AUSTRALIA - fao.org · de Codex sobre Residuos de Plaguicidas y a la vez la oportunidad de realizar...

Agenda Item 9 (b) CX/PR 06/38/9-Add.1 March 2006

JOINT FAO/WHO FOOD STANDARDS PROGRAMME

CODEX COMMITTEE ON PESTICIDE RESIDUES Thirty-eighth Session

Hotel Vila Galé, Fortaleza, Brazil, 3 - 8 April 2006

COMMENTS ON THE PROPOSED DRAFT REVISION OF THE LIST OF METHODS FOR PESTICIDE RESIDUE ANALYSIS INCLUDING METHODS OF DETERMINATION FOR DITHIOCARBAMATES AT STEP 3

AUSTRALIA

Australia is pleased to submit the following comments in response to CL 2005/52-PR, with relation to the Proposed Draft Revision of the List of Methods for Pesticide Residue Analysis at Step 3.

General Comments

Australia generally supports the review and update of the list of methods for pesticide residue analysis and commends the US and other member countries that have provided detailed validation data with the methods provided.

However, Australia has some reservation in regard to its potential use as an endorsed list, particularly if it assumes a defacto list of preferred or official methods for Codex purposes. As such clarification on the status of this list of methods and its intended use is sought. Australia’s consistent position on methods of analysis is that it promotes the use of performance-based methods, whether validated in a single laboratory or through a collaborative process.

Government and private laboratories involved in pesticide analysis in Australia use a variety of methods depending on the purpose of the residue program. These methods are generally based around standard or otherwise published methods which have been verified for the respective analyte(s) and matrices. The performance of the analytical methods and verification that they meet international standards are fundamental elements of the Australian laboratory system and involves ongoing proficiency testing, validation and accreditation of each specific analytical test to international standards (ISO/IEC 17025) and an evaluation of the laboratories’ facilities, staff and technical capabilities.

Analytical Techniques and Confirmatory Steps

Given the increasing application of mass spectrometry, including LC combined with tandem mass spectrometry as the determinative step, it would be useful to segregate the analytical methods according to their primary instrumentation. This will enable new laboratories to more readily identify and select methods according to the instrumentation available in their laboratory.

CX/PR 06/38/9-Add.1 page 2 Under the principles of good laboratory practice, all residue methods should incorporate a confirmatory step to eliminate the reporting of false positives. In this regard, the accepted ‘head-space’ method for dithiocarbamates in crucifers and onions should include a confirmatory step to eliminate matrix-based contributions. Whilst the identification and quantitation of individual dithiocarbamates is the ideal method, some Australian laboratories now use mass spectrometry to identify and discriminate carbon disulphide from other natural sulphur analogues which may interfere with the quantitation of dithiocarbamates in foods.

Pesticides for which no methods are available to CCPR

Within the various residue methods employed by Australian laboratories, a number of the residues listed are likely to be incorporated in existing methods. A detailed questionnaire may need to be circulated to laboratories to establish which compounds are captured in current multi-residue screens. It is also likely that the QuEChERS multi-residue methods developed by Steven Lehotay and co-workers will cover a number of the residues listed.

COSTA RICA

Costa Rica agradece al Gobierno de Brasil por su reiterado compromiso en presidir los trabajos del Comité de Codex sobre Residuos de Plaguicidas y a la vez la oportunidad de realizar las siguientes observaciones:

El laboratorio de residuos del Ministerio de Agricultura y Ganadería (MAG) analiza, en frutas y vegetales frescos, plaguicidas organoclorados, organofosforados, carbamatos y ditiocarbamatos, utilizando principalmente métodos para residuos múltiples.

Se utilizan los métodos de análisis modificados de la FDA (Food and Drug Administration), publicados en el manual “Pesticide Analytical Manual” (PAM).

Con respecto a la información solicitada sobre los métodos de análisis y características de rendimiento para la lista de plaguicidas enlistados en el punto 23. del documento CL 2005/52-PR, se cuenta únicamente con el método por cromatografía de gases para el plaguicida cadusafos, el cual se encuentra validado en el laboratorio. En el caso que se requiera, el laboratorio puede aportar el resumen del método y los datos de rendimiento.

Con respecto al párrafo 24 del mismo documento, en los laboratorios de nuestro país, se utiliza el Manual Of Pesticide Residue Analysis-Deutsche Forschungsgemeinschaft, VCH Verlagsgesell-Schaft-Weinheim,FRG para la determinación de ditiocarbamatos.

REPUBLIC OF KOREA

Analytical Methods for Dithiocarbamate Residues

Principle

Dithiocarbamates are agricultural fungicides that can be classified into 3 groups depending on the chemical structures such as dimethyldithiocarbamates, ethylenebisdithiocarbamates and propylenebis-dithiocarbamate. Ferbam, thiram and ziram belong to dimethyldithiocarbamate, mancozeb, maneb, metiram, nabam and zineb belong to ethylenebisdithiocarbamate, and propineb belongs to propylenebisdithiocarbamate, respectively. The analytical method for dithiocarbamates in food has been improved to detect them as 3 different groups. Targets are decomposed in alkaline median, followed by methylation, and then analyzed by HPLC.

- Dimethyldithiocarbamates : ferbam, thiram, ziram

- Ethylenebisdithiocarbamates : mancozeb, maneb, metiram, nabam, zineb

- Propylenebisdithiocarbamate : Propineb

CX/PR 06/38/9-Add.1 page 3

Experimental section

1. Apparatus & Equipment

Instrument : HPLC(Agilent 1100 series) Column : C18 column(250*4.6mm i.d., 5㎛, Shiseido, Japan) Mobile phase : acetonitrile-water-methanol(25:65:35) Flow rate : 1.0ml/min. Detector : UV 272nm(Agilent G1314A VWD) Centrifuge : Multipurpose Refrigerated Centrifuge LX-130 (TOMY KOGYO, TOKYO, Japan)

Glass fiber filter : PYREX 17G – 1( ID 65mm)

2. Reagents

Thiram(99% Dr. Erenstorfer GmbH , Germany) Nabam(67% Dr. Erenstorfer GmbH , Germany) Propineb(75% Riedel - de Haen, Germany) Methyl iodide(99% : Lancaster, England) Tetrabutyl ammonium hydrogen sulfate(97%, Sigma-Aldrich, USA) Ethylenediaminetetraacetic acid tetrasodium salt dihydrate(minimum 99% titration , Sigma-Aldrich, USA) L- Cysteine hydrochloride anhydrous(minimum 98%, Sigma-Aldrich, USA) 1,2-propanediol(99%, Sigma-Aldrich, USA)

(with 0.05M methyl iodide) Methylation

CH

CH2

R NH C

S

SCH3

NH C

S

SCH3

H3CN

H3CC

S

SCH3

Dimethyldit hiocarbamate

CH

CH2

NH C

S

SCH3

NH C

S

SCH3

2

Ethylenebisdit hiocarbamate

Maneb, mancozeb, metiram, nabam, zineb

Propineb

Propylenebisdithiocarbamate

Ferbam, thiram, ziram


Dichloromethane(99.8%, J.T.Baker, USA) Methanol(99.9%, Burdick & Jackson, USA) Hexane(99.9%, Burdick & Jackson, USA) Hydrochloric acid(35~37%, Wako, Japan) Sodium hydroxide(96%, Wako, Japan) Sodium chloride(99%, Wako, Japan)

EDTA solution

- pH 9.5-9.6 : 0.5g of L-cysteine and 100ml of 0.25M EDTA in 0.45M sodium hydroxide

- pH 7.0 : 0.5g of L-cysteine and 100ml of 0.25M EDTA in 0.45M sodium hydroxide(adjusted to pH 7.0 with 2 M hydrochloric acid).

Standard solution

- Thiram was prepared in methanol(100mg/mL).

- Nabam and propineb were prepared in EDTA solution (pH 9.5-9.6). And then the pH was immediately adjusted to ca 7.0 with 2 M hydrochloric acid(100mg/mL). These solutions were to use immediately after preparation.

- The stock solutions were diluted with EDTA solution(adjust pH 7.0).

- The concentrations of final standard solutions were multiplied by conversion factor 1.125 for thiram derivative and 0.938 for nabam derivative.

Analytical Procedure

1. Extraction

An aliquot(20g) of sample was cut into 10-15 pieces and analyzed immediately. The outer pieces of grapes, ginseng, and Chinese matrimony vine were analyzed. Cabbage, red pepper, onion and Korean cabbage were not chopped. The aliquot was shaken in 0.5g of L-cysteine and 100ml of EDTA solution(pH 9.5-9.6) for 5 min in a closed glass bottle. The extract was filtered through a glass fiber filter. Extracts which were too viscous to be filtered directly (e.g., those of strawberries) were centrifuged for 10 min at 1,700g before filtering. The bottle and the filter were rinsed with 10 mL(*3) of the EDTA solution, and combined into the extracts. Five mL of 0.41M tetrabutylammonium hydrogen sulfate and 10g of sodium chloride was added into the extracts while stirring. The pH of the extracts was cautiously adjusted to ca 7.0 with 2 M hydrochloric acid(*This extraction time must be within 15 min.)

