Equipo 7:Alvarado Bustos AnglicaGil lvarez Manuel ngelGuzmn Nieto Ilse IreneOsorio Ibaez SuheilSnchez Mendoza Luis Leonel

Son reacciones que se llevan a cabo por la interaccin de un antgeno particulado con su anticuerpo correspondiente.

Directa: intervienen antgenos o anticuerpos que forman parte de manera natural de una partcula de mayor tamao, ej. Eritrocitos.

Indirecta: los antgenos o los anticuerpos se adsorben de forma artificial a una particula. Ej. Ltex

Temperatura.

Relacin Ag / Ac.

Exposicin del antgeno.

pH(6.57.5).

Tiempo.

Fuerza inica del medio.

Es una reaccin inmunolgica entre anticuerpos sricos y el antgeno correspondiente produciendo una reaccin de aglutinacin macroscpica.

Es una reaccin de aglutinacin DIRECTA entre los antgenos de: Salmonella, Brucella y Proteus.

Anticuerpos contra estos antgenos presentes en el suero del paciente.

La infeccin por estos microorganismos induce a una respuesta inmune con la produccin de anticuerpos.

Reaccin de Widal: Salmonella tiphy, S.enteritis, S. paratyphi.Demuestra la presencia de anticuerpos aglutinantes contra los antgenos H (flagelar) u O (somtico).

Anticuerpos vs antigeno O aparecen de 6 a 8 das iniciada la enfermedad.

Anticuerpos vs antgeno H aparecen de 8 a 12 das.

Reacciones de Huddleson.Mtodo serolgico que detecta anticuerpos contra: Brucella abortus, Brucella melitensis Brucella suis.

Empleado para el diagnstico de brucelosis.

Reaccin de Weil-FelixSe lleva a cabo para la determinacin de anticuerpos de Proteus OX-19.

Existe una reaccin cruzada con bacterias del gnero Rickettsia.

El aislamiento de Rickettsia sp es complicado y riesgoso.

Mtodo en placa. Depositar en sitios diferentes de la placa cantidades distintas de suero a probar.

Aadir 30 L de la suspensin de antgeno a las cantidades de suero utilizadas.

Mezclar.

Observar aglutinacin a luz directa.

Mtodo en tubo.Mezclar antgeno y realizar una dilucin 1:20 en solucin salina.

Colocar 7 tubos de 13x100.

Aadir al tubo 1; 0.9 mL de solucin salina y 0.5 mL a

Titulacin en tubo.Diluir el antigeno en solucin salina 1:20.

*** Eliminar 5 mL de la dilucin..

Incubar a 37 para antgenos: tifico H, Brucella abortus y Proteus OX-19.48-50 para antgenos: tifico O y S. paratyphi A y B

1234567 C(-)Solucin Salina0.9 mL0.5 mL0.5 mL0.5 mL0.5 mL0.5 mL0.5 mLSuero0.1 mL

Interpretacin de resultados.

AglutinacinTubo4+Organismos: 100% sedimentados.Sobrenadante: totalmente claro.3+Organismos: 75% sedimentados.Sobrenadante: ligeramente turbio.2+Organismos: 50% sedimentados.Sobrenadante: moderadamente turbio.1+Organismos: 25% sedimentados.Sobrenadante: completamente turbio.NegativoNo se observa aglutinacin y la suspensin es turbia.

Consideraciones.Se deben tomar dos muestras con intervalos de 7 das, si en a segunda muestra se encuentra un titulo ms elevado que en la primera, indicar una infeccin activa.

De manera contraria, indica que el paciente est en recuperacin y los anticuerpos detectados son de memoria.

MetodologaTtulo: es la mayor dilucin del suero problema que da una reaccin positiva de aglutinacin

Muestra de suerosTtulo0.08 mL equivalen a una dln1:200.04 mL 1:400.02 mL 1:800.01 mL 1:1600.005 mL 1:320

Se refiere a la aglutinacin de los glbulos rojos. Se debe a la presencia de Ag en los eritrocitos.

Hemaglutinacin directaLa presencia de antgenos en la superficie de los glbulos rojos se puede detectar por la hemoaglutinacin producida cuando se aade un antisuero con anticuerpos frente a dichos antgenos.Esta tcnica se emplea habitualmente para la identificacin de los grupos sanguneos y Rh

A la sangre heparinizada se le aaden los antisueros correspondientes: anti-A, anti-B o anti-AB (todos ellos anti-Rh negativos).

