8/16/2019 Biología Del Virus de La Polio

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Biología del Virus de la Polio.

Breve Resumen

PorPilar León Rega

Licenciada en Ciencias Químicas, Doctora en Medicina.

Ex-Jefe de la Unidad de Hepatitis Víricas. er!icio de Micro"iolo#ía Dia#n$stica. 

Introducción

El virus polio (VP) sólo infecta al ser humano y, de éste, sólo su sistema nervioso central y,más específicamente, la sustancia gris en la médula y tronco del encéfalo, por representar

éstos un ámbito perfecto para su reproducción

!entro de las células nerviosas, el VP se reproduce, y sale de éstas sólo para infectarnuevas células, proceso "ue se repite innumerables veces, hasta "ue el organismo generalos anticuerpos necesarios para neutrali#arlo $ientras este proceso tiene lugar, el VP robaa las células nerviosas todas sus proteínas, limitando, e incluso inhibiendo su propio

%ergio &ugusto Vistrain

Clasificación

'amilia Picornaviridae, género enterovirus, especie virus polio

(VP)

Estructura del virión

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Es un virus pe"ueo de * a +* nm [1] de

diámetro, esférico y con simetría icosaédrica,

semeante a un cristal -a partícula vírica o

virión, esta formada por el genoma viral, "ue es

un ácido nucleico y una cápside de proteínas

llamada nucleocápaside ('igura .)

 /o tiene envuelta lipídica, es un virus desnudo

0onstituye el material genético del virus Es

una molécula de &1/ de 2,3 a 45,4 6b [2] , de

 polaridad positiva, es decir, puede funcionar 

como &1/ mensaero (&1/m)

-a mayoría del genoma (7*8) codifica por una gran

 proteína, "ue posteriormente, es fragmentada por unas en#imas

víricas, llamadas proteasas, dando lugar a las proteínas

víricas -os e9tremos del genoma (el .*8 restante,

apro9imadamente) denominados +: y 4: no son codificantes, no

generan proteínas, pero act;an en la regulación de la replicaciónviral

La nucleocápside

Protege al genoma viral y da la estructura a la partícula vírica

Está formada por cuatro proteínas estructurales, denominadas

VP., VP, VP+ y VP3 -as tres primeras son e9ternas y la

cuarta es interna y está unida covalentemente al e9tremo 4: del

genoma viral En la superficie del virión ('igura .) hay unas#onas "ue sobresalen, y son las encargadas de activar la

respuesta inmune< #onas donde se unirán los anticuerpos

específicos neutrali#antes y otras #onas deprimidas, por donde

el virus interacciona con el receptor celular, "ue es una

inmunoglobulina (=g) del sistema nervioso central, para infectar 

a las células diana (las neuronas)

 

El ciclo de la replicación viral-os virus son incapaces de reproducirse por sí solos /ecesitan

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utili#ar parte de la ma"uinaria biosintética de las células

específicas "ue infectan, en detrimento de éstas, por lo "ue se

les llama parásitos celulares

 

-os virus tienen una apetencia específica por determinados

huéspedes Esta característica se llama tropismo celular &sí, por 

eemplo, el VP sólo infecta al hombre y, de forma e9perimental,

también a algunos primates, pero no infecta a otros animales

&demás, no todos los órganos, ni cual"uier célula le sirven, sólo

a"uellas "ue tengan el receptor adecuado, convirtiéndolas en

células susceptibles Para el VP, éstas son las células del

sistema nervioso central 0uando el VP entra en contacto con la

célula adecuada, se une a los receptores celulares "uedando

adsorbido a la membrana celular >sta le rodea completamente

formando una vesícula llamada endosoma, "ue le transporta al

interior de la célula< al citoplasma !entro del endosoma, unas

en#imas celulares rompen la nucleocápside (proteasas) y liberan

el &1/ viral al citoplasma Este se introduce en un ribosoma

celular, desde donde inicia su replicación, sinteti#ando los

componentes necesarios para formar viriones nuevos< es decir,

la nueva progenie viral ('igura ) Esto provoca una limitacióno, incluso la inhibición del metabolismo celular, ya "ue algunas

 proteínas celulares van a ser utili#adas por el virus, con el

consiguiente peruicio para la célula

Síntesis de las proteínas víricas

El &1/ viral tiene capacidad para replicarse y para funcionar 

como &1/ mensaero, traduciéndose a la gran proteína, llamada

 poliproteína, utili#ando la mayoría del genoma(apro9imadamente el 7*8) Esta poliproteína es el precursor de

las proteínas víricas -a poliproteína inmediatamente se rompe,

 por acción de las proteasas, y da lugar a proteínas más

 pe"ueas< cuatro estructurales "ue forman la nucleocápside y

otras "ue no son estructurales, y no forman parte del virión,

 pero son necesarias para la replicación viral y para inhibir la

síntesis de componentes celulares Entre las proteínas no

estructurales está la &1/ polimerasa vírica, "ue será la

encargada de dirigir la síntesis de las cadenas nuevas del

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genoma viral, el VP la sinteti#a por"ue en la célula no e9iste

