples como glicerol y glucosa.
• Son bacilos Gram negativos cortosno esporulados, con fimbrias y flagelos. En individuos sanos no produceenfermedad, en cambio en pacientes Inmunocomprometidos causaenfermedad.Se transmiten vía aérea
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Morfología microscópica: Bacilos Gram Negativos.Capsula: Solo algunos y es de polisacáridos.Tamaño: De 0.5 µm de ancho por 3 µm de largo.Metabolismo: Anaerobias Facultativas.Movilidad: Solo algunos por flagelos peritricos.Hábitat Natural: Colon de animales incluido el hombre.
http://bit.ly/2liYidh
Patogenicidad y virulencia• Fimbrias adhesinas
• Adhesión de la bacteria a la superficie de una célula intestinal.
• La bacteria inyecta proteínas receptoras en célula intestinal.• La célula intestinal forma un pedestal para la bacteria.
• Vomitos.• Fuertes cólicos abdominales.• Diarrea líquida con mucha sangre.• Náuseas.• Cansancio y fiebre.
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Manifestaciones clínicas
Medios de cultivo
• Agar Eosina y azul metileno: Se representan mediante un brillo verde metálico.
• Agar Mac Conkey: Se representan mediante un color rojo con halo turbio.
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• Agar Lia: Se representa por un color púrpura.
Agar Tergitol 7: Se representa mediante Un color amarillo
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Enteropatógena
Enterohemorrágica
Enterotoxigénica
Enteroagregativa
Enteroinvasiva
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Cepas de Escherichia
http://bit.ly/2lZjO6R
ENTEROBACTERIAS
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3.2.4.7 Yersenia Gram-negativos no esporuladosIncluye 16 especies con 3 subespecies. De entre ellas, destacan tres especies invasivas capaces de resistir la respuesta inmune y producir patología humana: Yersinia pestis, Yersinia pseudotuberculosis y Yersinia enterocolitica.
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Género Yersinia Bacilos gram negativos
No espurulados
Anaerobio facultativos
Fermentadores
Inmóviles
Y. Pestis Posee una cápsula proteica Agente etiologico de peste bulbonica ( Y. pestis), diarreas acuosas agudas.
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Medios de cultivo Puede realizarse mediante muestras representativas del cuadro clínico del paciente. Esta especie crece en los medios escasa y moderadamente selectivos para enterobacterias como el agar MacConkey y el agar Salmonella-Shigella, en los que forma colonias transparentes, en agar entérico de Hektoen las colonias son de color salmón porque fermenta la sacarosa y en agar xilosa-lisina-desoxicolato forma colonias amarillas por fermentar la xilosa.
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Agente causal Yersinia pestis es un cocobacilo gram negativo, no esporulado, que mide 1,5 a 0,75 micromtros
A la tincion de Wright, se tiñen los extremos del bacilo, en forma caracteristica , se tiñen mas intensamente , lo que denomina como tincion bipolar o en alfiler de gancho
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Epidemiología Es un género de bacterias de distribución mundial, principalmente en áreas climáticas moderadas o subtropicales de América, Europa, Asia, África y Australia.
Los roedores son el principal reservorio natural de la Yersinia pestis y de Yersinia enterocolítica. Puede encontrarse en animales de sangre caliente domésticos y silvestres y ocasionalmente en reptiles y peces.
Los cerdos son importantes reservorios de los serotipos patógenos para el hombre.
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SINTOMAS
• Fiebre hasta 40°c durante 7 a 14 días • Dolor abdominal • Falta de apetito • Malestar general • Manchas rosas (roséola ) sobre la parte
baja del tórax y abdomen, durante la segunda semana de fiebre
• Estreñimiento; después diarrea• Heces con sangre • Agotamiento y confusión • Sangrado nasal (epistaxis)• Escalofríos • Alucinaciones (a causa de temperatura
elevada)• Dificultad e concentrarse • Disminución de frecuencia cardiaca
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Cuadro clínico • Periodo de incubación 1 a 3 semanas
• En su presentación intestinal , la enfermedad es de 5 a 16 días (niños 14 a 46 dias)
• La eliminación fecal del germen es prolongada (en algunos serotipos) 2-3 meses
• La infección puede dar lugar a un cuadro clínico variado, desde un síndrome diarreico auto limitado hasta septicemia.
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REFERENCIASEcheverri, L. y López, J. (2010). “K. pneumoniae: ¿la nueva “superbacteria”? Patogenicidad, epidemiología y mecanismos de resistencia”, IATREIA, [en línea]. Fecha de consulta: 16 de febrero 2017. Disponible en la red: http://www.scielo.org.co/pdf/iat/v23n2/v23n2a7.pdf
Galí, Zuleica. (2010). “Enterobacterias. Antibioticoterapia”, APUA, [en línea]. Fecha de consulta: 10 de febrero 2017. Disponible en la red: http://bit.ly/2lzRDev
http://www.bvsde.paho.org/cd-gdwq/docs_microbiologicos/Bacterias%20PDF/Klebsiella.pdf
Wilmer Paredes. (2015). Características del origen de Helicobacter pylori., [en línea]. Fecha de consulta 17 de febrero 2017 Disponible ne la red: http://www.monografias.com/trabajos60/helicobacter-pylori/helicobacter-pylori2.shtml
Gil. (2015). “Características Klebsiella”, Estudiando microorganismos, [en línea]. Fecha de consulta: 17 de febrero 2017. Disponible en la red: http://microbitosblog.com/2015/04/20/klebsiella_medio_cultivo_infeccion_gram/
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Sashenka Bonilla Rojas. (2011). Escherichia coli., en E.E.Microbiología General , [en línea]. ]Fecha de consulta 17 de febrero de 2017. Disponible en la red: http://www.uv.mx/personal/sbonilla/files/2011/06/Escherichia-coli-l.pdf
https://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicrobiologia/seimc-procedimientomicrobiologia30.pdf