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DETERMINACIÓN DE LA SUSCEPTIBILIDAD DEL MOSQUITO

AEDES AEGYPTI A LOS INSECTICIDAS DE USO EN SALUD PÚBLICA EN ÁREAS

DE RIESGO DE TRANSMISIÓN DE DENGUE Y DENGUE HEMORRÁGICO

MINISTERIO DE SALUDINSTITUTO NACIONAL DE SALUDCENTRO DE INFORMACIÓN Y DOCUMENTACIÓN CIENTÍFICA

2005

BLGO. ROSARIO BALTA LEÓN

BLGO. PABLO E. VILLASECA CASTRO.

SERIE INFORMES TÉCNICOS Nº28

DETERMINACIÓN DE LA SUSCEPTIBILIDAD DEL MOSQUITO AEDES AEGYPTI A LOS INSECTICIDAS DE USO EN SALUD PÚBLICA EN ÁREAS DE RIESGO DE TRANSMISIÓN DE DENGUE Y DENGUE HEMORRÁGICO

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INFORME FINAL

Aedes aegypti (foto RBL05)

I. TITULO DEL DOCUMENTO.

“Determinación de la susceptibilidad del mosquito Aedes aegypti a los insecticidas de uso en Salud Pública en áreas de riesgo de transmisión de dengue y dengue hemorrágico”. (C. OGITT : 2-01-05-04-071)

II. AUTORES.

Blgo. Rosario Balta León.

Blgo. Pablo E. Villaseca Castro.

Mercedes Rosario Balta León Instituto Nacional de Salud- Lima Perú


3

Telefono: 2516151 anexo 548 celular 98963456

Correo electronico [email protected]

III. INDICE.

I. Titulo 1

II. Autores 1

III. Índice 1

IV. Resumen en español 1

V. Resumen

VI. Introducción 2

VII. Antecedentes 2

VIII. Objetivos 2

IX. Metodología. Determinación de la susceptibilidad de las larvas de mosquitos Aedes

aegypti a los insecticidas (WHO/VBC/81.807). 3

Determinación de la susceptibilidad a insecticidas para mosquitos adultos

(WHO/VBC/81.807, WHO/MAL /95.1073, WHO/CTD/VBC/95.998) 4

X. Resultados 5

XI. Discusión 6

IV. RESUMEN EN ESPAÑOL

Planteamiento del problema: De las enfermedades transmitidas por mosquitos culicideos,

el dengue presenta un incremento paulatino en la década de los 90s, con Aedes aegypti


4

como vector principal, en el Perú1. Por otro lado, a partir de 1998 la transmisión del

dengue ha representado un gran problema por la dispersión del vector y posteriormente

en el 2002 por haberse detectado casos de dengue hemorrágico. En nuestro país se ha

utilizado las dosis diagnósticas de 0.1% para especimenes adultos, de 6 insecticidas y de

1 ppm para las larvas, utilizando la técnica de la OMS 19812.

Objetivo: Determinar la susceptibilidad del mosquito Aedes aegypti a diferentes

insecticidas de uso en salud pública en áreas con riesgo de transmisión de dengue y

dengue hemorrágico en el Perú.

Material y Métodos: Para este estudio descriptivo y de cohorte transversal se utilizaron

poblaciones de zancudos Aedes aegypti adultos criados desde larvas en el laboratorio,

tanto larvas como adultos, para estos últimos se utilizaran papeles OMS siguiendo el

procedimiento WHO/VBC/81.807) y con las correcciones de 1996

(CTD/WHOPES/IC/96.1) 4 y de 1998 5 .

Se estudiaron 8 insecticidas, de los cuales 04 eran piretroides (Lambdacyalotrina,

deltametrina, cyflutrina, permetrina) 01 organofosforado (malation) y 03 carbamatos

(propoxur, carbaryl, bendocarb). En 8 localidades del pais. Para cada bioensayo se

utilizaron 400 especimenes. Los bioensayos se realizaran entre 20 y 30 °C y 70 a 90 %

de HR.

Este estudio permitirá evaluar el programa de control y permitirá iniciar un monitoreo de la

susceptibilidad y delinear estrategias de control eficaces, para cortar la transmisión del

dengue y dengue hemorrágico a nivel local.

