DETERMINACION DE Hb EN SANGRE
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DETERMINACIÓN DE HEMOGLOBINA EN SANGRE
1. FUNDAMENTO DEL MÉTODO PARA LA DETERMINACION DE HB EN SANGRE
Reacción de Oxidación (con el Rvo. de Trabajo)
Hb + Ferrocianuro de Potasio Meta hemoglobinaF+2 K4[ Fe+2(CN6)] Fe+3
Reacción de Coloración
Meta hemoglobina + CNK Cianmetahemoglobina Fe+3 HbFe+3
Se leen a λ = 540 nm
Composición del Rvo. de Trabajo
- Ferricianuro de Potasio- Cianuro de Potasio- Agente Sterox: rompe la membrana del eritrocito liberando la hemoglobina.
2. PROCEDIMIENTO
Tubo Blanco Tubo Muestra ProblemaMuestra Problema --- 10 μLRvo. de Trabajo 2.5 ml. 2.5 ml.
λ = 540 nmIncubar por 3’ a temperatura ambiente.
3. ESTÁNDARES
ABS estándar = 0.517FC = 18/ ABS estándarABS m.p. = 0.421
4. CÁLCULOS
[Hb] = FC x ABS m.p.[Hb] = 14,65764
5. VALORES NORMALES
[Hb] /Varones = 14 g/dL – 18 g/dL[Hb] /Mujeres = 12 g/dL – 16 g/dL