DIAGÓSTICO DE HIV

DIAGÓSTICO DE HIV

LIC. RICARDO SALDAÑA

Por: Lic. Ricardo Saldaña 2

PRUEBAS DE LABORATORIO

• Métodos Directos: Evidencian/cuantifican la presencia de antígenos en la muestra. – PCR cualitativa, – PCR cuantificada– cultivo y aislamiento

viral, – antigenemia P-24)


PRUEBAS DE LABORATORIO

• Métodos Indirectos: – Evidencian la presencia

o ausencia de anticuerpos totales en la muestra.

– Son los más utilizados.• Pruebas rápidas• ELISA


Diagnóstico de VIH

Se usan dos niveles de prueba serológicas: Pruebas de Tamizaje:

Ensayos inmunoenzimáticos Test de aglutinación Test de detección rápida

Tienen alta sensibilidad. La posibilidad de tener falsos negativos es bajo.


Uni-Gold Recombigen

Multispot HIV-1/HIV-2

Reveal G2

OraQuick Advance

Pruebas rápidas disponibles en el mercado


Ventajas de las pruebas rápidas de VIH

• Versatilidad y existencia de diferentes principios inmunológicos así como en las muestras biológicas que se pueden utilizar.

• No necesitan un laboratorio muy sofisticado para utilizarlas.• La realización y la interpretación de los resultados obtenidos

es fácil.• Los resultados preliminares se obtienen en poco tiempo, y

cuando se combinan los resultados definitivos los podemos obtener en menos de una hora

• Personal a nivel técnico las puede realizar con la debida capacitación y supervisión de un profesional con experiencia.


Fortalezas de las pruebas rápidas de VIH

• Algunas se pueden almacenar a temperatura ambiente.

• Se optimiza el uso de los recursos y el tiempo comparado con el ELISA.

• Los resultados obtenidos son igual de confiables que los resultados del ELISA y con menos limitaciones técnicas.

• Algunas requieren poca inversión económica.


Debilidades de las pruebas rápidas de VIH

• El costo comparado de estas pruebas con el ELISA puede a veces ser mayor.

• Presencia de falsos positivos por lo que necesitan confirmación de los resultados obtenidos.

• El periodo de ventana es mas largo por lo que podemos tener resultados falso negativo comparado con el ELISA de cuarta generación.


Causas de resultado falso-positivo:

• Relativas al suero: Relativo a la calidad y manipulación de la muestra:

Calidad, extracción, almacenamiento y contaminación de la misma, estabilidad y calidad de los reactivos.

• Relativas a la presencia de auto anticuerpos:– Presencia de enfermedades autoinmunes (AR, LES).

• Relativas a otras condiciones: – Vacunaciones, Enf. Virales, I Renal, Cirrosis,

Enfermedades hemato -oncológicas, alcoholismo, embarazo, etc.


Causas de resultado falso- negativo:

• Periodo de ventana• Tratamiento con inmunosupresores• Procesos malignos• Trasplante de médula ósea• Disfunciones de las Células B• Factores reumatoides• Pérdida de estabilidad de los reactivos• Reactivos que detectan principalmente p24• Pobre respuesta inmune


Selección de pruebas rápidas de VIH apropiadas

• Es necesario tomar en cuenta tres factores:– El objetivo de hacer la prueba.– Sensibilidad y especificidad de la prueba.– Prevalencia de la infección de VIH en la población

que será tamizada con las pruebas.


Elección de Pruebas rápidas de VIH

• Los tres objetivos para hacer un tamizaje de anticuerpos contra VIH son:– Tamizaje de donadores de sangre u órganos.– Para fines epidemiológicos– Diagnóstico de personas infectadas.


Sensibilidad y especificidad de la prueba

• Estos dos factores son críticos para diferenciar entre una persona infectada y una que no está infectada.

• Pruebas alta mente sensibles disminuyen la posibilidad de obtener resultados falsos negativo.

• Las pruebas altamente específicas disminuyen la posibilidad de tener resultados falsos positivo.

• La mejor elección dependerá del objetivo de hacer la pruebas.• Los estándares mínimos son: Sensibilidad >99%

y especificidad >95% preferiblemente validadas en nuestra población.


Sensibilidad y especificidad de las pruebas

aVerdaderosPositivos

bFalsos

positivosa + b

cFalsos negativos

dVerdaderosnegativos

c + d

a+c b + d

Res

ulta

dos

De

la p

rueb

a

Sensibilidad = a / (a + c) Especificidad = d / (b + d)VPP = a / (a + b) VPN = d/ (c + d)


Detección de anticuerpos contra el VIH

Pruebas deTamizaje

Pruebas de Confirmación

Sensibilidad

Falsos negativos es bajo Falsos positivos es bajo

Especificidad


Prevalencia de la infección de VIH

• Definición: Casos positivos * 100%

población total• La prevalencia puede variar de población a

población o en un hospital de servicio a servicio.

• A > prevalencia > VPP y < VPN• A > prevalencia > VPN y > VPP


Bioline VIH ½ 3.0Estándar Diagnostic

• Principio: Análisis Inmunocromatográfico

• Prueba de 3ra. generación• Interpretación:Visual• Muestras: Suero, plasma y

sangre (EDTA)• Volumen de muestra:10µl • Tiempo:20 minutos • Sensibilidad: 100.0%• Especificidad: 99.4%


Pruebas de laboratorio

Oraquick

Determine

Instanscreen


DETERMINE: Prueba rápidaCaracterísticas:


• Interpretación:Visual• Muestras: Suero, plasma y

sangre (EDTA)• Volumen de muestra:50µl • Tiempo:30-35 minutos

• Sensibilidad: 99.6%• Especificidad: 99.4%


Immunocomb IICaracterísticas:

• Principio: Ensayo inmunoenzimático Indirecto.

• Interpretación:Visual• Muestras: suero y plasma• Volumen:50µl• Tiempo: 60 minutos • Sensibilidad: 100%• Especificidad: 99.4% • No necesita equipo

automatizado


ORAQUICKCaracterísticas


• Interpretación:Visual• Muestras: Suero, plasma y

sangre completa y fluído oral.

• Tiempo:30-35 minutos

• Sensibilidad: 99.6%• Especificidad: 99.4%


PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS

Muchas Graciaspor su

atención.

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