VI. INTRODUCCIÓN.


5

El ministerio de salud a través de DGSP y DIGESA para romper la transmisión del

dengue, ha venido realizando el control de culícidos, utilizando el insecticida temephos

para la fase larvaria y piretroides para la fase adulta.

Existe poca información sobre las evaluaciones de los programas de control en relación a

la susceptibilidad por eso es necesario ordenar estas actividades, lo que va a influir en la

salud de la población y hará más atractiva las ciudades para el desarrollo turístico.

Este nuevo conocimiento permitirá contar con la información operativa para planificar y

priorizar las compras de insecticidas.

VII. ANTECEDENTES

Se propone evaluar la susceptibilidad del Aedes aegypti vector principal del dengue frente

a los principales insecticidas de uso en salud Publica, iniciándose con la realización de la

línea base para conocer el grado de susceptibilidad en las áreas de transmisión de

dengue y dengue hemorrágico para iniciar una vigilancia de la susceptibilidad, uno de los

problemas que debemos solucionar es la falta de materiales y falta de sostenibilidad en

esta actividad.

El control químico con insecticidas es el más utilizado en Salud Pública para el control

vectorial pero no cuenta con evaluaciones periódicas para detectar la resistencia a

insecticidas, por ello debemos reforzar la implementación de este sistema. Igualmente en

la década de los 90s se ha incrementado en nuestro país la transmisión del dengue,

teniendo a Aedes aegypti como vector.


6

En nuestro país Balta et al en 2001, desarrollo la prueba de susceptibilidad usando la

dosis diagnóstica frente a 7 insecticidas (Cipermetrina 0.1 %, betaciflutrina 0.1 %,

alfacipermetrina 0.1 % Lambdacyalotrina 0.1 %, deltametrina 0.1 %, cyflutrina 0.1 % y

temephos) con la metodología de la OMS 1981 en 7 DISAS (Tumbes, Piura I, Piura II; La

Libertad, San Martín, Loreto, Ucayali) , resultando susceptibles en el 64% de ellas,

algunos utilizados hasta el momento y otros insecticidas alternativos para tener

herramientas disponibles para el control.

VIII. OBJETIVOS

Determinar la susceptibilidad del mosquito Aedes aegypti a insecticidas de uso en Salud

Pública en áreas de transmisión de dengue y dengue hemorrágico.

IX. METODOLOGÍA

Determinación de la susceptibilidad de las larvas de mosquitos Aedes aegypti a

los insecticidas (WHO/VBC/81.807).

Esta metodología puede hacerse con larvas del campo o las criadas en laboratorio

resultado de adultos criados en laboratorio.

Equipo de prueba.- 20 vasos de vidrio, 2 goteros o coladores pequeños, 2 baguetas, 1

micropipeta de 1 ml, 1 termohigrómetro.

Condiciones previas.- Se realizan colectas de larvas del III estadio y/o aquellas que

recién han pasado al IV estadio luego son transportados al laboratorio. Las larvas que

van a ser utilizadas en el bioensayo se colocan en 25 ml de agua declorada. Mientras que

se preparan vasos con 224 ml de agua sin cloro. Para efectuar una prueba completa con


7

un insecticida, se seleccionaran 500 larvas de mosquitos. Se desechan las larvas que

presenten anomalías.

Procedimiento.- Una prueba consiste en preparar 20 vasos con 249 ml de agua. Se podrá

usar agua destilada, de lluvia, de pozo, de arroyo o del caño, pero sin cloro, sin

impurezas orgánicas, que no contengan insecticidas, la forma de los recipientes debe ser

tal que el agua contenida en ellos alcance una altura de 2,5 a 7,5 cm.

Se deben realizar 4 tratamientos y un control con 4 repeticiones (debe decir 5

repeticiones. Se agrega acetona o alcohol absoluto al testigo y luego se agrega 1 ml de

solución de insecticida empezando por la más diluida y se deja en exposición durante una

hora. Realizar la prueba entre 20 y 30 ° Celsius. A las 24 horas de iniciada la prueba se

harán los recuentos de mortalidad. Para determinar la mortalidad se suman las larvas

muertas y moribundas, se consideran moribundas las larvas que al ser perturbadas, no

son capaces de alcanzar la superficie y son contadas como muertas, estas pueden flotar

o presentar cambios de color, adoptar posiciones no acostumbradas, pueden tener

rigidez, temblores o movimientos descoordinados.