ninguna en#ima con esa actividad

Replicación del genoma viral

Por acción de la &1/ polimerasa vírica, cada molécula del

&1/ positivo vírico se copia a una cadena complementaria de

&1/ negativo, "ue será utili#ado como molde para volver a ser 

copiado a una cadena nueva de &1/ positivo !e esta forma, la

información genética es copiada íntegramente originando

cadenas casi idénticas nuevas del genoma viral original Este

ciclo se repite muchas veces, mientras "ue la infección esté

activa

ormación del virión! ensam"la#e

0on las proteínas estructurales recién sinteti#adas, se forma la

nucleocápside !espués entra el &1/ nuevo, plegándose para

adaptarse al hueco y de esta manera, se forma el virión nuevo

-os virus nuevos se acumulan en el citoplasma hasta "ue la

célula se rompe y son liberados al e9terior como partículas

infecciosas con capacidad para infectar células pró9imas y

repetir el ciclo hasta "ue la infección se para por acción de losanticuerpos neutrali#antes, "ue el organismo huésped sinteti#a

 para abortar la infección

 !urante un tiempo, llamado de eclipse, no se detectan viriones

infecciosos dentro de la célula Esta fase se corresponde con la

ruptura de la nucleocápsida y la liberación del &1/ viral, hasta

la formación de los nuevos viriones

-a replicación viral no siempre ocurre con la misma eficacia

 /o todos los virus infecciosos se adsorben a la célula !e los

"ue se adsorben, algunos no penetran en el interior celular %e

sinteti#a mucho material vírico, proteínas y &1/, pero no todo

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se utili#a para forman viriones completos, pueden "uedar 

nucleocápsidas vacías, son las llamadas partículas defectivas

"ue no son infecciosas

-a replicación viral cesa cuando act;an los anticuerposneutrali#antes específicos Estos anticuerpos sinteti#ados por los

linfocitos ?, "ue han sido estimulados previamente por las

 proteínas e9ternas de la nucleocápside (antígenos), se unen a las

#onas prominentes del virión, lo rodean y ocultan las #onas

deprimidas donde se tendrían "ue unir los receptores celulares

 para iniciar la infección & medida "ue la infección progresa,

aumenta la síntesis de anticuerpos, hasta "ue estos prevalecen,

neutrali#ando todos los viriones nuevos, abortando yresolviendo la infección

 

Varia"ilidad gen$tica

-os virus &1/ poseen una variabilidad genética Esto ocurre

 por"ue durante la replicación del &1/ se producen errores "ue

no pueden ser subsanados por en#imas celulares !e esta

manera se originan virus nuevos con pe"ueas diferencias,

mutaciones, a veces imperceptibles Estas me#clas de virusnuevos se llaman cuasiespecies.  @tras veces, las mutaciones

son más importantes y dan lugar a tipos distintos para la misma

especie &sí, los VP presentan tres tipos diferentes, a saber, tipo

., y + Estos tipos se diferencian en las proteínas de la

nucleocápsida, hasta el punto en "ue los anticuerpos

neutrali#antes sinteti#ados frente a un determinado tipo de VP

no act;an frente a los otros tipos -a varia"ilidad gen$tica es

un mecanismo evolutivo %ue los virus poseen al igual %ue

otros organismos & %ue les 'a permitido adaptarse a las

distintas circunstancias & llegar 'asta nuestros días! en este

caso! para nuestra desgracia.

 

El VP fue el primer virus %ue se consiguió cultivar! en ()*)!

en líneas celulares. En ()+,! se secuenció su genoma! siendo

el primer virus animal con -R secuenciado. /am"i$n 'a

sido el primer virus infeccioso %ue se 'a podido sinteti0ar

sin la "ase de un cultivo celular! lo cual ocurrió en ())(.

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1racias al $2ito de las vacunas antipoliomielíticas & a los

avances tecnológicos! el VP se puede utili0ar como vector

para conseguir determinadas proteínas & vacunas contra

otros agentes infecciosos

 

-dapta"ilidad & resistencia

-os VP resisten cual"uier tipo de terapia hasta ahora conocida

Aambién son resistentes a la acción de solventes o detergentes, y

a los medios ácidos, y soportan temperaturas cercanas a los

4*B0 %on unos agentes infecciosos muy bien diseados para

 permanecer mucho tiempo fuera de sus organismos huésped y

 poder sobrevivir

 

Poliovirus

Poliovirus. LosPoliovirus con

stituyen uno de los seis

géneros que conforman la

familia Picornaviridae, son los

agentes etiológicos causantes

de lapoliomielitis,enfermedad

infecciosa aguda que en su

forma grave afecta elSistema

Nervioso Central (SNC),

destruyendo

lasmotoneuronas en

lamédula espinalresultando

en una parálisis flácida. Casi

todas las infecciones porPoliovirus son subclínicas.

Estos virus son los más

estudiados dentro del

géneroEnterovirus, sirviendo

como modelo para estudios

de biología molecular sobre la

replicación de

losPicornavirus.

