ESTUDIO FITOQUÍMICO Y FARMACOLOGICO DE LA SEMILLA DE “SACHA INCHI” Plukenetia volúbilis linneo

UNIVERSIDAD ALAS PERUANASFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICAAutor: MACHACA CAMPOMANES, Michael

RESUMEN

El estudio de los diferente componentes de Plukenetia volúbilis linneo pretende aportar a las investigaciones realizadas respecto a estas especies, que validen científicamente sus propiedades farmacológicas.

El fin de esta investigación implica el estudio de los diferentes componentes a través del tratamiento del extracto hidroalcohólico con alcohol de 96°. Las pruebas fotoquímicas desarrolladas permiten determinar que los componentes mayoritarios presentes en esta especie son los ácidos grasos, como: omega 3(acido linolenico)

El monitoreo de la cromatografía de columna se ha realizado con la cromatografía de capa fina utilizando como eluyentes al cloroformo y etanol de 96° y el revelado con FeCl3 al 1%; no se observan manchas en la cromatoplaca.

Y en la marcha de solubilidad se observa que solo son solubles con compuestos apolares.

ABSTRACT

The study of them different components of Plukenetia volúbilis linneo tries to reach to the investigations realized with regard to these species, which validate scientific his pharmacological properties.

The end of this investigation implies the study of the different components across the treatment of the extract hidroalcohólico with alcohol of 96 °. The photochemical developed tests allow determining that the majority present components in this species are the oily acids, since: omega 3 (acid linolenico).

The monitoring of the column chromatography has been realized by the chromatography of thin cap using like elements to the chloroform and ethanol of 96 ° and the developing with FeCl3 to 1 %; spots are not observed in the cromatoplaca.

And in the march of solubility is observed that alone they are soluble with compounds apolares.

I. INTRODUCCIÓN

Las posibilidades de encontrar nuevos medicamentos que alivien las diferentes enfermedades, han hecho que las plantas constituyan uno de los recursos terapéuticos de mayor uso.

La gran diversidad de especies con variados principios activos, permiten hoy en día afianzar más las investigaciones con valor científico, teniendo el antecedente etnobotánico.

Muchos de estos estudios están dedicados al aislamiento de principios activos que tienen uso terapéutico como es a partir de la semilla de sacha inchi. El estudio de los diferentes componentes de esta semilla pretende aportar a las investigaciones que se han podido realizar respecto a esta especie, que validen científicamente sus propiedades farmacológicas, teniendo como antecedente que esta especie es utilizada en la medicina tradicional con el nombre de sacha maní o maní del inca. Esta investigación además permitirá determinar a través de los análisis si estas especies tienen los metabolitos secundarios para los efectos terapéuticos.

II. ESTUDIO BOTANICO.

2.1. Plukenetia volúbilis l. Planta: trepadora, voluble, semileñosa,

de altura indeterminada. Hojas: son alternas, de color verde

oscuro, oval – elípticas, aserruchadas y pennitinervias, de 09 – 16 cm. de largo y 06 – 10cm. Ancho. El ápice es puntiagudo y la base es plana o semi-arriñonada.

Flores: los resultados obtenidos a través del proyecto de tesis titulado” biología floral y reproductiva del cultivo

de sacha inchi (plukenetia volúbilis l.) – “euphorbiaceae”, nos indican que el cultivo presenta un alto porcentaje de polinización cruzada, lo cual indica que se trata de una especie alegama, el conocimiento del tipo de reproducción es de una suma importancia para futuros trabajos de mejoramiento genético de la especie.En el sacha inchi se observan 2 tipos de flores: Masculinas: son pequeñas,

blanquecinas, dispuestas en racimos.

Femeninas: se encuentran en la base del racimo y ubicadas lateralmente de una a dos flores.

Fruto: es una capsula, de 3.5 a 4.5 cm. De diámetro, con 4 lóbulos aristados (tetralobados) dentro de los cuales se encuentran 4 semillas. Excepcionalmente, algunos eco tipos presentan capsulas con 4 a 7 lóbulos.

Semilla: es ovalada, de color marrón oscuro, ligeramente abultadas en el centro y aplastadas hacia el borde. Según los eco tipos, el diámetro fluctúa entre 1.3 y 2.1 cm.

FRUTO DE Plukenetia volúbilis linneo.

SEMILLA DE Plukenetia volúbilis linneo.

