Neoplasias

Definición. Nomenclatura. Clasificación Histogenetica y Clinica.

Prof. Abelardo Morales Briceño

INTRODUCCIÓN

• Existen una serie de mecanismos en los cuales el organismo multiplica sus elementos celulares con fines útiles Ejemplo. La Hiperplasia de un órgano, en caso de pérdida de un riñón.

• El fenómeno de la regeneración y cicatrización implica multiplicación celular y formación de tejido nuevo, este tipo de neoformación es ordenada y tiene una función especifica.

Neoplasias

Proliferación anormal de uno o varios tejidos

No tiene Pto. final

Incontrolado Agresivo para el

Huésped

Oncología Estudio de las neoplasías

Clasificación Benignas Malignas

Neoplasia

• El termino neoplasia es sinónimo de tumoración.

• Neoplasia: literalmente significa nuevo crecimiento.

• Oncología: Ciencia encargada del estudio de los tumores.

• Cáncer: Forma común de denominar a los tumores malignos

Nomenclatura

Términos que son necesarios conocer:

Hiperplasia

Metaplasia

Displasia

Anaplasia

Bien Diferenciado

Mal Diferenciado

METAPLASIA

Inhalación

Aparato Mucociliar

Traqueo-Bronquial

Macrófago Alveolar

Cadena linfática Espacios subpleurales

Adenocarcinoma broncogenico

Nomenclatura

• Los tumores tienen dos componentes básicos al igual que un órgano.

Parénquima Estroma

Benignos

Sufijo oma al tej. de origenEjplo.Tej. Fibroso Fibroma.Excepciones Granulomas

Epiteliales Carcinomas. Mesenquimaticos Sarcomas. Mixtos CarcinosarcomasMalignos

Componentes

Clasificación

CLASIFICACION HISTOGENETICA

TEJIDO EPITELIAL

EPITELIO DE REVESTIMIENTO

EPITELIO GLANDULAR

TROFOBLASTO

ÓRGANO DE ESMALTE

TEJIDO CONECTIVO

FIBROSO

ADIPOSO

TEJIDO MUSCULAR

LISO

ESTRIADO

TEJIDO CARTILAGINOSO

TEJIDO ÓSEO

BENIGNO

PAPILOMA

PÓLIPO

MOLA HIDATIFORME

FIBROMA

LIPOMA

LEIOMIOMA

RABDOMIOMA

CONDROMA

OSTEOMA

MALIGNO

CARCINOMA

ADENOCARCINOMA

CORIOCARCINOMA

ADAMANTIOMA

FIBROSARCOMA

LIPOSARCOMA

Leiomiosarcoma

Rabdomiosarcoma

CONDROSARCOMA

OSTEOSARCOMA

EPITELIO REVESTIMIENTO

EPITELIO GLANDULAR

TEJIDO CONECTIVO

TEJIDO CONECTIVO

TEJIDO CONECTIVO

TEJIDO CONECTIVO

TEJIDO CONECTIVO

CLASIFICACION HISTOGENETICA

NOTOCORDA

TEJ. VASCULAR SANGUINEO

TEJ. VASCULAR LINFATICO

T. DE MEDULA OSEA

MEMBRANA SINOVIALES

T. NERVIOSO PERIFERICO

NERVIO

VAINA DE SCHAWAN

NERVIOSO CENTRAL

ASTROCITO

GLIA

GANGLIOS SIMPATICOS

HEMANGIOMA

LINFAGIOMA

SINOVIONA

NEURONA

SCHAWANOMA BENIGNO

ASTROCITOMA I

GLIOMA

GANGLIO NEUROMA

CORDOMA

HEMANGIOSARCOMA

LINFANGIOSARCOMA

LEUCOSIS O LEUCEMIA

SINOVIOSARCOMA

SCHAWANOMA MALIGNO

2,3

2,3

GANGLIOBLASTOMA

DIFERENCIAS ENTRE NEOPLASIAS BENIGNOS Y MALIGNOS

TUMORES BENIGNOS

ENCAPSULADOS

SE CONSERVAN BIEN

NO INVASIVAS

BIEN DIFERENCIADAS

MITOSIS NORMALES E INFRECUENTES

CRECIMIENTO LENTO

NO METÁSTASIS

TUMORES MALIGNOS

NO ENCAPSULADOS

FRECUENTES NECROSIS

INVASIVAS

POCO DIFERENCIADAS

MITOSIS ATÍPICAS Y ANORMALES

CRECIMIENTO RÁPIDO E INCESANTE

PRODUCEN METÁSTASIS

Nomenclatura

• Tumores con nombre de Células

Mesotelioma Plasmocitoma Histiocitoma Mastocitoma Osteoclastoma

Nomenclatura

Tumores con nombre del Investigador (Eponimos)

HODGKIN EWING STICKER

MAREK GRAWITZ WILMS

Tumores Mixtos

Fibroadenoma Carcinosarcoma

Neoplasias originada de varias hojas Blastodermicas

Teratomas o Quistes Dermoides (OVARIOS).

Benignos y Malignos

Clasificación Clínica

• Tumor, Nódulo, Metástasis. T.N.M.