Poliovirus

Taxonomía

Orden Picornavirales

Familia Picornaviridae

Género Enterovirus

Características morfológicas

Forma delvirión

Virión esferoidal con cápside 

icosaédrica constituida por

60 protómeros.

Diámetrodel virión

22 a 30 nm

Composición

ARN 30!"# prote$nas %0!"

Genoma ARN de cadena &nica# lineal#

de sentido positivo# de %#2 a

'#( )* de tama+o# infectante#

tiene una prote$na unida al

,enoma. Posee un coe-ciente

de sedimentación de 3s#

contiene apro/imadamente

%(00 nucleótidos.

Proteínas uatro polipéptidos

principales VP1# VP2# Vp3

Vp(" escindidos a partir de

una prote$na precursora.

Envoltura arecen de envoltura

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Los Poliovirus sonEnterovirus típicos, pero presentan algunas particularidades:

se inactivan cuando se calientan a 55 grados celcios durante 30 minutos, pero

elMg 2+ 1 mol/L, la leche y el helado impiden esta inactivación, se inactivan

con lapasteurización adecuada. Los Poliovirus purificados se inactivan

concloro en concentración de 0,1 ppm, pero para desinfectar las aguas negras

contaminadas con el virus en suspensión fecal y en presencia de materia

orgánica se necesitan concentraciones mucho mayores.

En su composición protéica se describen cuatro polipéptidos principales (VP1,

VP2, Vp3 y Vp4) escindidos a partir de una proteína precursora, las proteínas

de superficie Vp1 y Vp3 son sitios fundamentales para la fijación de

anticuerpos, la proteína interna Vp4 se asocia con el ARN viral.

Contenido

 [ocultar] 

• 1 Susceptibilidad de los animales y cultivos celulares

•

2 Propiedades antigénicas

• 3 Patogenia

• 4 Datos clínicos

o 4.1 Poliomielitis abortiva

o 4.2 Poliomielitis no paralítica (meningoencefalitis viral)

o 4.3 Poliomielitis paralítica

o 4.4 Atrofia muscular progresiva pospoliomielitis (síndrome pospolio)

• 5 Tratamiento

• 6 Diagnóstico de laboratorio

o 6.1 Métodos de aislamientos

6.1.1 Toma de muestras.

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6.1.2 Inoculación

6.1.3 Identificación

o 6.2 Métodos serológicos

• 7 Métodos de diagnóstico rápido

• 8 Inmunidad

• 9 Epidemiología

• 10 Prevención y control

o 10.1 Vacunas inactivadas (VIP)

o 10.2 Vacunas atenuadas (VOP)

• 11 Erradicación mundial

• 12 Fuentes

Susceptibilidad de los animales y cultivos

celulares

Los Poliovirus infectan al mono cuando la inoculación se hace encerebro o

médula espinal. Los chimpancés y los monos cynomolgus pueden ser

infectados por vía bucal, aunque la infección es asintomática y los animales se

convierten en portadores del virus en elintestino. Es poco frecuente su

replicación en ratones o embriones de pollo. Poseen la propiedad de crecer en

cultivos primarios, diploides y de línea de origen humano y de riñón, testículo y

músculo de mono; no crecen en células de animales inferiores. Ellos requierende un receptor de membrana específico de primate para producir la infección y

la falta de este sobre la superficie de las células que no son de primate las hace

resistentes a dichos virus.

Esta restricción puede superarse introduciendo Poliovirus o elgenreceptor viral

en las células resistentes a través de vesículas lipídicas sintéticas (liposomas),

convirtiendo a estas células en susceptibles. Se han desarrollado ratones

transgénicos que contienen al gen receptor primario y son susceptibles a losPoliovirus.

http://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#Inoculaci.C3.B3nhttp://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#Identificaci.C3.B3nhttp://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#M.C3.A9todos_serol.C3.B3gicoshttp://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#M.C3.A9todos_de_diagn.C3.B3stico_r.C3.A1pidohttp://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#Inmunidadhttp://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#Epidemiolog.C3.ADahttp://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#Prevenci.C3.B3n_y_controlhttp://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#Vacunas_inactivadas_.28VIP.29http://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#Vacunas_atenuadas_.28VOP.29http://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#Erradicaci.C3.B3n_mundialhttp://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#Fuenteshttp://www.ecured.cu/index.php/Cerebrohttp://www.ecured.cu/index.php/Intestinohttp://www.ecured.cu/index.php/Genhttp://www.ecured.cu/index.php?title=Liposoma&action=edit&redlink=1http://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#Inoculaci.C3.B3nhttp://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#Identificaci.C3.B3nhttp://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#M.C3.A9todos_serol.C3.B3gicoshttp://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#M.C3.A9todos_de_diagn.C3.B3stico_r.C3.A1pidohttp://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#Inmunidadhttp://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#Epidemiolog.C3.ADahttp://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#Prevenci.C3.B3n_y_controlhttp://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#Vacunas_inactivadas_.28VIP.29http://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#Vacunas_atenuadas_.28VOP.29http://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#Erradicaci.C3.B3n_mundialhttp://www.ecured.cu/index.php/Poliovirus#Fuenteshttp://www.ecured.cu/index.php/Cerebrohttp://www.ecured.cu/index.php/Intestinohttp://www.ecured.cu/index.php/Genhttp://www.ecured.cu/index.php?title=Liposoma&action=edit&redlink=1

