Deshidratación - Plastinación

Deshidratación

Plas%nación

Luis Miguel Acevedo. Facultad de Medicina UdeA-‐ [email protected] 1

Principios de Deshidratación

En plas%nación como en histología la deshidratación es el proceso de reemplazar el agua del espécimen por un solvente orgánico miscible en agua.


Punto clave

•  Es importante diferenciar claramente los agentes deshidratantes de los solventes intermediarios o Vola%le Intermedium.

•  En teoría primero se deshidrata y luego se hace un paso por solvente intermediario (generalmente Cloruro de Me%leno) pero si el agente deshidratante %ene las caracterís%cas de un solvente intermediario este paso se puede obviar.


Agentes deshidratantes

Su estructura química puede variar: – Mono-‐hídricos

•  Metanol, etanol e isopropanol – Di-‐hídricos

•  Monoe%len glicol •  Die%len glicol

– Tri-‐hídricos •  Glicerina

– Cetonas •  Acetona


Vola%le Intermedium

•  Cualquier solvente orgánico con presión de vapor alta y y bajo punto de ebullición (+35ºC -‐ 60 ºC).

•  Puede ser miscible en agua (Ej. Acetona) •  Puede ser no miscible en agua (Ej. Cloruro de me%leno)


Difusión

•  El proceso de deshidratación se dá por el mecanismo de Difusión simple

•  Del la%n diffundere = expandir o dispersar. •  Es la mezcla gradual de diferentes sustancias sin usar fuerzas externas.


Deshidratación en el concepto de Plas<nación

Para producir un plas%nado agua y lípidos son reemplazados por un polímero curable. 1.  Deshidratación: Agua y parte de los lípidos son reemplazados por un solvente orgánico miscible en agua.

2. El liquido deshidratante es intercambiado por un Vola%le intermedium. Si un Vola%le intermedium como acetona es usado para deshidratación el paso 2 se obvia.

3.   Impregnación Forzada: El Vola%le Intermedium en el espécimen es reemplazado por el polímero curable.


Procedimiento básico

Deshidratación ascendente (procedimiento mas conocido). •  Consiste en poner el componente anatómico en baños

de deshidrataciones seriales con concentraciones ascendentes, el primer baño con deshidratante al 50%-‐70% y el úl%mo con deshidratante al 100%.

Frezze Subs%tu%on •  Hielo del espécimen es reemplazado por el agente

deshidratante a -‐24ºC. •  El agente usado es acetona y desde el primer baño se

usa al 100% En ambos procedimientos terminan cuando el contenido de agua en el componentes es inferior al 1%


Procedimiento básico

•  El reemplazo del agua y lípidos del tejido se da por difusión.

•  Entre más contenido acuoso tenga el tejido mas demorará la deshidratación.

•  El contenido de agua de la solución de deshidratación se determina por su densidad.


Notas Importantes

•  La relación entre el peso del componente y el volumen de deshidratante debe ser 10:1

•  Un componente fresco o fijado no puede simplemente ser sumergido en el líquido deshidratante , ya que este se encogerá (shrinkage).

•  No poner el componente anatómico en acetona o etanol al 100% a temperatura ambiente para no causar retracción extrema.


Desengrasado

Durante la deshidratación los componentes también se da el proceso de desengrasado. Este proceso depende de: 1.  Tipo de deshidratante: Cloruro de Me%leno más fuerte que acetona.

2.  Temperatura: Acetona a +25ºC mucho mas fuerte que a -‐25ºC

3. Relación entre el volumen del tejido adiposo y el volumen del baño de deshidratación.

4.  Duración de la deshidratación.


Cronograma de trabajo (Freeze subs<tu<on)

1. Lavar especímenes y enfriar a +1ºC -‐ +5ºC. 2. Pre-‐enfriar Acetona a -‐25ºC 3. Sumergir componente anatómico en acetona 4. Cambiar acetona.

Por razones de seguridad se deben hacer los cambios de acetona a -‐25ºC –  Estar debajo del punto de inflamación (-‐19ºC) –  Presión de vapor a esta Tº es muy baja.


Cronograma de trabajo (Freeze subs<tu<on)

Casos especiales: •  Cerebro: Mantener desh idratac ión por encima del 98% para disminuir retracción

•  I n t e s < n o s : P a r a mantener flexibilidad se recomienda que estos permanezcan lo menos posible en acetona .


Duración de la Deshidratación

•  Usualmente acetona es cambiada 3 veces si la razón es 10:1.

•  Cerebro Humano: Toma 2 semanas en el primer baño , 1 semana en el segundo y 4 días en el tercero.

•  Riñones y ar<culaciones: 3 – 4 semanas •  Cabezas e hígados: 5-‐6 semanas •  Intes<nos: 5 a 10 días.


Protocolo Universidad de Murcia, España


Deshidratación - Plastinación

Health & Medicine

Transcript of Deshidratación - Plastinación