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LINFOCITOS T REGULADORES: SUBPOBLACIONES, MECANISMO DE ACCIÓNVol. 18 Núm. 3 - 2011

REVISTA COLOMBIANA DE REUMATOLOGÍAVol. 18 Núm. 3, septiembre 2011, pp. 203-220© 2011, Asociación Colombiana de Reumatología

1. MSc, Coordinador de la unidad de Inmunología, Facultad de Medicina,Universidad del Rosario.

2. MD, Estudiante de toxicología, Facultad de Medicina, Universidad delRosario.

ARTÍCULO DE REVISIÓN

Linfocitos T reguladores: subpoblaciones,mecanismo de acción e importancia en el

control de la autoinmunidadT regulatory lymphocytes: subpopulations, mechanism of action

and importance in the control of autoimmunity

Heber Siachoque1, Natalia Satisteban2, Antonio Iglesias-Gamarra3

Debo reconocer que un hombre que concluye que un argumentono tiene realidad, porque se le ha escapado a su investigación,

es culpable de imperdonable arrogancia

David Hume

Resumen

La regulación inmunológica constituye tanto un mecanismo importante para el mantenimiento de lahomeostasis del sistema inmune como para el establecimiento de la tolerancia hacia antígenos propiosevitando el desarrollo de enfermedades autoinmunitarias. Así mismo, juega un papel relevante en elmantenimiento de la tolerancia periférica mediante el control de una pequeña población de células Tcirculantes denominadas células T reguladoras (Treg), las cuáles parecen haber migrado del timo duran-te estadios relativamente tardíos1.

El término “células T reguladoras” se refiere a células que activan o suprimen la función de otras células.Aparentemente, controlan el desarrollo de enfermedades autoinmunitarias (lupus, tiroiditis, diabetes tipoI y enfermedad inflamatoria intestinal entre otras) el rechazo de injertos, y pueden jugar un papel críticoen el control del asma y la alergia.

Palabras clave: fenotipo, singénicos, FoxP3, TGF-β, anergia, autóloga, escurfina, Treg, APC, célulaspresentadoras de antígeno, receptor de células T (TCR), Complejo Mayor de Histocompatibilidad (CMH).

Summary

Immune regulation is both an important mechanism for maintaining immune system homeostasis and forthe establishment of tolerance towards self antigens in order to prevent the development of autoimmunediseases. It also plays an important role in maintaining peripheral tolerance by controlling a small populationof circulating T cells, called regulatory T cells (Treg), which seems to have migrated from the thymusduring relatively late stages1.

The term “regulatory T cells” refers to cells that activate or suppress the function of other cells. Apparently,controlling the development of autoimmune diseases (For instance, lupus, thyroiditis, type I diabetes andinflammatory bowel disease among others), graft rejection and may play a critical role in asthma and allergy.

Key words: phenotype, syngeneic, FoxP3,TGF-β, anergy, autologous, escurfina, Treg, antigen presentingcells (APC), T cell receptor (TCR), Mayor Histocompatibility Complex (MHC).

3. MD. Profesor titular, Facultad de Medicina, Universidad Nacional de Colombia.

Los autores declaran no presentar ningún conflicto de interés al momentode la redacción del manuscrito.

Recibido: 13 de junio de 2011Aceptado: 11 de agosto de 2011

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Introducción

A finales de 1960 se descubre la existencia dedos grandes poblaciones de linfocitos, T y B, cadauno de ellos con una función específica. A iniciosde 1970 con la colaboración de las Universida-des de Tokio y Yale, Tomio Tada Chiba, reconoceque las células T no solamente tienen una fun-ción ayudadora sino que también pueden mo-dular la respuesta. Gershon y Kondo3, notaronque una subpoblación de células T podía depri-mir la respuesta inmune y que también mediabauna regulación supresora diferente a la ejecutadapor las células T ayudadoras. Esta subpoblaciónfue llamada inicialmente célula T supresora, lacual se ha venido estudiando extensamente de-mostrando la existencia de varias subpoblaciones,algunas de ellas antígeno-específicas, otras sinespecificidad alguna, otras secretoras de facto-res supresores y poblaciones con diferentesfenotipos y modos de supresión4-5.

El fenotipo de células T con actividad supresorase ha evaluado en modelos murinos por la expre-sión de marcadores Lyt-1 (CD5) y Lyt-2 (CD8), conun aumento en la expresión de Lyt-2. Sin embargola revisión activa de estas células, en la que seinvolucraron muchos inmunólogos, colapsóabruptamente a mediados de 1980, cuando elescrutinio de los ratones de prueba por técnicasmoleculares demostró que no existía el gen I-J,sobre el cual se había asumido codificaba estamisma molécula y la localizaba dentro del com-plejo genético MCH6. Hoy se evalúa este sucesode forma retrospectiva y se concluye que hubovarias fallas en la interpretación del estudio; fallaen el uso de marcadores confiables para la dife-renciación de células T supresoras de otrassubpoblaciones de células T, ambigüedad en lasbases moleculares de la supresión inmunológicay dificultad en la preparación de clones de célulasT supresoras antígeno específicas. Posteriores ha-llazgos generaron un ambiente favorable para lasT supresoras a las cuales se les atribuyó la gene-ración de citoquinas inmunosupresoras o regula-doras. Para 1990 fue muy comprensible que laIL-10 diferenciará a T reguladoras

llamadas TH

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Dada la ausencia de evidencia molecular so-bre las células T Supresoras, en Japón nace otro

concepto sobre las células T reguladoras (Treg).Yazuaki Nishizuka y Teruyo Sakakura en The AichiCancer Research Institute (Nagoya), encontró queen la timectomía neonatal a los 4 días de naci-dos podía inducir varias enfermedades auto-inmunes. Encontró que la trasferencia de célulasT inmaduras (timocitos) de animales singénicosno tratados inhibía la autoinmunidad, indicandoque los animales normales no solo inducían cé-lulas T autoreactivas potencialmente patogé-nicas, sino también inducía células T (CD4+) quesuprimían la respuesta inmune5.

Sakaguchi continuó la investigación y demos-tró que la población de células T supresoras exis-tía en ratones que expresaban CD4+, CD5high Peroal avanzar encontró que CD25 era un marcadorespecífico de estas células, a las que llamó célu-las T reguladoras (Treg)5. Sakaguchi y cols., handemostrado que las fallas en los mecanismos queregulan la tolerancia a lo propio son los directa-mente responsables del desarrollo de la enfer-medad autoinmune y que las poblacionesdirectamente comprometidas son las subpo-blaciones de células T CD4+ que expresanconstitutivamente la cadena á del receptor de IL-2 (CD25+) y el factor de trascripción Foxp3.

