UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE ODONTOLOGACTEDRA DE MICROBIOLOGA II

Tema:

Exmenes de laboratorio importantes para identificar microorganismos

LABORATORIO DE MICROBIOLOGA EN ESTOMATOLOGAUn estomatlogo debe estar en capacidad de solicitar exmenes de laboratorio y debe ser capaz de interpretar los resultados de los mismos.

EXMENES BSICOS DE LABORATORIO

Examen en fresco

Frotis con coloracin

El cultivo en medios enriquecidos, selectivos o diferenciales

EXAMEN EN FRESCOExamen entre lamina y laminilla.

Sirve para identificar:PROTOZOARIOS: trichomonas tenax, entamoeba gingivalis.

HONGOS: candida spp,paracoccidiodes spp y C. neoformans.

EXAMEN A TRAVS DE FROTISEl frotis es un extendido delgado del espcimen del paciente sobre una placa porta objetos

HAY TRES COLORACIONES IMPORTANTES:Coloracin GRAMColoracin WRIGHTColoracin ZIEHL

COLORACIN GRAM

Consiste en emplear un colorante bsico, carga +, violeta de cristal, se une a la carga del acido ribonucleico y fosfatos del citoplasma y colorea de morado el citoplasma de las bacterias

Gram positivas tienen una gruesa pared celular que al teirlas con el colorante de Gram toman un color azul intenso. Las bacterias Gram negativas se tien de color rosado.

Esta coloracin es muy importante por que posibilita el primer acercamiento taxonmico agrupndolos en GRAM+ y GRAM-, el frotis coloreado con GRAM identifica:

Forma (cocos y bacilos)

Agrupacin

Coloracin

COLORACIN GRAM

COLORACIN WRIGHT

Es diferencial.

Colorea el citoplasma en celeste y ncleo en rosado.

Diferencia clulas de sangre. EosinfilosBasfilos Neutrfilos

COLORACIN WRIGHT EN MICROBIOLOGA IDENTIFICA PROTOZOARIOS: leishmania, agentes del paludismo, plasmodiun spp.

HONGOS: histoplasma y paracoccidiodes.

COLORACIN ZIEHLSe observa bacilos alcohol acido resistentes (BARR) como: TuberculosisMycobacterium leprae

COLORACIN ZIEHLFucsina bsica fenolada

CULTIVOS EN MICROBIOLOGAMedio de cultivo es un conjunto de sustancias qumicas orgnicas e inorgnicas a proporciones y ph adecuado posibilitan la multiplicacin y desarrollo de germenes

Permiten el aislamiento de cepas viables provenientes de pacientes o del medio ambiente. Hay tcnicas rpidas y modernas como: Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)Sondas DNACampos pulsados etc.

CULTIVOS EN MICROBIOLOGAExisten diversidad de medios de cultivos:De acuerdo a la funcin del medioEnriquecidos nutrientes especiales Selectivos inhibidores de crecimientoDiferenciales sustratos metablicos

DE ACUERDO A LA TEXTURA

Medios lquidoscaldos

Medios slidosA base de agar

CONSTITUYENTES DE LOS MEDIOS DE CULTIVOSAgarAguaExtractos de protenas, de viserasAlmidonesDiferentes azucaresSalesIndicadores de phSustancias inhibidoras como antibiticos (bacitracina, colistin, nistanina, vancomicina, clorafenicol)Otras sustancias como:Cristal violetaSales biliaresCicloheximida telurito de potasio

AGAR

No disuelve en frioSolidifica como gelatina a partir de los 45CNo se hidroliza por accin metablica microbianaIdeal como base solida en medios de cultivo para aislamiento microbiano Se lo emplea en una proporcin equivalente a 1.5% en agua

CULTIVOS EN MICROBIOLOGAMEDIOS DE CULTIVOS SELECTIVOS: para aislar patgenos como:Agar chocolate asla: haemophilus, neisserias, neumococosAgar Thayer Martin asla: neisserias patgenas (N gonorrhoeae, N meningitidis) de zonas anatmicas contaminadas como vagina recto y garganta.Agar sangre con bacitracina y vancomicina asla: A actinomycemcomitans,Tioglicolato: transporta anaerobios estrictosAgar Mitis-Salivarius contiene sacarosa o sucrosa asla: S mutans

AGAR SANGREMedio de cultivo universal en bacteriologa Enriquecido con sangre de borrego, caballo, o humana Dependiendo de las exigencias del agente microbiano a aislar

Medio de cultivo para anaerobios ( P.gingivalis ) Actinomices ( A. naeslundii, A.odontolyticus El medio mas selectivo consiste en gelatina , metronidazol y cadmio

AGAR SANGRE

AGAR CHOCOLATE

Obtenido por calentamiento de la sangre para liberar la hemoglobina contenida en los glbulos rojos Hemoglobina aadida al agar color se asemeja al chocolate

AGAR THAYER MARTIN Agar chocolate Considerado selectivoPosee antibiticos (costn comovacomicina y nistatina)

AGAR MITIS-SALIVARIUS Selectivo diferencial Demuestra sntesis de polisacridos adherentes Tipo dextrano y mutano AISLAMicobacterias (mycobacterium spp)Rutina de identificacin de Lowendtein- Jensen

MEDIOS DE AMIES-CARBON Y STUART MEDIOS DE TRANSPORTE DE MUESTRAS O DE ESPECMENES

ANTIBIOGRAMA TIENE SUS LIMITACIONES POR:

ANTIBIOGRAMA

ANTIBIOGRAMA

ANTIBIOGRAMA

ANTIBIOGRAMA

ANTIBIOGRAMA

UN ANTIBIOGRAMA ES DE UTILIDAD

*Mycobacterium leprae**Diferenciales sustratos metabolicos***