2. Derivatization

Fourty mL of 0.05 M methyl iodide in dichloromethane-hexane (1:1) was added into the extracts. The mixture was shaken vigiorously for 10min. And then the upper layer was centrifuged for 5min at 800 rpm. 20mL of the extracts was taken and 5 mL of 20% 1,2-propanediol in dichloromethane(keeping solution) was added. The solvent and the excess of methyl iodide were stripped off at 30 ℃ in a rotatory evaporator. The

residue was diluted with 1.0 mL of methanol and 10㎕ was analyzed by HPLC using UV detection at 272 nm.


Results

1. HPLC Method

Fig. 1 Typical chromatogram of dithiocarbamate residues

(1) Standard mixture of thiram, nbam and propineb

(2) Sample blank

(3) Grape sample spiked with thiram, nbam and propineb

A : Dimethyldithiocarbamate (ferbam, thiram and ziram)

B : Ethylenebis(dithiocarbamate) (maneb, mancozeb, metiram, nabam and zineb)

C : Propylenebisdithiocarbamate(propineb)

Limit of determination

- Dimethyldithiocarbamates 0.005mg/kg,

Ethylenebisdithiocarbamates 0.01mg/kg,

Propylenebisdithiocarbamate 0.02mg/kg

(1)

A

spike A

B C

B CA

(3)

BCA

(2)



(1) Sample blank

(2) onion sample spiked with nbam and propineb




(1) Sample blank

(2) Chinese matrimony vine sample spiked with nbam and propineb


B C

(1)

(2)

B C

(2) C

(1) C



(1) Sample blank

(2) sample spiked with thiram, nbam and propineb

A : Dimethyldithiocarbamate (ferbam, thiram and ziram)



A

B

(2) Red pepper

(2) Ginseng

(1) Ginseng

C

B

CA

A

(1) Red pepper

(1) Korean cabbage

(2) Korean cabbage

A B C

A B C


2. GC Method

CS2

Fig. 5 Typical chromatogram of dithiocarbamate residues by using CS2 method

(1) Standard of nabam

(2) Cabbage sample blank

(3) Cabbage sample spiked with nabam

Limit of determination(LOD) : 0.005mg/kg

(2)

(1)

(3)




(2) Korean cabbage sample blank

(3) Korean cabbage sample spiked with nabam

CS2

(1)

(3)

(2)




(2) Red pepper sample blank

(3) Red pepper sample spiked with nabam

Table 1. Comparison of Recoveries

HPLC method GC method(CS2)

A B C nabam

Onion - 81.2±3.2 74.4±1.2 -

Red pepper(dried) 89.0±2.5 - 80.7±0.8 106.2±15.3

Cabbage - 81.2±1.8 - 122.2±16.9

Korean Cabbage - 85.9±2.6 - 112.5±17.1

Grape 76.9±1.6 108.8±3.4 112.5±3.2 77.7±8.5

Ginseng - - 95.9±2.5 83.5±10.4

Chinese matrimony vine - - 76.9±1.8 90.6±14.2

A : Dimethyldithiocarbamate, B : Ethylenebis(dithiocarbamate),

C : Propylenebisdithiocarbamate

CS2

(1)

(3)

(2)


CANADA

Canadian methods currently in use:

1. DETERMINATION OF 285 PESTICIDES IN FRUITS & VEGETABLES WITH SOLID PHASE EXTRACTION (SPE) CLEAN-UP AND GC/MSD AND HPLC FLUORESCENCE DETECTION

A representative sample is blended with acetonitrile and sodium chloride followed by separation of the 2 layers by centrifugation. An aliquot of the acetonitrile phase is concentrated, and cleaned up on an Envi-Carb SPE cartridge which is connected in series with an aminopropyl sep-pak. The pesticides are eluted from the cleanup column with acetonitrile:toluene 3:1. The eluant is concentrated, solvent exchanged, and split for analysis by GC/MSD for the GC amenable pesticides, and the carbamates by HPLC with post-column derivitization and fluorescence detection. (see list of pesticides in attached annex 1)

2. DETERMINATION OF AMITRAZ IN FOOD BY GC/MSD

The sample matrix is digested under acidic conditions, hydrolyzing Amitraz and its metabolites to 2,4-Dimethylaniline (2,4-DMA). The matrix is then made basic and extracted with isooctane. A portion of the extract is filtered, and the analyte is derivitized using Heptaflurobutyric Acid Anhydride, and concentrated. The instrumental analysis is performed by capillary Gas Chromatography with Mass Selective Detection.

3. DETERMINATION OF BENOMYL IN FRUITS AND VEGETABLES BY HPLC-UV

A representative sample is blended with ethyl acetate, filtered and concentrated. HCl is added and the acidified mixture is heated for one hour at 80◦C to hydrolyze benomyl to carbendazim. After washing with hexane and ethyl acetate, the acidic aqueous phase is made basic by the addition of sodium carbonate solution. The carbendazim is extracted with ethyl acetate and the ethyl acetate extract is evaporated. The residue is dissolved in methanol and passed through a Florisil Sep-Pak cartridge. Analysis is performed by HPLC with photodiode array (PDA) detection.

4. DETERMINATION OF THIABENDAZOLE IN FRUITS AND VEGETABLES BY HPLC-UV AND HPLC-FLUORESCENCE

A representative sample is blended with acetonitrile and sodium chloride (NaCl). The layers are allowed to separate. A portion of the acetonitrile phase is concentrated and solvent-exchanged to the mobile phase. The quantitation is performed using HPLC with Photodiode Array detection, or with fluorescence detection where interfering matrix co-extractives are observed in UV.

5. DETERMINATION OF ETU (2-IMIDAZOLIDINETHIONE) IN FRUITS AND VEGETABLES BY GC/MSD

The ETU is extracted from the sample matrix using methanol, then derivitized by the alkylation of the thiocarbonyl group to form Benzylthio-2-imidazoline using benzyl chloride. The matrix is made acidic and washed with dichloromethane, then made basic, with the analyte extracted using dichloromethane. The extract is concentrated and derivitized further using Trifluroacetic Anhydride. Quantitation in performed by capillary gas chromatography with a mass selective detector.

6. DETERMINATION OF ORGANOCHLORINATED PESTICIDES AND PCBs IN EGG AND DAIRY PRODUCTS BY GC/ECD

The fat, containing the organochlorine pesticides, is extracted from the dairy sample matrix with hexane using a blender.

The egg sample matrix is extracted with dichloromethane using a chromatographic column


The extracts are then purified using a Gel Permeation Chromatography (GPC) system, and the quantitation is performed by GC/ECD or GC/MS

7. DETERMINATION OF DAMINOZIDE IN APPLES BY GC/MSD

Daminozide in the sample is hydrolyzed in the presence of NaOH to form unsymmetrical dimethylhydrazine (UDMH). The generated UDMH is distilled from the matrix and reacts with salicylaldehyde to form salicylaldehyde dimethyl hydrazone, which is analyzed by GC/MSD.

8. DETERMINATION OF EBDC (ETHYLENE BIS-DITHIOCARBAMATES) IN FRUITS AND VEGETABLES BY HPLC WITH FLUORESCENCE DETECTION

A representative sample is digested with hydrochloric acid, and the resulting ethylenediamine is isolated with an ion exchange column, derivitized with o-phthaladehyde (OPA) and determined by HPLC/Fluorescence detection.

9. DETERMINATION OF FORMETANATE IN FRUITS BY HPLC

Formetanate residues are extracted with acetone/methanol. After filtration, an aliquot is acidified and extracted with dichloromethane. The acidified aqueous portion is neutralized and extracted into dichloromethane. The extract containing formetanate is concentrated, re-dissolved in acetonitrile and quantitated using HPLC with a photodiode array detector.

10. DETERMINATION OF ABAMECTIN IN FRUITS AND VEGETABLES USING HPLC WITH FLUORESCENCE DETECTION

Abamectin is extracted from samples with hexane, with the extract then cleaned up using an aminopropyl (NH2) SPE column. The extract is then derivatized by reaction first with 1-methylimidazole and trifluoroacetic anhydride, and then methanolic ammonium hydroxide. The final derivatized extract is injected into an HPLC system with fluorescence detection.

COMENTARIOS DE ARGENTINA

Argentina agradece la posibilidad de realizar comentarios al presente documento.

Los métodos de análisis son validados internamente en cada laboratorio y los laboratorios participan en test de proficiencia, en cumplimiento de la Norma ISO/IEC 17025. Se remite resumen y parámetros de validación, información de tres laboratorios, si bien en el país hay más laboratorios trabajando en el tema.

DETERMINACION DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS Y PCB´s EN GRASA POR CROMATOGRAFÍA GASEOSA CON DETECCIÓN POR CAPTURA DE ELECTRONES (GC-ECD)

Laboratorio 1

Una porción representativa de la muestra es disuelta en Hexano y los Plaguicidas son extraídos y separados de la grasa por elución con solvente no polar en columna de vidrio que contiene Alúmina parcialmente desactivada. El eluato es cuidadosamente evaporado a un volumen de 1 ml y una alícuota es inyectada en el cromatógrafo gaseoso con detector de captura de electrones para la detección y cuantificación de los analitos por estándar externo utilizando una columna capilar de polaridad intermedia-alta. Para la confirmación de los plaguicidas, la muestra es inyectada en el cromatógrafo por una segunda columna capilar de polaridad baja aplicando el mismo programa de temperaturas.