TAXONOMIA

La clasificación botánica según Ayala, S.A. Y Field Museum… S.A (1996) de la planta es la siguiente:Orden : EuphorbialesFamilia : Euphorbiaceae

Genero : PlukenetiaEspecie : Volúbilis LinneoNombre científico: Plukenetia volúbilis linneo.Nombre vulgar: sacha inchi.La especie plukenetia volúbilis l. es conocida de acuerdo al idioma o lugar con los siguientes nombres:

Sacha inchic Sacha maní Maní del monte Maní del inca Inca peanut

COMPOSICION QUIMICA DE LA SEMILLA DE Plukenetia volúbilis linneo

COMPONENTES CONTENIDO (%)

García Mejía

Humedad

Proteína

Grasa

Fibra

Ceniza

Carbohidratos

5,63

24,39

43,27

16,53

7,72

2,80

6,37

24,21

51,40

11,30

2,69

4,03

Fuente: García 1992 y Mejía 1997.

III. ASPECTOS ETNOBOTANICOS

Plukenetia volúbilis linneo dentro de la medicina tradicional y de acuerdo a la información bibliográfica e información directa de personas que utilizan estas especies en el tratamiento de diferentes enfermedades, cumplen un papel importante que se atribuye a los efectos terapéuticos.

Las semillas tienen diferentes usos, tanto farmacológicos como nutritivos.

En medicina tradicional, las mujeres Mayorunas, Chayuhuitas, Campas, Huitotas Shipibas, Yaguas y Boras mezclan la harina con el aceite de sacha inchi y hacen una crema especial para revitalizar y rejuvenecer la piel. Los nativos Secoyas, Handosas, Amueshas, Cashibos, Dapanahuas y Boras comen los granos tostados de Plukenetia volúbilis para recuperar la fuerza y los usan como un tónico para afrontar el trabajo duro. Con el aceite frotan sus cuerpos para aliviar los dolores reumáticos y musculares.

En la nutrición según los relatos de las personas que mantienen sus tradiciones dicen:”el maní del monte se muele y después pasa a ser cocinado para preparar como una especie de mazamorra llamado inchi cucho (ají con maní), lechona api (mazamorra de plátano con maní), inchi capi (sopa de gallina con maní o sopa de res con maní), en los cuales

reemplaza al maní.

En épocas antiguas la semilla de Plukenetia volúbilis l. se considero un elemento importante tanto en la nutrición como en la medicina, es por ello que se represento en las armas de guerra así como el los huacos.

IV. MÉTODOS DE ANALISIS

4.1 ANÁLISIS FITOQUIMICO.

Se ha realizado la marcha fotoquímica que corresponde a las siguientes pruebas: prueba del cloruro férrico (fenoles), prueba de la gelatina (taninos), prueba de dragendorff y mayer (alcaloides), prueba de shinoda (flavonoles), prueba de seliwanoff (azucares), prueba de la espuma (saponinas).

4.4 MARCHA DE SOLUBILIDAD.

Los ensayos de la solubilidad de un extracto, son importantes por que permite elegir el solvente adecuado para su extracción y determinar su polaridad de los constituyentes químicos.

4.3 CROMATOGRAFIA.

Las técnicas cromatográficas son procedimientos fisicoquímicos que permiten separar los componentes de una mezcla mediante el desplazamiento diferenciado de cada uno de ellos sobre una superficie estacionaria por acción de un sistema de solventes.

Las técnica cromatográfica utilizada es: cromatografía en capa fina (ccf).

V. PARTE EXPERIMENTAL

5.1. POBLACIÓN DE MUESTRA

Lugar de Recolección – Plukenetia volúbilis linneo: Oxapampa (1,814 msnm)Estadio y Época de Recolección: Floración

(febrero a abril 2008)Cantidad de muestra: 1 Kg.

5.2 OBTENCIÓN DE EXTRACTOS.

5.2.1 COSECHA

La cosecha del sacha inchi, bajo cualquier circunstancia de su uso o destino, tiene lugar generalmente cuando los frutos o capsulas se tornan de un color marrón oscuro o negro cenizo. Se realiza recolectando las capsulas con la mano, pues estas se desprenden fácilmente, algunas veces se producen perdidas por dehiscencia, por ello es recomendable cosechar cada 15 días. ), La cosecha se estabiliza a partir de los 14 meses. Generalmente, cuando 3se realiza la cosecha, se encuentran algunas capsulas inmaduras, que todavía conservan algo de color verde y se dejan en el campo para la siguiente cosecha, talvez ya no se cosechen debido a su dehiscencia. Por lo tanto, en estos casos, lo que se recomienda es cosecharlas y poner las capsulas inmediatamente al sol, para evitar el ataque de hongos, y así no se deteriore la calidad del producto.