Fenotipo de células T reguladoras (Treg)

Las células Treg presentan marcadores espe-cíficos tales como el receptor relacionado con lafamilia de receptores del TNFα inducido porglucocorticoides (GITR) y el factor de trascripciónFoxp3 y muestran elevados niveles de CD11a(LFA-1), CD44, CD54 (ICAM-1) y CD103 en au-sencia de aparente estimulación antigénica. Es-tas células exhiben otros marcadores de superficiecomo: CD45RB, CTLA-4 (antígeno-4 de linfocitosT citotóxicos), CD122, CD103 (integrina αaEb7),CD134 (OX40) y CD62L (L-selectina). Las célulasTreg expresan elevados niveles de receptores dequimocinas CCR5 en modelos murinos y su con-traparte en el humano, CCR4 y CCR8. (Figura 1).Estas células poseen un receptor T (TCR) muydiverso, lo cual les confiere la capacidad de re-conocer un gran número de antígenos y adi-cionalmente presentar una alta afinidad hacia losantígenos propios. Durante su producción tímica

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requieren la combinación de fuertes señalesantigénicas para la unión del TCR, así como unamáxima coestimulación, de tal modo que cuan-do vayan a migrar a los tejidos periféricos, seancompletamente funcionales7-8.

Aproximadamente del 5 al 10% de las célulasT CD4+ periféricas expresan constitutivamenteCD25+. CD25 no parece ser un marcador exclu-sivo de las células Treg, más bien refleja una ab-soluta dependencia de la IL-2 para su función ymantenimiento periférico1, debido a que no pro-liferan en presencia de antígenos o anticuerposcontra CD3. En ausencia de la IL-2 exógena, lascélulas TCD25+ estimuladas suprimen la proli-feración tanto de las células T CD4+ como decélulas T CD8+ por una reacción dependientede secreción de IL-10 y TGF-β. En éste sentido,

son células que inhiben la respuesta inmune almodular la actividad de otros tipos celulares,como: linfocitos T CD4+ y CD8+, células pre-sentadoras de antígenos (APCs), macrófagos ycélulas NK 7.

Otros biomarcadores expresados encélulas T CD4+CD25+.

Además de la expresión de CD4+, las célu-las Treg expresan otros biomarcadores identifi-cados como específicos al compararlos con losmarcadores expresados en células CD4+CD25-e incluyen: galectina-1, TNF-R2, TGF-βR1, PD1(muerte celular programada), neurofilina-1. Nin-guno de estos marcadores de superficie celularparece ser responsable de mediar la supresiónen células CD4+CD25+. El papel supresor de

Figura 1. Moléculas de superficie presentes en células Treguladoras(Treg): CD4+, CD25+,CD103, Galectina-1, Receptor de TNFα induci-do por glucocorticoides (GITR), Antígeno-4 asociado al Linfocito TCitotóxico (CTLA-4), Neutrofilina-1. La gran mayoría de marcadoresde superficie disminuye su expresión luego de su activación y pareceno estar involucradas en los mecanismos de supresión de células T.Los marcadores x, y, z están aún sin definir. (Tomado y modificadoapartir de, TRENDS in Immunology July 2004;25:7.

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CTLA-4 en células CD4+CD25+ en individuoscon enfermedad autoinmune activa, no ha sidoesclarecido. GIRF ha sido reportado como mar-cador importante en la función de las células TCD4+CD25+, y es diferencialmente expresadoen células T CD4+CD25+, pero también se ex-presa en células T CD4+CD25- activadas9-10.Recientemente se descubrieron dos nuevos mar-cadores en células T reguladoras: FoxP311 (factorde transcripción nuclear) y LAG-3 (gen 3 de acti-vación linfocitaria)12-13. Una característica impor-tante que ha sido evaluada por McHugh en estascélulas es la acción de los corticoides, haciendoreferencia al receptor de la neuropilina-1 comoun receptor importante en la angiogénesis y acti-vación de células Treg10.

Marcadores serológicos y celularesinvolucrados en los mecanismos

supresores de células reguladoras.

a. CTLA-4 (Antígeno-4 asociado al Linfocito TCitotóxico): es una molécula expresada en la su-perficie de la mayoría de los linfocitos T activa-dos. Su función es regular la homeostasis y latolerancia periférica inmunológica inhibiendo laactivación de los linfocitos T. Dos mecanismos hansido postulados para mediar la inhibición porCTLA-4 de la respuesta de los linfocitos T: Señali-zación negativa y antagonismo competitivo dela vía de coestimulación mediada por CD28/B7.Las diferentes moléculas que participan en laactivación e inactivación de los linfocitos T hansido analizadas con el objetivo de diseñar estra-tegias terapéuticas de tolerancia inmunológica14.

b. IL-2 (interleucina 2): es una proteína de bajopeso molecular secretada principalmente porcélulas T, con alta actividad proliferativa, conacción autocrina-paracrina. compuesta por 133aminoácidos y de peso 15,4 kda. Actúa comofactor de crecimiento de los linfocitos T, inducetodos los tipos de subpoblaciones de linfocitos yactiva la proliferación de linfocitos B. Su gen selocaliza en el cromosoma 4, La IL-2 es fundamen-tal para los linfocitos Th2 y para la proliferacióny diferenciación de las células Treg, cuyo recep-tor conocido como CD25, se puede encontrartanto en las células T efectoras, como en las célu-

las Treg de memoria. La IL-2 también intervieneen la reacción inflamatoria estimulando la sínte-sis de interferón, induce la liberación de IL-1, TNF-alfa y TNF-Beta. IL-2 es necesario para elestablecimiento de la memoria inmunitaria celu-lar, así como para el reconocimiento de autoantí-genos y antígenos foráneos14.

c. IL-10 (interleucina-10): esta proteína es pro-ducida en concentraciones relativamente altaspor células Treg También conocida como factorde inhibición de la síntesis de citocinas (CSIF sussiglas en inglés), es una citocina con propieda-des antiinflamatorias capaz de inhibir la síntesisde citocinas proinflamatorias por los linfocitos Ty los macrófagos. Ha sido demostrada su pre-sencia en las placas ateroscleróticas humanas,observándose en estudios experimentales queniveles bajos de IL-10 favorecen el desarrollo delesiones ateroscleróticas más extensas y morfo-lógicamente más inestables14.

No siempre es necesario el estimulo de IL-10para que las células Treg sean activadas, ya quepara ello fueron clasificadas en células Treg na-turales y Treg inducibles, de acuerdo al estimulodesencadenante de su activación. Las células Tnaturales representan aproximadamente del 5 al10% de la población celular total de LT CD4+ yson seleccionados como linfocitos T sencillospositivos15. Los efectos supresores de las célulasTreg son dados por el contacto célula-célula enun proceso dependiente de la señalización delCTLA-4 o por citocinas tales como el TGF-β8,2. Esteefecto supresor de las células TCD25+ puede serbloqueado por la presencia de IL-6, producida amenudo por las células dendríticas que han sidoactivadas por el receptor tipo Toll tipo 4 (TLR-4)2.