METODO: PCP-ME Nº 001 REFERENCIA: FSIS, Versión Julio Método CHC2

ANALITO MATRIZ MND MNC RANGO ANAL. %REC

RANGO % R

SENSBILIDAD

REPRODUC

IB. INCERTID.

(ng/g) (ng/g) (ng/g) AREA/(µg/g) (%) (%)

ALDRIN GRASA 4,5 10,0 10 - 139 73 69-80 2244634,05 4,4 8,7 DIELDRIN GRASA 3,2 6,0 6 - 137 97 92-100 1660409,95 2,9 5,8 Alfa-CLORDANO GRASA 6,0 15,0 15 - 163 90 82-100 2180676,46 7,2 14,5 Gamma-CLORDANO GRASA 4,3 11,0 11 - 143 87 75-96 2280067,11 6,9 13,7 OXICLORDANO GRASA 4,0 10,0 10 - 146 85 80-92 1883458,65 5,5 11,0 ENDRIN GRASA 12,0 23,5 23.5 - 295 77 70-90 1863903,28 8,7 17,4 HEPTACLORO GRASA 4,7 9,5 9.5 - 152 97 82-106 1782682,03 6,6 13,1 HEPTACLORO EPOXIDO GRASA 2,8 5,1 5.1 - 135 86 82-89 2126620,19 2,7 5,4 HEXACLOROBENCENO GRASA 4,5 6,4 6.4 - 148 83 75-93 3379300,13 7,9 15,7 Alfa-HEXACLOROCICLOHEXANO GRASA 4,2 9,0 9 -142 79 71-87 2910541,12 6,8 13,6 Beta-HEXACLOROCICLOHEXANO GRASA 6,2 15,0 15 - 255 83 72-98 1799824,52 9,1 18,2 LINDANO GRASA 4,1 9,5 9.5 - 138 91 82-109 2561478,87 11,9 23,9 o,p’-DDE GRASA 15,4 29,8 29.8 - 263 86 75-90 1975941,99 5,3 10,7 p,p’-DDE GRASA 16,0 32,1 32.1 - 272 87 75-90 2316605,67 5,6 11,3 o,p’-DDD GRASA 15,1 33,2 33.2 - 281 95 82-101 1264165 5,9 11,8 p,p’-DDD GRASA 16,1 28,0 28 - 292 99 85-104 1262745,76 5,8 11,5 o,p’-DDT GRASA 23,1 48,0 48 - 179 85 80-96 1059073,64 6,1 12,2 METOXICLORO GRASA 23,7 52,0 52 - 153 80 71-88 499002,74 8,2 16,4 MIREX GRASA 8,3 17,9 17.9 - 307 80 73-87 1790483,06 5,7 11,3 CONGENERE 28 GRASA 15,8 28,6 28.6 - 400 82 72-98 1324,75 8,8 17,5 CONGENERE 52 GRASA 15,9 30,5 30.5 - 400 76 68-82 1062,15 5,4 10,7

CONGENER GRASA 8,6 15,9 15.9 - 400 92 85-95 1535,34 3,0 6,0

CX/PR 06/38/9-Add.1 page 14 E 101 CONGENERE 118 GRASA 13,7 26,1 26.1 - 400 102 92-108 1814,66 4,5 9,1 CONGENERE 138 GRASA 13,2 26,0 26 - 400 103 93-108 2006,42 3,8 7,5 CONGENERE 153 GRASA 18,2 35,5 35.5 - 400 93 82-106 1729,85 7,3 14,7 CONGENERE 180 GRASA 19,0 38,6 38.6 - 400 96 86-105 1579,12 6,8 13,7

DETERMINACION DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS Y PCB´s EN GRASA POR CROMATOGRAFÍA GASEOSA CON DETECCIÓN POR CAPTURA DE ELECTRONES (GC-ECD)

Laboratorio 2

Los plaguicidas organoclorados se extraen y separan del tejido graso por elución con hexano en una columna de alúmina parcialmente desactivada. El extracto se concentra hasta un volumen adecuado y se inyecta una alícuota en cromatógrafo gaseoso equipado con columnas empacadas (polar y no polar) y detector de captura electrónica, cuantificando contra estándar externo. Confirmación con columna de distinta polaridad.

ALCANCE: El método se utiliza para la identificación y cuantificación de residuos de plaguicidas organoclorados en tejido animal.

METODO: MA 15/9 REFERENCIA: FSIS CHC2 mod. *FSIS CHC3 mod.

ANALI TO

MATRIZ MND MNC

RANGO ANAL. %REC

RANGO % R

SENSBIL IDAD

REPROD.

INCERTID.

(ug/Kg) (ug/Kg) (ug/Kg) Unidad area/ng

HCB GRASA 13 19 19 -132 87,3 78-100 32526 4,7 9,4 a-HCH GRASA 36 51 51 - 136 84,6 76-102 36413 5,4 10,8 g-HCH GRASA 20 29 29 - 155 83,3 76-101 24730 5,4 10,8 b-HCH GRASA 25 35 35 - 244 83,8 73-99 13141 5,4 10,8 o-CLD GRASA 42 60 60 - 160 88,5 77-99 26127 5,2 10,4 HTX GRASA 28 39 39 - 186 84,2 68-96 23572 7,2 14,4

a-CLD GRASA 27 38 38 - 235 85,9 75-98 31348 5,8 11,6 HPT GRASA 41 59 59 - 226 81,1 74-104 19260 8,3 16,6 ALD GRASA 22 31 31 - 226 74,7 59-114 27564 14,6 29,2

g-CLD GRASA 55 77 77 - 258 83,0 73-102 27473 9 18 DLD GRASA 32 45 45 - 220 88,3 72-109 22886 8,8 17,6

op'DDE GRASA 33 48 48 - 216 85,3 73-99 18389 7,9 15,8 pp'DDE GRASA 25 35 35 - 220 84,8 63-98 21912 10,3 20,6 op'DDD GRASA 76 108 108 - 216 87,2 66-99 59733 8,6 17,2

END GRASA 27 39 39 - 228 89,5 68-100 1428 7,7 15,4 pp'DDD GRASA 12 16 16 - 221 88,1 63-108 23347 10,8 21,6


MRX GRASA 68 85 85 - 314 90,0 77-107 14154 7,1 14,2 MTX GRASA 160 220 220 - 2328 92,4 79-113 12140 7,6 15,2

op'DDT GRASA 57 87 87 - 240 89,8 72-105 12142 9,1 18,2 pp'DDT GRASA 15 21 21 - 238 90,3 70-106 39177 9,1 18,2

CONG 28 GRASA 11,5 21,0 21 - 100 87,5 81-95 13433 4,9 9,8 CONG 52 GRASA 10,3 21,0 21 - 100 89,7 79-101 7744 5,5 11

CONG 101 GRASA 11,9 24,0 24 - 100 87,0 81-94 7782 4 8 CONG 118 GRASA 10,9 25,0 25 - 100 88,6 82-97 6507 4,9 9,8 CONG 138 GRASA 10,2 15,0 15 - 100 88,2 79-96 5482 4,8 9,6 CONG 153 GRASA 11,1 17,0 17 - 100 87,4 79-95 544 4,3 8,6 CONG 180 GRASA 13,9 23,0 23 - 100 85,9 76-94 636 4,9 9,8

DETERMINACION DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS Y PCB´s EN LECHE POR CROMATOGRAFÍA GASEOSA CON DETECCIÓN POR CAPTURA DE ELECTRONES (GC-ECD)

Laboratorio 1

A una porción representativa de la muestra se le agrega Metanol y la grasa es extraída con una mezcla de Hexano-Éter Etílico. Los Plaguicidas son extraídos y separados de la grasa por elución con solvente no polar en columna de vidrio que contiene Alúmina parcialmente desactivada. El eluato es cuidadosamente evaporado a un volumen de 1 ml y una alícuota es inyectada en el cromatógrafo gaseoso con detector de captura de electrones para la detección y cuantificación de los analitos por estándar externo utilizando una columna capilar de polaridad intermedia-alta. Para la confirmación de los plaguicidas, la muestra es inyectada en el cromatógrafo por una segunda columna capilar de polaridad baja aplicando el mismo programa de temperaturas.

METODO: PCP-ME Nº 012 REFERENCIA: FSIS, Versión Julio Método CHC2


RANGO % R

SENSBILIDAD

REPRODUC

IB. INCERTI

D.

