3. Reactivo de Shiff 09

8/12/2019 3. Reactivo de Shiff 09

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El reactivo de Shiff

Fucsina bsica tratada con exceso de cido

sulfuroso lo que la decolora y en presenciade un aldehdo da color rojo violeta

Se forma cido 4, 4

AMINOSULFINICOTRIFENIL METANOSULFNICO


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Fucsina bsica

Formula: C20-H20-Cl-N3.color index 42510

Tambien llamada:1. violeta bsica.2. Magenta I.3. alfa4-(p-aminofenil)-alfa4(imi... clorhidrato.4. Fucsina diamante


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El cido leucosulfnico es inestable y pierde cido sulfuroso cuandose trata con aldehdo

produciendo un colorante quinoideo de color violeta-prpura.

cido 4, 4 AMINOSULFINICOTRIFENIL METANO SULFNICO

cido leucosulfnico

Metabisulfito de potasio

Fucsina bsica


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Identificacin de carbohidratos por accin del

CIDO PERYDICO

Se produce aldehidos en grupos

Glucosidos : hexosas neutras,

azcares

Galactsidos

Mansidos

Fucsidos

cido silico


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el acido perydico rompe los enlaces C - C

en diversas estructuras en las que estn presentes grupos

1:2-glicol (CHOH-CHOH)

convirtindolos en dialdehdos (CHO.CHO)


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acido perydico

que lo hace inmensamente superior a los reactivoscorrientemente utilizados para la oxidacin de los enlaces C-C,no oxida despus a los aldehdos resultantes,pudiendo estos, ser localizados mediante reactivo de Schiff

para dar un colorante sustituido de color rojo.

la reaccin del cido perydicocon el residuo deshidroglucosa de una molcula de polisacridoPuede observarse el colorante rojo formado por la unin de la

leucofucsina con el dialdehdo, un nuevo compuesto.


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Accin de la oxidacin por cidoperydico

R-CH CH-R R-CH HC-R+H2O

OH OH O O

aldehdo aldehdo

HIO4

glicol

1


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Bases qumicas de la reaccin P.A.S.

Reacciones que producen al menos un radical aldehdo

glicol frmula Producto de oxidacin

HIDROXIAMINO

primario

OH NH2

-CH- CH-

O O

-CH CH-

+ NH3HIO4

Accin de la oxidacin por cido perydico2


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glicol

frmula Producto de oxidacin

HIDROXIAMINO

secundario

O O

-CH CH-

-OH NH-R

-CH CH-

+ NH2RHIO4

3


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glicolfrmula

HIDROXICETONA

OH O

-CH - C

+H2OO O

-CH COH

Producto de oxidacinfrmula

HIO4

4


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glicol

frmula

HIDROXIALDEHIDO

- OH O O

- CH CH - CH CO2 + H2O

Producto de oxidacin

HIO4


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Frmula del reactivo de Shiff

Reactivo de Schiff


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Usar fucsina bsica pura ( fucsina diamante)

Color index

Metabisulfito de potasio o sodio

Agregar cido clorhdrico normal o 3 ml de HCl

(Estos forman cido sulfuroso)

Preferible guardar por 24 horas

agregar carbn activado, filtrar

Debe quedar transparente o de color oro plido

PREPARACIN DEL REACTIVO DE SHIFF


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Se puede usar a las 4-6 horas

Preferible guardar por 24 horas a T ambiente en

oscuridad Debe quedar transparente o de color oro plido

si da color rosa debe descartarse

para su uso debe estar a T ambiente


Dura no ms de de 1 mes

Se debe guardar en frasco oscuro y en refrigerador


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Se puede usar a las 4-6 horas