La IL-10 es una citocina fundamental asocia-da con la generación de respuestas inflamatoriasfuertes (Th1), capaces de eliminar ciertos agen-tes patógenos, previniendo así inmunopatologíay mortalidad. Pero también puede suprimir reac-ciones Th1 protectoras, produciendo infeccionescrónicas. La IL-10 puede ser producida porlinfocitos T reguladores CD4+CD25+FoxP3, asícomo también por otros tipos de células, incluyen-do linfocitos Th2, linfocitos B y células presentado-ras de antígeno. ¿Pero cual es la célula productora

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de IL-10 durante las respuestas vigorosas Th1?Sacks y colaboradores usando un modelo de in-fección crónica con Leishmania major, el cual estáasociado con una respuesta sostenida tipo Th1en presencia de un aumento de IL-10, demostra-ron que la IL-10 era producida por células de lainmunidad innata, linfocitos Treg CD4+CD25+FOXP3+ presentes en la dermis de ratones infec-tados con L.major16. Para identificar la fuente ce-lular de IL-10 en este modelo, los investigadoresreconstituyeron ratones deficientes en el gen Rag(gen activador de recombinación1) denominadosRag-/- o ratones deficientes en Rag e incapacesde producir IL-10 denominados Rag-/-,IL-10-/-con células provenientes de ratones de IL10 -/- oratones normales, restringiendo de esta manerala fuente de IL-10 a linfocitos T o células no T.Ellos demostraron que a pesar que la principalfuente de IL-10 en esta enfermedad eran las cé-lulas de la inmunidad innata, la sola producciónde IL-10 por linfocitos T-antígeno específicos erasuficiente para suprimir la inmunidad protectorafrente a L.major Sorprendentemente, estoslinfocitos T CD4 eran CD25- y FOXP3- y la ma-yoría producían IFN-gamma17.

En paralelo con estos resultados, Anderson ycols, demostraron que la fuente celular principalde IL-10 en la infección con T.gondii eran loslinfocitos T CD4+CD25-FOXP3- productores deIFN-gamma17. La caracterización adicional de es-tas células productoras de IL-10 demostró que ex-presaban el factor de transcripción T-bet asociadocon Th1, indicando que estas células provienen delos mismos precursores de linfocitos Th1 clásicos.Los investigadores también demostraron que estascélulas producen IL-10 después de ser activadas porlo que no son un fenotipo estable, mientras que laproducción de IFN-gamma no es afectada por elestado de activación de la célula17.

Ambos estudios demostraron que los linfocitosTh1 CD4+CD25-FOXP3-T-bet+ productores deIFN-gamma son la fuente crucial de la IL-10reguladora. Los investigadores han sugerido quela producción de IL-10 por linfocitos Th1 puedeser un mecanismo de control de retroalimenta-ción para limitar el daño al huésped causado porla respuesta fuerte Th1 mientras se mantiene larespuesta efectora18.

d. TGF-β pertenece a una superfamilia defactores de crecimiento que incluye tresisoformas7, 8,19. Es una proteína homodimérica,producida por una gran variedad de células,como plaquetas, células endoteliales, linfocitosy macrófagos. Se sintetiza como un precursor in-activo, que debe ser escindido proteolíticamentepara generar la proteína activa, se une a dos re-ceptores celulares (tipo I y II) con actividad serina-treonina kinasa, y desencadena la fosforilaciónde factores citoplásmicos denominados Smads,de los que existen diferentes formas19,20.

Los Smads fosforilados se unen a Smad-4 paraformar heterodímeros que entran en el núcleo yse asocian a otras proteínas de unión a ADN paraactivar o inhibir la transcripción de genes especí-ficos. TGF-β tiene actividad pleiotrópica, a vecesopuesta en función del tipo de tejido afectado yel tipo de daño14.

En la mayoría de las células epiteliales, TGF-βes un inhibidor del crecimiento, ya que promue-ve la expresión de inhibidores del ciclo celularde las familias Cip/Kip e INK4/ARF. En cuanto alas células del mesénquima, el efecto de TGF-βdepende del entorno, pero puede promover lainvasión y la metástasis durante el crecimientode un tumor. A menudo, durante el desarrollo deun tumor se pierde TGF-β, lo que proporciona unaventaja adaptativa a las células tumorales14.

TGF-β tiene una fuerte acción antiinflamatoria,pero puede amplificar algunas funciones inmu-nes. Los ratones knock-out para TGF-β1 presen-tan defectos en los linfocitos T reguladores, lo quegenera una inflamación extensa con abundanteproliferación de linfocitos T y diferenciación deCD4+ en linfocitos “helper” Th1 y Th214.

Maduración intratímica

El repertorio de células Treg se forma en el timopor un proceso de selección positiva y negativa,la avidez determina el destino de las células T. Auna avidez baja las células reciben la señal ne-cesaria para su sobrevivencia. A una señal altalas células potencialmente autorreactivas son eli-minadas y son seleccionadas negativamente(mueren por apoptosis) caracterizándose por te-ner una alta afinidad por el CMH clase II, lo cual

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predispone un alto de riesgo de generar reaccionesautoinmunitarias. Las células que mantienen unaavidez intermedia son FoxP3- y se diferencian encélulas efectoras convencionales (Th0) Figura 2.

Las células Treg inician su función efectora enel momento en que la célula presentadora de antí-geno (CPA), se une al linfocito T regulador mediantela expresión de CD80 (B7 1), CD86 (B7 2) y CTLA-4, CD28, respectivamente. Después del contacto,

los linfocitos Treg sintetizan el gen Foxp3, el cualcompite con el factor nuclear de células T activa-das (NFAT) en la porción 5’, en la región promotorade genes que codifican para la IL-2, IL-4, TNFα yGM-CSF, conllevando a la inhibición de la activa-ción de la cascada inflamatoria asociada al re-clutamiento y proliferación de los linfocitos Th14.

El timo produce la mayoría de las células TregCD4+CD25+, así como de otras subpoblaciones

Figura 2. Desarrollo de células Treg y del mantenimiento de la tolerancia a lo propio. Elrepertorio de células Treg se forma en el timo por un proceso de selección positiva y negativa,la avidez determina el destino de las células T, a una avidez baja las células reciben la señalnecesaria para su sobrevivencia, a una señal alta las células potencialmente autorreactivasson eliminadas. Las células que mantienen una avidez intermedia son FoxP3- y se diferencianen células efectoras convencionales (Th0). Las células relativamente autorreactivas, (pero nomucho como para ser eliminadas) activan un programa que las diferencia en FoxP3+ y sonliberadas como células Treg Las células Th0 y Treg responden a estímulos antigénicos parasu diferenciación en células T efectoras Th1/Th2 o se comprometen con acción supresorarespectivamente. Adicionalmente las células Th0 pueden, diferenciarse en un repertorio decélulas T reguladoras periféricas bajo condiciones tolerogénicas (Tr1) mediando su activi-dad supresora a través de la producción de citoquinas. El repertorio de células Treg periféricasmantienen el fenotipo FoxP3+. (Tomado de Curr Opon Immunol 2004;16:203-208).