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Propiedades antigénicas

Existen tres tipos antigénicos oserotipos: Poliovirus 1, Poliovirus 2 y Poliovirus

3, aunque hay relación antigénica entre ellos. Se puedenpreparar antígenos fijadores de complemento (FC’) de cada tipo a partir de

cultivo de tejidos o de muestras de SNC, también al inactivar el virus

conformalina, calor oluz ultravioleta, se libera un antígeno soluble FC’, este

antígeno presenta reacción cruzada y fija el complemento con anticuerpos

heterotípicos a poliomielitis. Las preparaciones de Poliovirus contienen dos

antígenos específicos de tipo y pueden detectarse mediante pruebas

deELISA y de FC’, son los antígenos D (o N, nativo) y C (o H, calentado); por

calentamiento la forma D puede convertirse en la C. La variante D representapartículas completas que contienenARN, la variante C partículas vacías. Los

antígenos C de los tres tipos virales presentan reacción cruzada, pero los

antígenos D no.

Patogenia

Después de la entrada por vía oral o respiratoria, generalmente los Poliovirus,

al igual que el resto de los Enterovirus se localizan específicamente enlafaringe y en el intestino, con una activa multiplicación en

lasamígdalas yplacas de Peyer. Una semana después del inicio de los

síntomas, es difícil aislar el virus de la faringe, pero continúa siendo eliminado

por las heces varias semanas. Después de la secundaria es

frecuenteviremia que se produzca un cuadro clínico menor, pero los Poliovirus

circulantes en lasangre pueden invadir el SNC, sin que los anticuerpos

producidos al inicio de la enfermedad puedan evitar al paso a las fibras

nerviosas.

Pueden propagarse a lo largo de los cilindroejes de los nervios periféricos,

hacia el SNC y avanzar a lo largo de las fibras de las motoneuronas inferiores

para afectar a la médula espinal o el cerebro. Puede haber propagación neural

si un niño presenta una infección inaparente y se somete a unaamigdalectomía,

permitiendo el acceso a las fibras nerviosas. Invaden ciertos tipos de células

nerviosas, dañándolas o destruyéndolas totalmente. Las astas anteriores de la

médula espinal son muy afectadas y en los casos graves también los ganglios

grises intermedios, las astas posteriores y el ganglio de la raíz dorsal. Las

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células nerviosas muestran alteraciones rápidamente, desdecromatólisis leve

hastaneurofagia y destrucción. En el cerebro se afectan frecuentemente la

formación reticular, los núcleos vestibulares y los núcleos cerebelosos

profundos; la corteza prácticamente es respetada, excepto la corteza motora a

lo largo de lacircunvolución precentral. Los Poliovirus no se multiplican en

elmúsculo in vivo, los cambios en los nervios periféricos y en los músculos

voluntarios son producto de la destrucción de las células nerviosas.

Además de los cambios patológicos en el SNC puede

presentarsemiocarditis,hiperplasia linfática y ulceración en las placas de

Peyer.

Datos clínicos

 Artículo principal:Poliomielitis.

Cambios histológicos en eltejido muscularcausando ladistrofiacaracterística de las

secuelas de la Poliomielitis.

En una persona susceptible expuesta a los Poliovirus se puede observar varías

respuestas, que van desde la infección inaparente hasta lapoliomielitis

paralítica. La forma más frecuente la constituye la infección asintomática, la

cual ocupa de 90 a 95 % de las infecciones. La enfermedad puede tener uncurso bifásico, donde sus formas más graves pueden ir precedidas de cuadros

menores, aunque no siempre ocurre así.

Poliomielitis abortiva

Es la variante más frecuente de los casos infectados, el paciente solo presenta

la enfermedad menor, caracterizada porfiebre, fatiga,cefalea,anorexia,mialgia,

dolor de garganta, vómitos, estreñimiento, en diferentes combinaciones. Dichas

manifestaciones pueden durar dos o tres días ocurriendo después la completa

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recuperación del paciente, sin presentar signos de focalización neurológica.

Esta forma usualmente no es diagnosticada a no ser que se realice aislamiento

viral a una muestra del paciente y además se encuentre una conversión de los

anticuerpos.

Poliomielitis no paralítica (meningoencefalitis viral)

Aparece en el 1% de los infectados, además de los síntomas y signos

mencionados presenta rigidez y dolor en la espalda y cuello, cuadro clínico

típico de unameningoencefalitis viral. Tiene un pronóstico favorable y el

paciente suele curarse en pocos días. Sólo un número muy pequeño de casos

evoluciona hacia una parálisis.