Las larvas que se transforman en pupas durante la prueba quedan excluidas del

recuento. Cuando se produzca la metamorfosis de más del 10% de las larvas testigos en

el curso del experimento, se anulará la prueba. Siempre que la mortalidad en los testigos

sea superior al 20% la prueba se invalida y deberá repetirse.

Resultados.- Cuando la mortalidad en los testigos esté comprendida entre el 5% y el

20%, convendrá corregir los porcentajes de mortalidad mediante la fórmula correctiva de

Abbot.


8

Mortalidad corregida = % mortalidad de la prueba - % mortalidad del control x 100,

100 - % mortalidad del control

Cabe sospechar la aparición de una resistencia en las larvas de mosquito siempre que la

DL50 pase a ser de 10 a 15 veces superior a su valor primitivo o cuando la concentración

más fuerte del insecticida no sea capaz de matar a la totalidad de los individuos.

Determinación de la susceptibilidad a insecticidas para mosquitos adultos

(WHO/VBC/81.807, WHO/MAL /95.1073, WHO/CTD/VBC/95.998)

Introducción.- Los mosquitos adultos para los bioensayos pueden provenir de colecciones

obtenidas a partir de larvas o su descendencia (generaciones en laboratorio F1, F2, etc).

Aunque ocurre raramente una gran diferencia en la susceptibilidad entre los sexos, deben

usarse los mosquitos hembras exclusivamente en las pruebas de campo. Las

comparaciones de los datos de la prueba de susceptibilidad de un solo lugar a través del

tiempo son útiles para indicar las tendencias de resistencia, así como las comparaciones

de mosquitos de diferentes lugares en un solo momento, nos sirve para evaluar su

distribución.

Composición del equipo de prueba.- 25 tubos marcados con puntos verdes, 20 para la

espera y 5 para dejar en espera el control, 4 tubos marcados con puntos rojos para

portar los papeles impregnados, 20 correderas y 8 anillos dorados y 40 anillos plateados,

40 hojas de papel limpio (12 x 14.8 centímetro) para los tubos de espera, 02 capturadores

manuales, La hoja de la instrucción, 8 papeles impregnado 12 x 14.8 cm, Dos pinzas de

punta fina, 01 termohigrómetro, vasos colectores de 500 ml de capacidad (22), solución

azucarada al 5%.


9

Papeles impregnados con insecticidas.- Los papeles impregnados provienen de la

Universidad de Sains Malasia, Penang, Malasia (en nombre de OMS), vienen en la

presentación de cajas de plástico; cada caja contiene 8 papeles y se conservan a 4 °

Celsius.

Los factores generales que afectan la prueba de susceptibilidad de la OMS.- Cambios de

resistencia con la edad difieren dependiendo del mecanismo de resistencia involucrado,

con algunos insectos que se ponen más susceptible con el tiempo. El estado fisiológico

de las hembras adultas (es decir si ellos están faltos de alimento, alimentados con

sangre, semi-grávidas o grávidas) tiene un efecto notable en la susceptibilidad a los

insecticidas y la expresión del fenotipo de resistencia. La prueba debe realizarse entre 20

y 30 ° Celsius. La relación entre la temperatura y la mortalidad por la toxicidad es directa.

La temperatura y la humedad relativa deben registrarse durante la exposición al

insecticida y los períodos de espera.

Condiciones generales a ser reunidas.- El condicionamiento de los mosquitos en vasos

con el número que ira en cada tubo debe realizarse aproximadamente 10 horas antes de

realizarse la prueba, donde reposarán en condiciones optimas entre 20 y 30 grados

Celsius y 75 a 85 % de HR. Para la prueba se pueden usar hembras alimentadas con

sangre o no con 24 a 48 horas después de haber emergido. Un número mínimo de 400

mosquitos debe probarse para cualquier insecticida a una concentración dada, con 4

replicas de 25 mosquitos por tubo de la prueba. Dónde no es posible ensayar con el

número apropiado pueden continuarse los ensayos durante los días necesarios para

lograr este ideal.