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de célula T, distintas del linaje de células Tregpresentes en la circulación. Los timocitos TregCD4+CD25+ son fenotípicamente similares a lascélulas Treg presentes en los compartimentosperiféricos con un equivalente funcional deanergia y de acción supresora demostrado enensayos “invitro”. Los timocitos CD4+CD25+,expresan marcadores de superficie clásicos como:CTLA-4 (antígeno 4 asociado a células Tcitotóxicas, GITR (proteína asociada al receptorde TNF inducida por glucocorticoides)9. Ladepleción de timocitos CD4+CD25+ inducenenfermedad autoinmune en modelos murinos, sesugiere que el timo normal continuamente estáproduciendo tanto linfocitos T CD4+CD25-efectores como células Treg CD4+CD25+9,10.

Durante la maduración de las células T en eltimo, las células T expresan un amplio reperto-rio de receptores (TCR) constituidos por cade-nas αβ o γδ las que se combinan de formaaleatoria, pero solamente las células T que ex-presan un TCR, que reconocen con moderadaafinidad los péptidos propios, maduran com-pletamente para ubicarse en los órganoslinfoides secundarios. Uno de los fenotipos decélulas T que posiblemente escapa de la selec-ción negativa dentro del timo, son las células Treguladoras CD4+CD25+; sin embargo, sonvarias las subpoblaciones de células T involu-cradas en los mecanismos de regulación. Paraalgunos investigadores las células Treg salen deltimo a la circulación como células T naive, conun fenotipo CD45RA+ GIRF(-); de hecho estascélulas son capaces de suprimir la proliferaciónde células efectoras activadas policlonalmente,que pierden la capacidad para reaccionar osuprimir respuestas contra autoantígenos9 .

Poblaciones de células reguladoras

Recientemente se ha intensificado el estudiosobre el control de las células Treg en el controlde la respuesta inmune, identificándose variassubpoblaciones tanto en murinos como en huma-nos, los cuales incluyen regulación cruzada so-bre Th1 y Th2. Dentro del repertorio de célulasreguladoras se han identificado las siguientessubpoblaciónes de células T y poblaciones decélulas dendríticas tolerogénicas:

1. Células T CD4+ productoras de factoressolubles TGFβ-1 (Th3), capaces de inhibirel desarrollo de algunas enfermedadesautoinmunes.

2. Células Treg CD4+ tipo 1 (Tr1), producto-ras de altos niveles de IL-10 que inhiben res-puesta de células Th1.

3. Células CD8+CD28-con actividad supre-sora, células T asesinas naturales cuya ac-tividad depende del contacto fas/fasL (NKT).

4. Células T γδ, con una importante actividadreguladora.

5. Células Treg CD4+, caracterizadas por unaalta expresión de CD25+ (receptor de IL-2cadena á) llamados Treg CD4+CD25+,que se encuentran tanto en timo como ensangre periférica y están involucradas en losmecanismos activos de tolerancia periféricade células T autorreactivas, las que han es-capado de la selección tímica21,22,23.

6. Células dendríticas tolerogénicas estimula-das con Galectina-1 son capaces de actuarcomo ‘proyectiles silenciadores’ cuando sonadministradas terapéuticamente.

Basados en los extensos datos obtenidos demodelos murinos, se han propuesto dos subpo-blaciones que difieren en términos de especificidady mecanismos efectores: las células reguladorasnaturales llamadas Treg CD4+CD25+, tambiénllamadas Treg Profesionales, que se desarrollanen el timo, y son el resultado de la maduraciónde células T específicas de antígeno. Una carac-terística importante es que son de larga vida, es-pecializadas en la prevención de reaccionesautoinmunes. Las células Treg naturales, por suparte, se desarrollan en el timo durante los esta-dos tempranos de desarrollo fetal. La segundasubpoblación denominada células T reguladorasinducibles o adaptativas (Tr1, Th3 y otras célu-las,) se desarrollan como consecuencia de la ac-tivación de células T maduras bajo condicionesparticulares de exposición subóptima de antíge-nos o coestimulación24,25.

· Células T reguladoras naturales (nTreg)

Una de las subpoblaciones de células Treg queha sido ampliamente estudiada, es el de las célu-

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las T reguladoras naturales (nTreg) que se carac-teriza por presentar algunas moléculas de superfi-cie, entre las que se encuentran CD4+ CD25+Foxp3+. Las células nTreg, adquieren su capaci-dad reguladora intratímicamente y representan del1 al 10% del total de células T CD4+. En loscompartimentos linfoides, los linfocitos Treg pre-sentan TCRs que no tienen afinidad por el recono-cimiento de péptidos propios y se autorregulan conel fin de prevenir la autoinmunidad11,12.

Los nTreg presentan cierta similitud con loslinfocitos T de memoria y su repertorio TCR estan diverso como el de cualquier otra célula T26;no obstante, los nTreg son anérgicos in vitro enpresencia de estímulos convencionales delinfocitos T como el anti-CD3 soluble o unido aplaca. Esta anergia puede contrarrestarse pormedio de la adición de citoquinas como IL-15,IL-18 e IL-2, las que anulan las propiedadessupresoras de los nTreg27, 11, 12. Sin embargo, invivo los nTreg sufren una expansión clonal trasexposición a antígenos, manteniendo sus propie-dades supresoras; su papel esencial en la tole-rancia y en la regulación inmune ha sido ilustradopor diferentes hallazgos de mutaciones en el genFoxp3, desencadenando autoinmunidad y enfer-medades alérgicas28,12.

Las células nTreg son anérgicas para inducir laexpresión de TCRs polimórficos con alta afinidadantigénica y producción de citoquinas in vitro; portanto no son patogénicas, no obstante su aparen-te alta reactividad a antígenos propios29. Las cé-lulas nTreg pueden expandirse activamente ymediar la supresión antígeno especifica in vivo.La eliminación o anulación funcional de las célu-las nTreg de sangre periférica en modelosanimales, lleva al desarrollo espontáneo de en-fermedades autoinmunes. Además, la depleciónde nTreg provoca efectiva inmunidad a tumores,aumentando la respuesta inmune a bacterias, hon-gos, protozoos, nematodos y virus; el disparo dela respuesta alérgica a agentes ambientales y laruptura de la tolerancia materno fetal durante elembarazo. Es así como las células nTreg FoxP3+,no solamente regulan la respuesta autoinmunesino que además suprimen una variedad de res-puestas patológicas inflamatorias en un amplioespectro de antígenos no propias30.

