Regional Distrito CapitalSistema de Gestión de la Calidad

Informe de Laboratorio No 01ALISTAMIENTO Y PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO PARA EL PROCESAMIENTO

DE LAS MUESTRAS EMPRESA PROYECTO

Aprendices Wilmer Lopez Rojas

Diana Milena RamirezJuliana Rodriguez Torres

InstructorSonia Buitrago

Centro de Gestión IndustrialOctubre de 2013

1. Introducción

Un medio de cultivo es un conjunto de componentes que crean las condiciones necesarias para el crecimiento de los microorganismos.

Los medios de cultivo se deben almacenar en envases sellados bajo las condiciones que señale el fabricante. Generalmente se almacenan en un lugar fresco (entre 15 y 25o), con poca humedad y protegidos de la luz solar directa. Nunca se deben almacenar cerca de autoclaves, hornos, ni otra fuente de calor o vapor.

Una vez que el medio de cultivo ha sido preparado y esterilizado, puede almacenarse a temperatura ambiente por un periodo máximo de 2 semanas protegido de la luz, o por periodos mayores a 12 -15ºC. Sin embargo, almacenados bajo refrigeración entre 2 y 8°C se prolonga la vida útil de los mismos, (nunca por debajo de 0ºC porque se destruye la estructura del gel). Los medios de cultivo se deben mantener en recipientes bien cerrados para evitar su deshidratación y cuando se usa tapón de algodón, se debe colocar por encima una envoltura de papel (Craft).

2. Objetivos:

Objetivo general

- Realizar el aislamiento y preparación de los medios de cultivo y materiales necesarios para procesar las muestras provenientes de la empresa proyecto.

Objetivos específicos

- Determinar los cálculos correspondientes para la elaboración de los medios de cultivo.

- Elaborar los medios de cultivo de acuerdo a la cantidad de muestra a trabajar

- Reconocer las características propias de los medios de cultivo- Adquirir destreza en la elaboración de medios de cultivo y los materiales a

utilizar

3. Procedimiento

3.1 Elaboración de medios de cultivo agar plate count, agar PDA y agar ChromoCoult®

PDA

CHROMO COULD

Refrigere

Deje enfriar

Lea las instrucciones

de preparación

Coloque los gramos en un elemeyer de

250ml

Lleve autoclave a 15 min y 15

lbs de presión a 121°C

Adicione agua destilada

Caliente en plancha hasta

que homogenice

Lea las instrucciones de

preparación

Pese los gramos necesarios

Lleve el agua destilada a la

autoclave

A una temperatura de 60 ºC y mezcle

Caliente en plancha hasta que

homogenice

Deje hervir hasta que tenga una tonalidad clara

Deje enfriar hasta 40 ºC

Utilice el medio de cultivo

3.2 Elaboración de agua peptonada

3.3 Elaboración de caldo brilla

Determinar el volumen del agua peptonada

Determine la cantidad de gramos y péselos.

Mezcle en un frasco de 250 ml

Adicione 90ml frasco de 100ml

Adicione en 5 tubos de 9ml de tapa roscaLleve a la autoclave

Deje enfriar lleve a la nevera

Realice los cálculos

Agregue a un Baker de 250 ml hidrate con

agua destilada

A cada tubo vacío introduzca campana

de Durman

Lleve a la autoclave

Cierre los tubos

Adicione 10 ml a cada tubo

Deje enfriar

Guarde en la nevera

3.4 Alistamiento de material como cajas, pipetas entre otras

4. Cálculos Aquí se deben colocar los cálculos realizados para la preparación de los medios de cultivo. PREPARACION DE AGUA PEPTONADA 0.1 % p/vFrasco de 90ml5 tubos de 9ml c/u 45 ml

0.1gr 100ml0.135gr 135ml

PREPARACION MEDIO DE CULTIVO4 cajas de Petri = 80mlAgar Plate Count 22.5gr / 1000mlPDA 39gr / 1000ml

22.5gr 100ml 1.8 gr 80ml

39 gr 100ml 3.12gr 80ml

PREPRACION DE AGAR PARA COLIFORMES 6 latas de Petri = 120mlCromo 26.5/ 1000ml

26.5gr 100ml 3.8gr 120 m

PREPARACION CALDO BRILLA NMP9 tubos de 10 ml = 90 ml

40 gr 100ml 3.6gr 90 m

5. ResultadosSe deben llenar las siguientes tablas de acuerdo con los resultados obtenidos en el laboratorio

5.1 Alistamiento de material y medios de cultivo

REACTIVO O MEDIO DE CULTIVO

GRAMOS VOLUMEN A PREPARAR

Agar plate count 1.8 80

Agar ChromoCult® 3.8 120

Agar PDA 3.12 80

Caldo brilla 3.6 90

Agua peptonada 0.135 135

6. Análisis de resultados

Es importante señalar que los resultados obtenidos en caldos realizados en el laboratorio para los medio de cultivo fueron positivo, eso se debe a los cálculos obtenidos para realizar dichos caldos, el peso de se realizó conforme a los cálculos y la preparación fue conforme a la guía, los implementos se esterilizaron para que no se contaminara la sustancia a preparar.

7. Conclusiones

Se logo realizar el aislamiento y preparación de los medios de cultivo

Se pudo concluir que al determinar los cálculos correspondientes para la

elaboración de los caldos para los cultivos se pudo obtener un resultado

positivo en dichos caldos.

Se pudo obtener un claro aprendizaje sobre la elaboración delos medios de

cultivo de acuerdo a la cantidad de muestra a trabajar

Se logró reconocer las características propias de los medios de cultivo

Se puede concluir que se logró un completo aprendizaje y destreza en la

elaboración de medios de cultivo y los materiales a utilizar

MATERIALES CANTIDAD TOTALCajas de petri estériles 10Pipetas 1 ml estériles 4

Pipetas de 10 ml estériles 4Frascos de 250 ml 5

Tubos para agua peptonada 9Tubos para caldo brilla 9Campanas de Durham 9

8. Bibliografía

- Clavell, L.; Pedrique de Aulacio, M. 1992. Microbiología. Manual de Métodos

Generales (2da edición). Facultad de Farmacia. Universidad Central de

Venezuela.

- Difco y BBL. 2003. Manual de Medios de Cultivo Microbiológicos.