(ng/g) (ng/g) (ng/g) PROM

. AREA/(µg/

g)

ALDRIN LECHE 0,364 0,738 0,738 - 4,579 86 80 - 95 2276065 5,7 11,4

DIELDRIN LECHE 0,285 0,600 0,600 - 4,501 90 87 - 97 1732704 4,3 8,5

Alfa-CLORDANO LECHE 0,235 0,417

0,417 - 4,730 83 78 - 88 2206148 4,0 8,1

Gamma-CLORDANO LECHE 0,213 0,430

0,430 - 4,157 79 74 - 87 2326055 5,5 11,0

OXICLORDANO LECHE 0,478 0,782

0,782 - 4,241 78 73 - 83 1963355 4,2 8,4

ENDRIN LECHE 0,495 1,000 1,000 - 18,895 93 86 - 97 1462647 4,9 9,8

HEPTACLORO LECHE 0,329 0,745 0,745 - 4,997 92 85 - 104 1841300 6,7 13,3

CX/PR 06/38/9-Add.1 page 16 HEPTACLORO EPOXIDO LECHE 0,360 0,714

0,714 - 4,440 84 80 - 92 2216627 4,8 9,6

HEXACLOROBENCENO LECHE 0,369 0,708

0,708 - 4,872 83 70 -100 3653763 11,9 23,8

Alfa-HEXACLOROCICLOHEXANO LECHE 0,470 0,790

0,790 - 4,656 78 68 - 93 3178930 10,9 21,2

Beta-HEXACLOROCICLOHEXANO LECHE 0,308 0,577

0,577 - 3,879 78 73 - 88 1740046 6,1 12,1

LINDANO LECHE 0,498 0,964 0,964 - 4,547 82 74 - 91 2617450 7,5 14,9

o,p’-DDE LECHE 0,439 0,821 0,821 - 7,637 84 76 - 93 2084134 6,2 12,3

p,p’-DDE LECHE 0,507 1,002 1,002 - 7,906 83 76 - 89 23533001 5,6 11,3

o,p’-DDD LECHE 0,392 0,794 0,794 - 8,174 92 85 - 98 1294204 4,5 9,0

p,p’-DDD LECHE 0,374 0,700 0,700 - 8,489 96 89 -102 1250213 4,4 8,8

o,p’-DDT LECHE 1,293 2,161 2,161 - 23,568 85 76 - 93 1212499 6,2 12,5

p,p’-DDT LECHE 0,514 1,118 1,118 - 18,195 94 88 - 106 1013878 6,8 13,6

METOXICLORO LECHE 1,156 2,034

2,034 - 19,658 95 90 - 101 393557 4,4 8,8

MIREX LECHE 0,419 0,880 0,880 - 19,658 87 83 - 93 1993986 3,4 6,8

CONGENERE 28 LECHE 0,439 0,906

0,906 - 3,136 72,1 70 - 86 960539 7,8 15,6


0,768 - 3,136 73,4 69 - 86 796147 10,2 20,4


0,856 - 3,16 79,7 70 - 110 1159400 11,3 22,6


0,574 - 3,16 96,2 78 - 102 1179301 7,3 14,6


0,538 - 3,16 91,0 79 - 101 1327493 6,2 12,4


0,552 - 3,16 98,4 80 - 105 1320456 5,9 11,8


0,547 - 3,16 94,1 77 - 103 1322101 8,1 16,2


DETERMINACION DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS Y PCB´s EN MIEL POR CROMATOGRAFÍA GASEOSA CON DETECCIÓN POR CAPTURA DE ELECTRONES (GC-ECD)

Laboratorio 1

Una porción representativa de la muestra de miel es disuelta en Metanol y sembrada en una columna de Florisil activado. Los Plaguicidas son eluidos con Hexano y el extracto se lleva a un volumen final de 10 ml. Una alícuota es inyectada en el cromatógrafo gaseoso con detector de captura de electrones para la detección y cuantificación de los analitos por estándar externo utilizando una columna capilar de polaridad intermedia-alta. Para la confirmación de los plaguicidas, la muestra es inyectada en el cromatógrafo por una segunda columna capilar de polaridad baja aplicando el mismo programa de temperaturas.

METODO: PCP-ME Nº 021 REFERENCIA: Intern. J. Environ Anal Chem, Vol 57, pp. 63-71, 1994, Veterinary Drug Residues Second Edition. J. Chromatogr., 624, 353-367, 1992.

ANALITO MATRI

Z MND MNC RANGO ANAL. %REC

RANGO % R

SENSBILIDAD

REPRODUCIB.

INCERTID.

(ng/g) (ng/g) (ng/g) AREA/(µ

g/g)

ALDRIN MIEL 5,2 10,0 10,0 - 125,9 91 78 - 101 5821,843 7,3 14,6

DIELDRIN MIEL 5,3 10,4 10,4 - 119,8 91 80 - 106 3780,786 8,1 16,2

Alfa-CLORDANO MIEL 3,3 6,2 6,2 - 79,7 93 81 - 107 5023,634 6,8 13,6 Gamma-CLORDANO MIEL 3,2 6,9 6,9 - 78,6 92 80 - 105 4802,081 7,7 15,4 OXICLORDANO MIEL 4,6 8,0 8,0 - 117,8 94 84 - 108 3461,133 7,1 14,2 Alfa-ENDOSULFAN MIEL 3,5 6,9 6,9 - 121,5 78 72 - 86 4683,248 4,9 9,8 Beta-ENDOSULFAN MIEL 4,6 9,1 9,1 - 118,3 76 70 - 88 4129,173 6,0 11,9 ENDOSULFAN SULFATO MIEL 4,8 8,5 8,5 - 158,3 93 80 - 104 3331,646 5,9 11,8

ENDRIN MIEL 5,4 10,0 10,0 - 159,0 95 81 - 110 3179,991 7,5 15,0

HEPTACLORO MIEL 3,6 7,6 7,6 - 118,3 89 76 - 97 4075,250 7,4 14,8 HEPTACLORO EPOXIDO MIEL 4,9 8,9 8,9 - 121,1 90 80 - 105 4090,174 7,6 15,2 HEXACLOROBENCENO MIEL 2,9 5,1 5,1 - 87,6 79 70 - 91 6371,748 8,0 16,0 Alfa-HEXACLOROCICLOHEXANO MIEL 3,7 6,2 6,2 - 81,7 91 72 - 109 5105,432 10,6 21,1 Beta-HEXACLOROCICLOHEXANO MIEL 9,3 13,6

13,6 - 168,8 83 70 - 102 2263,122 10,8 21,6

LINDANO MIEL 4,9 8,1 8,1 - 117,0 92 78 - 108 4449,425 8,3 16,6 o,p’-DDE MIEL 4,3 8,3 8,3 - 124,4 97 84 - 110 3829,987 8,8 17,6

CX/PR 06/38/9-Add.1 page 18 p,p’-DDE MIEL 3,9 7,5 7,5 - 123,0 91 77 - 99 5351,866 7,4 14,8

o,p’-DDD MIEL 7,8 14,1 14,1 -245,8 90 76 - 102 2327,825 8,1 16,2

p,p’-DDD MIEL 7,0 13,5 13,5 - 243,0 93 75 - 101 2721,386 7,2 14,4

o,p’-DDT MIEL 6,7 10,9 10,9 - 161,0 92 79 - 107 2280,594 7,9 15,8

p,p’-DDT MIEL 8,1 14,9 14,9 - 238,8 88 80 - 99 2367,119 7,0 13,9

METOXICLORO MIEL 45,2 90,8 90,8 - 949,4 88 77 - 108 931,960 9,2 18,4

MIREX MIEL 5,0 9,7 9,7 - 162,4 92 83 - 103 3016,969 6,0 12,0 CONGENERE 52 MIEL 4,8 8,7 8,7 - 198,7 94 83 - 105 1847,712 6,0 19,9 CONGENERE 101 MIEL 4,9 11,2

11,2 - 198,7 92 73 - 106 2787,095 7,4 14,7

CONGENERE 118 MIEL 4,1 8,6 8,6 - 198,7 94 77 - 103 3189,143 5,7 11,4 CONGENERE 138 MIEL 6,1 11,7

11,7 - 198,7 90 72 - 105 3657,809 7,1 14,2

CONGENERE 153 MIEL 4,9 9,1 9,1 - 198,7 94 73 - 103 3067,751 7,1 14,2 CONGENERE 180 MIEL 7,2 14,2

14,2 - 198,7 92 73 - 101 4028,698 8,8 17,7

DETERMINACION DE PLAGUICIDAS ORGANOFOSFORADOS EN GRASA POR CROMATOGRAFÍA GASEOSA CON DETECCIÓN ESPECIFICA PARA FÓSFORO (GC-FPD)

Laboratorio 1

Una porción representativa de muestra es disuelta con Hexano y los Plaguicidas son extraídos con Acetonitrilo que se decanta sobre una solución acuosa de Sulfato de Sodio. Se re-extrae con Hexano y se concentra a un volumen de 1 ml. Los Plaguicidas son purificados en columna de Florisil y eluidos con Cloruro de Metileno. El eluato se concentra a 0.5 ml y una alícuota se analiza con el cromatógrafo gaseoso con detector específico para Fósforo para la detección y cuantificación de los analitos con estándar interno utilizando una columna capilar de polaridad baja. Para la confirmación de los plaguicidas, la muestra es inyectada en el cromatógrafo con otra columna capilar de distinta polaridad y/o con otro tipo de detector.

METODO: PCP-ME Nº 022 REFERENCIA: FSIS. Versión 1991, ORP 1.1-16.

MND MNC RANGO ANALIT. %REC SENSBI

LIDAD REPRODUCIB.

