Fundamentos Cromatografia de Liquidos

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Fundamento

Cromatografa de lquidos.La Cromatografa lquida, tambin conocida como Cromatografa de lquidos, es una tcnica de separacin y no debe confundirse con una tcnica cuantitativa o cualitativa de anlisis.

En toda cromatografa existe un contacto entre dos fases, una fija que suele llamarse fase estacionaria, y una mvil (fase mvil) que fluye permanente durante el anlisis, y que en este caso es un lquido o mezcla de varios lquidos.

La fase estacionaria por su parte puede ser almina, slice o resinas de intercambio inico que se encuentran disponibles en el mercado. Los intercambiadores inicos son matrices slidas que contienen sitios activos (tambin llamados grupos ionognicos) con carga electrosttica (positiva o negativa).

Dependiendo de la relacin carga/tamao unos constituyentes de la mezcla sern retenidos con mayor fuerza sobre el soporte slido que otros, es decir sern adsorbidos, lo que provocar su separacin. Las sustancias que permanecen ms tiempo libres en la fase omega, avanzan ms rpidamente con el fluir de la misma y las que quedan ms unidas a la fase estacionaria o retenidas avanzan menos y por tanto tardarn ms en salir o fluir.

Fundamento La cromatografa lquida (HPLC), es una tcnica utilizada para separar los componentes de una mezcla. Consiste en una fase estacionaria no polar (columna) y una fase mvil.

Los componentes de la solucin emigran de acuerdo a las interacciones no-covalentes de los compuestos con la columna. Estas interacciones qumicas, determinan la separacin de los contenidos en la muestra. La utilizacin de los diferentes detectores depender de la naturaleza de los compuestos a determinar.