• To, T1, T2, T3 No, N1, N2 ,N3 Mo, M1 M2 M3.

T- Presencia de tumor.

T1, T2, T3. S e refiere a la extensión o tamaño del tumor.

N. Se refiere a la presencia de Nódulos Ganglionares de drenaje

N1. Ganglio próximal afectado.

N2. Ganglio medial afectado

N3. Ganglio distales afectados

Clasificación Clínica

• M. Se refiere a la diseminación Metastásica.

M1. Metástasis a órgano.

M2. Metástasis a órganos

M3.Metástasis a órganos.

Ejemplo T1, N2, M1: Tumor de 5cms, con 2 ganglios mediales comprometidos, M1. metástasis a hígado,

ANATOMÍA DE LAS NEOPLASIAS

• MORFOLOGÍA

A SIMPLE VISTA

AL MICROSCÓPIO OPTICO (M.O)

AL MICROSCÓPIO ELECTRONICO (M.E)

PATOLOGIA MACROSCOPICA• FORMA

MASA O BULTO

ULCERA O PÉRDIDA DE TEJIDO

COMBINACION: masa ulcerada

ESFÉRICO/INFILTRANTE

Ejemplos: Ca. Epidermoide de piel, leiomioma uterino, leiomioma gástrico.

Benignos Masa

Malignos Necrosis Ulceración

Por lo general:

Tamaño

NO es índices de comportamiento ni pronostico

Tumores muy pequeños mamas, tiroides, pulmón, próstata Alta malignidad

Tumores Grandes LEIOMIOMAS Benignos

Superficie:

Lisa, uniforme, nodular Benignos (fibromas, lipomas)

Granular Tumores papilares ovario, tiroides, carcinomas.

Umbilicados Metástasis

Vegetantes infectados/ necróticos Ca. Esófago, útero.

Superficies y Tamaños

Color

PUEDE SUGERIR DIAGNÓSTICO

CARCINOMAS Blanquecinos, Granulares

LINFOMAS Carne de pescado crudo

SARCOMAS Rojas, Carnosas

VERDES Hepatocarcinomas secretores de

bilis

NEGROS Melanomas, Ca. Basocelular pig.

AMARILLOS Ca. Riñón (LIPIDOS)

Color

EN TÉRMINOS GENERALES

SE DEBE ANALIZAR EN CONJUNTO CON: HEMORRÁGIAS NECROSIS FIBROSIS QUISTES EN LA SUPERFICIE CALCIFICACIÓN E INFECCIÓN.

EL MACROSCÓPICO, ORIENTA PERO NO ES CONCLUYENTE EL MACROSCÓPICO, ORIENTA PERO NO ES CONCLUYENTE PARA EL DIAGNÓSTICOPARA EL DIAGNÓSTICO

Aspecto macroscópico de las neoplasias

Aspecto macroscópico de las neoplasias

PATOLOGÍA MICROSCÓPICA

LAS NEOPLASIAS SON TEJIDOS

- PARÉNQUIMA

- ESTROMA

ES MUY VARIABLE

Parénquima Componente celular

Estroma Vasos sanguíneos, linfáticos, nervios, tejido conectivo.

Ejemplo: Carcinoma de Hígado. Parénquima: hepatocitos con signos de malignidad.

Liposarcoma Lipoblastos

ESTROMA

Es caso en carcinoma de riñón

Abundante: Carcinoma escirroso de mama, estomago.

Tejido conectivo

La célula neoplásica puede ser:

Muy similares a las normales Bien diferenciado Benignos

No se parecen a las normales poco dif. (anaplásica) Maligna

Tener Cambios de Aspecto histológico Metaplasia

Cambios de maduración celular Displasia

Cambios en una Célula Neoplásica Aislada

Forma Irregular: Renacuajo (Rabdomiosarcoma)

Tamaño Anormal: Hepatocarcinoma (muy grandes), a veces muy pequeñas como en

tiroides, algunos Carcinoma de pulmón.

•Núcleos Hipercromáticos

•Escaso Citoplasma

•Pérdida Relación Núcleo Citoplasma

CONTENIDO CITOPLASMATICO

LÍPIDOS LIPOMA, LIPOSARCOMA

GLUCÓGENO HEPATOCARCINOMA,

CARCINOMA DE RIÑÓN

I.G. LINFOMAS B.

INSULINA CARCINOMA DE PÁNCREAS

MELANINA MELANOMAS

ESTRUCTURAS INTRACELULARES

Estriaciones Transversales Rabdomiosarcoma

Cristaloides Tumor de Leydig (Test.)

Productos Intracelulares Colágenos: Fibromas, Fibs.

Osteoides Osteosarcoma Osteogénico

Alteraciones más sugestivas de malignidad se aprecian en:

El Núcleo

Las alteraciones de tamaño, densidad, hipercromatismo, figuras mitóticas numerosas, nucleolos prominentes.

No obstante no son absolutamente concluyentes, sin relacionar con el No obstante no son absolutamente concluyentes, sin relacionar con el aspecto biológico de la neoplasia.aspecto biológico de la neoplasia.