Plukenetia volúbilis linneo. La planta ya es adulta y ya están listos los frutos para ser cosechados

5.2.2 RECOLECCIÓN

El material vegetal se recolecto en la provincia de Oxapampa; es la provincia más extensa del departamento de Pasco y se  localiza en la parte central del Perú. La Provincia de Oxapampa esta conformada por 7 distritos: Oxapampa, Villa Rica, Chontabamba, Huancabamba, Pozuzo, Puerto Bermúdez y Palcazú.

Se encuentra ubicada en la margen derecha del río Huancabamba, que divide al distrito de Oxapampa con el distrito de Chontabamba. Oxapampa se encuentra a una altura de 1,814

msnm, entre las coordenadas geográficas 10°35'25" de latitud sur y 75°23'55" de longitud oeste del meridiano de Grennwich. Cuenta con una superficie de 982.04 km2.

Las semillas fueron extraídas de plantas sanas, sembradas en el campo de multiplicación de la especie. Se eligieron frutos maduros, dehiscentes, antes de la cosecha programada.

5.2.3 MOLIENDA

El primer paso es el descascarado de las semillas, para después llevarlo al horno a una temperatura de 50 ° C .Una vez secas la especie vegetal, someterla a molienda.

Después de la molienda se peso de nuevo la droga vegetal y se observo que la cantidad de la muestra se reduce a 600 g. y 400 g (cáscara y humedad). Esta última obtención se llevo a una botella de color ámbar y después se agrego alcohol de 96°. El macerado obtenidos corresponden a soluciones hidroalcohólicas. Que después de una semana (tiempo mínimo de maceración) se procede a la filtración.

El pelado de las semillas es en tres etapas:

1. El fruto entero. (figura 1)

2. Las semillas con cáscara(figura 2)

3. Las semillas descascaradas(figura 3)

(Figura 1)

(Figura 2)

(Figura 3)

DIAGRAMA DE FLUJO DE EXTRACCIÓN

Siembra de sacha inchi

Cosecha de Sacha inchi

Acopio de semillas

Transporte de las semillas

Selección y descascarado de semillas

Macerado de las semillas

Filtrado del macerado

VI. ENSAYOS PRELIMNARES.

Los ensayos preliminares como solubilidad y la marcha fotoquímica que son análisis cualitativos permiten determinar la presencia de metabolitos y la cantidad de éstos en forma muy cualitativa. Los resultados de estos ensayos se aprecian en los siguientes cuadros.

6.1 MARCHA DE SOLUBILIDADEn la marcha de solubilidad obtuve lo siguiente:

Cuadro 1SOLUBILIDADES

SOLVENTES Plukenetia volúbilis l.

H2O (-)

ALCOHOL 20° (-)

ALCOHOL 30° (-)

ALCOHOL 40° (-)

ALCOHOL 50° (-)

ALCOHOL 60° (-)

ALCOHOL 70° (-)

ALCOHOL 80° (-)

ALCOHOL 96° (-)

HCl (-)

NaOH (+ -)

ACIDO ACETICO (+ -)

ETER (+ -)

BENCINA (+ -)

N-HEXANO (+ -)

CLOROFORMO (+ +)(-) = insoluble; (+-) = poco soluble;

(++) = soluble

En esta foto se muestra como el concentrado del extracto de Plukenetia volúbilis l. son insolubles en los compuestos polares.

6.2 GLUCIDOSEn los ensayos de caracterización de glúcidos se obtiene lo siguiente:

Cuadro 2CARACTERIZACION DE GLUCIDOS

REACTIVOS RESULTADOS

Reacción con molish(+++)azucares

reductores

Reacción con fehling(++)azucares

reductores

Reacción con benedit(++)azucares

reductores

Reacción con tollens(++)azucares

reductoresReacción con

selivanoff(++)azucares

reductores(-) = No hay presencia de metabolitos(+) = Escasa presencia de metabolito(++) = Regular presencia de metabolito(+++) = Abundante presencia de metabolito

REACCIÓN CON MOLISH

Ensayos fotoquímicos

REACCIÓN CON FEHLING

REACCIÓN CON BENEDIT

REACCIÓN CON TOLLENS

REACCIÓN CON SELIVANOFF

Anillo de color violeta

Precipitado de color naranja

Se torna de color amarillo

Se forma un espejo de plata

Se torna color naranja

En esta foto se muestra todas reacciones de glúcidos que dan positivo a la reacción.

