Informe Nº2 laboratorio de bioquimicaII
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Informe de Laboratorio Nº _2 _ BIOQUÍMICA 2 – Semestre 2009-II UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL FACULTAD DE INGENIERÍA INDUSTRIAL Y DE SISTEMAS ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL INFORME DE LABORATORIO Nº 2 BIOQUÍMICA 2 TEMA: _________Extracción de ADN _____ INTEGRANTES: CÓDIGO APELLIDOS Y NOMBRES CORREO ELECTRÓNICO 2008015460 Peña Moran María Isabel [email protected] om 2008015683 Salome Ordoñes Vanessa [email protected] 2008003532 Salvatierra Ccachulli Amys Celestina [email protected] 2008235371 Serrano Yarleque Soraida Brigitte [email protected] 2008013626 Zambrano Sayas Linda Lady [email protected] DOCENTE: Ing. Guillermo Chumbe Gutiérrez Semestre 2009 – II UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL Página 1 de 12
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Informe de Laboratorio Nº _2_BIOQUÍMICA 2 – Semestre 2009-II
UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREALFACULTAD DE INGENIERÍA INDUSTRIAL Y DE SISTEMAS
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL
INFORME DE LABORATORIO Nº 2
BIOQUÍMICA 2
TEMA:
_________Extracción de ADN_____
INTEGRANTES:
CÓDIGO APELLIDOS Y NOMBRES CORREO ELECTRÓNICO
2008015460 Peña Moran María Isabel [email protected]
2008015683 Salome Ordoñes Vanessa [email protected]
2008003532 Salvatierra Ccachulli Amys Celestina [email protected]
2008235371 Serrano Yarleque Soraida Brigitte [email protected]
2008013626 Zambrano Sayas Linda Lady [email protected]
DOCENTE:
Ing. Guillermo Chumbe Gutiérrez
Semestre 2009 – II
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I. INTRODUCCIÓN
ADN es la abreviatura del ácido desoxirribonucleico (en inglés, DNA). Constituye el material genético de los organismos. Es el componente químico primario de los cromosomas y el material del que los genes están formados.
La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas. En primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol.
Por eso que en este informe de laboratorio mostramos, su definición y algunos conceptos y conocimientos que debemos tener y están relacionados a este tema; y también contiene la práctica de laboratorio que realizamos y los cálculos correspondientes.
II. MARCO TEÓRICO
ÁCIDOS NUCLEÍDOS
Son moléculas constituidas por C, H, O, N y P. Relacionados con la conservación, constituye el material genético de los organismos. Es el componente químico primario de los cromosomas y el material del que los genes están formados. Se componen de un pequeño grupo de unidades monomericas denominadas nucleótidos, unidos mediante enlaces covalentes fosfodiester.
Tenemos:
ARN ADN
El ADN:
Esta formado por dos cadenas de polinucleotidos complementarios y dispuestos en doble hélices sus bases nitrogenadas son adenina, timina, citosina, guanina; carecen de uracilo.
La complementación de bases se debe a la formación de enlaces tipo puente de hidrogeno.
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La extracción de ADN de una muestra celular:
Se basa en el hecho de que los iones salinos son atraídos hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su disolución y posterior extracción de la célula.
Para esto tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol.
.
III. MATERIALES Y MÉTODOS
MATERIALES Y REACTIVOS:
Para la siguiente determinación se utilizo lo siguiente:
3.1 Materiales Gradilla
Colador o Centrífuga
Rallador
mortero
3.2 Muestra Cebolla
Ajos Tomate
Leche
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3.3 Material de vidrio Tubos de ensayo
Varillas de vidrio
Vasos de precipitado de 150 – 250 ml (12 unidades)
Pipetas
3. 4 Reactivos Agua (destilada o mineral)
Sal de mesa
Bicarbonato sódico
Detergente líquido o champú
Alcohol isoamílico a 0ºC.
3.5 Equipos Nevera
Balanza analítica
METODOLOGìA:
La extracción de ADN requiere una serie de métodos básicos. En primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol.
IV. DESCRIPCIÓN DE LA PRÁCTICA
Preparar el tampón con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en un
baño de hielo triturado: 120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No
usar agua del grifo. 1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura. 5 g de bicarbonato
sódico. 5 ml de detergente líquido o champú.
AGUA DESTILADA:
120ml
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SAL DE MESA:
1,5g
BICARBONATO DE SODIO:
5g
CHAMPU:
5ml
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Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que pueda haber
(cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos.
Tomate cebolla ajos leche
Triturar la muestra con un mortero. Así se romperán muchas células y otras
quedarán expuestas a la acción del detergente.
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La solución TAMPON
La solución TAMPON
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Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampón frío y
agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar después los restos
vegetales más grandes del caldo molecular haciéndolo pasar por un colador lo más
fino posible. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y después pipetear el
sobrenadante.
Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir con pipeta 10 ml de
alcohol isoamílico enfriado a 0ºC. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la
cara interna del recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol quedará flotando sobre
el tampón.
ALCOHOL ISOAMÍLICO:
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AJOS:
TOMATE:
LECHE:
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Se añade 10ml de alcohol isoamílico a 0ºC a cada caldo molecular…
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CEBOLLA:
Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación entre el alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedará adherido a su extremo con el aspecto de un copo de algodón mojado.
Ajo Tomate
Leche Cebolla
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V. RESULTADOS Y DISCUSIONESDescribir lo encontrado en la experiencia realizada
1. Tubo de ensayo ( Cebolla) : la coloración que presenta es blanquecina se pequeñas muestras de ADN
2. Tubo de ensayo ( ajos): la coloración que presenta amarillento pálido donde también podemos apreciar pequeñas muestras de ADN
3. Tubo de ensayo (Tomate): la coloración presenta rojiza, fragmentos de ADN en la parte Central.
4. Tubo de ensayo (leche): la coloración de tipo cremosa, mayor conglomeración de fragmentos de ADN.
Resultados finales de la Practica de la Extracción de ADN
VI.CONCLUSIONES
A modo de conclusión podemos decir que este informe ha dado a conocer aspectos de la vida natural perceptible como imperceptible a muestras sentidos, es decir, explica aquello que podemos ver a simple vista como lo que no lo podemos ver tan fácilmente.
El método utilizado para la extracción de DNA, permite purificar en un grado relativamente alto (porque depende con la precisión de la toma de muestras y
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de procedimiento su éxito) y pudimos determinar que es factible utilizarlo en posteriores ocasiones ya que es muy fácil de utilizar y se presta para varias aplicaciones.
VII. BIBLIOGRAFÍA
http://www.cienciahoy.org.ar/hoy08/adn.htm
http://www.jpimentel.com/ciencias_experimentales/pagwebciencias/pagweb/la_ciencia_a_tu_alcance_II/quimica/Experiencias_quimica_extraccion_de_adn.htm
Editorial Aduni tercera edición de biología y anatomía
http://html.rincondelvago.com/experimentos.html AUTOR Julián Esteban Londoño
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