Hemaglutinacin indirecta o pasivaSe basa en el principio de la inhibicin de la hemaglutinacin. Se precisan glbulos rojos a los cuales se les ha unido la misma sustancia que se desea detectar o cuantificar

Aglutinacin (+) indica ausencia de la sustancia a estudiar, y aglutinacin (-) indica presencia de la misma

MicrotitulacionSe utilizan diluciones seriadas de AbSe mantiene constante el AgTitulo de aglutinacin: La dilucin ms alta a la que se sigue aglutinando el AgUtilidad: conocer la concentracin de Ab especficos en suero

Metodologa

DIAGNSTICO SEROLGICO DE SFILIS

Treponema pallidium pallidium

CARACTERSTICAForma, agrupamientoBacilos aislados, largos y delgados en forma de espiral Gram (-)CultivoNo se han cultivado en medios artificiales.Caractersticas antignicasAntgeno no muy bien definido.Induce la produccin de reagina.Tiene ms de 100 antgenos proticos.ReservorioHombreMecanismo de transmisinContacto sexual, transplacentario, contacto con sangre infectada en piel o mucosas lesionadas.Periodo de incubacinVariable

Tienen una sensibilidad del 70-99%.Son afectadas por el tratamiento antitreponmico.No pueden utilizarse para el diagnstico de la sfilis primaria o la tarda.Prueba tamiz, barata y fcil de realizar.

Reactivos.Antgeno en suspensin estabilizadoControl positivoControl negativo

Material y EquipoPlaca cncavaAgitador mecnicoMicroscopio

FALSOS NEGATIVOS

En sfilis tarda o primaria.

FALSOS POSITIVOS

Error tcnico.

Pacientes que tienen otras infecciones treponmicas.

Prueba ResultadoVDRLreactivo a cualquier disolucinreactivo a ttulos bajosNo reactivoFTA-ABSreactivoNo reactivoreactivoInterpretacinAfirma treponematosis actual o pasadaReaccin falsa positivaTreponematosis pasada y curada

La Protena C reactiva (PCR CRP por sus siglas en ingls) es una alfa globulina anormal.Fue descubierta originalmente por Tillett y Francis en 1930.

La PCR es miembro de la clase de reactivos de fase aguda "protena de fase aguda

El nivel de la PCR aumenta en casi todas las infecciones bacterianas agudas.Algunos tumores .Diversos tipos de destruccin de tejidos (infarto al miocardio).

Es sintetizada por el hgado y por los adipocitos. Es miembro de la familia de las pentraxinas.La Protena C reactiva est relacionada con la fosfocolina, iniciando el reconocimiento y la fagocitosis de las clulas daadas.

El gen PCR se encuentra en el primer cromosoma (1q21-q23). Es una protena de 224 aminocidos. La protena tiene forma de un disco pentamrico anularMasa molecular de 251.060 Da.

Su utilidad ms frecuente es para registrar actividad en pacientes con fiebre reumtica y artritis reumatoide Indicio de inflamacin Determinar la efectividad de un tratamiento o conocer lo avanzada que est una enfermedad.

El FR se encuentra en suero y lquido sinovial. Algunos factores reumatoideos se pueden comportar como crioglobulinas.

Resultado PCR

FACTOR REUMATOIDESon anticuerpos dirigidos contra el fragmento Fc de Ig.G. Los anticuerpos son de tipo Ig.M, pero tambin pueden ser Ig.A o Ig.G.

La produccin de FR puede ser regulada con anticuerpos anti-idiotipo, que son anticuerpos IgG dirigidos contra sitios especficos sobre el fragmento Fab.

FR-Waalter-Rose (hemaglutinacin)EL FR detectado es nicamente de tipo IgM.Se basa en la capacidad del FR para la aglutinacin de GR de oveja previamente sensibilizados con suero de conejo.El IgM (pentmero) se une a los fragmentos Fc de las IgG del suero de conejo que se han unido a los GR de oveja provocando la aglutinacin.Especifico para Artritis Reumatoide Costosa

FR Singer Plotz (ltex)

El FR reacciona con las partculas de ltex recubiertas con IgG humana produciendo una aglutinacinMenos especificaMas barato

Altas concentraciones de RF (>300 IU/ml) son encontradas en la artritis reumatoidea y en el sndrome de Sjgren.