· Treg inducibles

Son inducidas en la sangre periférica por laconversión de células T inmaduras CD4+ CD25-en presencia de un microambiente particular.Generadas por estimulación antigénica bajo con-diciones especiales en la periferia, las células Treginducibles, denominadas también células regula-doras adaptativas, expresan el CD25 durante elcurso de una respuesta inmunológica normal,pero de manera variable. Esta subpoblación ce-lular incluye dos subconjuntos similares, estas sonlas células Th3 y Tr1, las cuales difieren en la se-creción del factor de crecimiento transformantebeta (TGF-β) e IL-10, respectivamente. A diferen-cia de los clones celulares Tr1, las célulasTCD4+CD25+ inducibles expresan significativa-mente altos niveles de CD25, no proliferan enrespuesta a citocinas y, más importante aún, noproducen IL-102. Las células Tregs inducibles handemostrado desarrollarse durante la inducciónde la tolerancia oral a un alérgeno y podrían ju-gar un papel importante en la inducción de latolerancia durante la inmunoterapia, sin embar-go, su fenotipo es mucho menos estable que elde las células Tregs. naturales1.

Las células T reguladoras CD4+ inducidas(iTreg) controlan la respuesta mediada por célu-las T. ambas subpoblaciones, las células Tregnaturales (nTreg) y células Treg inducidas (iTreg)regulan negativamente la función de las célulasT efectoras activadas en muchos escenariosinmunológicos (Figura 3). De este modo, los me-canismos de supresión para las células Tregs in-ducidas se regulan principalmente a través de lasecreción de citocinas tales como la IL-10 y elTGF-β7,19.

· Células Tr1

En cuanto a las células Tr1, éstas tienen unabaja capacidad proliferativa y producen altosniveles de IL-10, bajos niveles de IL-2 y no pro-ducen IL-4. Estas células antígeno-específicas su-primen la proliferación de las células TCD4+ enrespuesta al antígeno, y previenen la inducciónde colitis experimental en ratones con SCID(inmunodeficiencia combinada severa). Adicio-nalmente, disminuyen la expresión de moléculasco-estimuladoras y la producción de citocinas

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el desarrollo de encefalomielitis autoinmunitariaexperimental (EAE), lo cual destaca su capacidadpara inhibir los efectos patogénico de células Tautorreactivas8, 2.

· Células CD8 supresoras

Estas células actúan primordialmente sobre lascélulas presentadoras de antígenos (CPA). Asimis-mo, se cree que inducen la aparición de célulaspresentadoras reguladoras CD1868.

Células TNK reguladoras (TNK Reg)

Las células TNK, constituyen un sublinaje decélulas T con propiedades únicas tales como:reactividad hacia antígenos lipídicos presentados

pro-inflamatorias por las células presentadorasde antígenos (APC), pero para ello requieren seractivadas a través de su TCR para ejercer dichafunción supresora31. Éstas células son abundan-tes particularmente en el tracto gastrointestinal,en donde cumplen un papel importante al dismi-nuir la regulación de la respuesta inflamatoriadesencadenada por la flora comensal1.

· Células Th3

Estas son células T CD4+ CD25+ inducidaspor antígenos orales en los nódulos linfáticosmesentéricos, las cuáles fabrican TGF-β y canti-dades variables de IL-4 e IL-10. Actúan primor-dialmente sobre las células T efectoras y suprimen

Figura 3. Las células T reguladoras CD4+ inducidas (iTreg) controlan la respuesta mediada porcélulas T. ambas subpoblaciones, las células Treg naturales (nTreg) y células Treg inducidas (iTreg)regulan negativamente la función de las células T efectoras activadas en muchos escenariosinmunológicos. Mientras que las células nTreg CD4+CD25+ diferenciadas en timo hacen parte delrepertorio normal de células T naive CD4+, múltiples subpoblaciones que expresan CD25 derivanposiblemente de células T convencionales CD4+ son activadas y diferenciadas en la periferia bajociertos estímulos. La contribución de cada subpoblación en la regulación general de la respuestainmune no está clara. Tomado de TRENDS in Immunology 2004;25:7.

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a través de la molécula CD1d, expresión de unacadena invariante del TCR y requerimientos dife-rentes para la selección tímica a las células T con-vencionales. Estas células expresan moléculascoestimulatorias como CD40L y producencitocinas como el IFN-γ y la IL-12, la cuáles con-llevan a la activación de células dendríticas y aldireccionamiento de las respuestas hacia un pa-trón de tipo Th1. Sin embargo, las células T NKtambién pueden producir citocinas de tipo Th2como la IL-4, IL-10 e IL-13 después de laestimulación, por lo cual serían capaces demodular diferentes respuestas inmunológicas yprocesos patogénicos tales como el asma,especialmente a través de la inducción de la ac-tivación de células dendríticas con propiedadesreguladoras y productoras de IL-10, la cual esesencial para la generación de células T CD4reguladoras7. Las células T NK reguladoras hanmostrado ejercer una actividad reguladora fuer-te en enfermedades autoinmunitarias tales comola diabetes mellitus y la encefalomielitis autoin-munitaria experimental (EAE) y dependen bási-camente de la IL-15 para su supervivencia2.

Las células TNK Reg reconocen compuestos de2-galactosilceramida que son presentados pormoléculas CD1b o CD1d y pueden activarse ge-nerando citocinas típicas de la respuesta Th1, osecretar IL- 10, llevando a cabo de este modo supapel regulador8.

Células dendríticas tolerogénicas

No son células T, producen la enzima indolami-na-2,3 dioxigenasa (IDO), la cuál es responsablede la degradación del triptófano que es a su vezun aminoácido esencial para los microorganismospatógenos. En el tracto respiratorio, las célulasdendríticas forman una densa red dentro de y de-bajo de la submucosa en donde se especializanen la captura de alérgenos y partículas inhaladas20.Las células dendríticas del tracto respiratorio jue-gan un papel importante en la activación y reclu-tamiento tempranos de las células Th2 hacia lasvías aéreas. Estas células son capaces de capturaralérgenos inhalados y transportarlos rápidamen-te hacia los nódulos linfáticos regionales parapoder llevar a cabo la presentación antigénica alos linfocitos T. Dicha migración es modulada

principalmente por la expresión de receptores dequimiocina sobre su superficie. Después de la ex-posición al alérgeno, las células dendríticas expre-san altos niveles de MHC clase II y CD11c. Una vezen los nódulos linfáticos regionales, las célulasdendríticas estimulan a las células T nativas, dan-do lugar así, al inicio de la respuesta inflamatoriapor la inducción de la activación de los linfocitosTh1 y Th2, los cuáles se activan dependiendo delantígeno desencadenante de la respuesta20.

En cuanto a su mecanismo de acción asocia-do a neoplasias, en el momento en que es nece-sario silenciar la respuesta inmunológica, lagalectina-1 (una proteína que se une a cadenasde azúcares presentes en ciertas células del siste-ma inmune y que es producida por células can-cerosas para neutralizar los linfocitos T activadosdestinados a destruirlas) incrementa sus niveles yen éste sentido, las células dendríticas (normal-mente involucradas en iniciar y amplificar la res-puesta inmune activando linfocitos T) exponenazúcares específicos y se tornan células dendrí-ticas capaces de silenciar y frenar la respuestainflamatoria. Estas células adquieren el nombrede “células dendríticas tolerogénicas” (ya que soncapaces de generar tolerancia). Una vez que estefenómeno sucede se desencadena una cascadade eventos moleculares que determinan elsilenciamiento de la respuesta inmunológica. Lasegunda etapa de este circuito involucra la libe-ración de IL-27 por parte de estas célulasdendríticas tolerogénicas, las cuáles son capa-ces de convertir células T activadas en “células Tregulatorias” productoras de IL-10, la cual pue-de finalmente suprimir la respuesta inflamatoriaen diversos escenarios, como enfermedadesautoinmunes (ej. Esclerosis múltiple, artritisreumatoidea), infecciones y tumores). De estemodo, las células dendríticas tolerogénicas esti-muladas con Galectina-1 son capaces de actuarcomo ‘proyectiles silenciadores’ cuando son ad-ministradas terapéuticamente32.