Poliomielitis paralítica

Sólo se presenta en el 0,1 % de los pacientes que son infectados, es la forma

más grave de la enfermedad. Suele ir precedida por un período de fiebre y

malestar general, cuadro que típicamente desaparece en pocos días, pero

puede presentarse sin estos antecedentes. De 5 a 10 días después reaparece

la fiebre con signos de irritación meníngea y parálisis flácida asimétrica

resultante del daño de la motoneurona inferior. En las partes afectadas surgencalambres musculares,espasmos y contorsiones. Entre el 6 y 25 % de los

casos de parálisis aparece afección bulbar. La magnitud del daño varía mucho.

La recuperación máxima habitualmente es antes de los 6 meses, con parálisis

residual mucho más perdurable. La mortalidad en los niños es del 2 al 5 %,

siendo mayor en los adultos, entre un 15 y 30 %.

Atrofia muscular progresiva pospoliomielitis (síndrome pospolio)

Este síndrome clínico se presenta con frecuencia en algunos pacientes que se

recobraron de la poliomielitis paralítica, después de 25 a 30 años después de la

infección aguda y se caracteriza por debilidad, dolor yatrofia de las masas

musculares. Tiene un curso clínico gradual terminando con la total incapacidad

de las áreas afectadas. Se plantea que esta enfermedad puede deberse a la

posible reactivación de una infección viral persistente, o que se trate de un

problema deautoinmunidad a las proteínas virales. Otros creen que el

síndrome pospoliomielitis es el resultado de la atrofia o agotamiento de las

neuronas que inervan a los músculos afectados.

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Tratamiento

No hay tratamiento específico, es sintomático.

Diagnóstico de laboratorio

Los resultados de las pruebas de laboratorio considerados aisladamente, por lo

general, son poco demostrativos, hay que tener en cuenta que incluso el

aislamiento de Poliovirus en las heces de un enfermo, lo cual es uno de los

datos más significativos, dada la difusión de los Poliovirus en zonas endémicas,

no indica necesariamente que sea el agente causal de la enfermedad y la

demostración de unaseroconversión frente al mismo serotipo no siempreproporciona el diagnóstico de certeza, ya que puede tratarse de unainfección

subclínica simultánea. Sólo la consideración conjunta de los datos del

laboratorio con el estudio clínico y epidemiológico del caso, descartando

cualquier otraetiología, permite llegar al diagnóstico.Los métodos de

diagnóstico de las infecciones virales pueden dividirse en tres grupos: métodos

de aislamiento, métodos serológicos y métodos de diagnóstico rápido.

Métodos de aislamientos

Los métodos de aislamiento constan de tres etapas: toma de muestras,

inoculación e identificación del virus aislado.

Toma de muestras.

Como en la mayoría de las enfermedades infecciosas, las muestras deben ser

tomadas en los primeros días posteriores a la aparición de los síntomas. Las

heces constituyen la muestra más útil y representativa para el aislamiento viral

y se recomienda la toma seriada debido a la excreción intermitente del virus

que puede estar presente hasta seis semanas después del inicio de la

infección, tanto clínica como inaparente, recogerse en recipientes estériles,

mantenerlas congeladas a -20 oC ó varias horas a 4 oC hasta que sean

tratadas. Los Poliovirus se recuperan rara vez dellíquido

cefalorraquídeo (LCR). Los exudados faríngeos, gargarismos

ehisopados rectales constituyen fuentes de virus de donde se logra el

aislamiento si la muestra es tomada durante los primeros 7 días de la

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enfermedad y es mejor transportarlos y almacenarlos en medio de transporte

viral habitual, con la adición de proteínas.

Aunque poco frecuentes, otras fuentes de virus son la sangre (fase

virémica),orina y el tejido cerebral obtenido de lasnecropsias; se transportan al

laboratorio en sus tubos originales de colección, siguiendo las

recomendaciones para su toma. Todas las muestras deben trasladarse y

conservarse en congelación hasta el momento de inocularlas que deben ser

tratadas conantibióticos. Para estudios serológicos se requieren muestras de

sueros pareados, el primersuero se toma durante la fase aguda de la

enfermedad y el segundo colectado de 14 a 21 días después, en la fase

convaleciente, se deben conservar congeladas hasta su uso.

Inoculación

Las muestras obtenidas se inoculan en los sistemas biológicos susceptibles. El

aislamiento en cultivo de células es el método de elección para hacer el

diagnóstico. El virus se multiplica y produce elECP característico en cultivo

celular primario, diploide y de línea, tanto de origen humano como de mono,

entre los 3 y 6 días de inoculados. Recientemente una línea celular continua,

L20b, derivada de la transfección de la línea celular L de ratón, con el clon deADNc (20b) delgen que codifica para el receptor humano para Poliovirus, ha

surgido con el objetivo de disponer de un sistema de aislamiento viral

selectivamente más susceptible a la infección por este virus.