PIE (Prueba inmunolgica de embarazo)Embarazo caractersticas:Ausencia de menstruacinDolor en glndulas mamariasLa presencia de nusea matutina o vmitos ocasionales, cansancio y sueo.

Glucoprotena.

Placenta

36.5 Kd

Tiempo de vida media 24h.

GONADOTROPINA CORIONICA HUMANA

GONADOTROPINA CORINICA HUMANA

Niveles de hCG srica en embarazadas normales durante el primer trimestre.

Edad Gestacional (semanas) hCG mUI/ml)

3-49-1304-575-26005-6850-208007-124000-10020013-1618300-137000

Inhibicin de la hemaglutinacin.

Inhibicin de partculas de ltex.

INMUNOENSAYOS PARA DETECCIN DE HCG

Inhibicin hemaglutinacin

EXISTEN DOS TIPOS BSICOS PARA EL INMUNOENSAYO EN PARTCULAS DE LTEX:Aglutinacin directa de partculas de ltexb) Inhibicin de la aglutinacin de partculas de ltex

AGLUTINACIN DIRECTAUtiliza anti-HCG directamente absorbido en las partculas de ltex. Estas partculas se colocan junto con la muestra que contiene HCG.

POSITIVA: La aglutinacin indica la presencia de HCG

NEGATIVA: Cuando no hay aglutinacin, por ausencia de HCG.

INHIBICIN DE LA AGLUTINACIN EN PARTICULAS DE LATEXSe mezcla brevemente suero anti-HGC con orina del paciente (HGC) y se aaden partculas de ltex recubiertas de HCG

POSITIVA: Si existe la HCG sta neutralizara al antisuero anti-HCG y no habr aglutinacin de las partculas de ltex recubiertas de HCG

NEGATIVA: En caso contrario, el antisuero anti-HCG (en ausencia de HCG) quedara libre (no resulta afectado) y provocar una aglutinacin visible de las partculas de ltex recubiertas de HCGantisueroAntigenoLatex c/antigenoantisueroLatex c/antigeno

Referencias.

Rojas-Espinosa O. Inmunologa de memoria. 3a ed. Mxico: Editorial Medica Panamericana, 2006Freeema, Bob A. Microbiologa de Barrows. 22ed; Interamericana Mc Graw Hill:2008.Kokuina E, Chico A, Estevez M, Argelles A, Casas N, Prez D et al. Autoanticuerpos diagnsticos en enfermedades autoinmunes sistmicas y especficas de rgano. Rev Cubana Med. 2006;45 Goldby, Richard. Inmunologia. 5Ed; Mc Graw Hill: 2006.BAch, Jean F. Inmunologa. Editt Limusa: 1984Colectivo de Autores. Inmunologa Celular y Molecular. En: Sistema del Complemento. La Habana: Editorial Ciencias Mdicas; 2006 .p.370.

su nombre proviene de su capacidad de formar un precipitado con el polisacrido somtico C neumococo (La porcin somtica del neumococo contiene una protena M que es caracterstica de cada tipo, y un carbohidrato C que es comn para todos los neumococos), **es una glucoprotena producida por clulas trofoblasticas de la placenta. El trofoblasto placentario a los 9 das de su gnesis produce cantidades apreciables de HCG .Se excreta en orina y no se encuentra en mujeres no embarazadas. Por ello la HCG son la base de las pruebas de embarazo y tambin en la determinacin de tumores trofoblsticos. *La HCG se encuentra en orina y sangre mientras se mantenga el tejido placentario, puede detectarse al 7 dia posteriores a la ovulacin. Despus de 5 semanas de gestacin aumenta la HCG en orina y alcanza su mximo de la 10-12 semanas. En la medida que la produccin de estrgenos y progesterona por la placenta aumenta (durante el segundo trimestre de embarazo) los niveles de HCG descienden.

*Son pruebas cualitativas o cuantitativas que permiten valorar el incremento de la HCG sin importar si la causa es el embarazo.*consiste en recolectar la primera orina de la maana y ser analizada en el laboratorio o por la prueba que obtienes en la farmacia y tambin existe la prueba de sangre que se realiza en un laboratorio (fraccin beta de hormona gonodatropina corionica), esta es ms confiable incluso con 5 das de retraso