Mecanismo de acción de célulasT reguladoras

El mecanismo preciso por el que las célulasTreg ejercen supresión se desconoce, se piensa

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que se requiere contacto célula-célula, aunquehay algunos estudios que muestran un aumentoen la actividad de las células Treg inducida porcitoquinas. La actividad reguladora también pue-de ser inducida en los linfocitos T vírgenes pornumerosos factores ambientales y los ejemplosmás comunes de estas células T reguladoras in-ducidas (iTregs), son las células CD4+ Tr1 y Th3.Al contrario de los linfocitos Treg CD4+CD25+derivados del timo, la mayoría de los iTreg, me-dian la supresión, principalmente por medio dela secreción de citocinas26.

Las células Treg han surgido como un bastiónimportante en la inmunopatología de las enfer-medades autoinmunes como en el Lupus Eritema-toso Sistémico (LES). Los trabajos de Grossman etal. (2004)33, han demostrado que las células Tregadaptativas humanas con un fenotipo similar alde las células NK reguladoras, expresan cantida-des importantes de granzima B y desarrollan unaactividad lítica dependiente de perforinas. Handemostrado además, que las células nTregCD4+CD25+ naturales activadas expresangranzima A con niveles bajos de granzima B. Es-tas dos subpoblaciones de T reguladoras ejercenuna actividad citolítica sobre células autólogas,incluyendo células CD4+CD8+ y CD14+ (dendrí-ticas maduras e inmaduras); esta citotoxicidad esdependiente de la unión con CD18, pero es inde-pendiente de Fas/FasL.

Hay varios mecanismos que explican la acti-vidad citotóxica de algunas subpoblaciones deTreg, los defectos en la actividad reguladora enestas subpoblaciones está asociado con variaspatologías que incluyen: Linfohistocitosis, Síndro-me de Grincellis y enfermedad proliferativa liga-da al cromosoma X34. Aunque las células T CD4+expresan perforinas y granzimas, la importanciafuncional de la exocitosis de los gránulos no esclara33. Las células T CD4+ con actividadreguladora, generalmente han sido clasificadasen dos subtipos: naturales y adaptativas basa-dos en su ontogenia y modo de acción35.

· FoxP3, un regulador crítico en el de-sarrollo y función de los linfocitos Treg

Es un gen que se encarga del desarrollo y fun-cionamiento de las células Treg y, asimismo, es

utilizado como un marcador para la subpobla-ción de estas células. La expresión de Foxp3 estípica de células CD4+CD25+ y se correlacionacon la actividad supresora de estas células. Foxp3,a pesar de ser un marcador distintivo de las célu-las Tregs, puede ser también expresado por célu-las T efectoras después de su activación7,19,36. Elgen está ubicado en el cromosoma X, en dondecodifica para la proteína escurfina. En cuanto ala estructura del Foxp3, éste consta de un domi-nio N- terminal que media la activación y la re-presión de la transcripción, dedos de Zinc ydominios de cremallera de leucina que medianla homo y hetero-oligomerización del Foxp3 conciertas miembros de su misma familia, y un do-minio carboxi-terminal que media su anclaje aelementos de respuesta específicos del ADN.Foxp3 también contiene residuos que contribu-yen a la asociación física del Foxp3 con otros ele-mentos de transcripción, incluyendo el factornuclear de células T activadas (NFAT) y Runx1/AMI1, los cuáles hacen parte del mecanismo detranscripción y de las funciones supresoras de lascélulas Tregs20. La deficiencia del Foxp3 da ori-gen a diferentes síndromes autoinmunes como:enteropatía ligada al cromosoma X (IPEX),poliendocrinopatías, entre otras8. Los hallazgosdel síndrome IPEX están determinados por unadesregulación inmunológica. Esta enfermedad sepresenta típicamente durante la infancia y se aso-cia a enteropatía, endocrinopatía autoinmuni-taria, citopenia y dermatitis. La endocrinopatíaautoinmunitaria se caracteriza por el comienzotemprano de diabetes mellitus tipo I, frecuentedurante el primer año de vida. El hiper o hipotiroi-dismo resultante es también bastante común.Varias de las desregulaciones alérgicas en elsíndrome IPEX resultan de la presencia de pre-cursores de células Tregs que secretan grandescantidades de citocinas de tipo Th2, especialmen-te de IL-4, lo cual conlleva a pensar que la aler-gia a las comidas es una manifestación de ladeficiencia de las células Treg inducibles. En éstesentido, la deficiencia de Foxp3 en los precurso-res de las células Treg conlleva a que éstas pierdansu función como células supresoras. Asimismo,dicha deficiencia acarrea un aumento en la tasade apoptosis en células Treg, debida a una falta

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Figura 4. Control del desarrollo de linfocitos Treg por Foxp3 en el timo. Un timocito inmaduro queexpresa alta avidez por TCR contra péptidos propios/CMH Clase II presentados por células del epite-lio tímico (TE) sobre regula FoxP3 y se diferencia en LTreg Las células que expresan baja avidez porTCR son seleccionadas positivamente como LT ayudadores (Th) o citotóxicos (Tc). En la periferia lascélulas T reguladoras derivadas del timo suprimen respuestas Th o Tc cuando son activadas por CPAs.Bajo condiciones tolerogénicas o antiinflamatorias las células Th o Tc pueden adquirir la expresión deFoxP3 y diferenciarse en Tregs en la periferia, TGFβ puede promover esta acción. (Tomado de Microbesand Infection. 2004;6:745-751.

de respuesta de ciertos factores de crecimientocomo IL-237.

Según ciertas investigaciones, la presencia enun nivel alto así como la expresión persistente deFoxp3, son importantes para el mantenimientode la función supresora. Por otro lado, la expre-sión de la molécula CD127 está inversamentecorrelacionada con la de Foxp3, de modo que,hasta el momento, las células Tregs se conocenpor ser CD4+CD25 con altos niveles de Foxp3 ybajos de CD12736.