Preferible guardar por 24 horas a T ambiente en

oscuridad Debe quedar transparente o de color oro plido

si da color rosa debe descartarse

para su uso debe estar a T ambiente


Dura no ms de de 1 mes

Se debe guardar en frasco oscuro y en refrigerador


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Sustancias P.A.S. Positivas

Estmago: epitelio, glndulas fndicas, cardiales y

pilricas

tero : glndulas del cervix, vagina

Tiroides : coloide

Hipfisis anterior

Secreciones : prstata, vesculas seminales,

folculos ovricos, cuerpos amilceos del cervix,


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Sustancias P.A.S. positivas

Pigmentos : ceroide, lipofucsina de las suprarrenales

Membranas basales epiteliales y vasculares

Mucus : glndulas salivales, gl.traqueobronquiales,

cls caliciformes de intestino

Bordes ciliados de rin e intestino

Tejido conjuntivo: colgeno de esclertica,sustancia fundamental de cartlago

Lpidos : bastones de la retina


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La reaccin tiene una gran especificidad si:

La oxidacin es corta

Se realiza a temperatura adecuadaSe efecta lavado con agua sulfurosa


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H.EP.A.S

Cls. Caliciformes

estmago


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HIPOTLAMO


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ADENOCARCINOMA

Diagnstico diferencial :


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Qu es?

Ssutancias P.A.S positivas


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IDENTIFICACIN DE HONGOS

UTILIZANDO REACTIVO DE SHIFF


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@


Qu sustancia nos permite identificarlas?
http://pathy.fujita-hu.ac.jp/~tsutsumi/photo/photo078-3.htmhttp://pathy.fujita-hu.ac.jp/~tsutsumi/photo/photo078-3.htmhttp://pathy.fujita-hu.ac.jp/~tsutsumi/photo/photo078-3.htmhttp://pathy.fujita-hu.ac.jp/~tsutsumi/photo/photo078-3.htmhttp://pathy.fujita-hu.ac.jp/~tsutsumi/photo/photo078-3.htm


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@


RICOS EN POLISACRIDOS
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P.A.S.


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MEMBRANA BASAL - CPSULA DE BOWMAN

GLICOPROTENAS


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Tejido muscular GLICGENO

Escasas fibras PASposivas
http://mail.google.com/mail/?view=att&realattid=f_erpd2vp1&disp=inline&attid=0.6&th=10d7ab6b51f2a5bdhttp://mail.google.com/mail/?view=att&realattid=f_erpd35iv&disp=inline&attid=0.7&th=10d7ab6b51f2a5bd


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Clulas caliciformes

MUCOPOLISACRIDOS NEUTROS


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GLUCOGENOSIS TIPO IV

causada por la deficiencia de la enzima ramificante amiloa-1,4-1,6-glucotransferasa


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Fijadores recomendados

MUCOPLISACRIDOS Formol tamponado Solucin de Zenker

Solucin de Bouin

GLICGENO Carnoy

Lquido de Zenker Formol alcohlico cido


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Fijacin no recomendada

Glutaraldehido

Puede usarse si tratamos eltejido con hidroborato de sodio


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mtodo

1. Desparafinar hasta agua destilada

2. Oxidacin en cido perydico3. Reactivo de Shiff

4. Lavar en agua sulfurosa

5. Lavar en agua destilada

6. Tincin nuclear


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TCNICAS MIXTAS

PAS - ALCIAN BLUE

MUCOPLISACRIDOS NEUTROS

MUCOPOLISACRIDOS CIDOS
http://info.fujita-hu.ac.jp/~hirasawa/newgallery2/alc_008.jpghttp://info.fujita-hu.ac.jp/~hirasawa/newgallery2/alc_007.jpg


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Identificacin de cido silico:

o Presentan enlace glicosdico

o Usar cido perydico diludo

oTiempo corto

o Slo identificamos residuos de cido silico.

Oxidacin selectiva

Se utiliza para diferenciar mucina de tumores colnicos


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Precauciones

Corrosivo

Txico

Trabajar con guantes

Frasco oscuro Refrigerar 2 a 8 C

Almacenamiento


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