ANALITO MATRIZ

(ng/g) (ng/g) (�g/g) (promedio)

RANGO % REC

AREA/(µg/g) (%)

INCERTID. (%)

Clorfenvinfós Grasa 19,5 35,0 0.20 - 0.80 97,0 66 - 129 961,7 17,0 34,0 Clorpirifós Grasa 7,0 15,0 0.10 - 0.40 88,0 50 - 121 1993,7 14,0 28,0 Cumafós Grasa 41,0 63,0 0.20 - 0.80 81,0 50 - 103 981,0 18,0 36,0 Diazinón Grasa 4,0 8,5 0.15 - 0.60 80,0 72 - 89 2576,4 5,0 10,0 Etilbromofós Grasa 3,0 5,0 0.10 - 0.40 84,0 75 - 92 1815,1 5,0 10,0 Etión Grasa 11,5 21,7 0.05 - 0.20 100,0 67 - 137 5775,1 17,0 34,0

CX/PR 06/38/9-Add.1 page 19 Fenitrotión Grasa 8,5 13,1 0.15 - 0.60 82,0 59 - 102 1851,2 13,0 26,0 Fentión Grasa 6,0 14,0 0.10 - 0.40 80,0 69 - 108 2528,1 8,0 16,0 Metilbromofós Grasa 5,0 8,0 0.10 - 0.40 93,0 81 - 104 1449,7 6,0 12,0 Metilparatión Grasa 10,0 19,0 0.15 - 0.60 80,0 51 - 109 1669,8 8,0 16,0

Laboratorio 2

La muestra se disuelve en éter de petróleo y luego se extrae con acetonitrilo saturado en éter de petróleo. Losextractos de acetonitrilo se diluyen con agua para lograr la partición de los residuos de plaguicidas en éter depetróleo. Los residuos contenidos en el concentrado de los eluatos se cuantifican por cromatografía gas líquido con detector N/P. Para confirmar se utiliza columna de distinta polaridad

METODO: MA 05/09 REFERENCIA: AOAC Nº970.52

ANALITO MATRIZ MND MNC

RANGO ANAL. %REC

RANGO % R

SENSBILIDAD

REPROD.

INCERTID.

(ng/g) (ng/g) (ng/g) Unidad area/ng

CLORFENVINFOS GRASA 14 24 24-514 99,1 81-117 270,0 9,5 19,0

CLORPIRIFOS GRASA 7 15 15-424 91,8 76-121 864,0 10,7 21,4

CUMAFOS GRASA 25 40 40-1044 82,0 63-114 189,0 15,5 31,0

DIAZINON GRASA 3 9 9-144 89,2 71-109 1192,0 10,4 20,8

ETILBROMOFOS GRASA 8 17 17-354 92,9 62-102 707,0 12,3 24,6

METILBROMOFOS GRASA 9 18 18-316 93,1 74-113 504,0 10,5 21,0

ETION GRASA 8 14 14-146 86,8 66-106 1304,0 10,1 20,2

FENITROTION GRASA 11 19 19-344 78,4 61-95 570,6 12,1 24,2

FENTION GRASA 8 18 18-236 81,6 63-102 967,0 14,6 29,2

DETERMINACION DE PLAGUICIDAS ORGANOFOSFORADOS EN HIGADO POR CROMATOGRAFÍA GASEOSA CON DETECCIÓN ESPECIFICA PARA FÓSFORO (GC-FPD)

Laboratorio 1

Una muestra representativa de tejido es homogenizada y los Plaguicidas son extraídos con una mezcla de Acetato de Etilo-Hexano. El filtrado se concentra y se re-extrae con Acetonitrilo saturado en Hexano. Los Plaguicidas son purificados por columna de Celite-Carbón-Oxido de Magnesio y eluidos con Cloruro de Metileno. El eluato se concentra hasta un volumen final de 0.5 ml y una alícuota se analiza con el cromatógrafo gaseoso con detector específico para Fósforo para la detección y cuantificación de los analitos con estándar interno utilizando una columna capilar de polaridad baja. Para la confirmación de los plaguicidas, la muestra es inyectada en el cromatógrafo con otra columna capilar de distinta polaridad y/o con otro tipo de detector.


METODO: PCP-ME Nº 002 REFERENCIA: FSIS. Versión 1991, ORP 1.1-16.

MND MNC RANGO ANALIT. %REC SENSBI

LIDAD REPRODUCIB.

ANALITO

MATRIZ

(ng/g) (ng/g) (�g/g) (promed

io)

RANGO % REC AREA/(

µg/g) (%)

INCERTID. (%)

Clorfenvinfós Hígado 10,0 20,0 0.20 - 0.80 80,0 68 - 92 961,7 10,0 20,0

Clorpirifós Hígado 10,0 23,0 0.10 - 0.40 71,0 61 - 83 1993,7 10,0 20,0

Cumafós Hígado 24,0 55,0 0.20 - 0.80 92,0 77 - 106 981,0 11,0 22,0

Diazinón Hígado 10,0 20,0 0.15 - 0.60 69,0 59 - 78 2576,4 11,0 22,0

Etilbromofós Hígado 7,0 30,0 0.10 - 0.40 82,0 71 - 94 1815,1 6,0 12,0

Etión Hígado 10,0 23,0 0.05 - 0.20 78,0 65 - 86 5775,1 7,0 14,0

Fenitrotión Hígado 10,0 20,0 0.15 - 0.60 85,0 70 - 94 1851,2 10,0 20,0

Fentión Hígado 7,0 20,0 0.10 - 0.40 83,0 71 - 105 2528,1 9,0 18,0

Metilbromofós Hígado 10,0 24,0 0.10 - 0.40 70,0 59 - 81 1449,7 11,0 22,0

Metilparatión Hígado 10,0 38,0 0.15 - 0.60 82,0 70 - 90 1669,8 8,0 16,0

DETERMINACION DE PIRETROIDES EN GRASA POR CROMATOGRAFÍA GASEOSA CON DETECCIÓN ESPECÍFICA PARA FÓSFORO (GC-ECD)

Laboratorio 2

En este procedimiento, una porción de grasa, previamente cortada en pequeños trozos, se extrae con acetonitrilo saturado en éter de petróleo. Luego de lavados con éter de petróleo, el extracto es evaporado. El residuo reconstituido es purificado en columna de florisil, cuyo eluido se inyecta en el cromatógrafo.

La sustancia se determina mediante cromatografía gaseosa con detector de captura de electrones (GC-ECD), se confirma utilizando una columna de distinta polaridad.

METODO: MA 18/09 REFERENCIA: FSIS. Versión 1991 modif.


RANGO % R

SENSBILIDAD

REPROD.

INCERTID.

(ug/g) (ug/g) (ug/g) Unidad area/ng

CIALOTRINA GRASA 13,7 30,3 30.3 - 66,8 87,3 107-72 1224572

25 23,6 47,2 cis-PERMET RINA GRASA 30,9 63,9 63.9 - 210,9 81,6 98-70 1721390 17,2 34,4 trans-PERMETRINA GRASA 31,2 61,0 61 - 201,7 86,9 100-75 2114445 15 30

CIFLUTRINA GRASA 17,3 40,5 40.5 - 114,6 87,2 106-73 1115031

5 22 44 CIPERMETRINA GRASA 15,1 39,6 39.6 - 112,5 90,5 107-77 7643299 15,7 31,4

CX/PR 06/38/9-Add.1 page 21 FLUCITRINATO GRASA 7,4 18,4 18.4 - 272,5 89,3 106-74

10471120 17,2 34,4

FENVALERATO GRASA 9,4 20,4 20.4 - 56,55 96,7 111-87 7825711 12,2 24,4 DELTAMETRINA GRASA 34,5 79,0 79 - 120 92,0 124-73 7023274 26 52

DETERMINACION DE CARBAMATOS EN TEJIDOPOR CROMATOGRAFÍA LIQUIDA DE ALTA RESOLUCIÓN GASEOSA CON DETECCIÓN DE FLUORESCENCIA (HPLC-FLD)

Laboratorio 2

En este procedimiento, una porción de músculo, previamente picado y homogeneizado, se extrae con una mezcla de Etanol-Acetato de etilo 5:95. Luego de la evaporación de una alícuota del extracto, el residuo es purificado en columna de amino. Se analiza por HPLC-FLD, se aplica a músculo e hígado

METODO: MA 40/09 REFERENCIA: FSIS. Versión 1991.


RANGO ANAL.

%REC

RANGO % R SENSIB

REPROD.

INCERTID.