MICROSCOPIA ELECTRÓNICAMICROSCOPIA ELECTRÓNICA

Se usa para diagnóstico de Neoplasias muy diferenciadas

Melanomas Carcinoma Indiferenciados

Desmosomas tumores muy indiferenciados de origen Ept.

NEOPLASIA

VÍAS DE DISEMINACIÓN DE LAS NEOPLASIAS

NEOPLASIA

INVASIÓN

METASTASIS PROPIO DE MALIGNOS AGRESIVOS

INVASIÓN: Presencia de células neoplásicas FUERA de su SITIO DE ORIGEN, SIN PERDER CONTINUIDAD entre la masa PRIMARIA Y LA MASA DE TEJIDO SECUNDARIA.

EJEMPLO: Ca. De Bronquio Infiltrado parilla costal

Ca. De Estómago Infiltrado paredes y se

adhiere al hígado.

METASTASIS: Entre la masa primaria y secundaria NO EXISTE CONTINUIDAD, diseminación a sitios distantes de la masa original.

EJEMPLO:

Ca. Bronquio Metástasis a Cerebro.

Ca. Estómago Metástasis a ganglios, hígado,

peritoneo

INVASIVIDAD

Capacidad de las células neoplásicas de LESIONAR y PENETRAR en los tejidos circundantes.

Las células normales pueden penetrar en los tejidos.

POLIMORFONUCLEARES

MONOCITOS

HISTIOCITOS.

PERO NO PROVOCAN DAÑO CELULAR, SOLO SE DESLIZAN POR LOS ESPACIOS INTERSTICIALES.

VÍAS DE INVASIÓN DE LAS NEOPLASIAS

Menor resistencia a la penetración de células neoplásicas

Espacios Intersticiales.

Conductos Preformados.

Una vez alcanzada la luz del vaso:

TRES DESTINOS O SU COMBINACIÓN

Obliteran el vaso TROMBO LINFÁTICO

Proliferan dentro de la luz SIN PERDER CONTINUIDAD

METÁSTASIS

Se desplazan por la circulación y se implantan a distancia.

Invaden tejidos circundantes SIN PREFERENCIA por los espacios intersticial, ni cavidades, ni conductos, afortunadamente son las menos.

EJEMPLO: CARCINOMA PAPILAR DEL TIROIDES.

Infiltra tejidos vecinos, traquea, esófago, subcutáneo, músculo

METÁSTASIS

Los pacientes con tumores malignos usualmente NO sucumben por causa del tumor primitivo sino por las METÁSTASIS.

VÍAS DE DISEMINACIÓN METASTASICA.

1. LINFÁTICA Carcinoma.

2. HEMATÓGENA Sarcoma

3. LINFOHEMATOGENA

4. TRANSCELOMICA (Implantación) Ca. Pulmón pleura.

Ca. Ovarico peritoneo

5. CONDUCTOS PREFORMADOR REVESTIDOSPOR EPITELIOS. Tracto digestivo, urinario, pulmonar.

NEOPLASIA

DIAGNÓSTICO DE NEOPLASIAS

DIAGNÓSTICO DE NEOPLASIAS

HISTORIA.

DIAGNÓSTICO CLÍNICO.

MUESTRA REPRESENTATIVAS DEL TUMOR BIEN CONSERVADA, Fijadores, congelación.

1.- ESTUDIO MICROSCOPICO O ANATOMO PATOLÓGICO.

BIOPSIAS:

INTRAPERITONEAL, PREOPERATORIA O EXTEMPORÁNEA.

48 HORAS INCLUSIÓN EN PARAFINA.

1. INCISIONAL.

2. EXCISIONAL.

ASPIRACIONES CON AGUJA FINA

Tiroides, Próstata, Hígado, Ganglio Linfático.

EXTENSIONES CITOLÓGICAS.

PAPA NICOLAU/ PAP MART.

Para Estudiar:

ÓRGANOS.

Cuello Uterino. Próstata. Estómago.

Pulmón. Vejíga.

LÍQUIDOS:

Orina, Peritoneal, Pleural, Cefalorraquídeo.

Las células neoplásicas son MENOS COHERENTES , se diferencian de las células normales, Displasias, Cáncer.

2.INMUNOCITOQUIMICA: UTILIZADO EN EL DIAG. O TRAT.

Anticuerpo Monoclonales

Identificación de Productos Celulares

Marcadores de Superficie

2.1.- Clasificación de T. Malignos MUY INDIFERENCIADOS, de distintos orígenes (similares entre sí), de dificultoso diagnóstico solo con H-E.

2.2.- Clasificación de Leucosis y Linfomas.

Identifica y clasifica Linfomas de Células T y B.

2.3.- Determinación del lugar de origen de Tumores Metastásicos.

En muchos Ca. 1rara manifestación METASTASIS.

Origen??. Ej. Ag. Prostático y tiroglobulinas son marcadores de tiroides y próstata.

Detección de RECEPTORES HORMONALES (estrógeno, progesterona) valor pronóstico y terapéutico.

En general las N. DE MAMA con receptores H. tienen MEJOR PRONÓSTICO y se trata con ANTIESTROGENOS.

2.4.- Detección de Moléculas con significado terapéutico o pronóstico.

DIAGNÓSTICO MOLECULAR

No son fundamentales en el diagnóstico de cáncer.