6.3 ACEITES FIJOSEn los ensayos de caracterización para aceites fijos se realizo con el reactivo sudan III y se obtuvo lo siguiente:

Cuadro 3CARACTERIZACION DE ACEITES FIJOS

REACTIVOS RESULTADOS

Reacción con sudan III (+++)

(-) = No hay presencia de metabolitos(+) = Escasa presencia de metabolito(++) = Regular presencia de metabolito(+++) = Abundante presencia de metabolito

6.4 FENOLESPara el reconocimiento de compuesto fenolicos se obtuvo:

Cuadro 4CARACTERIZACION DE COMPUESTO

FENOLICOS(TANINOS)

REACTIVOS RESULTADOS

Reacción con FeCl3 ( - )(-) = No hay presencia de metabolitos(+) = Escasa presencia de metabolito(++) = Regular presencia de metabolito(+++) = Abundante presencia de metabolito

REACCIÓN CON FeCl3

6.5 PROTEINASEn el reconocimiento de proteínas se uso los reactivos: Biuret y Ninhidrina.

Cuadro 5CARACTERIZACION DE PROTEÍNAS

REACTIVOS RESULTADOS

Reacción con biuret ( ++ )Reacción con

ninhidrina ( + )(-) = No hay presencia de metabolitos(+) = Escasa presencia de metabolito(++) = Regular presencia de metabolito(+++) = Abundante presencia de metabolito

Reacción con biuret

REACCIÓN CON NINHIDRINA

Extracto con sudan III

Sudan III

Aceite con sudan III

Reacción negativa por que no se torna de color azul-negruzco

Reacción positiva por que se puso de color violeta

6.6 FLAVONIODESPara el reconocimiento de flavonoides se utilizo el reactivo de shinoda, y se obtuvo lo siguiente:

Cuadro 6CARACTERIZACION DE FLAVONOIDES

REACTIVOS RESULTADOS

Reacción con shinoda ( - )(-) = No hay presencia de metabolitos(+) = Escasa presencia de metabolito(++) = Regular presencia de metabolito(+++) = Abundante presencia de metabolito

REACCIÓN CON SHINODA

6.7 ALCALOIDESEn el ensayo de caracterización de alcaloides se obtuvo lo siguiente:

Cuadro 7

CARACTERIZACION DE ALCALOIDES

REACTIVOS RESULTADOS

Reacción con dragendorff ( - )

Reacción con mayer ( + )(-) = No hay presencia de metabolitos(+) = Escasa presencia de metabolito(++) = Regular presencia de metabolito(+++) = Abundante presencia de metabolito

REACCIÓN CON MAYER

Analizando los resultados de la prueba fotoquímica para aceites fijos del extracto hidroalcoholico se puede observar que existe una gran cantidad de aceite fijo que con lo recaudado en la bibliografía se puede corroborar que la especie Plukenetia volúbilis linneo si tiene presencia del omega 3.

VII. CROMATOLOGRAFÍA DE CAPA FINA.

7.1 CROMATOGRAFIA DE PAPEL

1° se corta el papel watman.

Reacción positiva por que se puso un mínimo de color violeta

Reacción negativa

Reacción donde hay una escasa presencia de metabolitos

2° luego se puentea los extractos con unos capilares sobre el papel dejando 2 cm. sobre el borde inferior.

3° el solvente se prepara con: cloroformo y etanol 2:1.

4° revelador: en este caso se utilizo al FeCl3 para el reconocimiento de flavonoides.

Los resultados fueron que no hubo presencia de flavonoides.

ESTRUCTURAS:

En la semilla de Plukenetia volúbilis linneo se encontró los siguientes ácidos grasos:

CONCLUSIONES

1. Las semilla de Plukenetia volúbilis l. tiene abundante cantidad de glúcidos.

2. Al experimentar para ver los aceites fijos, esto nos explica la gran cantidad aceite omega 3 que posee esta semilla (Plukenetia volúbilis l.)

3. Al realizar la cromatografía de capa fina para el reconocimiento de flavonoides esta resulta negativa lo que cabe deducir que tiene flavonoides.

4. En la marcha de solubilidad, tenemos como resultado que el extracto es soluble en compuestos apolares.

Ensayo negativo

BIBLIOGRAFIA

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