Prueba de susceptibilidad de la OMS.- Se deben usar los tubos en posición vertical. La

posición horizontal evita el rápido knock down en los piretroides y DDT, la recuperación

sub- secuente de mosquitos pero con un riesgo de elevada exposición al insecticida. Las


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pruebas deben llevarse a cabo preferentemente entre 20 ° y 30 ° Celsius y entre 70 y 80

% de humedad relativa (HR), nunca a las temperaturas superiores a 30 ° Celsius. Si

menos del 80% KD se observa después de 60 minutos, entonces KD también debe

anotarse después de 80 minutos, por ejemplo dejar otros 20 minutos, en el tubo de

exposición, Después de 10 minutos de exposición, contar el número de mosquitos de KD

moviendo suavemente el fondo del tubo. Donde la resistencia por el knock down (kdr)

esta envuelto el índice de KD es un indicador sensible para el descubrimiento temprano

de la resistencia del piretroide. De las lecturas de KD de varios intervalos, se puede

realizar un análisis probit por computadora o una línea de regresión sobre papel probit,

obteniendo el KD 50, así como el KD 95 así mismo obteniendo su gráfica. Los mosquitos

adultos pierden a menudo las piernas durante las pruebas con el piretroide, sobre todo

cuando están expuestos a concentraciones altas y deben ser considerados como vivos si

ellos pueden volar sin tener en cuenta el número de piernas que permanecen.

Los papeles impregnados con piretroides no deben usarse más de 5 veces.

La interpretación de resultados de prueba de susceptibilidad .- Cuando la mortalidad

ocurre entre el 98 y 100%, indica que es susceptible. Si ocurre una mortalidad entre el

80 y 97%, indica que los mosquitos de esa área se encuentran en vigilancia, pero cuando

la mortalidad es menor al 80%, indica que existe un grado de resistencia.

Cuando el porcentaje de mortalidad en el testigo es menor al 5% no se usa la formula de

Abbott. Cuando la mortalidad del control está entre 5% y 20%, el promedio observó la

mortalidad se corrige por la fórmula de Abbott. Cuando la mortalidad de los testigos es

mayor de 20 % se anula la prueba y se repite.

Mortalidad corregida = % mortalidad de la prueba - % morta!idad del control x 100

100 - % mortalidad del control


11

X. RESULTADOS.

Pruebas con Piretroides

Insecticida DISA Localidad Mortalidad Resultado

Tumbes Andres Araujo 84.6 Vigilancia

San Martín 9 de Abril 100 Susceptible

Piura II Mancora 99 Susceptible

Deltametrina 0.05 %

La Libertad Trujillo 100 Susceptible

Tumbes Andres Araujo 41.7 Resistencia

Lima Norte Sn. Juan de Lurigancho 99 Susceptible

Permetrina 0.75 %

La Libertad Trujillo 100 Susceptible

Cyflutrina 0.15 % Lima Norte Sn. Juan de Lurigancho 100 Susceptible

Lambdacyalotrina 0.05 % La Libertad Trujillo 100 Susceptible

Pruebas con organofosforados.


La Libertad Trujillo 96 VigilanciaMalation 5 %

Tumbes Andres Araujo 100 Susceptible

Pruebas con carbamatos.


Propoxur 1 % La Libertad Trujillo 35 Resistencia


12

Tumbes Andres Araujo 73.4 Resistencia

Carbaryl 0.8 % Tumbes Andres Araujo 0 Resistencia

Bendiocarb 0.1 % La Libertad Trujillo 36 Resistencia

Areas con riesgo de transmisión de dengue y dengue hemorrágico, donde se evaluó la susceptibilidad del mosquito Aedes aegypti frente a los insecticidas de uso en Salud Pública en el 2005.


13

MOSQUIT Aedes

XI. DISCUSION

En La Libertad – Trujillo los mosquitos Aedes aegypti son susceptibles al insecticida

Deltamethrina 0.05 %, Lambdacyalothrina 0.05 %, permethrina 0.75 % con una

mortalidad de 100% y susceptibles a Malation 5 % con una mortalidad de 96 %.