Útiles para diferenciar proliferaciones BENIGNAS

(policlonales).

Proliferaciones MALIGNAS (Monoclonales).

Estudios Genéticos.

Diagnóstico de la predisposición al cáncer.

ENTRE ELLOS:

1.- Antígenos de superficie celular.

2.- Proteínas citoplasmáticas.

3.- Enzimas.

4.- Hormonas.

EN LA PRACTICA SON MOLÉCULAS QUE PUEDEN DETECTARSE EN PLASMA U OTRO LÍQUIDOS.

MARCADORES TUMORALES Son índices bioquímicos de la PRESENCIA DE TUMOR.

NO SON UN MÉTODO FUNDAMENTAL PARA DIAGNÓSTICO DE CÁNCER.

Su utilidad APOYA el diagnóstico y respuesta a tratamientos, recidivas...

ALGUNOS MARCADORES TUMORALES:

A.C.E.

Antígeno producido por tejido embrionario de INTESTINO, PÁNCREAS, HÍGADO, MAMA.

ALFA FETO PROTEÍNA

Glucoproteínas sintetizada en el feto en saco vitelino.

Hígado, Intestino, Cell Germinales del Testículo.

Sus niveles bajan rápidamente después de la intervención quirúrgica de Ca. de hígado o testículo.

PROTEÍNAS ESPECÍFICAS

Inmunoglobulinas (I.G) ................. Mieloma Múltiple.

Fosfatasa Alcalina ......................... Ca. De Próstata.

Antígeno Prostático ...................... Ca. De Próstata.

HORMONAS

Gonadotrofina Coriónica ....... Tumor del Trofoblasto y T.

Calcitonina ............................. Ca. Medular de Tiroides.

Catecolaminas ........................ Feocromocitoma.

MUCINAS

Carcinoma de Ovario ................. C.A- 125

Ca. de Colon, Páncreas ............. C.A. 19-9

Ca. de Mama ............................... C.A- 15-3

Carcinogenesis

• Factores Geográficos• Incidencia Versus Mortalidad• Ejemplo:

Carcinoma estomago Japón EEUU

Carcinoma de pulmón EEUU Japón• Factores ambientales y culturales tienen

mayor peso que la predisposición genética.

Factores Geográficos Ambientales y CulturalesFactores Geográficos Ambientales y Culturales

HerenciaHerencia

• Los tumores son mas frecuentes en razas puras que en mestizos.

• La consanguinidad esta altamente relacionada con mamarios tumores en perros.

• Los bóxer son la raza de mayor riesgo de presentar una variedad de tumores especialmente mesenquimaticos.

• Humanos..retinoblastoma, poliposis,Ca Estomago• Gl.mamaria, ovario, encéfalo

RazaRaza

• Bóxer: Alto Riesgo

• Bulldog-Bóxer-Alto riesgo Tumores Sistema hemopoyetico-Linfoma

• Boston terrier- tumores vasculares

• Bóxer-spaniel-labrador- Alto riesgo Tumores glándula mamaria

RazaRaza

EdadEdad

• La edad ejerce una influencia importante, sobre la probabilidad de sufrir cáncer.

• Los carcinomas ocurren en los últimos años de vida 55 años.

• Cada grupo de edad tiene propensión a ciertas formas de cáncer.

• En la actualidad ha incrementado la mortalidad en niños con cáncer.

• Adultos 55 años Carcinomas• Niños 15 años Leucemias-Cáncer S.N.C.

EdadEdad

Obesidad-Alcoholismo-Obesidad-Alcoholismo-TabaquismoTabaquismo

Oncogenes y CáncerOncogenes y Cáncer

• Los oncogenes o genes causantes de cáncer derivan de los proto-oncogenes, genes celulares que promueven el crecimiento y la diferenciación normales.

Factores Ambientales Adquiridos:

Prod. Químicos.

Radiación, virus.

Mutaciones en el genoma de las células somáticas

Act. de oncogenes-

Promotores del crecimiento.

Alteración de los genes que regulan la apoptosis

Inactivación de genes

supresores de cáncer

Expresión de productos alterados de los genes y pérdida de prod génicos

reguladores

Neoplasia maligna

Mutaciones

Heredadas

Genes Supresores de Cáncer

• Los proto-oncogenes codifican proteínas que promueven el crecimiento celular, los productos de los genes supresores de tumores aplican frenos a la proliferación celular.

• La perdida de estos genes es un hecho clave en muchos tumores.

Agentes Carcinogénicos y Agentes Carcinogénicos y sus interacciones celularessus interacciones celulares

• Una gran cantidad de agentes causan daños genéticos e inducen la transformación neoplásica de células.

• Carcinógenos Químicos

• Energía Radiante

• Virus Oncogénicos

Carcinogenesis QuímicaCarcinogenesis Química

• Hidrocarburos aromáticos policíclicos.• Son los agentes carcinógenos mas potentes

que se conocen.• Si se presentan en la piel, cáncer de piel,

combustión del tabaco, cáncer de pulmón, grasas animales al asar carnes a la parrilla, también se encuentra en carnes y pescados ahumados.