Identificación

La identificación específica deserotipo depende de la prueba de neutralización

que emplea mezclas de sueros hiperinmunes, siendo los más utilizados los

deLim Benyesh-Melnick (LBM) que contiene antisueros equinos combinados

en 8 pooles capaces de identificar 42 enterovirus que crecen bien en cultivos

celulares. Los aislamientos también pueden ser identificados por pruebas de Nt

con sueros de referencia frente a los tres tipos de Poliovirus.

Métodos serológicos

Los métodos serológicos en el diagnóstico de la poliomielitis, tienen un valor

limitado, por lo general, el título de anticuerpos ya se encuentra elevado en el

momento de detectarse los primeros síntomas y es difícil demostrar una

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seroconversión o el aumento significativo del título de anticuerpos en dos

muestras de suero del enfermo. Se utiliza fundamentalmente la prueba de

neutralización (Nt) delefecto citopatogénico, la cual es laboriosa, pero muy

específica y permite el diagnóstico de tipo, pero difícilmente se detecta un

aumento de título entre dos muestras de sueros pareados debido a que,

generalmente, el primer suero se obtiene cuando se han instalado los síntomas

clínicos y ya se produjo unarespuesta inmune. Por otra parte, como los

anticuerpos persisten a títulos bajos durante muchos años, la Nt es la reacción

que se utiliza para determinar el grado de inmunidad de la población. La prueba

de fijación del complemento (FC’) es grupo específica y con antígeno de virus

activo puede determinar el tipo de virus cuando se trata de unaprimoinfección,

pues las reinfecciones producen reacciones cruzadas entre los tres serotipos.

Como los anticuerpos FC’ desaparecen al poco tiempo, cuando se obtiene una

muestra de suero durante la convalecencia y se detecta un título elevado de

anticuerpos, esto constituye una fuerte presunción diagnóstica.

También puede utilizarse la prueba de Nt por reducción de placas. Las técnicas

inmunoenzimáticas como el ELISA se aplican poco al serodiagnóstico de los

Poliovirus, pero se han normalizado ensayos indirectos para el seguimiento de

la inmunidad inducida por candidatos a vacunas.

Métodos de diagnóstico rápido

Actualmente son empleadas varias técnicas de diagnóstico rápido que

viabilizan el diagnóstico y la caracterización decepas, como las técnicas de

biología molecular, entre ellas lahibridación y lareacción en cadena de la

polimerasa (RCP), ambas para detectar el ácido nucleico viral en LCR, heces y

cultivo celular.

La hibridación de ácidos nucleicos usando sondas específicas constituye una

rápida y confiable alternativa en el estudio genómico, brindando una importante

información al diagnóstico virológico. El uso deoligonucleótidos sintéticos,

generalmente de ADN, ofrece varias ventajas como sonda, incluyendo

especificidad, rápida hibridación, preparación en grandes cantidades, a bajo

costo. El marcaje no radiactivo con enzimas,fluoresceína, ha primado en los

últimos años sobre el marcaje radiactivo. Su aplicación al diagnóstico de los

Enterovirus ha facilitado la detección rápida de miembros de este génerousando sondas de secuencias comunes a varios virus (zonas NTR), así como

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en la detección y diferenciación de la naturaleza de agentes como los

Poliovirus. El método tiene como desventaja la baja sensibilidad cuando el título

viral es bajo, y, por tanto, es más usado en combinación con las técnicas de

amplificación enzimática que lo supera en este aspecto.

La RCP ha sido la técnica más prometedora en el campo de la biología

molecular aplicada a la detección directa de los Enterovirus. Se han aplicado

tres estrategias fundamentales:

• Detección universal de muchos serotipos.

• Detección específica de un número limitado de serotipo.

• Detección selectiva de variaciones en cepas de un serotipo.

El conocimiento de la existencia de fragmentos de secuencias nucleotídicas

conservadas entre los miembros del mismo género (zonas NTR) ha llevado al

uso decebadores universales. Se han utilizado muestras de heces, aguas

albañales y LCR en la detección rápida de Poliovirus.

Elestudio e investigación específicos de los Poliovirus ha sido de valor con el

uso de cebadores grupo específicos, siendo las zonas de VP1, VP2 y ARN

polimerasa las más seleccionadas.

Inmunidad

Forman parte de la respuesta inmune, principalmente, por un lado las células

sanguíneas e hísticas leucocitarias (inmunidad celular), y por otra, elementos

humorales como elinterferón, el sistema del complemento y los anticuerpos

(inmunidad humoral). La respuesta inmune que estimula la infección

enterovírica incluye a los elementos mencionados, pero son los anticuerpos los

principales protagonistas de la neutralización del agente.

La inmunidad pasiva es transferida de la madre al niño. Estos anticuerpos (IgG)

desaparecen gradualmente durante los primeros 6 meses de vida. Los

anticuerpos neutralizantes aparecen durante los primeros días de exposición al

virus, frecuentemente antes de la aparición de los síntomas, y perduran de por

vida. Su formación tan temprana en la infección es el resultado de una activa

replicación viral en eltracto intestinal y profundas estructuras linfáticas antes de

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la invasión del SNC. Los virus en cerebro y médula espinal no son influidos por

los altos títulos de anticuerpos en sangre, que se encuentran en la etapa

preparalítica, la inmunización sólo tiene valor si precede a la aparición de los

signos que señalen una infección del SNC.