(ng/g) (ng/g) (ng/g) Unid.Area/n

gr

ALDICARB MUSCULO 1,1 2,1 2,1 - 20 91 70 - 102,4 47,72 7,1 14,2 ALDICARB SULFOXIDO MUSCULO 1,4 2,4 2,4 - 20 87

71,6 - 100,6 76,62 8,4 16,8

ALDICARB SULFONA MUSCULO 1,6 3,3 3,3 - 20 91

80.6 - 110.6 90,75 7,9 15,7

CARBARYL MUSCULO 9,3 15,715,7 - 100 92

73,7 - 106,6 60,80 10,6 21,3

CARBOFURAN MUSCULO 6,0 11,511,5 - 100 91 72,4 - 104 35,88 9,4 18,9

3-HIDROXI CARBOFURAN MUSCULO 5,9 11,7

11,7 - 100 90

77,8 - 105,7 33,81 9,4 18,8

DETERMINACION DE AMITRAZ EN GRASA Y MIEL POR CROMATOGRAFÍA GASEOSA CON DETECTOR DE ESPECTROMETRIA DE MASAS (GC-MS)

Laboratorio 2

El método se utiliza para la identificación y cuantificación de residuos de amitraz en tejido animal y miel. Amitraz [N-methylbis(2,4-xylyliminomethyl)amine], es un acaricida e insecticida activo contra un amplio rango de larvas e insectos.El presente método determina el contenido de Amitraz total ya que éste junto a sus metabolitos son convertidos, porhidrólisis alcalina, a 2,4 dimetilanilina, éste es un producto final estable que se determina directamente por GC-MS, sin derivatización. El método consiste en disolución de la muestra, purificación por columnas de C-18 (miel) o sílica gel (grasa), hidrólisis alcalina y determinación y cuantificación por GC-MS.

METODO: MA 42/09 REFERENCIA: Det.Total Amitraz Residue in Honey by GC/ ECD. Council Regulatory EEC Nro. 2377/90 PAM-VOL II y Analyst 1993 GC-MS Methods for the simultaneus det. Amitraz, Coumaphos, Cymazole, Fluvalinate in honey



RANGO ANAL. %REC

RANGO % R SENSBIL REPROD.INCERTID.


AMITRAZ GRASA 5,50 10,00 10 - 100 80,6 68-92 44,59 7,5 14,9

AMITRAZ MIEL 4,00 10,00 10 - 100 75,8 63-89 0,2034 8,3 16,6

DETERMINACION DE ABAMECTINA EN HIGADO, MÚSCULO Y LECHE POR CROMATOGRAFÍA LIQUIDA DE ALTA RESOLUCIÓN CON DETECCIÓN DE FLUORESCENCIA (HPLC-FLD)

Laboratorio 2

Los compuestos en estudio se extraen de la grasa con Acetonitrilo y se separan de la misma físicamente por centrifuga y baja temperatura (-18 ºC ). Luego el extracto es evaporado y se derivatiza con Metilimidazol y ácido trifluoracético.

Una porción de leche, se extrae con Acetonitrilo y se purifica por columna de Alúmina. Se evapora a sequedad, se derivatiza con Metilimidazole-Trifluoroacético y se determina mediante cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) con columna de Carbono 18 y detección fluorescente, a longitud de onda excitación 365 y de emisión 465nm El método es también aplicable a músculo e hígado (ave, bovino, porcino).

METODO: MA 48/09 REFERENCIA: Journal of AOAC vol. 83 Nº 1 (2000) .Simultaneus det. Of Eprinomectin, Abamectin, Doramectin and Ivermectin in beef liver by HPLC-FLD


RANGO ANAL. %REC

RANGO % R

SENSBILIDAD

REPROD.

INCERTID.


ABAMECTINA HIG/MUSC 1,2 3 3.0-40.6 92,4 78-116 39,36 9,2 18,5

ABAMECTINA Leche 1,2 3 3.0-35.6 93,2 77-109 52,32 9,2 18,4

DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS EN FRUTAS Y HORTALIZAS CON PURIFICACIÓN POR EXTRACCIÓN EN FASE SÓLIDA Y CROMATOGRAFÍA DE GASES CON DETECTORES ECD, FID Y FTD.

Laboratorio 3

Una porción representativa de la muestra del fruto u hortaliza es disuelta en una mezcla de hexano acetona y sembrada en una columna de Florisil activado. Los Plaguicidas son eluidos con la mezcla de solventes, reciben sonicación para favorecer la posterior extracción por vacío y el extracto se lleva a un volumen final estandarizado. Una alícuota es inyectada en el cromatógrafo gaseoso con detector de captura de electrones y por el detector de ionización por flama para la detección y cuantificación de los analitos por estándar externo utilizando una columna capilar de polaridad intermedia-alta. Para la confirmación de los plaguicidas, la

CX/PR 06/38/9-Add.1 page 23 muestra es inyectada en el cromatógrafo por una segunda columna capilar de polaridad baja aplicando el mismo programa de temperaturas.

METODO: LCQ-FH Nº 001 REFERENCIA Official Methods de AOAC INTERNATIONAL; Pesticide Analytical Manual, Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) EE.UU.; Manual of Pesticide Residue Análisis

DETERMINACIÓN DE 2,4 D EN CÍTRICOS CON PURIFICACIÓN POR EXTRACCIÓN EN FASE SÓLIDA Y CROMATOGRAFÍA GASEOSA CON DETECTOR ECD

Laboratorio 3

Una porción representativa de la muestra de citricos es disuelta en una mezcla de metanol cloruro de etileno y sembrada en una columna de Florisil activado. Los Plaguicidas son eluidos con la mezcla de solventes, reciben sonicación para favorecer la posterior extracción por vacío. Se concentra el analito por evaporación. El concentrado resultante de estérifica con metanol acidificado. Se vuelve a concentrar y se lleva a un volumen final estandarizado con ciclohexano. Una alícuota es inyectada en el cromatógrafo gaseoso con detector de captura de electrones para la detección y cuantificación de los analitos por estándar externo utilizando una columna capilar de polaridad intermedia-alta. Para la confirmación de los plaguicidas, la muestra es inyectada en el cromatógrafo por una segunda columna capilar de polaridad baja aplicando el mismo programa de temperaturas.

METODO: LCQ-CI Nº 002 REFERENCIA Official Methods de AOAC INTERNATIONAL; Pesticide Analytical Manual, Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) EE.UU.; Manual of Pesticide Residue Análisis

ANALITO MATRIZ MNDRANGO ANAL. %REC

RANGO % R INCERTID.

(ppm) (ppm)

2,4 D CITRICOS 0,01 2 - 8 95 90 - 100 15,8

DETERMINACION DE PLAGUICIDAS HEXATIAZOL Y MICROBUTANIL EN FRUTILLA POR CROMATOGRAFÍA GASEOSA CON DETECCIÓN POR CAPTURA DE ELECTRONES (GC-ECD)

Laboratorio 3

Una porción representativa de la muestra del fruto es disuelta en metanol y sembrada en una columna de Florisil activado. Los Plaguicidas son eluidos con este solvente, reciben sonicación para favorecer la posterior extracción por vacío y el extracto se lleva a un volumen final estandarizado. Una alícuota es inyectada en el cromatógrafo gaseoso con detector de captura de electrones para la detección y cuantificación de los analitos por estándar externo utilizando una columna capilar de polaridad intermedia-alta. Para la confirmación de los plaguicidas, la muestra es inyectada en el cromatógrafo por una segunda columna capilar de polaridad baja aplicando el mismo programa de temperaturas.

METODO: LRQ-FR Nº 003 REFERENCIA Official Methods de AOAC INTERNATIONAL; Pesticide Analytical Manual, Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) EE.UU.; Manual of Pesticide Residue Análisis

ANALITO MATRIZ MNDRANGO ANAL. %REC RANGO % R INCERTID.

(ppm) (ppm)

HEXATIAZOL FRUTILLA 0,01 2 - 7 95 90 - 100 4,5

CX/PR 06/38/9-Add.1 page 24 MICROBUTANIL FRUTILLA 0,01 2 - 7 95 90 - 100 4,5

DETERMINACION DE PLAGUICIDAS GUAZATINA, PROCLORAZ E IMAZALIL EN CITRICOS POR CROMATOGRAFÍA GASEOSA CON DETECCIÓN POR CAPTURA DE ELECTRONES (GC-ECD)

Laboratorio 3

Una porción representativa de la muestra del fruto es disuelta en la mezcla de solventes hexano-acetato de etilo y sembrada en una columna de Florisil activado. Los Plaguicidas son eluidos con esta mezcla de solventes, reciben sonicación para favorecer la posterior extracción por vacio y el extracto se lleva a un volumen final estandarizado. Una alícuota es inyectada en el cromatógrafo gaseoso con detector de captura de electrones para la detección y cuantificación de los analitos por estándar externo utilizando una columna capilar de polaridad intermedia-alta. Para la confirmación de los plaguicidas, la muestra es inyectada en el cromatógrafo por una segunda columna capilar de polaridad baja aplicando el mismo programa de temperaturas.

METODO: LRQ-CI Nº 004 REFERENCIA Official Methods de AOAC INTERNATIONAL; Pesticide Analytical Manual, Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) EE.UU.; Manual of Pesticide Residue Análisis

ANALITO MATRIZ MNDRANGO ANAL. %REC RANGO % R INCERTID.