Aminas Aromáticas y Aminas Aromáticas y Colorantes AzoicosColorantes Azoicos

• Ejercen su efecto carcinogénico en el hígado donde forma el carcinógeno final, por la activación de los sistemas oxigenasa del citocromo P 450.

• Colorantes como el rojo escarlata (cerezas) y el amarillo Nro 5 (mantequilla).

Carcinógenos presentes en Carcinógenos presentes en la Naturalezala Naturaleza

• Existen aproximadamente 30 carcinógenos químicos, producidos por plantas y microbios.

• El mas importante es el carcinógeno hepático, la aflatoxina B1, producido por Aspergillus flavus, que crece en cereales mal almacenados.

Agentes DiversosAgentes Diversos

• Asbesto- Carcinoma Broncogénico.

• Cloruro de vinilo- hemangiosarcoma hepático.

• Cromo y Niquel- Cáncer de Pulmón.

• Aldrin, dieldrin y clordano- carcinomas en animales.

Carcinogenesis por Radiaciones

• Luz ultravioleta – Cancer de Piel.

• Radiación Ionizante: Origen medico

Origen ocupacional

Bombas atómicas

Neoplasias malignas

Carcinogenesis por Virus

Se ha demostrado que un elevado numero de virus ARN y ADN son oncogénicos en una amplia variedad de animales.

Virus ADN Virus ADN Oncógenos.Oncógenos.

Adenovirus.

Virus del papiloma bovina Virus del papiloma.

Virus de Epstein- Barr [VEB] humano [VPH]

Virus de Marek [herpes virus] Virus de hepatitis B

Virus ARN Virus ARN Oncógenos.Oncógenos.

Retrovirus [RNA] grupo leucosis linfoide

mieloblastosis

reticuloendoteliosis.

“La única forma segura de evitar el cáncer, es

no nacer, vivir es correr el riesgo”

Clasificación

Antígeno especifico del tumor [AET]

Antígeno asociado a tumor [AAT]

En muchos tumores reducidos experimentalmente y en algunos canceres humanos se han demostrado antígenos que desencadenan respuesta inmunitaria.

Antígenos Antígenos TumoralesTumorales

Antígeno especifico de tumor [AET]

Factores pronósticos y predictivos en el cáncer de mama

Dr.Eduardo Caleiras

Dr.Aldo Reigosa Yániz

• Factor pronóstico

Evolución

• Factor predictivo

Respuesta a tratamiento específico

Conceptos

Factores pronósticos

• Estadio clínico

• Tamaño del tumor

• Ganglios axilares

• Tipo histológico

• Edad

• Grado histológico

• Grado nuclear

• Invasión a piel

• Embolos neoplásicos

• Necrosis

• Angiogénesis

• Bordes y márgenes

• Estrato social

• Componente intraductal extenso

• Infiltrado inflamatorio

Estadio clínico

Estadio Sobrevida 5 años

I 85 %

II 66 %

III 43 %

IV 10 %

Tamaño del tumor

• - 2 cm S5a

– 1 – 10mm 88 %

– 10 – 13 mm 73 %

– 14 – 20 mm 65 %

(medida histológica)

• + 2 cm 59 %

?

Tamaño del tumor

Ganglios linfáticos axilares

Nº ganglios + Sobrevida 5 años 0 88 %

Micrometástasis (- 2 mm) ? (83) %1 a 3 80 %

4 a 9 68 %10 ó + 45 %

Importante señalar si existe o no extensión extranodal

Predictores de mt axilares: Tamaño del tumorGrado nuclearÉmbolos vasculares

Tipo histológico

• Buen pronóstico

– Mucinoso, tubular, papilar, adenoideo-quístico

• Pronóstico intermedio

– Medular, lobular

• Mal pronóstico

– Metaplásico, células en anillo de sello, carcinosarcoma, rico en lípido

Grado histológico(Scarff-Bloom-Richardson-Elston)

• Parámetros:• Formación

túbulos• Pleomorfismo• Mitosis

• Grados:

I

II

III

Grado nuclear(Black)

• Parámetros:• Nucléolos

• Pleomorfismo

• Tamaño nuclear (n/c)

• Grados:

I

II

III

Émbolos vasculares

• Linfáticos

• Sanguíneos

• Importancia– Recurrencia– Metástasis

ganglionares– Metástasis a

distancia 4040Si

4570No

N1N0IL

S5a

Factores pronósticos y predictivos inmunohistoquímicos

• Receptores de estrógeno

• Receptores de Progesterona

• C-erbB-2

• p53

• Bcl2

• Ki67

• Catepsina D

• Factor de crecimiento epidérmico

• MDR - 1

Receptores hormonales

+++

Receptores hormonales y carcinogénesis

Célula normal

Insultocarcinógeno RE+

Alteracionesgenómicaspromovidas

por estrógeno

Célula tumoral

Célula tumoral

RE+

RE-

J Clin Oncol 19:1, 18-27, 2001.

Receptores hormonales y pronóstico

• RE+ RP+– Mayor edad al diagnóstico– Menor tamaño tumoral– Mejor grado histológico– Mayor supervivencia RE- RP-

Anderson. J Clin Oncol 19: 18-27, 2001.