Los anticuerpos circulantes contra Poliovirus no son la única fuente de

protección contra la enfermedad. La inmunidad secretora (IgA) alcanzada

después de la recuperación de una infección natural o tras una inmunización

con VOP previene la reinfección intestinal. Los anticuerpos secretores tienen un

importante papel en la defensa contra la infección por Poliovirus y es una de las

razones del éxito de la inmunización masiva con laVOP en la interrupción de la

transmisión de los Poliovirus salvajes. Las personas inmunodeficientes corren

un mayor riesgo de padecer la enfermedad. Estos individuos, con la adquisición

del Poliovirus salvaje o de las cepas vacunales de Poliovirus (las cuales pueden

revertir en ciertas ocasiones al estado salvaje), pueden desarrollar una manera

atípica de la enfermedad, con un período de incubación mucho mayor y una

alta mortalidad después de haber sufrido síntomas crónicos y una inusual

distribución de las lesiones en el SNC.

Epidemiología

La poliomielitis ha tenido tres fases epidemiológicas: endémica, epidémica y la

era de lavacuna que es la actual.

• Distribución: mundial.

• Estacionalidad: en el trópico ysubtrópico circulan todo el año, en áreas

templadas predominan en verano y otoño, en invierno son raros los brotes; en los

países donde existen campañas de vacunación no se cumple la estacionalidad, los

casos de parálisis se producen aproximadamente un mes después desuministrarse la vacuna como una complicación de esta.

• Reservorio: el hombre es el único conocido.

• Edad, sexo y raza: puede presentarse en todos los grupos de edad, pero los

niños son más susceptibles, ya que los adultos poseen inmunidad; en poblaciones

aisladas puede afectar a todas las edades, en las regiones subdesarrolladas

donde las malas condiciones higiénico-sanitarias favorecen la amplia diseminación

del virus, la poliomielitis es una enfermedad de la infancia (parálisis infantil) y casi

todos los niños adquieren inmunidad desde edades tempranas; en los países

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desarrollados antes de iniciarse las campañas de vacunación, la mayoría de los

pacientes eran mayores de 5 años, con la aplicación de la vacuna han variado los

grupos afectados, encontrándose casos de parálisis en padres de niños

vacunados. El sexo y la raza no son parámetros significativos en esta enfermedad.

• Período de incubación: puede variar de 7 a 14 días o de 3 a 35 días.

• Vía de transmisión: la más importante es lafecal-oral; otras vías es la

transmisión de persona a persona, el contacto con objetos, alimentos y aguas

contaminadas; lasmoscas y las cucarachas pueden desempeñar la función de

transmisores mecánicos de los virus, el virus se disemina rápido entre los

miembros de una familia y se ve favorecida por el hacinamiento y las malas

condiciones higiénico-sanitarias.

El Poliovirus 1 es el más importante desde el punto de vista epidemiológico(tipo epidémico), produce un caso de parálisis por cada cien infectados; el

Poliovirus 3, considerado el tipo endémico, produce un caso de parálisis por

cada 500 infectados y por último el Poliovirus 2 es el menos importante

epidemiológicamente, ya que produce un caso por cada 2 000 infectados.

Prevención y control

Aunque las medidas higiénicas y sanitarias limitan la diseminación del

Poliovirus, la única medida específica para la prevención de la poliomielitis

paralítica es lainmunización con vacunas, ya sean atenuadas o inactivas.

Vacunas inactivadas (VIP)

Fue desarrollada originalmente en el año1955, por elDr. Jonas Salk, a partir

de cultivos primarios deriñón de mono. Actualmente, se utilizan líneas de

células de riñón de mono verde africano (Vero). Contiene los tres serotipos dePoliovirus en proporciones definidas y es inactivada posteriormente conformol.

Esta vacuna confiere inmunidad humoral, lo que previene la diseminación del

virus al SNC. Debido a que no contiene virus vivo, no existe la posibilidad de

que ocurran mutaciones, evitando así la aparición de casos de parálisis, es la

vacuna de elección en los niños inmunodeprimidos y sus contactos. Sin

embargo, esta vacuna produce una baja inmunidad a nivel del intestino, por lo

que esta no es capaz de disminuir significativamente la circulación del

Poliovirus salvaje y la población vacunada es capaz de diseminar el mismo,

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esto representa el mayor obstáculo para el uso de esta vacuna en la estrategia

para la erradicación de la poliomielitis.

Otras de sus desventajas son: la necesidad de administrar dosis repetitivas

para mantener niveles de anticuerpos detectables, su alto costo y su aplicación

parenteral con un personal calificado para su aplicación. Actualmente, algunos

países industrializados han introducido el uso combinado de vacuna inactivada

(VIP) y vacuna atenuada (VOP) para reducir el riesgo de los casos de parálisis.

Vacunas atenuadas (VOP)

Albert Sabin yRobert Gallo, 1985.