(ppm) (ppm)

GUAZATINA CITRICOS 0,01 2 - 8 95 90 - 100 4,5

PROCLORAZ CITRICOS 0,01 2 - 8 95 90-100 4,5

IMAZALIL CITRICOS 0,01 2 - 8 95 90-100 4,5

DETERMINACION DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS, ORGANOFOSFORADOS Y PIRETROIDES EN ACEITES ESENCIALES EN CITRICOS POR CROMATOGRAFÍA GASEOSA CON DETECCIÓN POR CAPTURA DE ELECTRONES (GC-ECD) Y DETECTOR DE IONIZACIÓN POR FLAMA (GC-FID)

Laboratorio 3

Una porción representativa de la muestra del aceite esencial es disuelta en la mezcla de solventes hexano-acetona y sembrada en una columna de Florisil activado. Los Plaguicidas son eluidos con esta mezcla de solventes, reciben sonicación para favorecer la posterior extracción por vacío y el extracto se lleva a un volumen final estandarizado. Una alícuota es inyectada en el cromatógrafo gaseoso con detector de captura de electrones para la detección y cuantificación de los analitos por estándar externo utilizando una columna capilar de polaridad intermedia-alta. Para la confirmación de los plaguicidas, la muestra es inyectada en el cromatógrafo por una segunda columna capilar de polaridad baja aplicando el mismo programa de temperaturas.

METODO: LRQ-AC Nº 005 REFERENCIA Official Methods de AOAC INTERNATIONAL; Pesticide Analytical Manual, Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) EE.UU.; Manual of Pesticide Residue Análisis

ANALITO MATRIZ MND RANGO ANAL. %REC

RANGO % R INCERTID.


(ppm) (ppm)

HCB, Dieldrin, alfaHCH, PP´DDE, heptacloro, PP´DDT, mirex, gamaHCH, transpermetrina, Imidacloprid, dicofol, malation, tetradifon.

ACEITES CITRICOS 0,01 2 - 8 94 90 - 100 4,5

DETERMINACION DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS, ORGANOFOSFORADOS Y PIRETROIDES EN TOMATE POR CROMATOGRAFÍA GASEOSA CON DETECCIÓN POR CAPTURA DE ELECTRONES (GC-ECD) Y DETECTOR DE IONIZACIÓN POR FLAMA (GC-FID)

Laboratorio 3

Una porción representativa de la muestra del tomate es disuelta en la mezcla de solventes hexano-acetato de etilo y sembrada en una columna de Florisil activado. Los Plaguicidas son eluidos con esta mezcla de solventes, reciben sonicación para favorecer la posterior extracción por vacío y el extracto se lleva a un volumen final estandarizado. Una alícuota es inyectada en el cromatógrafo gaseoso con detector de captura de electrones y por el detector de ionización por flama para la detección y cuantificación de los analitos por estándar externo utilizando una columna capilar de polaridad intermedia-alta. Para la confirmación de los plaguicidas, la muestra es inyectada en el cromatógrafo por una segunda columna capilar de polaridad baja aplicando el mismo programa de temperaturas.

METODO: LRQ-TO Nº 006 REFERENCIA Official Methods de AOAC INTERNATIONAL; Pesticide Analytical Manual, Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) EE.UU.; Manual of Pesticide Residue Análisis


RANGO % R

INCERTID.

(ppm) (ppm)

Heptacloro, clorotalonil, alfaendosulfan,, Ensodosulfan, delta HCH, clorpirifos, PP´DDD, tetradifon TOMATE 0,01 2 - 8 93 90 -100 4,5

DETERMINACION DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS, ORGANOFOSFORADOS Y PIRETROIDES EN ACEITE DE SOJA POR CROMATOGRAFÍA GASEOSA CON DETECCIÓN POR CAPTURA DE ELECTRONES (GC-ECD)Y EL DETECTOR DE IONIZACIÓN POR FLAMA (GC-FID)

Laboratorio 3

Una porción representativa de la muestra del aceite esencial es disuelta en la mezcla de solventes hexano-acetona y sembrada en una columna de Florisil activado. Los Plaguicidas son eluidos con esta mezcla de solventes, reciben sonicación para favorecer la posterior extracción por vacío y el extracto se lleva a un volumen final estandarizado. Una alícuota es inyectada en el cromatógrafo gaseoso con detector de captura de electrones y por el detector de ionización por flama para la detección y cuantificación de los analitos por estándar externo utilizando una columna capilar de polaridad intermedia-alta. Para la confirmación de los plaguicidas, la muestra es inyectada en el cromatógrafo por una segunda columna capilar de polaridad baja aplicando el mismo programa de temperaturas.

CX/PR 06/38/9-Add.1 page 26 METODO: LRQ -AS Nº 007 REFERENCIA Official Methods de AOAC INTERNATIONAL; Pesticide Analytical Manual, Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) EE.UU.; Manual of Pesticide Residue Análisis


RANGO % R

INCERTID.

(ppm) (ppm)

Clorpirifos, fenitrotion, cipermetrina, Alfacipermetrina, deltametrina, Endosulfam, tetraconazole, Propiconazole, difenoconazole, Cyproconazole, trifloxystrobin, Ipconazole, tebuconazole, Epoxiconazole, pyroclostrobin, Carbenzadin, azoxistrobina, atrazina, 2-4D, metsulfuron

ACEITE DE SOJA 0,01 2 - 8 95 90 - 100 4,5

DETERMINACION DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS Y PCB´s EN MIEL POR CROMATOGRAFÍA GASEOSA CON DETECCIÓN POR CAPTURA DE ELECTRONES (GC-ECD)

Laboratorio 3

Una porción representativa de la muestra de miel es disuelta en Metanol y sembrada en una columna de Florisil activado. Los Plaguicidas son eluidos con Hexano y el extracto se lleva a un volumen final de 10 ml. Una alícuota es inyectada en el cromatógrafo gaseoso con detector de captura de electrones para la detección y cuantificación de los analitos por estándar externo utilizando una columna capilar de polaridad intermedia-alta. Para la confirmación de los plaguicidas, la muestra es inyectada en el cromatógrafo por una segunda columna capilar de polaridad baja aplicando el mismo programa de temperaturas.

METODO: LRQ-MI Nº 007 REFERENCIA: Intern. J. Environ Anal Chem, Vol 57, pp. 63-71, 1994, Veterinary Drug Residues Second Edition. J. Chromatogr., 624, 353-367, 1992.

ANALITO MATRIZ MNDRANGO ANAL. %REC

RANGO % R INCERTID.

(ppm) (ppm)

Plaguicidas organoclorados MIEL 0,01 2 - 8 97 90 - 100 4,5

DETERMINACION DE DISTINTAS SUSTANCIAS EN ALIMENTOS DE ORIGEN VEGETAL

Laboratorio 4

Los principios activos se extraen de los productos de origen vegetal con solvente, se purifican y determinan por Cromatografía gaseosa (GC) o líquida de alta resolución (HPLC), con detectores de captura de electrones (GC-ECD), específico para fósforo (GC-FPD), de fluorescencia (FLD) o arreglo de diodos (DAD) según las características del analito.

ANALITO MATRIZ MND MNC %REC Método de

(mg/Kg) (mg/Kg) cuantificación

ABAMECTINA PAPA 0,002 0,005 94,5 HPLC FLD

CX/PR 06/38/9-Add.1 page 27 ACETAMIPRID ACEITE 0,070 0,250 86,1 HPLC DAD ACETAMIPRID POROTO 0,020 0,050 89,8 HPLC DAD BETACIFLUTRIN SOJA 0,010 0,020 98 GC ECD BISPIRIBAC SODICO ARROZ 0,006 0,020 93 HPLC DAD BUTRALIN CEBOLLA 0,007 0,020 92 GC NPD CIPROCONAZOLE CEBADA 0,010 0,025 94,4 GC NPD

CLETODIM SEMILLA DE ALGODÓN 0,075 0,250 84,6 HPLC DAD

CLORSULFURON TRIGO 0,006 0,020 96,7 HPLC DAD CIPRODINIL VINO 0,200 0,600 87 HPLC DAD CIROMAZINE PAPA 0,070 0,250 88,2 HPLC DAD DICLOFOP METIL CEBADA 0,010 0,020 95,3 GC ECD DIFENOCONAZOLE SOJA 0,020 0,050 91 GC ECD EPOXICONAZOLE SOJA 0,002 0,005 95,4 GC ECD FAMOXADONE PAPA 0,010 0,040 93,7 GC ECD FLUDIOXINIL MANZANA PERA 0,300 1,000 92,7 HPLC DAD FLUROXIPIR CAÑA DE AZUCAR 0,020 0,070 86,2 GC ECD FLUSILAZOLE SOJA 0,002 0,005 90,6 GC NPD CYAZOFAMID TOMATE 0,020 0,070 94,7 HPLC DAD IMAZAPIC ARROZ 0,010 0,025 93,1 HPLC DAD IMAZAPIR ARROZ 0,010 0,025 88,3 HPLC DAD IMAZETAPIR ARROZ 0,003 0,010 87,8 HPLC DAD IMIDACLOPRID SOJA 0,001 0,002 98,1 HPLC DAD LAMBDA - CYALOTRINA TABACO 0,004 0,010 87,6 GC ECD LAMBDA - CYALOTRINA POROTO 0,003 0,007 94,8 GC ECD LUFENURON SOJA 0,003 0,010 98,8 HPLC DAD MICLOBUTANIL SOJA 0,002 0,007 89,5 GC NPD PROCLORAZ SOJA 0,006 0,025 86,9 HPLC DAD TEBUCONAZOLE SOJA 0,020 0,050 94,9 GC NPD TETRACONAZOLE SOJA 0,010 0,030 93,3 HPLC DAD TIAMETOXAN POROTO 0,001 0,004 97,3 HPLC DAD TRIADIMEFON SOJA 0,010 0,040 91,7 GC ECD

DETERMINACION DE PLAGUICIDAS y OTROS COMPUESTOS ORGANOFOSFORADOS GC-MS O GC- FTIR (Cromatografía gaseosa acoplada a espectrofotometría infrarroja con transformada de Fourier)

Laboratorio 5

Sistema de Detección: GCQ Finnigan equipado con una columna capilar ionización electrónica. Los compuestos son inyectados a partir de disoluciones en cloruro de metileno. El análisis de las muestras se realiza usando un cromatógrafo de gases Finnigan Mat GCQ cpm autosampler Finnigan A200S, acoplado a través de una línea de transferencia a un espectrofotómetro de masa Ion Trap Finnigan Mat GCQ.