Estudios recientes revelan la existencia de unapequeña población de células T CD4+CD25- (1-2% de células T CD4+) que expresan niveles in-termedios de mRNA FoxP3 y también desarrollan

actividad de Treg La relevancia de estas célulasen la homeostasis y su importancia en laontogenia no es conocida28, 38. La naturalezaprecisa de la señal tímica requerida para el de-sarrollo de los Treg no es clara, pero algunosconceptos empiezan a emerger, como el de quela población funcionalmente madura de Tregsurge en el timo y que las primeras célulasFoxP3+ son detectadas en estado de timocitosencillo positivo CD4+, Figura 4. Evidencias su-gieren que la señal desarrollada por células Tregrequieren de una única interacción entre el re-ceptor TCR y células del estroma tímico que pre-sentan péptidos asociados a la molécula CMHde clase II39.

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Células Treg activadas por microorganismosy su papel en la autoinmunidad

Mientras que algunos agentes infecciosos se hanrelacionado con la aparición de la enfermedadautoinmune, también hay evidencia de que cier-tos agentes infecciosos podrían inhibir la patolo-gía autoinmune40,41. Los estudios iniciales sobreautoinmunidad resaltaron el papel de los agentesinfecciosos en el desarrollo de la enfermedadautoinmune, a través del mimetismo molecular yde la sobre activación de las células T42. Por ejem-plo las reacciones cruzadas entre los antígenos delestreptococo del grupo A y el músculo cardiacohan mostrado ser las responsables de el desarro-llo de la enfermedad cardiaca autoinmune43.

La infección directa de un tejido que conduce ala destrucción y a la liberación de autoantígenospodría ser la explicación en el inicio de la respuestaautoinmune. Un ejemplo de este mecanismo es loobservado por el virus de la rubeola en la infec-ción de las células beta del páncreas y su asocia-ción con la aparición de la diabetes melitus tipo 1en modelos animales44. Sin embargo los estudiosrecientes muestran algunos ejemplos de procesosinfecciones en los que se ha impedido el inicio dela enfermedad autoinmune45,41. Las infeccionesbacterianas generan la activación principalmentede macrófagos, células B reguladoras y células Treguladoras, lo cual conlleva la producción decitocinas inmunosupresoras tales como la IL-10 yel TGF-β por parte de los macrófagos y células Treguladoras inducidas; en cuanto a las células Breguladoras, éstas van a generar IL-10 y TGF-β1.La producción de estas citoquinas inhibe directa-mente el desarrollo de respuestas inflamatorias(figura 5) Hay que tener en cuenta que el númerode células Treg puede verse incrementado por lapresencia de infecciones8.

Las infecciones bacterianas y virales generanla activación de las células TNKreg, las cualesejercen varias funciones relacionadas con la in-hibición de las respuestas autoinmunitarias, la lisisde las células infectadas y la activación demacrófagos, entre otras; cuando no se llevan acabo estas funciones adecuadamente, se produ-ce la autoinmunidad.

Figura 5. Las infecciones bacterianas generan laactivación principalmente de macrófagos, célulasB reguladoras y células T reguladoras, lo cual con-lleva la producción de citocinas inmunosupresorastales como la IL-10 y el TGF-β por parte de losmacrófagos y las células T reguladoras inducidas;en cuanto a las células B reguladoras, éstas van agenerar IL-10 y TGF-β1. La producción de estascitoquinas inhibe directamente el desarrollo derespuestas inflamatorias. Hay que tener en cuen-ta que el número de células Tregs puede verseincrementado por la presencia de infecciones.

Las células TNK Reg reconocen compuestos de2-galactosilceramida que son presentados pormoléculas CD1b o CD1d y pueden activarse ge-nerando citocinas típicas de la respuesta Th1, osecretar IL- 10, llevando a cabo de este modo supapel regulador8.

Supresión por citoquinas por parte decélulas T CD4+CD25+ naturales (nTreg)

Como se mencionó anteriormente varios tiposde subpoblaciones de células Treg se han identi-ficado presentando diversos fenotipos específicos,algunas de estas poblaciones liberan patronesde citoquinas específicas. Una vez son activadas,

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Figura 6. Fig.6. Posibles mecanismos de acción de células Treg CD4+ (Treg). Tienen un papel en lasupresión funcional de células CD4+ activadas o CD8+ efectoras en varios tipos de respuesta inmu-ne, los mecanismos para alcanzar esta regulación son diversos. Mientras se induce la proliferaciónde células T reguladoras CD4+, opera la vía de secreción de citoquinas inmunosupresoras, liberan-do Interleucina 10 (IL-10) y factor transformante de crecimiento β1 (TGFβ-1). Las células T naturalesreguladoras pueden depender de otras citoquinas (A), depender del contacto célula-célula o delcontacto célula/citoquinas (A+B). Modos de acción para controlar la respuesta de células T. APC:Células presentadoras de antígeno- TCR: Receptor de células T. (tomado de TRENDS in ImmunologyJuly 2004;25(7).

realizan regulación cruzada sobre Th1 y sobreTh2, regulan la producción de IL-10 en célulasTr1 e inducen liberación de TGFβ (factor transfor-mante de crecimiento beta) en células Th3 (figura6). Dentro de las señales requeridas por parte delas células Treg para inducir supresión se necesi-ta el estímulo sobre TCR (receptor de la célula T)con la consecuente liberación de IL-2. Las Treg

pueden ejercer la acción tanto sobre CD4+ comoCD8+21,46,21. En un estudio reciente, Sugimoto ycols, reportaron que las células T CD4+CD25+,pueden ser expandidas por células dendríticas enausencia de citoquinas exógenas y que la expan-sión e inducción de la actividad supresora requie-re de la coestimulación de B7 en el contactocélula-célula47.

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Implicación de los linfocitos Treg en lafisiopatología del Lupus Eritematoso

Sistémico (LES).

El lupus es un desorden multisistémico que secaracteriza por síntesis de autoanticuerpos queinducen la formación de complejos inmunes cir-culantes los cuales se localizan en varios órga-nos causando daño tisular importante. Elconcepto de que las células T median la supre-sión de la autoinmunidad y regulan la respuestainmune fue descrito hace 40 años, a mediadosde los años 90 cuando Sakaguchi demostró quelas subpoblaciones de linfocitos T expresabanaltos niveles de receptores para IL-2 cadena α(CD25+), y eran capaces de prevenir el desarro-llo de enfermedades autoinmunes sistémicas enratones timectomizados. Son muchos los estudiosque analizan el fenotipo de células Treg y su im-portancia en el desencadenamiento del lupusEritematoso sistémico, pero ninguno se centra enlos mecanismos involucrados en las vías de se-ñalización mediados por la proteína zeta (ζ)48.

El concepto de que los Treg juegan un papelrelevante en la prevención de los desordenesautoinmunes ha sido ampliamente soportado. ElLES representa el prototipo clásico de la enferme-dad autoinmune sistémica en el que la perdidade la tolerancia a antígenos propios conduce a laactivación y expansión de linfocitos autorreactivos,producción descontrolada de muchos autoan-ticuerpos y liberación de mediadores inflamatoriosque finalmente dañan muchos órganos49. Se asu-me que la alteración de la respuesta inmune, eneste desorden multisistémico se debe a la pérdidade la tolerancia, sin embargo los mecanismos detolerancia central parecen no estar afectados enlos modelos animales que desarrollan lupus, noobstante se piensa que la ruptura de la toleranciaes un evento esencialmente de la periferia. En estecontexto la hipótesis de un defecto significativo enel número y en la función de células T reguladorascobra relevancia. El modelo hipotético de que lascélulas T reg se encuentran disminuidas en núme-ro y en funcionalidad supone una atractiva estra-tegia terapéutica, ya que podría ofrecer nuevasformas para el tratamiento de esta devastadoraenfermedad50.