Esta fue desarrollada por el Dr.Albert Bruce Sabin y licenciada para su uso en

el año1962. Los 3 serotipos de Poliovirus fueron atenuados por pases

sucesivos en cultivos celulares, tanto de células de riñón de mono como células

diploides humanas. Esta vacuna es estabilizada concloruro de magnesio y es

capaz de estimular tanto anticuerpos séricos (IgG eIgM) como anticuerpos

secretorios a nivel del intestino (IgA), el sitio primario donde se multiplican estos

virus. Esto permite que además de proteger al individuo contra la poliomielitis,

limite la multiplicación del Poliovirus salvaje en el intestino, sirviendo como una

barrera efectiva contra la circulación de este. Los virus vacunales son

excretados por las heces, permitiendo que en países con malas condiciones

higiénicosanitarias se infecten las personas no vacunadas.

Esta vacuna además tiene la ventaja de ser administrada porvía oral, por lo

que no necesita de un personal entrenado para su administración y su costo de

producción es muy bajo en comparación con la VIP. Todas estas características

hacen que haya sido seleccionada para la erradicación de la poliomielitis. El

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mayor problema relacionado con esta vacuna es que los virus vacunales

tienden a mutar (revertir) en el curso de la multiplicación (en particular los

Poliovirus 2 y 3) y a aumentar suneurovirulencia. Se producen así en raras

ocasiones casos de parálisis, tanto en las personas vacunadas como en sus

contactos, se estima que hay 1 caso de parálisis por cada 2,4 000 000 de

personas vacunadas, fundamentalmente, después de la primera dosis de

vacuna, siendo algo mayor en niños inmunodeficientes.

Un factor limitante para la VOP es la interferencia, si el intestino de un niño esta

infectado con otro Enterovirus en el momento de administrar la vacuna se

puede bloquear el establecimiento de la infección por Poliovirus y de la

inmunidad; este puede ser muy importante en regiones (mayormente en las

tropicales) donde son comunes las infecciones con Enterovirus. La VOP no

debe suministrarse a personas inmunodeprimidas o a sus contactos en el

hogar. La inmunoglobulina puede proteger durante unas cuantas semanas

contra la enfermedad paralítica, pero no evita la infección subclínica y es eficaz

solo si se administra poco antes de la infección, no tiene valor luego de

aparecer los síntomas clínicos.

Los avances enIngienería Genética han permitido el desarrollo de un Poliovirus

vivo que no pueda mutar para incrementar su neurovirulencia, generando solomutaciones específicas y deseables; se han construidos virus recombinantes a

partir de virus progenitores pertenecientes a diferentes serotipos de Poliovirus y

entre cepas virulentas y atenuadas del mismo serotipo. Las nuevas

cepasquiméricas poseen las características biológicas deseadas: la estabilidad

genética del Poliovirus 1 y las características inmunogénicas de los tipos 2 y 3.

Estos avances pueden dar lugar a una vacuna genéticamente más estable, sin

embargo, será difícil hacer pruebas de campo para este nuevocandidato

vacunal, ya que habría que demostrar que la nueva vacuna produce menos deun caso por cada millón de personas susceptibles a quienes se les aplique la

vacuna.

Erradicación mundial

Las Organizaciones Mundial y Panamericana de la Salud (OMS /OPS) se han

propuesto la eliminación de la poliomielitis en el mundo. Esto significa erradicar

la circulación del Poliovirus salvaje utilizando la inmunización antipoliomielíticaoral de virus vivo atenuado (VOP) administrada a la población infantil de todo el

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mundo en forma de programas mantenidos y Días Nacionales de Inmunización

(DNI) por Campañas Masivas.

En1985 la OPS puso en marcha la iniciativa de erradicar la poliomielitis en las

Américas. En1994, laComisión Internacional para la Certificación de la

Erradicación de la Poliomielitis (CICEP) declaró que se había interrumpido la

transmisión del Poliovirus salvaje en este continente, lográndose con un alto

grado de cobertura de vacunación con VOP, unido a un sistema sensible de

vigilancia epidemiológica. Varios estudios sustentan que las cepas de Poliovirus

vacunal al replicarse en el tracto gastrointestinal y circular entre la población,

tienden a experimentar una reversión hacia las cepas salvajes que las

originaron, entonces hay que determinar qué tiempo pueden circular y

permanecer entre la población y en elmedio ambiente las cepas de Poliovirus

vacunal a partir de que se interrumpe la vacunación y si es tal la duración de

este período de permanencia como para que se originen cepasmodificadas a

partir de las cepas vacunales empleadas y producirbrotes epidémicos de la

enfermedad en la población susceptible que se acumula meses después de

concluido el uso de la VOP.

Fuentes

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Zuazo Silva. Microbiología y Parasitología Médicas, Tomo II. Consultado: 5 de

 junio de2013. Disponible en:gsdl.bvs.sld.cu

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• Aislamientos de poliovirus vacunal y respuesta inmune con diferentes dosis de

vacuna oral antipoliomielítica. Consultado: 5 de junio de 2013. Disponible

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