CX/PR 06/38/9-Add.1 page 28 Las condiciones de operación son las siguientes: volumen de inyección 1 ml (split flux 50 cm3/min); Gas carrier Helio, presión de cabeza de columna 7 psi; flujo constante de gas a una velocidad de 40 cm/sec.

Condiciones de Temperatura – Los compuestos buscados son analizados por el siguiente procedimiento de calentamiento:

Temperatura inicial 0ºC durante 1 min, rampa10 ºC/min hasta 280 ºC mantenida 10 min., llegando a un tiempo total de 30 min. Temperatura de inyección en el puerto: 250 ºC; Línea de transferencia de temperatura, 275 ºC; temperatura fuente de iones, 190 ºC; presión 30-40 mTorr.

Los parámetros de espectrometría de masa son los siguientes: masa inicial 40, masa final 450: scan sweep 1 sec.

Columna CG: Restek Corp RTX 5MS, 5% phenyl-95% polidimetilsiloxano, ancho de film 0,25 mm, lomgitud 30 m, diámetro interno 0,25 mm.

Data collection y procesado – Los datos son procesados por medio de Gateway 2000 P5-75, software GCQ Analysis Finnigan Corporation version 2.2.

Alternativamente se utiliza CG-FTIR para caracterización de los compuestos.

RANGO ANAL. %REC ANALITO

Tetraetil ditiopirofosfato: Sulfotep cualitativo no determinado

Tetrametil ditiopirofosfato cualitativo no aplica

O-dietil 4-nitrofenil fosfato: Paraoxón cualitativo no determinado

Serie de 40 Di alquil alquilfosfonatos si 60 a 90

los datos de rendimiento.

Con respecto al párrafo 24 del mismo documento, en los laboratorios de nuestro país, se utiliza el Manual Of Pesticide Residue Analysis-Deutsche Forschungsgemeinschaft, VCH Verlagsgesell-Schaft-Weinheim,FRG para la determinación de ditiocarbamatos.

GERMANY1

In para. 23 of the Circular Letter mentioned above Governments are invited to submit information on methods of analysis and their performance characteristics on a number of pesticides.

The German delegation can provide this type of information on various pesticides as follows.

a) Chlormequat:

An internationally validated method of analysis exists for this active substance („Determination of Chlormequat and Mepiquat in Foods by Liquid Chromatography/Mass Spectrometry or Liquid Chromatography/Tandem Mass Spectrometry: Interlaboratory Study“, Alder & Startin: Journal of AOAC International Vol. 88 No. 6, 2005, S. 1762). Its results form the basis for the draft European Standards EN 16054 and EN 15055 (Annex 1 and 2).

1 Due to very large size of files, all Annexes will be printed as CRD.

CX/PR 06/38/9-Add.1 page 29 b) Benalaxyl, Cadusaphos, Cyprodinil, Methoxifenozide, Pyraclostrobin und Triforin: In Germany, the suitability of the method of analysis by J. Klein und L. Alder mentioned in footnote 3 on page 2 of the Circular Letter has by now been confirmed for more than 150 active substances (Annex 3).

In the context of these proficiency tests also the 6 mentioned pesticides have been examined. The results of these proficiency tests are contained in Annex 4.

Furthermore, as Annex 5, we attach a statement by the Federal Office of Consumer Protection and Food Safety (BVL) with information on methods of analysis regarding other pesticides.

Finally, please find attached, as Annexes 6 and 7, information on the QuEChERS Method of the Pesticide Residues Laboratory of the CVUA Stuttgart.

UNITED KINGDOM

1. There are several European standard methods not included in the German list.

BSEN 14185-1:2004 Determination of N-methyl carbamate residues.

PART 1:HPLC method with SPE clean up BS EN 14333:2004

Determination of benzimidazole fungicides carbendazim, thiabendazole and benomyl (as carbendazim)

Part 1 HPLC method with solid phase extraction clean-up

Part 2 --------------------with gel permeation chromatography

Part 3 ---------------------with liquid/liquid clean up

2. There is a collaboratively studied method for chlormequat and mepequat progressing through the system.

3. There are quite a lot of compounds which will go through EN 12393 and which are not included in the Standard. Stewart Reynolds (CSL) coordinated an EU funded project which validated this method for a range of "newer" pesticides.

4. There is a validated method for maleic hydrazide.

5. Methods 3 and 4 use UV detection and are thus not very specific.

6. With regard to point 23 and 24, we would be happy to give out methods listed in the methods compendium. This might be done by providing a 'link' to the compendium, if you wish.

CX/PR 06/38/9-Add.1 page 30 DENMARK

Substances, which are analyzed by the GC-MS/MS multi method in fruit and vegetables in Denmark

2-phenylphenol Acephat Aclonifen Aldicarb sulfon Aldicarb sulfoxid Aldrin Atrazin Azinphos-ethyl Azinphos-methyl Azoxystrobin Benfuracarb Bifenthrin Binapacryl Biphenyl Bitertanol Bromophos Bromophos - ethyl Bromopropylate Bupirimate Buprofezen Captafol Captan Carbaryl Carbofenothion Carbofuran Carbosulfan Chlorbenzilat Chlorfenson Chlorfenvinphos Chlormephos Chlorpropham Chlorpropylate Chlorpyrifos Chlorpyriphos - methyl Chlorthalonil Clofentezine Cyfluthrin Cyhalothrin-lambda Cypermethrin Cyprodinil DDD - P,P DDE, pp- DDT, op- DDT, pp- Deltamethrin Demeton-S-methyl Demeton-S-methyl sulfon Demeton-S-methyl-sulfoxid Dialiphos Diazinon Dichloran Dichlorfluanid Dichlorvos Dicofol Dieldrin Difenoconazole

Diflufenican Dimethoat Dioxathion Diphenylamin Disulfoton Ditalimfos Endosulfan A Endosulfan B Endosulfan sulfat Endrin Ethion Etrimfos Fenarimol Fenchlorphos Fenitrothion Fenoxaprop-p-ethyl Fenpropathrin Fenpropidin Fenpropimorph Fenson Fenthion Fenvalerate Fludioxonil Flycythrinate Folpet Formothion Furathiocarb HCH-alfa HCH - beta Heptachlor Heptachlorepoxid-trans Heptenophos Hexachlorbenzen Idofenphos Imazalil Iprodion Isofenphos Kresoxim-methyl Lindan Malathion Mercarbam Metalaxyl Methamidophos Methidathion Metoxychlor Mevinphos Monocrotophos Myclobutanil Nuarimol Omethoat Parathion Parathion - methyl Penconazole Pentachloranilin Pentachloranisol Pentachlorbenzen

Pentachlorphenol* Pentachlorthioanisol Permethrin Phenthoat Phorat Phosalone Phosmet Phosphamidon Phoxim Pirimicarb Pirimiphos - ethyl Pirimiphos - methyl Prochloraz Procymidon Profenofos Propargite Propham Propiconazole Propyzamide Prothiophos Pyrazophos Pyrethrin Pyrimithanil Quentozen Quinalphos Simazine Sulfotep Tau-fluvalinat Tebuconazole Technazen TEPP Tetrachlorvinphos Tetradifon Tetrasul Thiometon Tolclofos-methyl Tolyfluanid Traidimenol Triadimefon Triazophos Trichlorfon Trichloronat Trifloxystrobin Vamidithion Vinclozolin Aldicarb (sum) Captan+folpet Endosulfan (sum) Dicofol (sum) Heptachlor (sum) Triadimefon+triadimenol

Substances, which are analyzed by the LC-MS/MS multi-method in fruit and vegetables in Denmark

Acephat Aldicarb Aldicarb-sulfon Aldicarb-sulfoxid Aldicarb (sum) Benfuracarb Carbaryl Carbendazim Thiophanat-methyl Carbendazim (sum)

Ethiofencarb Fenhexamid Imazalil Linuron Methamidophos Methiocarb Methomyl Oxamyl Propoxur Thiabendazol

Other methods used in fruit, vegetables and cereals in Denmark.

Dithiocarbamates are analysed by spectrophotometry as CS2. The LOQ is 0,1 mg/kg.

Chlormequat and mepiquat are analyzed by LC-MS/MS in cereals and pears. The LOQ is 0,01 mg/kg

Glyphosate are analyzed by LC-MS/MS in cereals.

AUSTRALIA - fao.org · de Codex sobre Residuos de Plaguicidas y a la vez la oportunidad de realizar...

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