Los estudios anteriores se centraron en lacaracterización fenotípica de las células T circu-lantes con un limitado aporte debido a las difi-cultades al no poder diferenciar bien estasubpoblación de Treg, además los resultados noeran consistentes en parte porque las investiga-ciones se llevaron a cabo en diferentes fases dela enfermedad y con tratamientos que involu-craban diferentes inmunosupresores. Los recien-tes trabajos de askenasy y kaminitz, han permitidodemostrar una mayor actividad supresora enlinfocitos Treg con una mayor expresión deCD25+ en pacientes con LES49.

Con el fin de distinguir con más precisión en-tre células Treg y células T activadas, se han rea-lizado estudios de evaluación de expresión deARNm Foxp3 en linfocitos CD4 + CD25 + depacientes con LES. La disponibilidad de nuevasherramientas para la detección de Foxp3 porcitometría de flujo ha mejorado la fiabilidad delos datos. Es evidente que en el análisis de losdiferentes estudios de células CD4+CD25, noarrojen datos concluyentes debido a la extremaheterogeneidad de este subgrupo de células T.sin embargo los estudios de Suarez Han permiti-do demostrar que hay un número reducido decélulas CD4 + CD25high circulantes en pacientescon Lupus51.

Los análisis de los resultados sobre la expre-sión de Foxp3 en células T CD4+ de pacientescon LES es más compleja, ya que la evaluaciónde su expresión se ha llevado a cabo con méto-dos diferentes y se ha analizado dentro desubgrupos de células diferentes. Es de gran inte-rés la observación de que la expresión de Foxp3,tiende a reducirse en células T CD4+ que aumen-tan la expresión de CD25+ en pacientes con LESy un aumento en la expresión de FoxP3+ en elsubgrupo de células T que carecen de CD25 ensuperficie. Los estudios recientes en células depacientes con LES muestran un fenotipo T CD4+,CD25-/low circulación Foxp3 + +, que podríanser consideradas células Treg52.

Bases patogénicas de LES pueden resultar tam-bién por un desequilibrio entre las células Tefectoras y reguladoras, y no sólo por un defectoen las células Treg Existe alguna evidencia de que

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la función supresora alterada es demostrablecuando las células Treg son co-cultivadas con cé-lulas T efectoras autólogas, pero no con las célu-las T efectoras de donantes sanos, lo que sugiereuna posible resistencia de las células T efectoras ala inhibición de Treg50,53,54.

Es concebible que existen muchas discrepan-cias acerca de los hallazgos de células Treg en eldesarrollo del LES, es posible que su actividadpueda depender de variables como: las diferen-tes fases de actividad de la enfermedad y trata-mientos inmunosupresores que pueden afectar ala viabilidad y función de las células T. En estecontexto, la terapia con corticosteroides suele sercapaz de aumentar la circulación de subpo-blaciónes de células con el fenotipo de las célu-las Treg55,56. Estos resultados están de acuerdo conla observación general de que en la fase activade la enfermedad se presenta un numero reduci-do y / o un defecto en el funcionamiento de lascélulas Treg El funcionamiento defectuoso pare-ce estar asociado con las fases activas de la en-fermedad, un fenotipo y función similar a loscontroles es el hallazgo más frecuente en célulasTreg de pacientes con LES inactivo55,56.

En conclusión, los datos disponibles parecenindicar que la molécula CD25 no es un marca-dor de superficie suficiente para distinguir las cé-lulas Treg en LES. A pesar de que el factor detranscripción Foxp3 es actualmente el marcadormás específico de las células CD4+ Treg, se hacenecesaria la presencia de otros marcadores desuperficie para identificar células T reg.

Uno de los marcadores utilizados actualmentees el receptor GITR identificado en células Treg deratones y de seres humanos.GITR es una glicopro-teína transmembrana de tipo I, clonada en 1997en ratones y en seres humanos57,58. GITR se une yactiva varias proteínas asociadas al receptor deTNFα (TNFαR),como TRAF el cual posee un domi-nio de muerte que contienen proteínas de modu-lación de la familia de las caspasas como Bcl-2.Laactivación fisiológica y farmacológica de recep-tores GITR exacerba el desarrollo de enfermeda-des autoinmunes e inflamatorias57,58.

Sin embargo, la inhibición de la actividad su-presora de células Treg es transitoria. Por otra

parte, GITR-coactiva las células Treg inhibiendola proliferación e induciendo un estado anérgico.En particular, la activación de GITR aumenta laactividad de las células T, tanto a través de lacoestimulación de células T efectoras y la inhibi-ción de la actividad de regulación Tcell, incluyen-do las células T reguladoras59. Sin embargo, lainhibición de la actividad supresora de célulasTreg es transitoria. Aún no está claro si GITR es unmarcador de las células Treg humanas, pues seha demostrado, que sólo el 5% de los T CD4 +CD25 + son positivos para GITR. Hay pocos da-tos publicados sobre la expresión y función GITRen las células T59.

Manejo de las células Treg comotratamiento en enfermedades

autoinmunitarias y cáncer

La manipulación de las células Treg es unaestrategia atractiva para la inmunoterapia, tal ycomo ha sido sugerido por la transferenciaadoptiva de células Treg en el tratamiento expe-rimental de enfermedades autoinmunitarias.Estrategias de tratamiento similares están empe-zando a ser desarrolladas en humanos, en quie-nes se tiene previsto que la terapia celular concélulas Treg antígeno específicas podría conlle-var al desarrollo a largo plazo de la modulacióninmune sin conllevar a problemas asociados ala inmunosupresión o a la toxicidad sistémica37.

En cuanto al cáncer, y de acuerdo a la eviden-cia arrojada, las células Treg ejercen un papelcrítico en los circuitos regulatorios inmunes al ate-nuar la inmunidad antitumoral. En éste sentido,para mejorar el pronóstico de los pacientes conneoplasias, se hace necesario el manejo de com-puestos como la ciclofosfamida, la cual anta-goniza la función de las células Treg. Por otrolado, estudios adicionales han demostrado queel empleo de anticuerpos que bloqueen al CTLA-4, ha establecido actualmente la habilidad deeste esquema de efectuar la sustancial destruc-ción del tumor37.

Agradecimientos

A Paola Santamaría estudiante de quinto se-mestre de medicina de la Universidad Colegio

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mayor de Nuestra señora del Rosario por su acti-va participación en la revisión del tema y su va-liosa colaboración en la elaboración del escrito.

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