Receptores hormonales y pronóstico - Edad al diagnóstico

RE+RP+ (58%)

RE-RP- (15%)RE-RP+ (4%)

RE+RP- (23%)

30 40 50 60 70

30 40 50 60 7030 40 50 60 70

30 40 50 60 70

Receptores hormonales y pronóstico

RE+RP+

RE+RP-

RE-RP+

RE-RP-

Sobrevida en meses

Receptores hormonales y valor predictivo

• Respuesta a manipulación hormonal

– RE+ RP+ 77 %– RE+ RP- 27 %– RE- RP+ 46 %– RE- RP- 11 %

Weidner: Surg Oncol Clin 6: 415-462, 1997.

Receptores hormonales y valor predictivo

• Receptores de estrógeno

Alfa = susceptibilidad al tamoxifeno (crom. 6)

Beta = resistencia al tamoxifeno (crom. 14)

C-erbB-2 (Her-2/neu)

• Proto-oncogen• Familia de receptores del factor de crecimiento epidérmico• Cromosoma 17• Codifica receptor transmembrana tirosina quinasa de 185 kd

C-erbB-2 (Her-2/neu)

• Amplificación y/o sobre-expresión lleva a fosforilación de región intracelular

• Señal que desencadena cascada ------------

---------> crecimiento celular• 20 a 30 % de casos de cáncer de mama• Factor pronóstico• Factor predictivo

C-erbB-2 (Her-2/neu)

• Factor pronóstico:– Peor pronóstico– Sobrevida global menor– Sobrevida libre de enfermedad menor– Grupo con ganglios negativos, c-erbB-2 -, receptores

hormonales +, bcl2 + = mejor pronóstico = no quimioterapia adyuvante ?.

C-erbB-2 (Her-2/neu)

• Factor predictivo:– Menor respuesta a terapia endocrina– Menor respuesta a Qt con CMF– Mejor respuesta a antraciclinas - doxorrubicina– Respuesta a trastuzumab– Mejor respuesta a taxanos + trastuzumab

Trastuzumab

• Anticuerpo monoclonal humanizado dirigido contra proteína Her2/neu

• Se acopla al dominio extracelular de la proteína

• Bloquea proliferación celular

• Induce toxicidad celular dependiente de anticuerpos

• Hasta ahora aprobado su uso en enfermedad metastásica

Lebeau: J Clin Oncol 19: 354-363, 2001

C-erbB-2 (Her-2/neu)Inmunohistoquímica

IHQ -

IHQ 3+

IHQ 2+

IHQ +

C-erbB-2 (Her-2/neu)Inmunohistoquímica

C-erbB-2 (Her-2/neu)

• Inmunohistoquímica (IHQ)

– 0 = negativo

– + = negativo

– ++ = positivo débil

– +++ = positivo fuerte

• Hibridación in situ fluorescente (FISH)

– normal

– baja amplificación

– alta amplificación

C-erbB-2 (Her-2/neu)

0 1 + 2 + 3 +

- 2 0 7 2 8 6 7 2 1

+ 7 2 2 1 1 7 6

3 % 7 % 2 4 % 8 9 %

Concordancia general = 82 %

FISH

IHQ

Mass R y col. Proc ASCO 2000; 19.

C-erbB-2 (Her-2/neu)

IHQ 2+

FISH -

C-erbB-2 (Her-2/neu)

IHQ 3+

FISH +

C-erbB-2 (Her-2/neu)

IHQ 1+

IHQ 2+

IHQ 3+

IHQ - FISH -

FISH -

FISH +

FISH ++

C-erbB-2 (Her-2/neu)Toma de decisión para tratamiento con trastuzumab

Muestra

IHQ FISH

3+2+ - +

Tto. específicoTto. específicoFISH

+-

Tto. específicoLebeau: J Clin Oncol 19: 354-363, 2001

p53 mutante

• p53 salvaje --> célula alterada --> apoptosis• Mutación --> célula alterada --> no apoptosis• 30 - 50 % casos de cáncer de mama• Mal pronóstico - supervivencia reducida• Sensibilidad a taxanos• Resistencia a antraciclinas• Futuro ---> Remplazo de p53 funcional

p53 mutante

Bcl2

• Sobre-expresión relacionada con bloqueo de apoptosis

• Proto-oncogen• Localizado en mitocondrias• Relacionado con estrógeno• Predice respuesta a tratamiento hormonal

Bcl2

Ki67

• Mide actividad proliferativa• Reconoce epítope en núcleos de células proliferativas• Positivo en células no G0 (G1, S, G2, M) • Mayor % células + = mayor agresividad

– 1 a 9 % = Índice bajo– 10 a 13 % = Índice intermedio– 14 % o mas = Índice alto

Ki67

Catepsina D

• Proteasa lisosomal • Facilita invasión tumoral y metástasis• Peor supervivencia• Correlacionada con amplificación del

gen c-myc

Tavassoli. Pathology of the Breast,1999.