Detectándose en esta área resistencia a Propoxur 1 % y Bendiocard 0.1 %.

San Martín

Tumbes

Trujillo

Sn. Juan de Lurigancho

Máncora


14

En Tumbes se encontró que los mosquitos Aedes aegypti del área de Andrés Araujo

se encuentran en Vigilancia para el insecticida Deltamethrina 0.05 % detectándose

resistencia en esta misma área a Permethrina 0.75 % propoxur 1. % y Carbaryl 0.8 % .

En Loreto en la localidad de Punchana, los mosquitos Aedes aegypti se encuentran

susceptibles a Deltamethrina 0.1 % con una mortalidad de 100 % .

En Lima el San Juan de Lurigancho se evaluaron los mosquitos Aedes aegypti con

los insecticidas Permethrina 0.75 % y Cyfluthrina 0.15 % obteniéndose como resultado

mosquitos susceptibles.

En San Martín -Tarapoto localidad 9 de Abril los mosquitos Aedes aegypti son

susceptibles con 100 % de mortalidad.

En Piura de evaluaron los Aedes aegypti en Mancora y en Chulucanas encontrándose

mosquitos Aedes aegypti susceptibles en esta s áreas.

XII. CONCLUSIONES

Por los resultados obtenidos en el presente trabajo se llega a la conclusión de que el

Aedes aegypti de las diferentes áreas evaluadas se encuentra susceptible a los

insecticidas Deltamethrina en San Martín –Tarapoto, Piura - Chulucanas y Mancora y

Loreto – Punchana.

Se detecta Resistencia del mosquito Aedes aegypti en Tumbes – Andrés Araujo y en

La Libertad Trujillo a los insecticidas propoxur 1% y Carbaryl 0.8 % y Bendicard 0.1 %.

XIII. RECOMENDACIONES

Según OMS recomienda realizar por lo menos una vez al año en las áreas donde los

mosquitos son susceptibles.

Para las áreas donde se encuentra en Vigilancia se debe evaluar dos veces al año.


15

Las áreas detectadas resistencia se debe evaluar 4 veces al año dejar de usar el

insecticida y confirmar la resistencia para posteriormente determinar el mecanismo de

resistencia.

Se recomienda realizar evaluaciones para la confirmacion de la resistencia en las areas

detectadas resistencia.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFIACAS

1. MINSA .

2. OMS. “Determinación de la susceptibilidad de las larvas de mosquitos Aedes aegypti a

los insecticidas. 1981. WHO/VBC/81.807.

3. BALTA et al 2001. “Evaluaciones de susceptibilidad del Mosquito Aedes aegypti en

áreas de dengue y riesgo a Dengue en el Perú”.

4. OMS. Report of the WHO Informal Consultation on the “ Evaluation and Testing of

Insecticides” 1996. CTD/WHOPES/IC/96.1.

5. OMS. “Test Procedures for Insecticide Resistance Monitoring in Malaria Vectors, Bio-

Efficacy and Persistence of Insecticides on Treated Surfaces”.

Report of the WHO (1998) Informal Consultation. Geneva 28-30 Septempber.

6. OMS. “Chemical Methods for the Control of Vectors and Pest of Public Health

Importance” Chavasse DC y Yap HH.1997. WHO/CTD/WHOPES/97.2

7.OMS. “Suministros para el monitoreo de la Resistencia a Insecticida en los Vectores de

enfermedades”.(1995). WHO/MAL /95.1073, WHO/CTD/VBC/95.998”.

ANEXOS

Foto N° 1.- Manipulación de larvas del insectario.


16

Foto N° 2.- Se muestran los tubos de exposición y reposo, para realizar las pruebas de

susceptibilidad de la OMS

Grafica N° 1.- Muestras los resultados de la susceptibilidad de los piretroides frente a

diferentes cepas de Aedes aegypti.

60

80

100


17

Grafica N° 2.- Muestras los resultados de la susceptibilidad del organofosforado y

carbamatos frente a diferentes cepas de Aedes

100 96

73.4

35

0

36

0

20

40

60

80

100

Tumbes La Libertad

Malation Propoxur Carbaryl Bendiocarb

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