Catepsina D

MDR-1

• Glicoproteína de transmembrana - 170 kD• Gen de resistencia multidrogas• Producto proteico actúa como bomba transmembrana• Bombea drogas citotóxicas fuera de la célula• Sobre-expresión relacionada con resistencia a drogas de

quimioterapia (antraciclinas, vincristina, etoposide, taxanos)

Hahn: Int J Oncol 14: 273-279, 1999

Conclusión

Terapiaindividualizada

Factoresclásicos

Factoresinmunohistoquímicos

Nuevas drogasInmunoterapia

Nuevos avancesManipulación genética

Universidad Central De VenezuelaFacultad de Ciencias Veterinarias

Departamento de Patología VeterinariaCátedra de Patología

NUEVOS AVANCES DIAGNÓSTICOS EN

PATOLOGIAVETERINARIA

M.V. Julissa Ramírez Medina M.ScM.V. Julissa Ramírez Medina M.Sc

Maracay Abril, 2004

Introducción

Técnicas Diagnósticas

• INMUNOHISTOQUÍMICA (IHQ)– Inmunofluorescencia (Coons et al.,1940)– Marcaje Enzimas (Nakane, 1966; Avrameas,

1969; Brown, 1974)• REACCIÓN EN CADENA DE LA

POLIMERASA (PCR)– Kary Mullis (1983) Premio Nobel

• HIBRIDIZACIÓN IN SITU (HIS)– Pardue y Gall (1969)– Jones et al. (1969)

Introducción a las Técnicas De IHQ y Aplicaciones en Patología

Veterinaria

• Combina técnicas (anatómicas, inmunológicas y bioquímicas)

• Localiza componentes tisulares (“in situ”)• Utiliza enzima (marcador)

– Peroxidasa– Fosfatasa alcalina– Glucosa oxidasa

Se basa en la visualización de un anticuerpo, lo más específico posible, que reconozca a un antígeno concreto, fijado y presente en los cortes del tejido en estudio.

Se basa en la visualización de un anticuerpo, lo más específico posible, que reconozca a un antígeno concreto, fijado y presente en los cortes del tejido en estudio.

INMUNOHISTOQUÍMICAConceptos Básicos

Antígeno: sustancia o partícula animada o inanimada induce respuesta H ó C

Ac primario: reacciona con el Ag

Afinidad de un Ac: formar IC insolubles

Epítopo: porción de un Ag que reacciona con un Ac

Ac monoclonales: mismo clon de células plasmáticas (síntesis ratón)

Ac policlonales: producido por células diferentes (síntesis conejo)

INMUNOHISTOQUÍMICAConceptos Básicos

Peroxidasa: forma complejo E-S

Diaminobencidina (DAB): intensifica la reacción colorimétrica

Antisuero: suero que contiene Acs.

Background: tinción no específica (fondo)

Reacción cruzada: Acs. reaccionan contra otros Ags.

Control positivo: resultado tinción específica

Control negativo: muestras procesadas usando suero no inmune

Técnicas de Inmunoperoxidasa

Técnicas de Inmunoperoxidasa

Técnicas de Inmunoperoxidasa

Anticuerpos marcados

Anticuerpos marcados

Anticuerpos sin marcar

Anticuerpos sin marcar

directadirecta indirectaindirectaperoxidasa

antiperoxidasaperoxidasa

antiperoxidasa

Representación enzimática de la Técnica de inmunoperoxidas mediante el uso de Acs. marcados (método directo)

PP

AgAg AgAg AgAg AgAg

Técnicas con Ac`s Marcados

Representación enzimática de la Técnica de inmunoperoxidasa mediante el uso de Acs. marcados (método indirecto)

PP

AgAg AgAg AgAg AgAg

Técnicas con Ac`s Marcados

MÉTODO DE LA PEROXIDASA

ANTIPEROXIDASA (PAP)Sternberger et al.,

1970-1986

Técnicas con Ac`s no Marcados

AgAg AgAg AgAg AgAg

PP PPPP

Aplicaciones de la IHQ en Patología Veterinaria

• CONSIDERACIONES GENERALES

– Antígenos a detectar:

• Microorganismos: agentes infecciosos y Ags. detectables en tejidos

• Depósitos: (Igs) enf. autoinmunes

• Filamentos intermedios: queratina; vimentina; desmina

Antígenos a detectar: Hormonas: tumores endocrinos Marcadores neurológicos: elonasa

específica neuronal Proteínas superficiales

leucocitarias: CD4-CD8 Productos oncogénicos: Acs.

contra oncogenes y Dx. de tumores

Aplicaciones de la IHQ en Patología Veterinaria

Aplicaciones de la IHQ en el Dx. de diferentes especies animales

Caninos Toxoplasmosis;Tumores pobremente diferenciados;

Neospora caninum

Felinos Toxoplasmosis; Tumores pobremente diferenciados

Aves Vs Laringotraqueitis; Vs infección de bronquitis; Vs

enfermedad infecciosa de la bursa; Vs de la

encefalomielitis aviar adenovirus, influenza virus; Vs enf.

de Newcastle

Equinos Músculo gluteus medius; Sarcocystis neurona

Bovinos Encefalopatía Espongiforme

Rinotraqueítis infecciosa

Cerdos Influenza , SRRP, Lawsonia intracellularis, coronavirus

(GET); Escherichia coli

Circovirus Porcino Tipo 2

Conclusiones

• Constituye en la actualidad una técnica de gran importancia en biología y es utilizada para realizar Dxs. rápidos.

• Herramienta en Anatomía Patológica avances en el Dx. histopatológico.

• Se inició con fines de Investigación y actualmente se emplea cada vez más en el Dx. rutinario.

Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)

• Biología molecular (código genético)

• Pruebas diagnósticas

• Identificación de patógenos (ADN o ARN)

• Especies, tipo, subtipo y patotipo

• Muestras

“Es una técnica “in vitro” que imita la habilidad natural de la célula de duplicar el ADN”“Es una técnica “in vitro” que imita la habilidad natural de la célula de duplicar el ADN”

Fundamento de la Técnica (PCR)

AMPLIFICA ADNAGENTE CAUSALAMPLIFICA ADN

AGENTE CAUSAL

TAQ POLIMERASATAQ POLIMERASA ADN POLIMERASAADN POLIMERASA

SINTETIZA NUEVAS CADENAS DE ADN

SINTETIZA NUEVAS CADENAS DE ADN

PasosPasosPasosPasos

1.- Desnaturalización 95°C

2.- Alineación 37-56°C

3.- Amplificación 72°C

“PCR AUTOMATIZADO”

PCR

Gel de electroforesis

PCR como herramienta diagnóstica en patología Veterinaria

AvesAves Haemophilus paragallinarum; Mycoplasma gallisepticum; M. synoviae; Birnavirus; Coronavirus; Alphaherpesvirus; Circovirus; Oncornavirus; Herpesvirus

BovinosBovinos Babesia spp.; Fasciola hepática; Trichomona foetus

EquinosEquinos Strongylus vulgaris

PorcinosPorcinos Ascaris suum, VSRRP; VGET; Salmonella spp. Lawsonia intracellularis; VPR (pseudorabia)

Ovinos-Ovinos-CaprinosCaprinos

Haemonchus contortus; Paratuberculosis; paternidad

CaninosCaninos Parvovirus, Ehrlichia spp; Echinococcus granuloso; coronavirus, Leishmania spp; Def. de fosfofructoquinasa; H. heilmannii; H. felis

FelinosFelinos Toxoplasma gondii; Helicobacter felis y H. pylori

Conclusiones

• Las aplicaciones en la genética molecular están contribuyendo a enriquecer y descifrar los conocimientos que hasta ahora solo pertenecían al misterio que encierran los genes.

• El análisis de los Ácidos Nucleicos abre nuevos campos en las ciencias agropecuarias en general y en la veterinaria en particular: identificación de agentes patógenos en el Dx. clínico, de genotipos, patotipos, detección de enfermedades hereditarias, pruebas de paternidad, entre otros.

• El PCR posee altos niveles de especificidad para el Dx. e identificación de agentes patógenos ya que se fundamenta en la secuencia única de bases del genoma de un organismo.

HIBRIDIZACIÓN “in situ” (HIS)HIBRIDIZACIÓN “in situ” (HIS)

• Mapear un gen por hibridación molecular de una secuencia clonada de ADN marcado con radioactividad o fluorescencia, en un cromosoma extendido sobre una laminilla.

• Combinada con IHQ- información topológica microscópica de genes (ADN, ARN)

• Material genómico: (estructura)

• Cadenas

• Azúcar-fosfato

• Bases nucleótidas (púricas y prirmidínicas)

Técnica de IHS

• Se requieren 3 componentes esenciales:– Ácido nucleico blanco (ADN o ARN)– Sonda de Ac. Nucleico marcado– Sistema de detección

• Marcadores: radioactivos, fluorescentes, quimioluminiscentes y bioreactivos

• Duración: 30-90 minutos.• Recolección de muestras

– Congeladas– Fijadas en formalina

Hibridización in situ

Aplicaciones de la HIS como Herramienta Diagnóstica en

Patología VeterinariaCaninos

Parvovirus

Cerdos Virus Aftosa; Pestivirus, PRRSV

Bovinos Virus Aftosa, Pestivirus; Virus de Maedi-Visna

Porcinos

Herpesvirus 1; Circovirus porcino

Aves Anemia infecciosa aviar

IHQ o IHS o PCR?cual seleccionar?

Infecciones activas

Infecciones activas

Infecciones latentes

Infecciones latentes

Presencia de Material Especifico de un Organismo Infeccioso en Tejidos

Presencia de Material Especifico de un Organismo Infeccioso en Tejidos

DISPONIBILIDAD

ALTA SENSIBILIDAD

DISPONIBILIDAD

ALTA SENSIBILIDAD

IHQ HISPCR

CONCLUSIONES

• Detecta secuencias complementarias de Ácidos nucleicos presentes en tejidos usando sondas específicas para el organismo infeccioso.

• Combina la morfología y la biología molecular, considerando que cada organismo infeccioso tienen un segmento único de ADN o ARN que no se encuentra en otros organismos, células o tejidos.• El desarrollo científico de la biología molecular ha causado un fuerte impacto en las ciencias en general, así como en el campo diagnóstico de la patología veterinaria.

GRACIAS POR GRACIAS POR SU ATENCIÓNSU ATENCIÓN